奧氮平含量的HPLC法測(cè)定

劉紅霞　張國(guó)哲

摘 要 目的：利用高效液相色譜法測(cè)定奧氮平片中奧氮平含量。方法：采用C8色譜柱，流動(dòng)相為十二烷基硫酸鈉12g-乙腈，流速為1.5ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)260nm建立色譜方法測(cè)定奧氮平含量。結(jié)果：奧氮平濃度在60 g/ml～140 g/ml范圍內(nèi)，其峰面積（Y）與濃度（X）呈良好的線性關(guān)系，線性方程為Y=59133X+25872，R=1.000；其穩(wěn)定性、重復(fù)性、精密度試驗(yàn)均RSD<2.0。結(jié)論：該方法操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏度高、重復(fù)性好，可用于測(cè)定奧氮平含量。

關(guān)鍵詞 奧氮平 含量 高效液相色譜

中圖分類(lèi)號(hào)：R927 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A DOI：10.16400/j.cnki.kjdkx.2018.04.069

Determination of Olanzapine Content by HPLC

LIU Hongxia， ZHANG Guozhe

（Jiangsu Vocational College of Medicine， Yancheng， Jiangsu 224005）

Abstract Objective： to determine the content of olanzapine in olanzapine by HPLC. Methods： using C8 chromatographic column， the flow phase was 12g-acetonitrile with sodium dodecyl sulfate， and the flow rate was 1.5ml/min， and the detection wavelength of 260nm was established to determine the content of olanzapine. Results： the concentration of olanzapine was in the range of 60 mu g/ml ～140 mu g/ml， and its peak area（Y） was in good linear relation with concentration（X）.The linear equation was Y=59133X+25872，R=1.000.Its stability， repeatability and precision test are all RSD<2.0.Conclusion：the method is simple， accurate， sensitive and reproducibility， and can be used to determine the content of olanzapine.

Keywords olanzapine； content； high performance liquid chromatography

奧氮平（結(jié)構(gòu)如圖1）的化學(xué)名為2-甲基-4-（4-甲基-1-哌嗪基-）-10H-噻吩并[2，3-6][1，5]苯并二氮雜，有一定的抗精神病作用，可改善精神分裂癥和其它有嚴(yán)重陽(yáng)性癥狀（如：妄想、幻覺(jué)、思維障礙、敵意和猜疑）的精神病，同時(shí)也對(duì)陰性癥狀（如：情感淡漠、情感和社會(huì)退縮、言語(yǔ)貧乏）的急性期和維持治療有部分效果。試驗(yàn)表明其治療作用顯著且副作用低，尤其是錐體外系反應(yīng)和遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙發(fā)生率很低，廣泛用于多種精神疾病的治療。

關(guān)于奧氮平藥理作用的報(bào)道常見(jiàn)于文獻(xiàn)，但關(guān)于其含量的測(cè)定并不多，中國(guó)藥典也未收錄該藥物，因此缺乏相應(yīng)的藥品標(biāo)準(zhǔn)。本實(shí)驗(yàn)參加美國(guó)藥典對(duì)于奧氮平片含量的測(cè)定方法，擬采用HPLC法進(jìn)行含量測(cè)定。

1 材料

1.1 儀器

LC-2010AT島津高效液相色譜儀，LC Solution色譜數(shù)據(jù)工作站；KQ-3000型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；BS21S型十萬(wàn)分之一電子天平（德國(guó)Sartorius）。

1.2 藥品與試劑

奧氮平（110302，江蘇萬(wàn)特制藥）；奧氮平對(duì)照品（100948-200801，中國(guó)藥品生物制品檢定所），雜質(zhì)A（20110201，臺(tái)州市華鼎化工）；乙腈為色譜純，其余試劑為分析純，水為超純水。

2 方法和結(jié)果

2.1 色譜條件

以辛基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以磷酸鹽緩沖液-乙腈（50：50）為流動(dòng)相；流速為每分鐘1.5ml；檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm。

2.2 溶液的制備

（1）磷酸鹽緩沖液：稱(chēng)取磷酸二氫鈉6.9g，加水1000ml使溶解，用磷酸試液調(diào)pH至2.5，再加十二烷基硫酸鈉12g。

（2）對(duì)照品溶液：取奧氮平對(duì)照品25 mg，精密稱(chēng)定，置于25ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，量取各溶液1ml分別置于10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。

