口腔黏膜相關疾病免疫功能檢測及意義

王安訓

中山大學附屬第一醫(yī)院口腔頜面外科，廣東廣州（510080）

人體的免疫系統(tǒng)由免疫器官（骨髓、脾臟、淋巴結等）、免疫細胞（淋巴細胞、單核吞噬細胞、肥大細胞等）和免疫活性物質（抗體、補體、免疫球蛋白、細胞因子等）共同組成，具有免疫監(jiān)視、防御、調控等作用。由于免疫功能的異常在許多疾病的發(fā)生發(fā)展及預后中起重要作用，因此開展免疫功能檢測具有實際的臨床意義。

1 免疫功能檢測分類

1.1 細胞免疫分析

淋巴細胞是機體細胞免疫的重要組成部分，其功能的異常與許多疾病相關，因此臨床上常開展淋巴細胞亞群分析，主要分析T 淋巴細胞、B 淋巴細胞和自然殺傷細胞（natural killer cell，NK）。

1.1.1 T 淋巴細胞 T 淋巴細胞維持著機體正常的細胞免疫［1-2］。成熟的T 細胞表面均表達CD3（CD3+，即總T 細胞）；CD3+T 細胞又分為CD4+T 細胞和CD8+T 細胞兩個亞群。CD4+T 細胞接受抗原刺激后，在不同的條件下可分化成不同亞型的T 細胞，如：①在白介素-12（interleukin-12，IL-12）和干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）的誘導下分化為Th1細胞，調節(jié)細胞免疫和遲發(fā)型超敏反應等；②在IL-4 的誘導下分化為Th2 細胞，參與體液免疫和速發(fā)型超敏反應等；③在轉化生長因子β（transforming growth factor-β，TGF-β）誘導下分化為調節(jié)性T 細胞（regulatory T cells，Tregs），參與免疫調節(jié)；④在TGF-β 和IL-6 的共同誘導下分化為Th17 細胞，參與炎癥反應和自身免疫性疾病。CD8+T 細胞只識別主要組織相容性復合體（major histocompatibility complex，MHC）Ⅰ類分子遞呈的抗原，根據(jù)細胞表面CD28 的表達情況又可分為細胞毒性T 細胞（CD8+CD28+）和抑制性T 細胞（CD8+CD28-），前者在CD28 共刺激分子激活下分化增殖成效應細胞；后者對免疫應答具有負調節(jié)功能。

T 細胞亞群的檢測分析對許多疾病的診斷和治療都有極其重要的指導意義。在大多數(shù)惡性腫瘤患者中外周血T 細胞亞群呈現(xiàn)如下特征：CD3+細胞、CD4+細胞明顯減少，而CD8+細胞明顯增加，CD4+/CD8+比值顯著降低，這說明患者的細胞免疫功能處于抑制狀態(tài)。在免疫缺陷病、白血病、某些病毒感染、器官移植后的排斥反應以及免疫抑制劑治療的患者中常表現(xiàn)為CD4+T 細胞數(shù)和CD4+/CD8+比值降低。在類風濕性關節(jié)炎、I 型糖尿病等患者中可見CD4+/CD8+比值上升。

1.1.2 B 淋巴細胞 B 淋巴細胞來源于骨髓的多能干細胞，成熟B 細胞定居于淋巴結皮質淺層的淋巴小結和脾臟的紅髓和白髓的淋巴小結內，接受抗原刺激后，在抗原提呈細胞和Th 細胞的輔助下成為活化B 細胞，進而分化為漿細胞，合成和分泌各類抗體（免疫球蛋白），執(zhí)行機體的體液免疫［3］。

CD19 是B 細胞重要的膜抗原，是診斷B 細胞系腫瘤（白血病、淋巴瘤）和鑒定B 細胞最好的標記。CD19+B 細胞升高常見于B 細胞系的惡性腫瘤：如急性前B 細胞白血病和Burkitt 淋巴瘤等；CD19+B 細胞降低可見于長期使用免疫抑制劑患者。另外，由于CD19 廣泛存在于B 細胞惡性腫瘤細胞表面，故CD19 可用于其靶點免疫治療［4］。

