基因靶向治療糖尿病的研究進(jìn)展*

謝紫潔，王高強(qiáng)，卯明艷，余開湖，2**

(1．湖北科技學(xué)院醫(yī)學(xué)部，湖北 咸寧 437100;2．咸寧市中心醫(yī)院/湖北科技學(xué)院附屬第一醫(yī)院)

糖尿病(diabetes mellitus,DM)是21世紀(jì)難治性疾病發(fā)病率和死亡率的主要原因，預(yù)計到2030年將影響5億多人[1]。目前全球已經(jīng)有多達(dá)十億人罹患慢性高血糖，形成了重大的全球公共衛(wèi)生問題。據(jù)最新數(shù)據(jù)[2]表明，2021年全球20～79歲人群的糖尿病患病率估計為10.5%(5.366億人)，到2045年將上升至12.2%(7.832億人)；2021年，全球與糖尿病相關(guān)的衛(wèi)生支出估計為9 660億美元，預(yù)計到2045年將達(dá)到10 540億美元。糖尿病主要分為兩種類型：1型糖尿病(type 1 diabetes,T1DM)和2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)。目前基因靶向治療已被應(yīng)用于對囊腫性纖維化、心血管疾病及糖尿病在內(nèi)的各種疾病的研究，人們也開發(fā)了控制靶基因表達(dá)的細(xì)胞類型、時間和可逆性的方法，并有望在未來應(yīng)用在糖尿病的臨床基因靶向治療上。

1 基因靶向治療糖尿病現(xiàn)狀

基因治療是將治療性遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到特定的靶細(xì)胞，通過調(diào)節(jié)特定蛋白質(zhì)的表達(dá)以預(yù)防或治療疾病。最初的方法是基因過表達(dá)，其主要是通過轉(zhuǎn)基因注入卵母細(xì)胞，傳統(tǒng)的方法則是使用胚胎干細(xì)胞進(jìn)行基因敲除。對基因靶向研究的首次實驗是觀察純化的DNA對肺炎鏈球菌的遺傳轉(zhuǎn)化[3]。

目前國內(nèi)外對糖尿病基因靶向治療的研究主要針對T1DM、T2DM以及糖尿病并發(fā)癥，研究人員通過對相關(guān)靶基因和靶點的研究以及基因靶向治療糖尿病的載體進(jìn)行了一系列的研究和探索[4-5]。而在糖尿病的基因靶向治療中，單靶點治療往往不能有效控制住機(jī)體血糖水平和并發(fā)癥，目前研究人員也越來越關(guān)注多靶點聯(lián)合治療糖尿病上[6]。然而還需要一種技術(shù)可以有效靶向轉(zhuǎn)染治療糖尿病，一系列基因靶向遞送系統(tǒng)也應(yīng)運(yùn)而生，其中超聲介導(dǎo)載基因微泡技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于包括糖尿病在內(nèi)的多種疾病中，并且取得了良好的治療效果[7]。

2 基因靶向治療糖尿病載體的選擇

2.1 病毒載體

目前廣泛用于基因?qū)爰?xì)胞的病毒載體包括復(fù)制缺陷型腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺相關(guān)病(adenovirus-associated virus,AAV)和單純皰疹病毒(herpes simplex virus，HSV)。復(fù)制缺陷型腺病毒載體是目前最常用載體，其可以將編碼免疫調(diào)節(jié)蛋白的基因?qū)胪暾囊葝u[8]。與腺病毒類似，逆轉(zhuǎn)錄病毒在體內(nèi)和體外也被廣泛用作基因轉(zhuǎn)移載體，當(dāng)給鏈脲佐菌素(streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型注射重組胰島素基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒時，研究發(fā)現(xiàn)在肝細(xì)胞中表達(dá)了胰島素并使機(jī)體達(dá)到正常血糖濃度。然而肝細(xì)胞不是增殖細(xì)胞，所以需要肝切除術(shù)誘導(dǎo)肝細(xì)胞增殖，以確保有效的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染效率[9]。逆轉(zhuǎn)錄病毒慢病毒屬還包括人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)，可以感染非分裂和分裂細(xì)胞[10]。然而，在應(yīng)用于人類之前，這些病毒的生物安全需要廣泛研究。

