長(zhǎng)喙毛茛澤瀉根莖葉營(yíng)養(yǎng)成分與急性經(jīng)口毒性

石從廣，李浩銘，仇建習(xí)，呂賢良，葉 珊

（1. 浙江省林業(yè)科學(xué)研究院，浙江 杭州310023；2. 麗水市蓮都區(qū)生態(tài)林業(yè)發(fā)展中心，浙江 麗水323000）

長(zhǎng)喙毛茛澤瀉Ranalisma rostratum是澤瀉科Alismataceae毛茛澤瀉屬Ranalisma多年生蓮座狀沼生小草本植物，產(chǎn)于中國(guó)的浙江、江西、湖南省以及越南和馬來西亞[1]。1930年，在浙江省麗水市南明山首次采到長(zhǎng)喙毛茛澤瀉標(biāo)本[2]，之后幾十年不曾采到，一度被認(rèn)為滅絕。直到20世紀(jì)90年代，研究人員才相繼在江西省東鄉(xiāng)縣和湖南省茶陵縣陸續(xù)發(fā)現(xiàn)野生長(zhǎng)喙毛茛澤瀉種群[3]。由于人類對(duì)其生境的破壞和本身生存、競(jìng)爭(zhēng)能力較差，湖南茶陵和江西東鄉(xiāng)野外長(zhǎng)喙毛茛澤瀉種群已消失[2]。1999年，國(guó)家林業(yè)局和農(nóng)業(yè)部正式發(fā)布了中華人民共和國(guó)《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)野生植物名錄(第1批)》，長(zhǎng)喙毛茛澤瀉被列為極度瀕危的植物，為國(guó)家Ⅰ級(jí)保護(hù)野生植物[4]。2008年，浙江省人文園林有限公司天景水生植物園從杭州植物園交換引入了長(zhǎng)喙毛茛澤瀉，并進(jìn)行了大規(guī)模的遷地?cái)U(kuò)繁[5-6]。2015年，浙江省麗水市蓮都區(qū)林業(yè)技術(shù)推廣站從天景水生植物園引進(jìn)長(zhǎng)喙毛茛澤瀉5 000株，開始回歸原生地試驗(yàn)。目前，在麗水市蓮都區(qū)布局了3個(gè)回歸示范點(diǎn)，2019年8月，每個(gè)示范點(diǎn)繁育長(zhǎng)喙毛茛澤瀉小苗不少于5 000株，已初步具備了開發(fā)利用的物質(zhì)基礎(chǔ)。目前，國(guó)內(nèi)學(xué)者圍繞長(zhǎng)喙毛茛澤瀉繁育特性與遺傳多樣性[7-8]、有性生殖系統(tǒng)[9-13]、生物學(xué)特性與生活史[2,14]、種群生態(tài)與環(huán)境適應(yīng)性[15-19]等方面開展研究，目的是揭示其瀕危機(jī)制，為制定保護(hù)策略提供依據(jù)。但關(guān)于長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株?duì)I養(yǎng)成分和毒性試驗(yàn)的研究尚無(wú)報(bào)道。本研究測(cè)定了采自麗水3個(gè)示范點(diǎn)的長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株莖葉和根的主要營(yíng)養(yǎng)成分，并對(duì)莖葉的急性經(jīng)口毒性進(jìn)行初步研究，以期為長(zhǎng)喙毛茛澤瀉的進(jìn)一步保護(hù)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 采樣地概況