1.1.3 NK 細胞 NK 細胞來源于骨髓，主要分布于外周血，少量分布于淋巴結和骨髓。NK 細胞的表面標志特異性相對差，常見的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94 和LAK-1。NK 細胞主要通過穿孔素、NK 細胞毒因子和腫瘤壞死因子（tumour necrosis factor，TNF）等對靶細胞起殺傷作用，是機體抗腫瘤、抗感染的重要免疫因素，活化的NK 細胞還可發(fā)揮調節(jié)免疫和造血作用以及直接殺傷靶細胞的作用［4］。

NK 細胞總數(shù)和活性檢測可作為判斷機體抗腫瘤和抗病毒感染的指標之一。NK 細胞總數(shù)正常而活性降低者常見于大多數(shù)腫瘤患者（尤其是中晚期或伴有轉移的患者）、免疫缺陷病以及感染性疾病患者；NK 細胞總數(shù)和活力均下降常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、急性多發(fā)性硬化癥等；NK 細胞活性增高常見于多發(fā)性骨髓瘤、肺結核和宿主抗移植物反應等疾病。

1.2 體液免疫分析

1.2.1 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig） 免疫球蛋白主要存在于血漿中，也見于其他體液、組織液和分泌液中［5-6］，因結構不同分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE 5 種。血清Ig 的測定是檢查體液免疫功能最常用的方法，由于目前還沒有發(fā)現(xiàn)由IgD 和IgE 缺陷所致疾病，所以通常只檢測IgG、IgM、IgA。

IgG 抗體是四鏈單體，占血清Ig 總量的75%，是血清和細胞外液中最主要的抗體成分；IgG 出生后3 個月開始合成，3～5 歲接近成人水平，其功能包括：激活補體經(jīng)典途徑介導溶菌和細胞毒作用；參與抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用；調理吞噬作用；中和毒素和病毒［7］。血清IgG 升高常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕性關節(jié)炎以及某些感染性（病毒）疾病等；血清IgG 降低常見于免疫缺陷綜合征、燒傷、濕疹、天皰瘡等。血清IgG 抗體陽性，一般提示是既往感染，對臨床診斷意義不大；但如果IgG 抗體滴度持續(xù)上升，則應考慮為近期感染了該種病毒。IgG4（IgG 一種亞型）相關性疾病是一種慢性、進行性炎癥伴纖維化的疾病，可累及多臟器，血清IgG4 水平顯著升高，如唾液腺受累的Mikulicz ?。?］。

IgM 是由5 個結構相同單體組成的“星狀”五聚體；占血清Ig 總量的5%～10%。IgM 在胎兒3 個月后開始合成，1～2 歲時達到成人水平；其功能包括：與抗原結合啟動補體級聯(lián)反應產(chǎn)生溶菌作用、調理吞噬作用、中和病毒（效能比IgG 高）［9］。IgM抗體是免疫應答中首先分泌的抗體，一經(jīng)感染快速產(chǎn)生，其后逐漸減少而消失，因此血清中檢出IgM，提示近期感染，可用于感染的早期診斷。IgM不能通過胎盤，如果胎兒或新生兒的血液中發(fā)現(xiàn)IgM，說明有宮內感染。IgM 升高常見于巨球蛋白血癥、類風濕關節(jié)炎、肝臟病等；IgM 降低常見于胃腸病、燒傷、聯(lián)合免疫缺陷病等。

IgA 有單體、雙體、三體及多聚體等多種形式，占血清Ig 含量的10%～20%；分為血清型及分泌型。血清型IgA 無重要的免疫功能；分泌型IgA 存在于分泌液中，如唾液、淚液、初乳、鼻和支氣管分泌液等，是機體黏膜局部抗感染的主要抗體［10］。新生兒可從母乳中獲得分泌型IgA，出生4～6 個月后血中開始出現(xiàn)IgA，青少年期達到高峰。IgA 的功能包括：分泌于黏膜表面中和感染因子；通過初乳輸送到新生兒的消化道黏膜中起保護作用［11］。血清IgA 升高常見于IgA 型多發(fā)性骨髓瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等；血清IgA 降低常見于自身免疫病、繼發(fā)性免疫缺損等。