是胰島素基因傳遞的常用病毒載體腺病毒，其可攜帶多達(dá)30kb的外源DNA。此外，腺病毒載體是在細(xì)胞核內(nèi)作為非復(fù)制的染色體外DNA，所以不存在插入突變誘發(fā)細(xì)胞基因型的改變。但缺點也很明顯，其一基因表達(dá)的持續(xù)時間很短，其二具有較強(qiáng)的細(xì)胞免疫原性[11]。此外，由于一部分人已經(jīng)存在抗腺病毒的抗體，這會影響這種病毒的基因轉(zhuǎn)移效率。但是這一問題可以通過選擇性衣殼修飾AAV來克服，以逃避先前存在的抗體識別或者直接將AAV注射到組織中，野生型AAV可以以特定位點的方式整合到宿主染色體，它是胰島細(xì)胞基因治療的合適載體系統(tǒng)。為了驗證AAV載體轉(zhuǎn)染胰腺內(nèi)分泌細(xì)胞的有效性，研究人員使用質(zhì)粒pSub201構(gòu)建AAV載體，將pSub201質(zhì)粒中的野生型AAVDNA類似物克隆到pSP72克隆質(zhì)粒中，用異源啟動子代替AAV開放閱讀框架，結(jié)果表明轉(zhuǎn)化胰島細(xì)胞系INS-1和RINm5F的AAV載體轉(zhuǎn)染效率較高，分別為65%和57%。這些研究結(jié)果表明AAV載體是一種將基因傳遞到胰腺和分離的胰腺β細(xì)胞的有效基因載體[12]。

最后，單純皰疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)也被用作病毒載體。HSV-1在靶細(xì)胞中具有高效轉(zhuǎn)染效率，可感染分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞，然而其潛在風(fēng)險仍有待確定。除了改善已建立的載體系統(tǒng)，還正在開發(fā)新的病毒載體用于靶向基因治療。目前研究最多的是麻疹病毒，這是一種包膜病毒，可以靶向腫瘤細(xì)胞以發(fā)揮其溶瘤潛能。與逆轉(zhuǎn)錄病毒相反，由于麻疹病毒的附著和融合功能是在單獨的蛋白質(zhì)上編碼的，因此，更容易操縱結(jié)合特異性而不會影響進(jìn)入細(xì)胞的效率[13]。

2.2 非病毒載體

非病毒載體與病毒載體相比雖然安全，但是非病毒載體的基因轉(zhuǎn)移效率不是很高。傳統(tǒng)傳遞遺傳物質(zhì)的非病毒方法包括直接注射DNA、電穿孔和基因槍法[14]。目前已經(jīng)開發(fā)了基于納米粒、脂質(zhì)體和多聚體的非病毒載體用于基因療法核酸的遞送，其中陽離子脂質(zhì)體和聚合物在遞送各種類型的核酸方面取得了重大進(jìn)展。

2.2.1 聚合物載體

合成聚合物載體由于其潛在的安全性和多功能性而對基因遞送具有吸引力。然而，聚合載體的基因傳遞效率較低，所以主要用于運(yùn)載低濃度下具有生物學(xué)作用的治療基因。聚乙烯亞胺被認(rèn)為是最有效的陽離子聚合物之一。脂聯(lián)素是一種具有降血糖和抗動脈粥樣硬化作用的蛋白，Park等[15]使用與聚合物載體聚乙烯亞胺復(fù)合的微小環(huán)狀DNA將脂聯(lián)素基因傳遞到飲食誘導(dǎo)的肥胖C57BL/6J小鼠中，研究表明在體外和體內(nèi)，微小環(huán)狀DNA的表達(dá)水平均比常規(guī)質(zhì)粒的脂聯(lián)素表達(dá)水平高。該方法可產(chǎn)生足夠的血脂聯(lián)素水平，并且將與胰島素抵抗相關(guān)的參數(shù)標(biāo)準(zhǔn)化，所以聚合物載體介導(dǎo)的脂聯(lián)素基因療法可用于治療2型糖尿病。小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)是一種長度為20～25nt的雙鏈RNA，它可以通過RNA干擾(RNA interference,RNAi)抑制特定基因的表達(dá)。Jeong等[16]在使用聚合物載體聚乙烯亞胺靜脈給藥后，在使用環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的糖尿病動物模型中評估了Fas siRNA對糖尿病發(fā)生與發(fā)展的影響。Fas siRNA的全身性非病毒遞送顯示糖尿病發(fā)病率顯著延遲長達(dá)40d，而裸Fas siRNA或磷酸鹽緩沖溶液處理的對照小鼠則在20d內(nèi)患上了糖尿病。在這項研究中，聚乙烯亞胺介導(dǎo)的Fas siRNA遞送體系可保護(hù)非肥胖糖尿病小鼠免受環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的胰島炎和糖尿病的侵害，證明了基于非病毒載體的siRNA基因療法在預(yù)防1型糖尿病中的潛在用途。