本研究所用的長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株分別來自麗水南明山、蓮都區(qū)大港頭鎮(zhèn)和蓮都區(qū)老竹鎮(zhèn)。南明山樣地處于麗水市南明山風(fēng)景名勝區(qū)，長(zhǎng)喙毛茛澤瀉被栽植在一片沼澤地中，沼澤地處于森林邊緣，森林整體郁閉度為0.5～0.7；沼澤周圍有毛竹Phyllostachys edulis、楓香Liquidambar formosana等喬灌樹種；沼澤地水位維持在2～10 cm，伴生植物有蕺菜(魚腥草)Houttuynia cordata、蕨Pteridium aquilinumvar.latiusculum、苧麻Boehmeria nivea、野芋Colocasia antiquorum等。大港頭樣地位于麗水市蓮都區(qū)大港頭鎮(zhèn)，長(zhǎng)喙毛茛澤瀉被栽植在水田，伴生植物有丁香蓼Ludwigia prostrata、喜旱蓮子草Alternanthera philoxeroides等；水田呈梯田狀，有高低落差，水位常年維持在5～15 cm，且有進(jìn)水出水口，水流較緩；樣地周邊無(wú)喬灌木遮陰。老竹鄉(xiāng)樣地位于麗水市蓮都區(qū)老竹鄉(xiāng)，長(zhǎng)喙毛茛澤瀉被栽植在水田里，伴生植物有刺芋(野茨菇)Lasia spinosa、蓮Nelumbo nucifera和喜旱蓮子草等；水田坡度較為平緩，周圍缺乏喬灌木遮陰；8月蓮葉已展開，此時(shí)郁閉度接近0.9；水田水位及出水情況與大港頭樣地基本一致。

1.2 方法

1.2.1 樣品預(yù)處理 2019年8月26日，每個(gè)試驗(yàn)地采集1份樣品，每份樣品鮮質(zhì)量為300～1 000 g。瀝干樣品表面水分，用精度為0.01 g的天平稱量植株鮮質(zhì)量，之后攤放在竹篾上曝曬，待連續(xù)3 d樣品質(zhì)量下降不超過1%時(shí)，認(rèn)為樣品已風(fēng)干。2020年6月15日，再次采集南明山示范點(diǎn)樣品1份，進(jìn)行相同處理。

1.2.2 營(yíng)養(yǎng)元素測(cè)定和小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn) 剪掉風(fēng)干后的長(zhǎng)喙毛茛澤瀉樣品根系，將莖葉與根系分離，用精度為0.01 g的天平稱量莖葉質(zhì)量和根系質(zhì)量，計(jì)算干鮮比和莖葉與根系生物量比，然后進(jìn)一步檢測(cè)風(fēng)干樣品莖葉和根的脂肪、氮、磷、鉀和其他金屬離子質(zhì)量分?jǐn)?shù)。每份樣品每個(gè)指標(biāo)重復(fù)測(cè)定3次。

將經(jīng)營(yíng)養(yǎng)元素測(cè)定后剩余樣品的干燥莖葉用于小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)。稱取干燥的莖葉35.00 g，用小型干磨研磨機(jī)在常溫下(25 ℃)粉碎30 s，待無(wú)明顯莖葉殘?jiān)鼤r(shí)停止粉碎，刮取莖葉粉末，過 20目篩，去除未充分粉碎的顆粒，得到綠色均勻粉末狀樣品。稱取上述粉末樣品10 g，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%羧甲基纖維素鈉為溶媒溶解配制成80 mL懸浮樣液。每個(gè)樣品共配制這樣的懸浮樣液3瓶，每瓶80 mL，4 ℃冰箱冷藏備用。

小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)委托浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院完成。實(shí)驗(yàn)用小鼠Mus musculus由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，SPF級(jí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(浙)2019-0002，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)為SYXK(浙)2019-0011，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。實(shí)驗(yàn)所用小型干磨研磨機(jī)型號(hào)為TY-150A，由永康市敬業(yè)工貿(mào)有限公司生產(chǎn)。實(shí)驗(yàn)用天平型號(hào)為BS2202S，量程2.0 kg，由賽多利斯(北京)科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)。檢測(cè)環(huán)境條件：溫度為20～25 ℃，相對(duì)濕度為40%～70%。

1.3 測(cè)定方法和依據(jù)

1.3.1 營(yíng)養(yǎng)成分與金屬元素測(cè)定 長(zhǎng)喙毛茛澤瀉樣品植株中脂肪、全氮、全磷和6種金屬元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定委托浙江方圓檢測(cè)集團(tuán)股份有限公司檢測(cè)，其中脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)依據(jù)GB 5009.6-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：食品中脂肪的測(cè)定》測(cè)定；莖葉和根中全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定參照HJ 717-2014《土壤質(zhì)量 全氮的測(cè)定 凱氏法》測(cè)定，全磷質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定參照NYT 88-1988《土壤全磷測(cè)定法》測(cè)定；鉀、鈣、鎂、鐵、錳和鋅質(zhì)量分?jǐn)?shù)依據(jù)GB 5009.268-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：食品中多元素的測(cè)定》測(cè)定。