1.2.2 輕鏈 輕鏈是指Ig 單體分子中分子量較小的多肽鏈，每條輕鏈包含可變區(qū)（VL，與抗原結合部位）和恒定區(qū)（CL），根據(jù)恒定區(qū)氨基酸序列的差異將輕鏈分為：kappa（κ）鏈與lambda（λ）鏈［12］。正常人血清中κ∶λ 比值約為2∶1。輕鏈能自由通過腎小球基底膜，并能在腎小管被重吸收，因此正常人尿中有少量輕鏈存在。血或尿輕鏈的定量測定可用于多發(fā)性骨髓瘤等疾病的診斷或輔助診斷。自身免疫性疾病、某些惡性腫瘤、感染、肝硬化、急慢性肝炎等患者輕鏈也可增多，但一般表現(xiàn)為κ、λ同時增多，比值不變。

1.2.3 補體（Complement） 補體是存在于血清和組織液中經(jīng)活化后具有酶活性的一組蛋白質，可介導免疫和炎癥反應。補體包括固有成分（C1q、C1r、C1s、C2-C9、D 因子及B 因子）、調節(jié)蛋白和補體受體。補體的經(jīng)典激活途徑是由抗原-抗體復合物或其他因子激活C1，然后經(jīng)過識別、活化和膜攻擊3 個階段起作用；而替代激活途徑是直接由C3開始的激活途徑。補體系統(tǒng)參與機體的特異性和非特異性免疫機制，包括對細菌溶解和殺傷、免疫黏附、趨化和過敏毒素作用。

補體C3 是血清中含量最高的補體成分，主要由巨噬細胞和肝臟合成，在補體經(jīng)典激活途徑或替代激活途徑中均發(fā)揮重要作用。補體C4 是一種多功能β1-球蛋白，在補體經(jīng)典激活途徑中被C1s水解為C4a/C4b，在補體激活、促進吞噬、防止免疫復合物沉著和中和病毒等方面發(fā)揮作用。C3 或C4 升高常見于某些急性炎癥、傳染病早期或者組織損傷，如風濕熱急性期、關節(jié)炎等；C3 或C4 降低常見于慢性活動性肝炎、急性胰腺炎、嚴重類風濕關節(jié)炎以及兒童營養(yǎng)不良性疾病等［13-14］。腫瘤患者血清補體可發(fā)生明顯改變，如肝癌和白血病等。

1.3 炎癥反應標志物

機體受到微生物入侵或組織損傷等炎癥刺激時肝細胞可合成一系列的急性相蛋白，包括：C 反應蛋白、血清淀粉樣蛋白A、纖維蛋白原等［15］。臨床上常用這些炎癥反應標志物作為多種疾病診斷和治療的監(jiān)測指標。

1.3.1 紅細胞沉降率（erythrocyte sedimentation rate，ESR） ESR 是指紅細胞在一定條件下沉降的速度。在正常情況下紅細胞膜表面的唾液酸帶有負電荷形成zeta 電位，使紅細胞互相排斥而保持懸浮穩(wěn)定性，沉降很慢；在病理情況下血漿纖維蛋白原或球蛋白增多，致使紅細胞zeta 電位降低，彼此易于沾邊成緡錢狀，使血沉加快。婦女月經(jīng)、妊娠3 個月以上直到分娩后3 周、60 歲以上的高齡者因血漿纖維原蛋白量逐漸增高可導致血沉的生理性增快［16-17］。

血沉增快常見于以下疾?。?4］：①炎癥、組織損傷及壞死；②惡性腫瘤：惡性腫瘤患者因組織壞死、繼發(fā)感染及貧血等因素可導致血沉加快，血沉可用于良惡性腫瘤鑒別診斷和惡性腫瘤療效監(jiān)測的指標；③各種原因導致的高球蛋白血癥：如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥等；④貧血：當血紅蛋白低于90 g/L 時，血沉可增快，但低色素性貧血，可因紅細胞體積減小、血紅蛋白量不足導致血沉降低。

