妊娠期糖尿病患者血清Klotho 蛋白水平變化及臨床意義

吳昌志，湯旭，羅永慧

（江西省婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西 南昌 330006）

妊娠期糖尿病是一種妊娠期特發(fā)的疾病，特點(diǎn)是妊娠后才發(fā)生或妊娠后首次發(fā)現(xiàn)的糖尿病[1,2]。近年來(lái)，不管是全球數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，還是我國(guó)的流行病學(xué)調(diào)查，妊娠期糖尿病的發(fā)病率逐漸上升[3]。 由于妊娠期糖尿病可引起嚴(yán)重的母嬰并發(fā)癥，導(dǎo)致巨大兒出現(xiàn)、新生兒黃疸、新生兒低血糖發(fā)生，增加孕婦剖宮產(chǎn)的發(fā)生率，還可增加母兒繼發(fā)T2DM的風(fēng)險(xiǎn)，因此對(duì)妊娠期糖尿病研究一直是臨床科研工作者關(guān)注的熱點(diǎn)[4,5]。目前有關(guān)妊娠期糖尿病的病因?qū)W研究尚無(wú)明確的定論，考慮可能與多方面因素有關(guān)，其中包括有遺傳因素、環(huán)境因素和免疫性因素[6]。 Klotho 蛋白是一種新近發(fā)現(xiàn)的抗衰老蛋白，參與機(jī)體多種生理病理過(guò)程，與衰老、骨質(zhì)疏松、動(dòng)脈硬化、硬皮病、肺氣腫等疾病密切相關(guān)[7,8]。最近的研究發(fā)現(xiàn)Klotho 蛋白可參與機(jī)體能量代謝過(guò)程，妊娠期糖尿病是一組以血糖升高、血糖利用障礙為特征的代謝性疾病，Klotho 蛋白是否在妊娠期糖尿病發(fā)揮作用尚無(wú)相關(guān)研究。 本研究以妊娠期糖尿病為研究對(duì)象，觀察klotho 蛋白在妊娠期糖尿病患者中的表達(dá)情況及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 妊娠期糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)：采用美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)推薦的OGTT 試驗(yàn)，孕婦在24～28 周75g 葡萄糖口服后，分別采集空腹、口服葡萄糖1h、2h 三次標(biāo)本進(jìn)行血糖檢測(cè)，三次血糖值分別達(dá)到或 超 過(guò)5.1mmol/L、10.0mmol/L、8.5mmol/L 則 判 定為妊娠期糖尿病。 本研究共納入研究對(duì)象共247例，均于2018年10月至2019年11月在江西省婦幼保健院定期門(mén)診孕期檢查的婦女，年齡20～45（26±5.2）歲，孕婦于24～28 周行OGTT 試驗(yàn)，測(cè)量孕婦空腹Glu、果糖胺、糖化血紅蛋白等指標(biāo)，并詳細(xì)詢(xún)問(wèn)孕婦情況，包含孕婦年齡、孕次、有無(wú)吸煙史、有無(wú)糖尿病家族史、有無(wú)其他疾病史。 所有入組的孕婦均為低危人群、單胎妊娠、無(wú)高血壓、心血管疾病、肝腎疾病史，近期無(wú)外傷手術(shù)史，此次懷孕排除急慢性感染史、 無(wú)呼吸系統(tǒng)和泌尿生殖系統(tǒng)炎癥疾病史，無(wú)其他產(chǎn)科并發(fā)癥和合并癥。 正常妊娠對(duì)照組與健康對(duì)照組為同時(shí)期我院門(mén)診就診人群（其中正常妊娠對(duì)照入組261 例,年齡21～46(26±5.3)歲,健康對(duì)照入組247 例,年齡20～45(26.4±4.7)歲.經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,個(gè)組患者的年齡 性別等一般資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異意義(P＞0.05)。

1.2 血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白含量檢測(cè) 采用的人α-Klotho 和β-klotho 蛋白酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒分別購(gòu)自欽城生物有限公司和百奧萊博有限公司，操作步驟按照商品試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPPS17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以 表示,非正態(tài)分布變量以四分位間距表示而后進(jìn)行分析。 多組間比較采用單因素方差分析,血漿Klotho 蛋白水平與指標(biāo)參數(shù)的關(guān)系采用Pearson 相關(guān)分析, 其各組分的相對(duì)危險(xiǎn)度采用多元逐步回歸分析。 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 妊娠期糖尿病組、 正常妊娠組和正常對(duì)照組α-Klotho 和β-klotho 蛋白水平 血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白表達(dá)水平在妊娠期糖尿病組明顯低于正常妊娠組及健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），α-Klotho 和β-klotho 蛋白在各組表達(dá)水平是健康對(duì)照組＞正常妊娠組＞妊娠期糖尿病組，而α-Klotho 和β-klotho 蛋白在正常妊娠組及健康對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 妊娠期糖尿病組、正常妊娠組和正常對(duì)照組α- Klotho 和β- klotho 蛋白水平