1.3.2 小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn) ①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：選用健康、成熟，體質(zhì)量18～22 g(美國(guó)癌癥研究所分送)小鼠20只，雌雄小鼠各10只。②劑量和給藥方法：按限量法設(shè)7.5 g·kg-1(體質(zhì)量)1個(gè)劑量組。灌胃前小鼠禁食(禁水)6 h后，用懸浮樣液按20 mL·kg-1灌胃容量對(duì)小鼠進(jìn)行灌胃，共計(jì)3次，每次間隔4 h，末次灌胃2 h后小鼠自由進(jìn)食、飲水。③觀察指標(biāo)：灌胃后，觀察小鼠的一般狀況、中毒表現(xiàn)和死亡情況，觀察期限為14 d，記錄小鼠實(shí)驗(yàn)期初及期末體質(zhì)量。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同樣品的干鮮比和莖葉與根的生物量比

由表1可知：長(zhǎng)喙毛茛澤瀉的干鮮比為0.17～0.19，整個(gè)植株，特別是莖葉部分的含水率較高。長(zhǎng)喙毛茛澤瀉莖葉與根的生物量之比為1.8～2.5，不同取樣時(shí)間和取樣地，莖葉與根的生物量之比相差很大，其中南明山2號(hào)樣品和大港頭鎮(zhèn)樣品的莖葉與根的生物量之比高于其余2個(gè)樣地，特別是南明山2號(hào)樣品。對(duì)表1的結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)：未結(jié)實(shí)的長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株，其莖葉與根的生物量之比相較已結(jié)實(shí)的植株要高，莖葉生物量占整個(gè)植株的比例大。主要原因在于不同采樣時(shí)期植株的成熟度和植株長(zhǎng)勢(shì)不一樣，南明山2號(hào)采集時(shí)間為2020年6月中旬，長(zhǎng)喙毛茛澤瀉還未開花，此時(shí)植株生長(zhǎng)比較旺盛；而大港頭鎮(zhèn)、南明山1號(hào)和老竹鄉(xiāng)樣品的采集時(shí)間為2019年8月，此時(shí)3個(gè)樣品均已結(jié)實(shí)，植株長(zhǎng)勢(shì)開始衰敗。

表1 長(zhǎng)喙毛茛澤瀉3個(gè)樣地4份樣品的干鮮比和生物量Table 1 Dry-fresh ratio and biomass of 4 batches of R. rostratum from 3 samples places

2.2 植株脂肪和營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)變異特征

由表2可知：長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株中脂肪、氮和鉀質(zhì)量分?jǐn)?shù)均為25.00 mg·g-1左右，脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)的最大最小值之比小于5，且變異系數(shù)為39.86%，說明脂肪在不同樣品和植株器官間變異不大。營(yíng)養(yǎng)元素平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于10.00 mg·g-1的有氮和鉀，平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5.00～10.00 mg·g-1的有鐵和鈣，平均質(zhì)量分為1.00～5.00 mg·g-1的有磷和鎂，平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于1.00 mg·g-1的有錳和鋅。鋅與大量元素氮和鉀的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)相差了近3個(gè)數(shù)量級(jí)。各營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)均值從高到低依次為氮、鉀、鐵、鈣、磷、鎂、錳、鋅。