1.3.2 C 反應蛋白（C-reaction protein，CRP） CRP是機體受到微生物入侵或組織損傷等炎癥性刺激時肝細胞合成的急性相蛋白，它通過與配體結合，激活補體和單核吞噬細胞系統(tǒng)，將載有配體的病理物質或病原體清除。CRP 在炎癥開始數(shù)小時就升高，48 h 即達峰值，隨著病變消退恢復正常；CRP升高比臨床癥狀的變化要早，因此CRP 檢測可成為某些疾病早診斷和早治療的依據(jù)。

CRP 檢測可用于多種疾病的診斷和治療監(jiān)測［18］，①急性感染性疾病的診斷：CRP 升高的程度反映炎癥嚴重程度，當CRP 值大于100 mg/L 時表示嚴重的炎癥；②術后感染的監(jiān)測：術后并發(fā)癥可導致CRP 的持續(xù)升高，因此對有術后感染風險的患者可通過測定CRP 來調整治療方案；③抗生素使用的依據(jù)和療效觀察：許多急性感染或高危病人在缺少微生物學診斷時可通過監(jiān)測CRP 作為使用抗生素治療的依據(jù)，CRP 下降至正常時中斷抗生素治療；④疾病預后判斷：許多惡性腫瘤患者血清CRP 均有不同程度的升高，因此CRP 水平升高或持續(xù)升高預示著預后不良或轉移。

1.3.3 血清淀粉樣蛋白A（Serum amyloid A protein，SAA） SAA 是一種由肝細胞產(chǎn)生后被分泌到血清中的一種急性時相蛋白，當機體發(fā)生感染或損傷時，可在4～6 h 內迅速升高約1 000 倍，當機體抗原清除后則迅速降低至正常水平，是反映機體感染情況和炎癥恢復的靈敏指標［19］。

SAA 升高可見于病毒、支原體、細菌感染，且敏感性高于CRP。在細菌感染性疾病中SAA 比CRP上升早、幅度大、靈敏度高，而在病毒感染性疾病中SAA 顯著升高，CRP 不升高。因此SAA 聯(lián)合CRP 檢測可用于鑒別診斷細菌或病毒感染［20］。惡性腫瘤發(fā)生轉移時SAA 可顯著升高；SAA 還是監(jiān)測移植排異的靈敏指標［21］。

2 免疫功能檢測在口腔黏膜相關疾病中的應用

口腔頜面部在人體的免疫系統(tǒng)中占重要地位，免疫功能的異常在某些口腔疾病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。本文將討論免疫功能異常在3 種常見口腔黏膜相關疾病中的作用，包括復發(fā)性阿弗他潰瘍（recurrent aphthous ulcer，RAU）、扁平苔蘚（lichen planus，LP）以及口腔鱗狀細胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC）。同時探討免疫功能檢測在這些疾病診斷和治療中的應用價值。

2.1 復發(fā)性阿弗他潰瘍

RAU 是最常見的口腔黏膜病，患病率高達20%左右；其臨床表現(xiàn)為孤立的、圓形或橢圓形的淺表性潰瘍，周期性復發(fā)且具有自限性，愈合后多不留瘢痕。RAU 的發(fā)病與遺傳、免疫、環(huán)境、感染等多種因素有關，其中免疫因素被認為與該病的發(fā)生尤為密切，包括細胞免疫功能異常、體液免疫功能異常、自身免疫等。

目前已有大量關于RAU 淋巴細胞亞群和體液免疫功能的研究［22-25］，Nan 等［22］檢測30 例RAU 患者外周血細胞免疫和體液免疫指標，結果顯示：RAU 患者CD4+細胞水平顯著降低，IgM 水平顯著增高，因此作者認為RAU 患者以細胞免疫功能低下為主，同時伴有體液免疫功能增強。Yang 等［23］對頑固性RAU 患者外周血Th17 細胞和體液免疫功能分析顯示：RAU 患者Th17 細胞占CD4+細胞的比例升高，IgG、IgA、IgE 水平也升高。Koridze 等［24］的研究結果也顯示RAU 患者CD3+、CD4+和NK 細胞下降，IgM、IgG、IgE 和IL-6 升高；治療后CD3+、CD4+、NK 細胞以及IgG、IgM 均可恢復正常。然而Sun 等［25］對34 例RAU 患者的研究發(fā)現(xiàn)，RAU 患者發(fā)病期間CD3+、CD4+等細胞顯著升高；治愈后CD4+細胞顯著下降，CD8+細胞顯著升高。