2.2.2 電穿孔

通過體內(nèi)電穿孔(electroporation,EP)增強(qiáng)非病毒基因的轉(zhuǎn)移，該技術(shù)可用于針對胰島細(xì)胞抗原進(jìn)行DNA疫苗接種，當(dāng)與適當(dāng)?shù)拿庖吲潴w結(jié)合使用時可導(dǎo)致T細(xì)胞的生成和對T1DM的保護(hù)。體內(nèi)EP也可用于糖尿病的非免疫治療，它可用于遞送蛋白質(zhì)藥物，例如胰高血糖素樣肽1，瘦素或轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)，它們通過恢復(fù)葡萄糖穩(wěn)態(tài)，促進(jìn)胰島細(xì)胞存活與生長并促進(jìn)傷口愈合和改善其他并發(fā)癥應(yīng)用于T1DM和T2DM。Sato等[17]對成年麻醉的雌性小鼠進(jìn)行胰腺內(nèi)直接注射含綠色熒光蛋白環(huán)狀質(zhì)粒的溶液,使用方脈沖發(fā)生器進(jìn)行電穿孔?；蜻f送1d后，在注射的胰腺部分觀察到綠色熒光蛋白的表達(dá)。轉(zhuǎn)染后1周內(nèi)，綠色熒光蛋白表達(dá)水平降低至基線。此研究證明電穿孔對于胰腺細(xì)胞的安全和轉(zhuǎn)染是有效的，這種向胰腺轉(zhuǎn)移基因的方法可能會在胰腺疾病的基因治療和特定基因功能的研究中得到應(yīng)用。

2.2.3 納米粒

納米粒是一系列直徑小于100nm的高分子材料。納米粒具有獨特的性質(zhì)，例如獨特的結(jié)構(gòu)、單分散性、高表面質(zhì)量比、高效傳遞基因以及蛋白質(zhì)和小分子化學(xué)藥物的特性，使其適用于生物醫(yī)學(xué)的各種領(lǐng)域。殼聚糖是一種直鏈多糖，殼聚糖納米粒具有良好的生物相容性且無毒性，是一種理想的非病毒載體，可廣泛用于基因轉(zhuǎn)移。將質(zhì)粒包埋在殼聚糖納米粒中，它可以抵抗核酸酶的降解。此外，它還通過抑制細(xì)菌的新陳代謝表現(xiàn)出抗菌活性。研究[18]發(fā)現(xiàn)人胰島素基因可以被殼聚糖DNA納米粒成功轉(zhuǎn)染并在糖尿病大鼠的胃腸道中有效表達(dá)?；⒄溶?polydatin,PD)具有多種藥理活性，但其生物利用度仍是關(guān)鍵的問題。Abdel Moneim等[19]開發(fā)一種新的口服配方—殼聚糖納米粒，以提高PD治療2型糖尿病的潛力；與游離PD相比，這種口服配方—殼聚糖納米粒在糖尿病大鼠中表現(xiàn)出更明顯的抗糖尿病作用。因此，納米粒作為治療糖尿病的非病毒載體有極大的應(yīng)用前景。

3 相關(guān)靶基因和靶點的鑒定

3.1 相關(guān)靶點的鑒定

1型糖尿病的本質(zhì)是胰腺β細(xì)胞被自身免疫破壞導(dǎo)致患者終生對胰島素產(chǎn)生依賴。但每天多次注射或持續(xù)皮下注射胰島素不僅繁瑣還會引起低血糖，甚至可能危及生命。雖然近年來胰島素治療更精準(zhǔn)有效，但僅靠胰島素治療無法預(yù)防腎病、視網(wǎng)膜病變以及血管和心臟病，這些并發(fā)癥仍然發(fā)生在大量糖尿病患者中。長期以來，人們一直在尋求糖尿病的根本治愈療法，包括胰島移植、全胰腺移植、β細(xì)胞再生和胰島素基因治療。然而，目前還沒有令人滿意的方法來治愈這種疾病。