與世界陸生維管植物元素平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)范圍相比較[20]，麗水3個(gè)回歸示范點(diǎn)4份長(zhǎng)喙毛茛澤瀉樣品的氮、磷、鉀、鈣、鎂這5種大量必需營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)均在正常范圍內(nèi)(表2)。但與陸生高等植物所需元素的適合平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)值相比較[21]，該5種元素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，除鎂外，氮、磷、鉀和鈣均高于已報(bào)道的陸生高等植物所需元素的相應(yīng)組織，這可能與長(zhǎng)喙毛茛澤瀉為水生草本植物有關(guān)。從變異系數(shù)來看，8種營(yíng)養(yǎng)元素從大到小依次為鐵、鎂、磷、錳、鈣、鉀、鋅、氮，鐵質(zhì)量分?jǐn)?shù)在各樣品和組織間變異系數(shù)最大，其次是鎂和磷，說明鐵、鎂和磷在各樣地和植株器官間質(zhì)量分?jǐn)?shù)不穩(wěn)定，受樣地環(huán)境影響較大。氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)在各樣品和植株器官間變異系數(shù)最小，說明氮在植株體內(nèi)相對(duì)穩(wěn)定。從元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的最大值與最小值之比(以下簡(jiǎn)稱最大最小比)來看，鎂的最大，其次是鐵，再次是磷，其他元素均小于5.00，最大最小比從大到小的順序與變異系數(shù)的順序基本一致，進(jìn)一步說明長(zhǎng)喙毛茛澤瀉中的鎂、鐵和磷質(zhì)量分?jǐn)?shù)不夠穩(wěn)定，而其他元素均較穩(wěn)定。

由圖1可知：南明山1號(hào)樣品的脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高，老竹鄉(xiāng)樣品中的脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)最低，脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)在4個(gè)樣品之間存在顯著差異(P＜0.05)。7種營(yíng)養(yǎng)元素在樣品內(nèi)和各樣品間的變異系數(shù)很大。鐵質(zhì)量分?jǐn)?shù)在大港頭鎮(zhèn)樣品中最高，而在南明山2號(hào)樣品中的最低，兩者均值相差30倍左右，但鐵質(zhì)量分?jǐn)?shù)在4個(gè)樣品中卻無(wú)顯著差異；鎂質(zhì)量分?jǐn)?shù)均值在南明山1號(hào)樣品中低于檢測(cè)限(＜0.003 mg·g-1)，而在其他各樣品中平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)均在1.00 mg·g-1以上；由于鋅質(zhì)量分?jǐn)?shù)極低，鋅元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)不納入樣品和器官的比較分析。除了未做分析的鋅，7種營(yíng)養(yǎng)元素在4個(gè)樣品間均無(wú)顯著差異。

圖1 4個(gè)樣品莖葉和根的脂肪及營(yíng)養(yǎng)元素平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)Figure 1 Average contents of fatty acid and nutrient elements in the stems，leaf and root of the four samples

由表3可見：脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)在長(zhǎng)喙毛茛澤瀉的莖葉和根之間無(wú)顯著差異，氮、磷、鉀和鈣在莖葉和根間存在顯著差異(P＜0.05)，說明長(zhǎng)喙毛茛澤瀉根系對(duì)這些元素具有選擇吸附性；鐵元素在莖葉和根的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)(分別為1.22和11.75 mg·g-1)雖相差了1個(gè)數(shù)量級(jí)，但莖葉和根間卻并無(wú)顯著差異，原因在于鐵質(zhì)量分?jǐn)?shù)在個(gè)別樣品(大港鎮(zhèn))的根系中極高，在不同樣品的不同組織之間變異極大(變異系數(shù)為123.67)，導(dǎo)致了方差勻齊度很低。這也說明長(zhǎng)喙毛茛澤瀉根系對(duì)土壤中的鐵離子有富集作用。根系中的錳和鎂元素在質(zhì)量分?jǐn)?shù)高于莖葉中的，但在莖葉和根之間差異不顯著(P＞0.05)，表明這2種元素在莖葉和根之間沒有明顯的分布傾向性。

表3 長(zhǎng)喙毛茛澤瀉莖葉與根系的脂肪和營(yíng)養(yǎng)元素均值及顯著性分析Table 3 Mean value and significance analysis of fat and nutrient elements in stem, leaf and root

2.3 長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株脂肪和營(yíng)養(yǎng)元素的相關(guān)性分析

由表4可見：脂肪和營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)之間的相關(guān)系數(shù)在較大范圍內(nèi)波動(dòng)，說明不同元素之間的相互關(guān)系較為復(fù)雜。分析脂肪和8種營(yíng)養(yǎng)元素的36對(duì)因子的相關(guān)關(guān)系可知：7對(duì)因子間存在顯著相關(guān)性，如鉀與氮，磷與氮、鉀，鈣與氮、鉀、磷，鎂與磷，占總對(duì)數(shù)的19.44%。其中，氮與鉀、鈣呈極顯著正相關(guān)(P＜0.01)，與磷呈極顯著負(fù)相關(guān)；鉀與磷呈極顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.01)，與鈣呈顯著正相關(guān)(P＜0.05)；磷與鈣呈顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，與鎂呈顯著正相關(guān)(P＜0.05)。這些結(jié)果說明：長(zhǎng)喙毛茛澤瀉的氮、鉀、鈣之間存在協(xié)同作用，與磷存在拮抗作用；鎂與磷存在協(xié)同作用。

