外周血CD64指數(shù)和血清淀粉樣蛋白A檢測(cè)在學(xué)齡前兒童細(xì)菌感染診斷中的臨床意義

馮莉莉, 屈曉威, 貌彥昀

(1.延安大學(xué)附屬醫(yī)院東關(guān)心腦血管病醫(yī)院檢驗(yàn)科, 陜西 延安 716000 2.延安大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科, 陜西 延安 716000)

感染性疾病作為一種兒童常見(jiàn)病，一旦發(fā)病會(huì)嚴(yán)重影響患兒身心健康，甚至危及生命，因此應(yīng)重視早期準(zhǔn)確診斷及治療[1]。近年來(lái)，外周血CD64指數(shù)作為一個(gè)新的感染性指標(biāo)，在細(xì)菌感染診斷中的應(yīng)用受到了越來(lái)越多的關(guān)注，診斷敏感性、特異性均較高，CD64于機(jī)體出現(xiàn)細(xì)菌感染時(shí)其表達(dá)水平會(huì)快速升高，可用于輔助診斷細(xì)菌感染；血清淀粉樣蛋白A(Serum amyloid A protein，SAA)作為一種急性期反應(yīng)蛋白，其在血漿內(nèi)的含量非常低，當(dāng)病原體對(duì)機(jī)體產(chǎn)生侵襲時(shí)會(huì)發(fā)生急性時(shí)相反應(yīng)，隨著炎性反應(yīng)的發(fā)展SAA表達(dá)水平會(huì)逐漸升高[2]。本研究以2018年1月至2020年1月入院的100例病毒感染患兒、100例細(xì)菌感染患兒及100例健康兒童為研究對(duì)象，分析外周血CD64指數(shù)與SAA檢測(cè)在學(xué)齡前兒童細(xì)菌感染診斷中臨床的意義。

1 資料與方法

1.1一般資料:采用回顧性分析方法，研究對(duì)象為2018年1月至2020年1月入院的200例患感染性疾病學(xué)齡前兒童，參考不同病原體分為病毒感染患兒(病毒組，n=100)與細(xì)菌感染患兒(細(xì)菌組，n=100)；同時(shí)，選取同期入院進(jìn)行體檢的健康兒童作為研究對(duì)象，設(shè)為健康組(n=100)。病毒組男52例，女48例；年齡0～6歲，平均年齡(3.51±1.86)歲。細(xì)菌組男54例，女46例；年齡0～6歲，平均年齡(3.42±1.93)歲。健康組男51例，女49例；年齡0～6歲，平均年齡(3.48±1.81)歲。三組研究對(duì)象一般資料比較，無(wú)顯著差異(P>0.05)，具有可比性。所有研究對(duì)象家屬均知情并簽署同意書(shū)，本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，倫理標(biāo)號(hào)20190817。

1.2入選、排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1入選標(biāo)準(zhǔn):病毒組：①經(jīng)臨床癥狀、體征、病史、影像學(xué)資料結(jié)合血清學(xué)、病原學(xué)、血常規(guī)檢查確診感染性疾病；②臨床資料完整；③病毒血清學(xué)檢查呈陽(yáng)性；④抗菌藥物治療效果不明顯，血常規(guī)檢查顯示白細(xì)胞正?；虻陀谡?，且以淋巴細(xì)胞為主。細(xì)菌組：①經(jīng)臨床癥狀、體征、病史、影像學(xué)資料結(jié)合血清學(xué)、病原學(xué)、血常規(guī)檢查確診感染性疾??；②臨床資料完整；③病原學(xué)細(xì)菌培養(yǎng)呈陽(yáng)性；④抗生素治療有效。健康組：①常規(guī)體檢顯示身體健康；②臨床資料完整。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn):①伴精神異常；②入院前有院外相關(guān)抗菌、抗病毒治療史。

1.3方 法

1.3.1儀器與試劑:儀器：美國(guó)beckman coulter公司生產(chǎn)制造的AU5800型全自動(dòng)生化分析儀、美國(guó)Becton-Dickinson公司生產(chǎn)制造的FACS Calibur型流式細(xì)胞儀。試劑：中國(guó)寧波普瑞柏生物技術(shù)有限公司提供的SAA試劑、美國(guó)Becton-Dickinson 公司生產(chǎn)制造的小鼠抗人CD64、小鼠抗人CD45、緩沖液及溶血?jiǎng)?/p>

