冠心病患者外周血信號(hào)蛋白7A 與炎癥反應(yīng)、冠脈狹窄程度的相關(guān)性分析

閆東霞，汪硯雨

（1.義馬煤業(yè)集團(tuán)股份有限公司總醫(yī)院心血管內(nèi)科，河南 三門峽 472300；2.河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院心血管內(nèi)科，河南 洛陽(yáng) 471000）

冠心病（Coronary heart disease，CHD）是臨床常見(jiàn)的心腦血管疾病，指因冠狀動(dòng)脈管腔狹窄導(dǎo)致血管痙攣和狹窄，造成心肌供血不足和心肌功能損傷，嚴(yán)重者造成心肌梗死和心力衰竭[1-3]。 既往研究提出，CHD 的早期治療對(duì)改善患者心功能和提高患者生活質(zhì)量有著積極的作用[4-6]。 但是由于心肌自身的代償作用使冠心病早期缺乏特異性的臨床特征，多數(shù)患者出現(xiàn)臨床癥狀時(shí)冠狀動(dòng)脈狹窄程度已進(jìn)展為嚴(yán)重水平[7-9]。 因此，早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷對(duì)患者預(yù)后有積極的作用。 有研究提出，外周血信號(hào)蛋白7A（Semaphorin7A,Sema7A）是第七類軸突導(dǎo)向分子的家族成員，是動(dòng)脈粥樣硬化及斑塊破裂相關(guān)的蛋白，在神經(jīng)發(fā)育、免疫應(yīng)答、骨骼平衡和癌癥中均扮演重要的角色[10,11]。 CHD 患者心肌功能受損激發(fā)體內(nèi)免疫機(jī)制，釋放大量炎癥因子。 有研究發(fā)現(xiàn)，CHD 患者動(dòng)脈內(nèi)壁發(fā)生病變堵塞血管管腔，造成血管管腔狹窄或血管管腔閉塞，常伴有炎癥因子的升高，使人體巨噬細(xì)胞吞噬異常的膽固醇，形成斑塊[12]。 本研究旨在探討CHD 患者Sema7A 水平與炎癥因子和冠脈狹窄程度的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月-2021年1月在我院確診為CHD 患者98 例為觀察組，取同期健康體檢人員98 例為對(duì)照組。 納入標(biāo)準(zhǔn)：觀察組中所有患者均滿足CHD 的診斷標(biāo)準(zhǔn)[13]；對(duì)照組中經(jīng)體檢各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)均正常； 所有患者均予以冠狀動(dòng)脈造影術(shù)（Coronary angiography，CAG）檢查；經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)通過(guò)，患者及家屬知情同意。 排除標(biāo)準(zhǔn)：對(duì)造影劑過(guò)敏；肝腎功能不全；血液系統(tǒng)疾病；合并其他嚴(yán)重并發(fā)癥；有精神疾病史。 對(duì)照組：男性60 例，女性38 例；年齡54～69歲，平均年齡61.39±3.51歲；病程1～4年，平均病程2.47±0.87年。 觀察組：男性61 例，女性37 例；年齡54～69歲，平均年齡61.25±3.66歲；病程1～4年，平均病程2.65±0.62年。 兩組患者性別、年齡和病程一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 CAG 由心內(nèi)科主治醫(yī)師完成 采用美國(guó)心臟病協(xié)會(huì)的冠狀動(dòng)脈分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)Gensini 積分系統(tǒng)對(duì)冠脈的左主干支、左前降支、左回旋支和右冠狀動(dòng)脈的狹窄程度進(jìn)行評(píng)價(jià)，Gensini 積分標(biāo)準(zhǔn)[14]：輕度組（動(dòng)脈管徑減小50%）、中度組（動(dòng)脈管徑減小50%～75%）和重度組（動(dòng)脈管徑減小75%～99%）。

1.2.2 標(biāo)本采集 入院后采集患者空腹靜脈血6ml，3000r 離心10min 分離血清，標(biāo)本采集到檢驗(yàn)≤2h。

1.2.3 檢測(cè)方法 采用免疫比濁法測(cè)量血清超敏C反應(yīng)蛋白 (Hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP)水平，儀器選用吉林美侖醫(yī)療器械有限責(zé)任公司生產(chǎn)全自動(dòng)生化分析儀。 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)Sema7A、腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factorα，TNF-α) 和白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)水平。 所有試劑盒均采用武漢博士德生物工程有限公司生產(chǎn)。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 比較兩組患者的Sema7A、TNF-α 和IL-6 水平 分析CHD 患者Sema7A 水平與TNF-α 和IL-6 的相關(guān)性。