上述研究雖然顯示RAU 與細胞免疫和體液免疫功能異常相關，但結果存在很大差異，為此筆者收集了2013 年1 月至2017 年9 月在中山大學附屬第一醫(yī)院就診的47 例RAU 患者（20 例女性，27 例男性；年齡16～69 歲），同時收集健康人13 例（7 例女性，6 例男性；年齡22～43 歲），檢測外周血淋巴細胞亞群、體液免疫功能和炎癥反應標志物；淋巴細胞亞群分析顯示：與健康人比較，RAU 患者CD19+細胞、CD3+細胞、CD4+細胞、CD8+細胞水平下降，CD4+/CD8+、NK 細胞水平升高，但所有指標兩組間差異均無統(tǒng)計學意義；分別有45%的患者CD4+細胞呈升高（7/47）或降低（14/47），48.9%的患者NK 細胞呈升高（19/47）或降低（4/47）。體液免疫功能結果顯示：與健康人比較，口腔潰瘍患者κ 鏈、λ 鏈、C3、IgA、IgG、IgM 水平升高，κ 鏈/λ 鏈、C4 水平下降，兩組間差異有統(tǒng)計學意義的有：κ 鏈/λ 鏈和λ鏈；同時有51%的患者C3 或C4 異常。炎癥反應標志物檢測結果顯示：與健康人比較，口腔潰瘍患者ESR、CRP 均顯著升高，分別為39%和28.5%。進一步分析顯示RAU 患者中許多組合的陽性檢出率高于70%（即兩項中至少有一項異常），如細胞免疫組合（CD3+/NK、CD4+/NK），細胞/體液免疫組合（CD3+/κ 鏈、CD3+/C3、CD3+/IgG、CD3+/IgM、CD4+/κ鏈、NK/κ 鏈、NK/C3），細胞免疫/炎癥組合（CD3+/CRP、NK/ESR）和體液免疫/炎癥組合（ESR/κ 鏈、ESR/IgG）。本研究表明RAU 患者存在明顯的體液免疫功能異常和炎癥反應。雖然細胞免疫功能未見明顯異常，但有近一半的患者存在CD4+細胞或NK 細胞的異常；同時RAU 患者中各種細胞免疫、體液免疫或炎癥反應標志物組合的陽性率均高達70%。這也說明雖然RAU 患者免疫功能存在異常，但不同個體存在不同的細胞免疫或體液免疫功能的異常，臨床上應該針對不同的免疫功能異常給予不同的治療方案。

2.2 口腔扁平苔蘚

LP 是一種可累及皮膚、黏膜、指甲和毛發(fā)的炎癥性皮膚??；可單獨發(fā)生于口腔黏膜或皮膚，也可皮膚與黏膜同時累及。OLP 的臨床特征為珠光白色條紋，可形成網(wǎng)狀損害或糜爛，多見于磨牙區(qū)黏膜與前庭溝，具有明顯的左右對稱性，有粗糙感和輕度刺激痛。目前OLP 病因未明，其發(fā)病可能與自身免疫、感染、神經(jīng)精神因素有關；藥物因素、內分泌異常、慢性病灶等因素也可誘發(fā)本病。由于自身免疫功能的異常以及感染引起的炎癥反應是LP 發(fā)病的主要原因，因此對LP 患者進行淋巴細胞亞群分析、體液免疫功能以及炎癥反應標志物的檢測對LP 的診斷、治療及預后預測具有重要意義。