表4 長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株脂肪和8種營(yíng)養(yǎng)元素間相互關(guān)系Table 4 Correlation between plant fat and 8 nutrient elements

2.4 小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)

如表5所示：實(shí)驗(yàn)期間，小鼠均未出現(xiàn)中毒表現(xiàn)，無(wú)死亡。長(zhǎng)喙毛茛澤瀉葉片對(duì)雌雄小鼠經(jīng)口半致死量(LD50)均大于7.5 g·kg-1(體質(zhì)量)，按急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)判定，屬實(shí)際無(wú)毒級(jí)。

表5 長(zhǎng)喙毛茛澤瀉莖葉的小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Acute oral toxicity test in mice of leaf of R. rostratum

3 結(jié)論與討論

長(zhǎng)喙毛茛澤瀉為水生小草本植物，其葉片為紙質(zhì)。根據(jù)干鮮比結(jié)果推測(cè)植株自由水含水率在81%以上，顯示植株含水率較高。長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株中脂肪平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)略高于23.13 mg·g-1，且在不同樣品間和植株器官間變異不大，進(jìn)一步的方差分析顯示脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)在莖葉和根之間差異不顯著，但在不同樣品間存在顯著差異。

長(zhǎng)喙毛茛澤瀉植株的8種營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯示：5種大量營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)均值從高到低依次為氮、鉀、鈣、磷、鎂。從變異系數(shù)和各營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的最大值與最小值之比來看，長(zhǎng)喙毛茛澤瀉中的鎂、鐵和磷在不同樣地和植株器官間不穩(wěn)定，受樣地環(huán)境影響較大，而其他元素均較穩(wěn)定。進(jìn)一步的方差分析顯示：除鋅外，其余7種營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)在4個(gè)樣品間均無(wú)顯著差異，但氮、磷、鉀和鈣在莖葉和根間差異顯著，說明長(zhǎng)喙毛茛澤瀉根系對(duì)這4種元素具有選擇吸附性。對(duì)長(zhǎng)喙毛茛澤瀉不同樣品和組織中營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的相關(guān)分析顯示：氮、鉀、鈣這3種元素兩兩之間存在顯著或極顯著正相關(guān)，而與磷存在顯著或極顯著負(fù)相關(guān)，磷與鎂存在顯著正相關(guān)。

長(zhǎng)喙毛茛澤瀉莖葉的小鼠經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)表明：雌雄小鼠半致死質(zhì)量分?jǐn)?shù)均大于7.5 g·kg-1，試驗(yàn)期間各組小鼠均未出現(xiàn)死亡情況。按急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)判定，該樣品屬實(shí)際無(wú)毒級(jí)。

植物元素特征除與植物本身的遺傳學(xué)特性有關(guān)外，主要受土壤和氣候等生境條件的影響，也是植物對(duì)所在生境長(zhǎng)期適應(yīng)的結(jié)果[22]。羅緒強(qiáng)等[23]對(duì)雷公山自然保護(hù)區(qū)5種常見木本植物葉片的6種大量必需營(yíng)養(yǎng)元素進(jìn)行了測(cè)定分析。結(jié)果表明：6種元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)從高到低依次為氮、鈣、鉀、硫、鎂、磷；惠岑懌等[24]的研究顯示：4種旱生針茅屬Stipa植物葉片中7種大量元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)均值從高到低依次為碳、氮、鉀、硫、鎂、磷、鈣。這些大量元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的排序結(jié)果與本研究結(jié)果有所不同，可能的原因是本研究的研究對(duì)象為水生草本植物，而上述2篇文獻(xiàn)的研究對(duì)象分別為陸生木本植物和旱生草本植物。