1.3.2采集樣本:三組受檢者均于入院首日抽取3mL非抗凝靜脈血進(jìn)行SAA檢測(cè)，并抽取乙二胺四乙酸二鉀抗凝靜脈血2mL進(jìn)行CD64檢測(cè)；同時(shí)，細(xì)菌組于抗生素治療7d后抽取3mL非抗凝靜脈血進(jìn)行SAA檢測(cè)，并抽取取乙二胺四乙酸二鉀抗凝靜脈血2mL進(jìn)行CD64檢測(cè)。

1.3.3CD64測(cè)定:按照儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行測(cè)定，每份標(biāo)本每次檢測(cè)10000個(gè)細(xì)胞，檢測(cè)于2h內(nèi)完成；以淋巴細(xì)胞作為內(nèi)部陰性對(duì)照，以單核細(xì)胞作為內(nèi)部陽(yáng)性對(duì)照，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為CD64指數(shù)≥3.5；CD64指數(shù)=中性粒細(xì)胞CD64平均熒光強(qiáng)度/淋巴細(xì)胞CD64平均熒光強(qiáng)度。

1.3.4SAA測(cè)定:于室溫條件下將3mL靜脈血放置1h，然后進(jìn)行離心處理(3000r/min離心5min)，離心后對(duì)血清進(jìn)行分離，根據(jù)試劑參數(shù)設(shè)定之后選取膠乳增強(qiáng)免疫比濁法對(duì)SAA濃度進(jìn)行測(cè)定，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為SAA≥10mg/L。

1.4觀(guān)察指標(biāo):①比較三組研究對(duì)象的CD64、SAA水平；②比較三組研究對(duì)象的CD64、SAA陽(yáng)性率；③比較細(xì)菌組治療前后CD64、SAA水平；④觀(guān)察CD64、SAA對(duì)于細(xì)菌感染的診斷效能。

2 結(jié) 果

2.1三組研究對(duì)象CD64指數(shù)及血清SAA水平比較:三組患兒CD64指數(shù)、SAA水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對(duì)比病毒組、健康組，細(xì)菌組患兒CD64指數(shù)、SAA水平明顯更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；對(duì)比健康組，病毒組患兒的SAA水平明顯更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而CD64指數(shù)無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 三組研究對(duì)象CD64指數(shù)及血清SAA水平比較

2.2三組研究對(duì)象CD64指數(shù)、SAA陽(yáng)性率比較:三組患兒CD64指數(shù)≥3.5的比例、SAA陽(yáng)性率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.016)；對(duì)比病毒組、健康組，細(xì)菌組CD64指數(shù)、SAA陽(yáng)性率明顯更高，差異均有顯著性(P<0.016)；對(duì)比健康組，病毒組SAA陽(yáng)性率明顯更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.016)，見(jiàn)表2。

表2 三組研究對(duì)象CD64指數(shù)及SAA陽(yáng)性率比較n(%)

2.3細(xì)菌組患兒治療前后CD64指數(shù)及血清SAA水平比較:細(xì)菌組患兒治療后7d較治療前CD64指數(shù)及血清SAA水平明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 細(xì)菌組患兒治療前后CD64指數(shù)及血清SAA水平比較

2.4CD64指數(shù)和血清SAA水平對(duì)細(xì)菌感染的診斷效能:以CD64指數(shù)≥3.5為臨界值，以SAA>10mg/L為臨界值，細(xì)菌感染組與病毒感染組比較，CD64診斷細(xì)菌感染的敏感度低于SAA，但細(xì)菌感染診斷中CD64的特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均明顯高于SAA，差異有顯著性(P<0.05)；見(jiàn)表4。