3.1.1 胰腺β細(xì)胞

胰腺中含有三種主要的細(xì)胞類型α、β和δ。在1型糖尿病中，分泌胰島素的β細(xì)胞被炎癥細(xì)胞破壞，所以治療1型糖尿病的基因治療方案以β細(xì)胞為最佳靶點。胰島素基因治療的本質(zhì)是遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到特定靶細(xì)胞。雖然胰島素基因治療會受到胰島素生理機(jī)制的阻礙，但是胰腺β細(xì)胞具有特定的肽酶、葡萄糖傳感系統(tǒng)和分泌顆粒，其可以通過胞吐迅速釋放胰島素來調(diào)節(jié)機(jī)體血糖水平，而在胰腺β細(xì)胞外重建這一調(diào)節(jié)系統(tǒng)是非常不容易的。

3.1.2 肝細(xì)胞

肝細(xì)胞是基因治療產(chǎn)生胰島素的另一個可能靶點。肝細(xì)胞的主要優(yōu)點是它們有一個類似于胰腺β細(xì)胞的葡萄糖傳感系統(tǒng)。但肝細(xì)胞用于基因治療的缺點是它們不含有胰島素前處理酶或分泌顆粒，其中未加工的胰島素可以在生理刺激下通過胞吐迅速釋放。在葡萄糖誘導(dǎo)型啟動子下，含有胰島素基因的重組腺病毒載體被用來轉(zhuǎn)運(yùn)肝細(xì)胞，可糾正STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠高血糖。研究發(fā)現(xiàn)[20]，將胰島素靶向肝臟可糾正由外周胰島素輸送引起的葡萄糖代謝障礙。Lee等[21]對STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠肝臟門靜脈注射改良型胰島素基因，發(fā)現(xiàn)大鼠可以恢復(fù)到正常血糖水平。

3.1.3 K細(xì)胞

胃腸道中有大量的內(nèi)分泌細(xì)胞，其中胃腸道K細(xì)胞也是糖尿病基因治療中潛在且理想的靶細(xì)胞。K細(xì)胞可以分泌葡萄糖依賴型促胰島素多肽(glucose-dependent insulinotropic ploypeptide,GIP)，其可刺激β細(xì)胞釋放胰島素并促進(jìn)β細(xì)胞的再生。研究表明在胃腸道K細(xì)胞中，在GIP基因5′調(diào)控區(qū)的控制下，克隆的人胰島素基因可以產(chǎn)生生物活性胰島素，并在STZ誘導(dǎo)后保護(hù)小鼠免受糖尿病的影響[22]。Mojibian等[23]發(fā)現(xiàn)通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)使腸道K細(xì)胞產(chǎn)生胰島素，可以保護(hù)非肥胖糖尿病小鼠免于自身免疫性糖尿病。綜上所述，開發(fā)一種有效的靶向基因傳遞方法對體內(nèi)基因治療具有重要意義。

3.2 相關(guān)靶基因

3.2.1 非編碼小RNA分子

非編碼小RNA分子(microRNA，miRNA)可以減輕或預(yù)防各種疾病發(fā)展，所以其成為各種疾病治療的靶點，在臨床上具有廣泛的應(yīng)用前景。人類中有兩千多個miRNA，且每個miRNA不止調(diào)控一個基因。miRNA在胰腺功能中也起著重要作用。miR-375可以通過調(diào)節(jié)肌營養(yǎng)蛋白和磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1的表達(dá)，從而調(diào)節(jié)胰島素分泌[24]。Wang等[25]發(fā)現(xiàn)miRNA-92a可以通過靶向轉(zhuǎn)錄因子KLF2，進(jìn)而抑制高糖環(huán)境下誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，并促進(jìn)胰島素的分泌和增殖。所以miRNA-92a可以作為糖尿病臨床治療的潛在靶標(biāo)，基于miRNA的治療策略具有巨大的臨床應(yīng)用前景。