對(duì)陸地生態(tài)系統(tǒng)的高等植物而言，當(dāng)?shù)妆龋?6時(shí)，說明植物生長(zhǎng)受到磷的限制，當(dāng)?shù)妆龋?4時(shí)，植物生長(zhǎng)受到氮的限制，而當(dāng)?shù)妆葹?4～16時(shí)，氮與磷單獨(dú)或共同影響植物的生長(zhǎng)[25]。長(zhǎng)喙毛茛澤瀉的氮磷比在4個(gè)樣品和不同器官間均小于14，說明其生長(zhǎng)受到氮的限制。此外，羅緒強(qiáng)等[23]的文獻(xiàn)結(jié)果顯示：氮和磷、氮和鉀、磷和鈣、鉀和鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)之間均具有顯著或極顯著正相關(guān)關(guān)系?；葆瘧萚24]的研究結(jié)果顯示：非金屬元素碳、氮、硫、磷 等與金屬元素鉀之間顯著正相關(guān)，與其他金屬元素顯著負(fù)相關(guān)。本研究結(jié)果表明：氮和鉀、鉀和鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)間存在極顯著和顯著正相關(guān)，但磷與金屬元素鉀、鈣、鎂質(zhì)量分?jǐn)?shù)的相關(guān)性與其他文獻(xiàn)的結(jié)果有明顯的不同，說明不同植物體內(nèi)這些元素之間具有不同的比例組成和協(xié)調(diào)關(guān)系。

石從廣等[26]對(duì)越南安息香Styrax tonkinesis精煉的種子油開展了大小鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)以及慢性毒性3項(xiàng)試驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：精煉油對(duì)應(yīng)的小鼠半致死質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為雌性小鼠17.10 g·kg-1，雄性小鼠10.80 g·kg-1，達(dá)到理論無(wú)毒的標(biāo)準(zhǔn)；王亞萍等[27]對(duì)長(zhǎng)興吊瓜Trichosanthes bracteata籽油的食用安全性進(jìn)行了評(píng)估。結(jié)果顯示：小鼠經(jīng)口急性毒性試驗(yàn)的半致死量高達(dá)40.00 mL·kg-1以上，表明吊瓜籽油實(shí)際無(wú)毒。本研究開展小鼠急性經(jīng)口毒性的材料為莖葉，與上述試驗(yàn)所用的材料為液態(tài)油脂有所不同，評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)不一樣，小鼠的半致死質(zhì)量分?jǐn)?shù)也不同，但結(jié)果表明長(zhǎng)喙毛茛澤瀉的莖葉為實(shí)際無(wú)毒。

長(zhǎng)喙毛茛澤瀉是極度瀕危植物，野生種質(zhì)資源極其稀少，導(dǎo)致了對(duì)其莖葉的營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)和活性化學(xué)成分的測(cè)定研究難以開展。2015年起，浙江省麗水市相關(guān)單位開展了人工栽培的長(zhǎng)喙毛茛澤瀉回歸原生地的項(xiàng)目研究，至2019年已在3個(gè)回歸示范點(diǎn)培育出了一定數(shù)量的苗，可供一個(gè)批次的指標(biāo)測(cè)定和毒性試驗(yàn)所需的樣品。由于所取的樣品數(shù)量有限，本研究?jī)H對(duì)3個(gè)回歸示范點(diǎn)4份樣品的莖葉和根中的脂肪及8種常見營(yíng)養(yǎng)元素質(zhì)量分?jǐn)?shù)進(jìn)行了定量測(cè)定(由于檢測(cè)手段的限制未測(cè)定硫質(zhì)量分?jǐn)?shù))，這與對(duì)中藥材澤瀉Alisma orientalis的測(cè)定偏重于三萜類等活性化學(xué)物質(zhì)的報(bào)道[28]有所不同。本研究測(cè)定的指標(biāo)不屬于活性物質(zhì)，而且缺乏大量元素硫的測(cè)定結(jié)果，同時(shí)缺乏近緣物種的各項(xiàng)指標(biāo)值作為參照，這是本研究的不足之處。下一步的研究應(yīng)側(cè)重于莖葉活性化學(xué)成分的測(cè)定，并探討這些活性化學(xué)成分與植株毒理的關(guān)聯(lián)。