（3）供試品溶液：取奧氮平樣品25mg，配制方法痛對(duì)照品溶液

說(shuō)明：筆者在奧氮平有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗(yàn)證過(guò)程中，驗(yàn)證了奧氮平起始物、奧氮平雜質(zhì)A（結(jié)構(gòu)如圖2）與奧氮平雜質(zhì)B三種物質(zhì)，其中奧氮平起始物和奧氮平雜質(zhì)B均未測(cè)出，為了防止奧氮平雜質(zhì)A對(duì)奧氮平含量測(cè)定時(shí)對(duì)其含量產(chǎn)生影響，故奧氮平含量方法學(xué)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中加入奧氮平雜質(zhì)A，考察其影響。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

取奧氮平對(duì)照品25 mg，精密稱(chēng)定，置25ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻；雜質(zhì)A貯備液：取雜質(zhì)A25mg，精密稱(chēng)定，置25ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，量取該溶液1ml至10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻；量取奧氮平貯備液與雜質(zhì)A貯備液各1ml，置同一10ml量瓶中，加流動(dòng)相定容至刻度，搖勻；同法配制6份。精密量取系統(tǒng)適用性溶液各20l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖（見(jiàn)圖3）。

結(jié)果：6份相同濃度的系統(tǒng)適用性溶液主峰峰面積RSD值為0.1%小于2.0%，主峰保留時(shí)間RSD值為0.79%小于1.0%；奧氮平與雜質(zhì)A的分離度大于2.0，理論塔板數(shù)按奧氮平計(jì)算高于3000，奧氮平峰的拖尾因子在0.8～1.5范圍內(nèi)，系統(tǒng)適用性好。

2.4 精密度試驗(yàn)

精密量取供試品溶液20l，注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，計(jì)算主峰面積RSD值，6次進(jìn)樣奧氮平峰面積的RSD值為0.26，小于2.0%，精密度良好，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.5 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)

將供試品溶液在室溫條件下放置，分別于0h、2h、4h、6h、8h、10h精密量取供試品溶液20 l注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算主峰面積的RSD值。結(jié)果： 10h內(nèi)，主峰面積的RSD值為0.12%，小于2.0%；說(shuō)明在室溫下，本品含量測(cè)定供試品溶液室溫放置10h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

同法配置供試品溶液六份，對(duì)照品溶液兩份，精密量取各溶液20 l注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算奧氮平含量。結(jié)果：按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算得到的六份奧氮平樣品含量的RSD值為0.051%，小于2.0%，重復(fù)性良好。

2.7線性關(guān)系考察

取奧氮平樣品約20mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密量取該貯備液3ml、4 ml、5 ml、6 ml、7 ml分別置10ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，配制成濃度為60g/ml、80g/ml、100g/ml、120g/ml、140g/ml系列濃度的溶液。精密量取供試品溶液各20l注入液相色譜儀，每個(gè)濃度點(diǎn)平行進(jìn)兩針，記錄色譜圖；以樣品濃度為橫坐標(biāo)（X），主峰峰面積的平均值為縱坐標(biāo)（Y），進(jìn)行線性回歸分析，奧氮平濃度在60 g/ml～140 g/ml范圍內(nèi)，濃度（X）與奧氮平峰面積（Y）呈良好的線性關(guān)系R=1.0000。結(jié)果見(jiàn)表2。

2.8 樣品含量測(cè)定

取3批樣品各適量，分別按照2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，再按照2.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，外標(biāo)法計(jì)算樣品含量，結(jié)果見(jiàn)表3。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)合著文獻(xiàn)及藥典的報(bào)道，形成了一種簡(jiǎn)單的奧氮平的HPLC含量測(cè)定法，筆者最初考慮的奧氮平雜質(zhì)A在本方法中不影響奧氮平含量的測(cè)定，此奧氮平方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果表明該方法重復(fù)性好、靈敏度高、專(zhuān)屬性強(qiáng)，適合奧氮平的含量測(cè)定。

課題名稱(chēng)：酒精性肝病的診斷標(biāo)記物挖掘及中藥葛根葛花的防治作用研究（項(xiàng)目：江蘇省衛(wèi)計(jì)委2017指導(dǎo)性課題，項(xiàng)目編號(hào)：Z2017017）

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