1.3.2 比較觀察組中不同狹窄程度冠脈的Sema7A、TNF-α 和IL-6 水平 并分析Sema7A 水平與TNF-α、IL-6 和Gensini 積分的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，滿足正態(tài)分布且方差齊的計(jì)量資料采用（±s）表示，采用兩樣本獨(dú)立t 檢驗(yàn)比較組間差異，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Pearson 相關(guān)性分析CHD 患者炎癥水平和狹窄程度與Sema7A 的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 比較兩組患者Sema7A、TNF -α、hs -CRP 和IL-6 水平 觀察組患者Sema7A、TNF-α、hs-CRP和IL-6 水平均高于對(duì)照組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 比較兩組患者Sema7A、TNF- α、hs- CRP 和IL- 6 水平（n=98,±s）

表1 比較兩組患者Sema7A、TNF- α、hs- CRP 和IL- 6 水平（n=98,±s）

組別 Sema7A（ng/mL）觀察組對(duì)照組t P 2.86±0.31 1.25±0.69 21.070＜0.001 TNF-α（ng/L） hs-CRP（mg/L）8.15±1.22 5.28±1.36 15.551＜0.001 6.36±1.32 0.69±0.24 44.837＜0.001 IL-6（ng/L）28.74 ±5.16 4.25±0.75 46.496＜0.001

2.2 CHD 患 者TNF-α、hs-CRP 和IL -6水平與Sema7A 的相關(guān)性分析CHD 患者TNF-α、hs-CRP和IL-6 水平與Sema7A 呈正相關(guān)的關(guān)系 （P＜0.05），見(jiàn)表2 。

表2 CHD 患者TNF- α、hs- CRP 和IL- 6 水平與Sema7A 的相關(guān)性分析

2.3 比較三組患者Sema7A、TNF -α、hs -CRP 和IL-6 水平 冠狀動(dòng)脈的狹窄程度越高，Sema7A、TNF-α、hs-CRP 和IL-6 水平越高（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 比較不同冠狀動(dòng)脈的狹窄程度患者的Sema7A、TNF- α、hs- CRP 和IL- 6 水平（±s）

表3 比較不同冠狀動(dòng)脈的狹窄程度患者的Sema7A、TNF- α、hs- CRP 和IL- 6 水平（±s）

組別 Sema7A（ng/ml）輕度組（n=42）中度組（n=31）重度組（n=25）TNF-α（ng/L）hs-CRP（mg/L）FP 2.45±0.36 2.76±0.32 2.93±0.12 21.619＜0.001 7.44±1.03 7.87±1.22 8.32±0.25 6.546 0.002 5.36±1.22 5.98±1.04 6.44±0.59 8.993＜0.001 IL-6（ng/L）5.36±1.04 6.68±1.66 7.15±0.96 18.864＜0.001

2.4 CHD 患者TNF-α、hs-CRP、IL-6 和Gensini 積分水平與Sema7A 的相關(guān)性分析CHD 患者TNFα、hs-CRP、IL-6 和Gensini 積分水平與Sema7A 呈正相關(guān)的關(guān)系（P＜0.05）。

表4 CHD 患者TNF- α、hs- CRP、IL- 6 和Gensini 積分水平與Sema7A 的相關(guān)性分析

3 討論

對(duì)CHD 的發(fā)病機(jī)制，有學(xué)者提出，可能與血小板活性增加，改變患者凝血功能，激活體內(nèi)的炎癥因子引發(fā)人體內(nèi)的免疫反應(yīng)[15,16]相關(guān)。 本研究發(fā)現(xiàn)，CHD 患者Sema7A、TNF-α、IL-6 和CRP 均比健康人群水平更高，同時(shí)，CHD 患者冠脈狹窄程度越高，炎癥因子更活躍。 這些均進(jìn)一步說(shuō)明了炎癥細(xì)胞通過(guò)介導(dǎo)炎癥因子參與CHD 病情進(jìn)展，CHD患者病情越嚴(yán)重，炎癥反應(yīng)水平和Sema7A 水平越高。