3.2.2 蛋白激酶

蛋白激酶CK2是細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的一種絲氨酸和酪氨酸激酶。一方面CK2可以降低β細(xì)胞胰島素的釋放，從而影響胰島素分泌水平；另一方面，這種激酶促進(jìn)脂肪細(xì)胞增生肥大以及視網(wǎng)膜的血管化[26]。因此，CK2抑制劑可能通過改善胰島素分泌來治療T2DM。研究發(fā)現(xiàn)CK2抑制劑抑制脂肪組織的增生，從而減輕肥胖引起的糖尿病。此外，用CK2抑制劑或大黃素對小鼠進(jìn)行預(yù)處理，可抑制缺氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變模型小鼠的視網(wǎng)膜新生血管生成。因此，抑制CK2可能是抑制糖尿病誘導(dǎo)的視網(wǎng)膜組織新生血管生成的一種合適的治療策略。抑制CK2活性降低了糖尿病視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移以及細(xì)胞活力[27]。但是目前可用的CK2抑制劑具有較高的細(xì)胞膜穿透能力，沒有細(xì)胞特異性。因此，開發(fā)細(xì)胞特異性CK2抑制劑靶向細(xì)胞是目前亟待解決的問題。

3.2.3 胰十二指腸同源盒1轉(zhuǎn)錄因子

胰十二指腸同源盒1轉(zhuǎn)錄因子(pancreatic and duodenal homeobox-1,PDX-1)可以調(diào)節(jié)胰島素和胰高血糖素的分泌，研究[28-29]發(fā)現(xiàn)，PDX-1基因的突變會導(dǎo)致幼年糖尿病和其他胰腺疾病。PDX-1對重塑β細(xì)胞活性的治療作用已經(jīng)被報道出來，在2型糖尿病動物模型中，PDX-1基因過表達(dá)可以提高β細(xì)胞的質(zhì)量和糖耐受。Amatya等[30]構(gòu)建了一種含人PDX-1的融合蛋白，研究其在非肥胖糖尿病體內(nèi)和體外抗T1DM的治療潛力。結(jié)果與預(yù)期一致，構(gòu)建的融合蛋白起到了治療糖尿病的作用。其中PDX-1部分促進(jìn)了胰島β細(xì)胞的分化和新生，進(jìn)而產(chǎn)生功能性的胰島素。綜上所述，PDX-1作為一種抗T1DM藥物可以起到治療自身免疫性糖尿病的作用。

4 基因靶向遞送系統(tǒng)的選擇

盡管基因治療在臨床前研究取得了顯著的成果，但其實際臨床應(yīng)用仍然有限，如何運(yùn)用一種更加安全有效的途徑將靶向基因精準(zhǔn)遞送到相應(yīng)組織是目前亟待解決的問題[31]。要成功實現(xiàn)基因的靶向治療，必須將基因精準(zhǔn)傳遞到靶細(xì)胞并在靶細(xì)胞中表達(dá)，并且不損害非靶細(xì)胞。其中一種方法是使用僅在靶細(xì)胞中激活的啟動子，雖然這一策略可以減少甚至消除轉(zhuǎn)基因的副作用，但它并不能解決那些由載體顆粒錯誤定位所引起的不良反應(yīng)。因此，單靠轉(zhuǎn)錄水平的靶向作用不足以確保靶細(xì)胞中的基因表達(dá)，所以需要有效的基因靶向遞送系統(tǒng)。目前應(yīng)用比較廣泛的有納米顆粒藥物靶向遞送系統(tǒng)，多糖靶向遞送系統(tǒng)，超聲靶向微泡破壞技術(shù)等聯(lián)合應(yīng)用[32]。

4.1 納米粒藥物靶向遞送系統(tǒng)

當(dāng)對納米粒表面進(jìn)行修飾后，納米粒就可以主動定位到特定的靶向部位，并具有通過血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)的能力。當(dāng)維生素B12、葉酸、轉(zhuǎn)鐵蛋白等這些靶向配體在對納米粒進(jìn)行修飾后，促進(jìn)了機(jī)體對胰島素的攝取。另外，它可檢測體內(nèi)RNA動態(tài)變化，應(yīng)用范圍較廣，同時也提高了基因靶向治療糖尿病在臨床的功能和實用性。藥物遞送納米粒中包含金屬納米粒，金屬氧化物納粒和非金屬納米粒。但由于其毒性，特別是由納米粒觸發(fā)神經(jīng)元引起的神經(jīng)毒性是靶向藥物輸送中的嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。其中納米粒的大小、形狀和表面電荷都對基因的傳遞有一定影響，所以評估藥物納米粒的神經(jīng)毒性對將來開發(fā)新的針對人體安全性的藥物靶向傳遞系統(tǒng)具有重大意義[33]。Olojede等[34]發(fā)現(xiàn)高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法共軛銀納米顆粒改善2型糖尿病大鼠睪丸損傷。對納米藥物的研發(fā)，尤其是針對糖尿病這類難治性疾病具有一定意義，也對未來納米粒藥物遞送系統(tǒng)應(yīng)用于臨床糖尿病基因靶向治療有較大的參考價值。