2.2 妊娠期糖尿病組α-Klotho 和β-klotho 蛋白與空腹Glu、果糖胺、糖化血紅蛋白相關(guān)性分析 在妊娠期糖尿病人群中血清α-Klotho 和β-klotho 蛋白水平與空腹Glu、 果糖胺及糖化血紅蛋白呈負(fù)相關(guān)，且相關(guān)程度空腹Glu＜果糖胺＜及糖化血紅蛋白。

表2 妊娠期糖尿病組α- Klotho 和β- klotho蛋白與空腹Glu、果糖胺及糖化血紅蛋白相關(guān)

3 討論

妊娠期糖尿病這一概念最早由Miller 教授于1946年首次提出，1970年WHO 將其作為一個(gè)獨(dú)立病種單獨(dú)列出，足見(jiàn)世界各國(guó)對(duì)該病種的重視程度。 對(duì)妊娠期糖尿病進(jìn)一步研究有助于提高對(duì)糖尿病的認(rèn)識(shí)和重視，采取相應(yīng)的干預(yù)措施，減少其對(duì)婦女和兒童的損害和減輕遠(yuǎn)期并發(fā)癥，減少出生缺陷發(fā)生率，提高人口素質(zhì)[9,10]。

研究證實(shí)，妊娠期糖尿病對(duì)妊娠婦女的糖代謝、脂代謝和蛋白質(zhì)代謝都有著系列的影響，主要表現(xiàn)在葡萄糖攝取和利用減少，蛋白質(zhì)分解減少而脂肪分解和氧化增加[11]。 在妊娠期肌肉和肝臟的糖利用障礙對(duì)維持母體一定的血糖水平以滿(mǎn)足胎兒和母體中樞神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)血糖水平的依賴(lài)起一定的作用，對(duì)蛋白質(zhì)分解減少滿(mǎn)足胎兒生長(zhǎng)的需求，而對(duì)脂肪分解和氧化的增加則為機(jī)體提供足夠的能量來(lái)源，然而這一系列的生理改變也成為妊娠期糖尿病發(fā)病的高危因素。 klotho 蛋白是一種新近發(fā)現(xiàn)抗衰老蛋白，參與機(jī)體多種生理病理過(guò)程，與衰老、骨質(zhì)疏松、動(dòng)脈硬化、硬皮病、不孕不育、肺氣腫等疾病密切相關(guān)[7,8]。 最近的研究表明klotho 蛋白參與機(jī)體能量代謝過(guò)程，尤其是在白色脂肪組織和骨骼肌中對(duì)機(jī)體保護(hù)起著重要作用[12]。 此外有研究顯示klotho 蛋白具有抗炎、抗氧化、抗凋亡作用，其表達(dá)水平下降與多種病理模型的病理發(fā)展相關(guān)，而給予外源性klotho 蛋白干預(yù)則具有明顯的改善作用，提示可溶性klotho 蛋白有可能成為一個(gè)重要的臨床治療靶點(diǎn)[13]。 因此研究klotho 蛋白與妊娠期糖尿病關(guān)系意義重大。 我們的研究以妊娠期糖尿病人群為研究對(duì)象，結(jié)果提示血清α-Klotho和β-klotho 蛋白表達(dá)水平在妊娠期糖尿病組明顯低于正常妊娠組及健康對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，α-Klotho 和β-klotho 蛋白在各組表達(dá)水平是健康對(duì)照組＞正常妊娠組＞妊娠期糖尿病組，而α-Klotho 和β-klotho 蛋白在正常妊娠組及健康對(duì)照組并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表明α-Klotho 和β-klotho蛋白可能在妊娠期糖尿病發(fā)揮著作用。

妊娠期糖尿病一般無(wú)特殊臨床癥狀，大多只有在進(jìn)行糖尿病篩查時(shí)才發(fā)現(xiàn)血糖異常升高。 而妊娠期糖尿病的管理旨在嚴(yán)格控制血糖，以減少這種不利的新生兒和妊娠并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)[14-17]。 本研究表明α-Klotho 和β-klotho 蛋白在妊娠期糖尿病表達(dá)下降，通過(guò)對(duì)其與體內(nèi)的血糖控制指標(biāo)相關(guān)性研究，提示α-Klotho 和β-klotho 蛋白與空腹Glu、果糖胺、糖化血紅蛋白呈負(fù)相關(guān)，且相關(guān)程度空腹Glu＜果糖胺＜及糖化血紅蛋白。 所以我們推測(cè)α-Klotho 和β-klotho 蛋白可能影響著妊娠期糖尿病的糖代謝過(guò)程，與糖利用障礙或胰島素抵抗機(jī)制密切相關(guān)，從而使得α-Klotho 和β-klotho 蛋白成為妊娠期糖尿病的生物學(xué)標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)的潛在可能。

本研究結(jié)果顯示α-Klotho 和β-klotho 蛋白在妊娠期糖尿病人群中低水平表達(dá)，并與血糖控制指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)，提示α-Klotho 和β-klotho 蛋白參與該病的進(jìn)程。 然而由于妊娠期糖尿病是一個(gè)多因素復(fù)雜的病理過(guò)程，對(duì)這些因素的識(shí)別與分子機(jī)制的確定，尚需更多更詳細(xì)的研究。