表4 CD64指數(shù)和血清SAA水平對(duì)細(xì)菌感染的診斷效能

3 討 論

從臨床上來(lái)看，學(xué)齡前兒童因機(jī)體免疫系統(tǒng)尚未完全發(fā)育，抵抗力、免疫力差與自身身體條件特殊性的影響，其極易發(fā)生細(xì)菌感染，且細(xì)菌感染后無(wú)明顯癥狀，臨床檢查難以及時(shí)、準(zhǔn)確的判斷是細(xì)菌感染或病毒感染，容易出現(xiàn)誤診狀況，致使藥物使用不合理與疾病進(jìn)展，嚴(yán)重影響患兒的身心健康與生長(zhǎng)發(fā)育，所以因此重視早期準(zhǔn)確診斷與合理治療[3]。從臨床診斷方面來(lái)看，感染性疾病診斷的金指標(biāo)為病原學(xué)培養(yǎng)，但這一檢驗(yàn)方式需要花費(fèi)較長(zhǎng)時(shí)間，極易導(dǎo)致患兒錯(cuò)過(guò)最佳治療時(shí)機(jī)，因此探尋敏感性、特異性較高的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)對(duì)提升早期診斷準(zhǔn)確性具有重要意義[4]。

正常生理?xiàng)l件下，中性粒細(xì)胞表面上CD64處于低表達(dá)水平，而機(jī)體出現(xiàn)細(xì)菌感染狀況時(shí)，CD64于中性粒細(xì)胞表面的表達(dá)水平會(huì)明顯升高，所以其可用于細(xì)菌感染的早期診斷[5]。相關(guān)研究[6]中表明，細(xì)菌感染時(shí)中性粒細(xì)胞CD64表達(dá)水平會(huì)顯著上升，且與感染程度呈正相關(guān)，可用于鑒別病毒感染與細(xì)菌感染。SAA作為一種急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，機(jī)體健康時(shí)血漿中SAA含量較低，而機(jī)體出現(xiàn)真菌、病毒及細(xì)菌感染等急性時(shí)相反應(yīng)時(shí)，可于短時(shí)間內(nèi)顯著上升，炎癥消除后又于短時(shí)間內(nèi)顯著下降，其水平與疾病急性期及嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，可用于細(xì)菌感染、病毒感染的早期診斷及療效評(píng)估[7]。

本研究中，細(xì)菌組患兒CD64指數(shù)和血清SAA水平明顯高于病毒組、健康組，差異均有顯著性(P<0.05)，提示細(xì)菌感染診斷中CD64指數(shù)、血清SAA水平具有較高價(jià)值，可作為早期診斷細(xì)菌感染的輔助指標(biāo)。病毒組患兒血清SAA水平明顯高于健康組，差異有顯著性(P<0.05)，提示SAA用于感染性疾病的診斷不特異，其水平升高可作為感染性炎癥指標(biāo)，有利于提升早期診斷感染性疾病的準(zhǔn)確性。細(xì)菌組CD64指數(shù)、SAA陽(yáng)性率明顯高于病毒組、健康組，差異均有顯著性(P<0.016)，提示細(xì)菌感染診斷中CD64指數(shù)、SAA均可作為輔助診斷指標(biāo)，可用于細(xì)菌感染與病毒感染的鑒別診斷，且對(duì)細(xì)菌感染具有一定預(yù)測(cè)作用。細(xì)菌組患兒抗生素治療后7d CD64指數(shù)和血清SAA水平較治療前明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)，表明細(xì)菌感染患兒經(jīng)抗生素有效治療后CD64指數(shù)和血清SAA水平均呈下降趨勢(shì)，提示CD64、SAA在細(xì)菌感染患兒病情判斷、療效評(píng)估方面具有一定價(jià)值。

在診斷細(xì)菌感染時(shí)，CD64的特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值明顯高于SAA，差異有顯著性(P<0.05)，且CD64約登指數(shù)明顯高于SAA，提示CD64用于細(xì)菌感染診斷中的價(jià)值明顯大于SAA。

綜上所述，學(xué)齡前兒童細(xì)菌感染時(shí)CD64指數(shù)、SAA均可顯著上升，細(xì)菌感染診斷中CD64指數(shù)的應(yīng)用價(jià)值優(yōu)于SAA，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)CD64指數(shù)、SAA水平可用于學(xué)齡前兒童細(xì)菌感染的診斷和療效評(píng)估。但是，因本研究方法為回顧性分析，對(duì)于病例的選擇存在主觀(guān)性，無(wú)法排除信息偏倚與選擇性偏倚，且因病例數(shù)較少、觀(guān)察時(shí)間短等多種因素影響，結(jié)果還需進(jìn)一步驗(yàn)證。