研究顯示OLP 患者炎癥反應標志物紅細胞沉降素（erythrocyte sedimentation rate，ESR）、CRP、中性粒/淋巴細胞（neutrophil/lymphocyte ratio，N/L）比率顯著上升［26］。Huang［27］等對30 例OLP 患者的細胞免疫和體液免疫功能進行分析顯示：OLP 患者淋巴細胞亞群CD3+、CD4+和CD8+細胞顯著低于正常值，CD19+細胞顯著高于正常值；體液免疫IgM 顯著上升，C4 顯著下降，也即OLP 患者同時存在細胞免疫功能和體液免疫功能的異常。Biocina-Lukenda 等［28］對30 例OLP 患者的體液免疫功能檢測也發(fā)現(xiàn)：OLP 患者IgA 和IgM 顯著上升，但IgG 僅輕度升高。

為了對OLP 患者進行系統(tǒng)的免疫功能和炎癥反應狀態(tài)進行研究，筆者收集了2013 年1 月至2017 年9 月在中山大學附屬第一醫(yī)院就診的OLP患者38 例（22 例女性，16 例男性；年齡25～76 歲），淋巴細胞亞群分析顯示：與健康人比較，OLP 患者CD3+細胞、CD8+細胞水平下降，CD19+細胞、CD4+細胞、CD4+/CD8+、NK 細胞水平升高，其中CD3+細胞、CD8+細胞和CD4+/CD8+兩組間存在顯著性差異；同時發(fā)現(xiàn)40%的患者CD19+細胞異常（83%升高），57%的OLP 患者NK 異常（71%升高）。體液免疫功能結果顯示：與健康人比較，OLP 患者λ 鏈水平升高，κ 鏈、κ 鏈/λ 鏈、C4、IgA 水平下降，C3、IgG、IgM無明顯變化；兩組間存在顯著性差異的有κ 鏈/λ 鏈和C4；同時發(fā)現(xiàn)63%患者κ 鏈異常（70%下降），41%患者C4 異常（85%下降）。炎癥反應標志物檢測結果顯示：與健康人比較，OLP 患者ESR 顯著升高；ESR 升高的患者中女性占85%。進一步分析顯示OLP 患者中許多組合的陽性檢出率高于75%，如細胞免疫組合（CD19+/CD3，CD19+/NK），細胞/體液免疫組合（CD3+/IgG、CD4+/κ 鏈、NK/λ 鏈、NK/C4），體液免疫組合（κ 鏈/λ 鏈，κ 鏈/C4）和體液免疫/炎癥組合（κ 鏈/ESR）。OLP 患者中CD3+/κ 鏈和NK/κ 鏈組合的陽性檢出率高于90%；在男性患者中NK/κ 鏈，CD19+/κ 鏈組合的陽性檢出率達100%。同時還發(fā)現(xiàn)CD3 或CD4 下降的患者NK 均上升，λ 鏈升高的患者ESR 均上升，IgG 下降的患者κ 鏈均下降。本研究表明OLP 患者存在明顯的細胞免疫功能、體液免疫功能的異常和炎癥反應；細胞免疫功能中還可見40%和57%的患者存在CD19+細胞和NK 細胞的異常，這兩者均與體液免疫功能密切相關；體液免疫功能中也可見63%和41%的患者存在κ 鏈和C4 的異常；同時OLP 患者中各種細胞免疫、體液免疫或炎癥反應標志物組合的陽性率可高達75%，甚至100%。

2.3 口腔鱗狀細胞癌

OSCC 泛指原發(fā)于口腔黏膜的惡性腫瘤，在湖南、臺灣等地區(qū)，由于有咀嚼檳榔的習慣，導致口腔鱗癌的發(fā)病率居高不下。近年來隨著程序性死亡受體1（programmed cell death protein 1，PD-1）/程序性死亡配體-1（programmed death ligand-1，PDL1）、嵌合抗原受體T 細胞免疫療法（chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy，CAR-T）等免疫治療在惡性腫瘤治療中取得的巨大成功，腫瘤免疫又成為了腫瘤研究的熱點方向。惡性腫瘤中由于腫瘤抗原的存在，機體的免疫系統(tǒng)可識別并激發(fā)特異性免疫反應，因此擁有正常的免疫功能對機體有效監(jiān)視和排斥癌變細胞具有重要意義，臨床上可通過檢測淋巴細胞亞群和體液免疫功能評估腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)。