Sema7A 是在神經(jīng)細(xì)胞中發(fā)生的胞外信號(hào)分子，是腦信號(hào)蛋白家族中唯一糖基化磷脂酰肌醇錨定蛋白，在細(xì)胞外基質(zhì)中也有較高表達(dá)，在免疫系統(tǒng)疾病中有免疫調(diào)節(jié)功能，在本研究中可見(jiàn)Sema7A 在CHD 中有較高的表達(dá)，這可能是因?yàn)镃HD 患者增加了輔助性T 細(xì)胞分泌并上調(diào)了表達(dá)機(jī)制，因而在CHD 中有較高的水平。 TNF-α、IL-6和CRP 均是血清炎癥因子，其中TNF-α 是最早的炎癥因子，在激活中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和增加血管內(nèi)皮通透性等方面均有積極的效果，在CHD 患者中，巨噬細(xì)胞大量分泌TNF-α 損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)黏附分子表達(dá)形成更多的TNF-α，使CHD患者病情加重。 IL-6 是一種前炎癥性細(xì)胞因子，廣泛參與體液免疫和細(xì)胞免疫，IL-6 受體主要通過(guò)促進(jìn)肝細(xì)胞產(chǎn)生急性炎癥蛋白反應(yīng)使炎癥反應(yīng)加重，在CHD 患者中參與冠狀動(dòng)脈的急性炎癥反應(yīng)，如心肌缺血和心肌損傷，因此CHD 病情嚴(yán)重者通常IL-6 有相對(duì)較高的水平。 CRP 是存在于肝細(xì)胞和肝外組織的急性反應(yīng)蛋白，通過(guò)誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中金屬蛋白酶活化發(fā)生作用，在CHD 患者中刺激單核內(nèi)皮平滑肌釋放細(xì)胞因子降低組織型纖溶酶原激活劑活性，使心臟血管結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生病變，因此CRP 水平高的患者CHD 病情更嚴(yán)重。

CHD 的發(fā)展反應(yīng)了炎癥持續(xù)進(jìn)展的過(guò)程，本研究可見(jiàn)，CHD 患者冠脈狹窄的嚴(yán)重程度與Sema7A 和血清炎癥因子呈現(xiàn)正相關(guān)。 患者血液內(nèi)成分發(fā)生變化后，增加了TNF-α 的表達(dá)，TNF-α 破壞了細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性，影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)釋放神經(jīng)遞質(zhì)，促使炎癥介質(zhì)分泌IL-6 和CRP 炎癥因子，增加血管壁的外周阻力，使血管管腔變得狹窄而增厚。 同時(shí)，TNF-α 加速脂質(zhì)過(guò)氧化，介導(dǎo)交感神經(jīng)分泌兒茶酚胺，使患者全血黏度增高，出現(xiàn)心肌缺血，使動(dòng)脈粥樣化面積擴(kuò)大進(jìn)一步破壞血管內(nèi)皮的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，CRP 是反應(yīng)全身炎癥的重要指標(biāo)，IL-6 是活化的T 細(xì)胞和纖維細(xì)胞產(chǎn)生的淋巴因子，在CHD 中有較高的表達(dá)[17-20]。 為了進(jìn)一步探討CHD 患 者Sema7A 水平 與TNF-α、IL-6 和CRP 的相關(guān)性，對(duì)所有CHD 患者采用Gensini 積分評(píng)價(jià)，使用Pearson 相關(guān)性分析可發(fā)現(xiàn)，CHD 患者TNF-α、IL-6、CRP 和Gensini 積 分 與Sema7A水平呈正相關(guān)。 提示隨病情進(jìn)展，TNF-α、IL-6、CRP 和水平亦隨之增加。 臨床可通過(guò)測(cè)定TNF-α、IL-6、CRP 水平和評(píng)價(jià)Gensini 積分，判斷CHD 患者Sema7A 水平差異，并以此作為CHD 患者治療和預(yù)后的評(píng)估依據(jù)。

綜上所述，CHD 患者Sema7A、TNF-α、IL-6 和CRP 均比健康人群有著較高的表達(dá)，且與冠脈的狹窄程度呈正相關(guān)，可為臨床醫(yī)師的診斷和治療提供一定參考意義。