4.2 多糖靶向遞送系統(tǒng)

在藥物遞送系統(tǒng)中使用多糖作為靶向載體是近幾年的熱門研究，特別是那些具有免疫細(xì)胞特異性識別能力的多糖，使其能夠用于靶向遞送系統(tǒng)[35]。β-D-葡聚糖是天然存在的具有免疫調(diào)節(jié)活性且不易分解的多糖，目前已引起人們廣泛的關(guān)注。β-D-葡聚糖可以通過氫鍵以疏水相互作用的形式與同型寡聚脫氧核苷酸結(jié)合并形成新型復(fù)合物。C型凝集素受體1(dectin-1)是參與識別的主要受體并在抗原呈遞細(xì)胞中表達(dá)[36]。當(dāng)其用于免疫治療時，能夠被巨噬細(xì)胞等免疫細(xì)胞特異性識別。所以β-D-葡聚糖可被開發(fā)為具有穩(wěn)定生物相容性和特異性的靶向遞送載體并有望在靶向糖尿病基因治療方面得到應(yīng)用。

4.3 超聲靶向微泡破壞技術(shù)

超聲靶向微泡破壞技術(shù)(ultrasound-targeted microbubble destruction,UTMD)是一種很有前景的基因靶向遞送策略，其是將pDNA摻入脂質(zhì)殼中，然后由包裹全氟化碳?xì)怏w的脂質(zhì)殼組成的微泡注入體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)。在超聲照射下，微泡破裂并在周圍細(xì)胞的膜中產(chǎn)生瞬時孔，此時pDNA被插入靶細(xì)胞中。UTMD具有許多基因治療所需的特性，包括低毒性、低免疫原性、重復(fù)使用的潛力以及器官的特異性。人血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因傳遞到移植的胰島和周圍的組織會促進(jìn)胰島血運(yùn)重建，并改善機(jī)體血糖，說明UTMD介導(dǎo)的基因傳遞可安全有效地改善胰島移植后血運(yùn)重建[37]。Zhao等[38]利用納米粒載體與UTMD結(jié)合的療法首次成功將堿性成纖維細(xì)胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)遞送至糖尿病大鼠的心臟。此研究證實將非病毒載體與UTMD技術(shù)相結(jié)合是將bFGF靶向遞送至心臟的有效策略，并且這種生長因子療法可以通過恢復(fù)心臟功能以及受損結(jié)構(gòu)來逆轉(zhuǎn)糖尿病性心肌病進(jìn)程。這項技術(shù)使用超聲波能量將基因特異性轉(zhuǎn)移到胰腺中并且無需利用病毒載體，給臨床上基因靶向治療提供了新方法。

5 小結(jié)與展望

綜上所述，基因靶向治療正逐漸應(yīng)用于不同領(lǐng)域的發(fā)展。與藥物治療相比，基因靶向治療是一種靶向性生物治療手段，其治療效果作用持久并且靶向性強(qiáng)，具有更廣泛的應(yīng)用前景。而未來的研究更需要著眼于克服基因靶向傳遞系統(tǒng)的準(zhǔn)確性和安全性，才能更好應(yīng)用于臨床糖尿病的治療。從靶基因到靶點的鑒定再到載體的選擇對基因靶向治療的療效有較大影響，而制備具有高效靶向定位能力的藥物遞送載體系統(tǒng)更是基因靶向治療的關(guān)鍵。目前雖然在糖尿病腎病領(lǐng)域已經(jīng)有了一定的突破進(jìn)展，但是基因靶向治療糖尿病的實質(zhì)性應(yīng)用仍充滿了挑戰(zhàn)。盡管如此，這一技術(shù)的出現(xiàn)與發(fā)展給難治性疾病的臨床治療提供了全新的治療思路和方法，未來有望在臨床上實現(xiàn)大規(guī)模應(yīng)用，推動人類疾病的治療進(jìn)程，尤其是為糖尿病患者帶來福音。