雖然免疫治療已成為惡性腫瘤治療的發(fā)展方向，但有關OSCC 的免疫發(fā)病機制、免疫治療的研究仍較少。目前研究已顯示OSCC 患者細胞免疫功能受到明顯抑制［30］，Grimm 等［29］對30 例OSCC 患者術前淋巴細胞亞群分析顯示：患者總T 細胞、Th細胞、Treg 細胞、Tc 細胞和NK 細胞均顯著下降。Bose 等［30］對Ⅲ/Ⅳ期頭頸癌的研究也發(fā)現(xiàn)，患者外周血CD4+、CD8+、NK 細胞顯著下降，而具有抑制功能的CD4+CD25+Foxp3+T 細胞顯著上升。Rajendran等［31］對口腔癌患者體液免疫功能研究發(fā)現(xiàn)患者血清IgA，IgD 和IgE 均顯著上升。近年來許多研究發(fā)現(xiàn)炎癥反應標志物CRP 與OSCC 的發(fā)生發(fā)展密切相關，可作為口腔癌癌變危險性的標志物，還可作為口腔癌進展、復發(fā)和預后標志物；DE Paz 等［32］對246 例OSCC 患者CRP 的檢測發(fā)現(xiàn)患者CRP 顯著上升，且與侵襲轉移能力、預后密切相關。Du 等［33］應用免疫組化分析顯示CRP 與舌鱗癌的原發(fā)灶大小、淋巴結轉移和病理分級密切相關，體外研究發(fā)現(xiàn)CRP 具有濃度和時間依賴性促進舌鱗癌細胞的增殖、侵襲轉移能力。

以上研究分別提示OSCC 存在免疫功能異?；蜓装Y反應，為了綜合評估OSCC 的免疫功能狀態(tài)和炎癥狀態(tài)，筆者收集了2013 年1 月至2017 年9月在中山大學附屬第一醫(yī)院就診的OSCC 患者67例（22 例女性，45 例男性；年齡18～83 歲），淋巴細胞亞群分析顯示：與健康人比較，OSCC 患者CD3+細胞、CD8+細胞水平下降，CD19+細胞、CD4+細胞、CD4+/CD8+、NK 細胞水平升高，CD4+細胞、CD8+細胞和CD4+/CD8+兩組間存在顯著性差異；同時發(fā)現(xiàn)近47.8%的患者NK 細胞呈升高（26/67）或降低（6/67）。體液免疫功能結果顯示：與健康人比較，OSCC 患者λ 鏈輕微升高，κ 鏈、κ 鏈/λ 鏈、C4、IgM、IgG水平下降，C3、IgA 無明顯變化；兩組間存在顯著性差異的有κ 鏈/λ 鏈和C4；同時發(fā)現(xiàn)55%的患者κ 鏈呈升高（7/67）或降低（30/67），57%的患者IgG 呈升高（13/67）或降低（25/67），52.2%的患者IgM 呈升高（4/67）或降低（31/67）。炎癥反應標志物檢測結果顯示：與健康人比較，OSCC 患者ESR 顯著升高。ESR、CRP、SAA 水平升高的患者分別為42%、30%和28%。進一步分析也發(fā)現(xiàn)OSCC 患者中許多組合的陽性檢出率均高于75%，如細胞免疫組合（CD3+/CD8+、CD3+/NK、CD4+/NK），細胞/體液免疫組合（CD3+/κ 鏈、CD3+/IgG、CD3+/IgM、CD4+/κ 鏈、CD4+/IgG、CD4+/IgM、CD8+/κ 鏈、CD8+/IgM、NK/κ 鏈、NK/IgG、NK/IgM），體液免疫組合（κ 鏈/IgM、IgG/IgM）和體液免疫/炎癥組合（ESR/κ 鏈、ESR/IgG），其中NK/κ 鏈和ESR/κ 鏈組合的陽性檢出率高于80%；在女性患者中CD4+/IgM、CD8+/IgM 組合的陽性檢出率達90%。以上結果表明OSCC 患者存在明顯的細胞免疫功能和體液免疫功能的異常和炎癥反應；體液免疫功能中還可見超過一半的OSCC 患者分別有κ鏈、IgG 或IgM 的異常；同時OSCC 患者中各種細胞免疫、體液免疫或炎癥反應標志物組合的陽性率可高達75%，甚至90%。

3 總 結

綜上所述，免疫功能檢測具有廣泛的臨床意義。淋巴細胞亞群分析常用于惡性腫瘤患者免疫功能狀態(tài)的評估、血液性腫瘤的分子分型、免疫相關疾病的診斷和治療監(jiān)測。體液免疫功能檢測常用于免疫性疾病、細菌或病毒性感染性疾病、部分惡性腫瘤（如多發(fā)性骨髓瘤）、肝臟疾病等的的診斷、鑒別診斷和治療指導。炎癥反應標志物常用于細菌或病毒感染性疾病的診斷和鑒別診斷、良惡性腫瘤鑒別診斷和惡性腫瘤預后轉移和療效監(jiān)測的指標、各種炎癥和術后感染的監(jiān)測、抗生素使用的依據(jù)和療效觀察、免疫相關疾病的診斷和治療監(jiān)測。

免疫功能檢測在口腔疾病的應用也相當廣泛，本文僅列舉3 種最常見的口腔疾病。3 種疾病中RAU 患者僅有輕度的體液免疫功能異常和明顯的炎癥反應（CRP 和ESR 均升高），細胞免疫功能雖未見明顯異常，但有近一半的患者存在CD4+細胞或NK 細胞的異常；同時存在各種細胞免疫和體液免疫的聯(lián)合異常，這些說明RAU 患者存在不同的細胞免疫或體液免疫功能的異常，臨床上應該針對不同的免疫功能異常給予不同的治療方案。與RAU 比較，OLP 患者存在更為明顯的細胞免疫功能、體液免疫功能的異常和較輕的炎癥反應（僅ESR 升高）；細胞免疫功能中除了CD3+和CD8+細胞水平呈顯著性差異外，近一半患者存在CD19+細胞和NK 細胞的異常，這兩者均與體液免疫功能密切相關；體液免疫功能中除了C4 水平呈顯著性差異外，63%的患者存在κ 鏈的異常；OLP 患者存在更為普遍的各種細胞免疫和體液免疫的聯(lián)合異常；在男性患者中NK/κ 鏈、CD19+/κ 鏈組合的陽性檢出率達100%，也即患者中至少存在κ 鏈或CD19+（NK）的異常。與OLP 患者比較，OSCC 患者同樣存在明顯的細胞免疫功能和體液免疫功能的異常和炎癥反應；細胞免疫功能中除了CD4+和CD8+細胞水平呈顯著性差異外，還可見近一半患者存在NK細胞的異常；體液免疫功能中同樣存在C4 水平的顯著性差異，但超一半的患者分別有κ 鏈、IgG 或IgM 的異常；OSCC 患者中存在更多的細胞免疫體液免疫組合異常，在女性患者中CD4+/IgM、CD8+/IgM 組合的陽性檢出率達90%。

以上的研究成果與文獻報道不盡相同，同時文獻的研究結果也存在較大差異，其原因與研究中存在的缺陷相關，如大部分研究的樣本量小、檢測指標單一、缺乏有效配對、缺乏追蹤隨訪以及多中心研究等。因此未來必須開展大樣本、多中心、多指標聯(lián)合檢測的研究，從而更加完善地闡明免疫功能異常在各種疾病發(fā)病中的作用及其機理，建立相應的診斷模型和預后預測模型，尋找更為有效的治療手段。同時還需對各種異常指標在疾病中的作用展開功能和機理的研究，以獲得更為精準的診斷和治療標志物。

【Author contributions】Wang AX wrote and revised the article.Wang AX read and approved the final manuscript as submitted.