• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    典型喀斯特區(qū)云南松林土壤養(yǎng)分和細(xì)菌群落對海拔的響應(yīng)

    2021-12-26 09:57:18隋夕然劉云根張雅潔吳麗芳
    浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報 2021年12期
    關(guān)鍵詞:松林菌門海拔

    隋夕然,王 妍,2,*,劉云根,2,張雅潔,吳麗芳

    (1.西南林業(yè)大學(xué) 生態(tài)與環(huán)境學(xué)院,云南 昆明 650224;2.云南省山地農(nóng)村生態(tài)環(huán)境演變與污染治理重點實驗室,云南 昆明650224)

    喀斯特生態(tài)系統(tǒng)是一個環(huán)境容量低、生態(tài)系統(tǒng)變異敏感度高、災(zāi)害承受閾值低的具有生態(tài)脆弱性特征的特殊生態(tài)系統(tǒng)??λ固氐貐^(qū)的生態(tài)環(huán)境非常脆弱,土層淺薄,貯水能力差,加之人為破壞和不合理利用,石漠化問題非常突出[1]。相較于其他喀斯特地貌類型區(qū),我國西南石漠化區(qū)的治理工作在基礎(chǔ)理論研究方面相對薄弱[2],治理技術(shù)模式單一[3],效果不理想,亟需相關(guān)科學(xué)研究提供理論依據(jù)和有效技術(shù)支撐。

    土壤微生物在生態(tài)系統(tǒng)中扮演著養(yǎng)分驅(qū)動者的角色,與土壤養(yǎng)分的遷移和轉(zhuǎn)化息息相關(guān)[4]。在土壤微生物中,細(xì)菌分布最廣泛,數(shù)量、類群最多,參與土壤的養(yǎng)分循環(huán)利用,維持生態(tài)系統(tǒng)的能量流動和物質(zhì)循環(huán)[5]。尹娜[6]研究顯示,在歐亞草原帶上,土壤碳、氮、磷等營養(yǎng)元素的含量對土壤細(xì)菌多樣性有顯著影響;戴雅婷等[7]發(fā)現(xiàn),庫布齊沙地自然恢復(fù)的油蒿群落根際土壤的細(xì)菌群落豐度,與土壤含水量,及氮、磷、鉀等養(yǎng)分含量密切相關(guān);韓亞飛等[8]研究顯示,在門分類水平上,變形菌門為連作楊樹人工林土壤中豐度最高的優(yōu)勢菌群;柳春林等[9]認(rèn)為,土壤全氮與變形菌群具有正向的相互促進(jìn)作用。目前,針對典型喀斯特區(qū)域土壤養(yǎng)分、細(xì)菌群落組成、多樣性對不同海拔梯度響應(yīng)的研究工作在本文檢索范圍內(nèi)還鮮見報道,關(guān)于不同海拔對典型喀斯特區(qū)域松林土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響,及微生物與環(huán)境因子的關(guān)系等問題,尚無明確結(jié)論。

    云南省建水縣是我國西南喀斯特區(qū)域的典型代表,當(dāng)?shù)氐貏菸髂细摺|北低,海拔高差大,碳酸鹽分布廣泛,土地石漠化現(xiàn)象嚴(yán)重[10]。本研究深入探索該區(qū)域不同海拔對云南松林土壤理化性質(zhì)的影響,以及不同海拔梯度下云南松林土壤微生物的群落組成和多樣性特征,并基于高通量測序技術(shù),揭示微生物群落組成和多樣性對喀斯特地區(qū)海拔梯度的響應(yīng)關(guān)系,以期為我國西南典型喀斯特區(qū)域的石漠化治理、植被恢復(fù)提供理論支撐,為當(dāng)?shù)氐耐寥牢⑸锒鄻有匝芯亢捅Wo(hù)提供參考。

    1 材料與方法

    1.1 研究區(qū)概況

    研究區(qū)位于云南省建水縣境內(nèi),地理坐標(biāo)為102°49′~103°9′E、23°18′N~23°40′N,海拔在1 300~2 100 m。該區(qū)屬南亞熱帶季風(fēng)氣候,年均氣溫19.8 ℃,年均地溫20.8 ℃,年均相對濕度72%,年均日照時數(shù)2 322 h,全年無霜期307 d[11]。該區(qū)碳酸鹽巖溶地貌分布廣泛,土壤巖性以石灰?guī)r為主,基巖裸露率在30%~70%。受土壤母質(zhì)影響,當(dāng)?shù)氐闹饕寥李愋蜑槭彝?,森林類型為亞熱帶常綠落葉闊葉混交林[12]。

    1.2 試驗設(shè)計與樣品采集

    2019年9月,在研究區(qū)海拔1 300~2 100 m范圍內(nèi),以高程200~300 m作為一個梯度(具體地,分別對應(yīng)于海拔1 300、1 600、1 900、2 100 m,各海拔梯度上研究區(qū)的基本情況詳見表1),在每個海拔梯度上選取3個云南松林代表性區(qū)域設(shè)置樣地,共布設(shè)12個樣地,每個樣地的大小均為20 m×20 m。同時,在每個樣地的4個角和對角線交點處再設(shè)置5個2 m×2 m的樣方,在每個樣方中心采集500 g土壤進(jìn)行混合,從混合均勻的土壤中取出500 g(以下將其稱為土樣1)帶回實驗室用于理化性質(zhì)測定。同時,為了避免微生物樣品污染,嚴(yán)格按照相關(guān)要求采集10 g土樣(以下將其稱為土樣2),剔除大的石塊和雜質(zhì),而后放入無菌離心管中密封,在干冰保護(hù)環(huán)境下帶回實驗室,用于土壤微生物檢測。

    表1 不同海拔梯度的研究區(qū)概況

    土樣1在室溫下風(fēng)干,研磨,分別過2、0.25 mm篩,測定土壤理化性質(zhì)。土樣2在超凈臺中剔除更小的石塊和雜質(zhì),從剩下的混合均勻的無雜質(zhì)樣本中取出5 g放入無菌離心管,加干冰低溫保存,送往上海凌恩生物科技有限公司進(jìn)行DNA提取和微生物測序。

    1.3 土壤理化性質(zhì)測定

    本研究測定的土壤理化性質(zhì)指標(biāo)包括全碳(TC)、全氮(TN)、全磷(TP)、全鉀(TK)、速效氮(AN)、速效磷(AP)、速效鉀(AK)、pH[13]。其中:TC采用重鉻酸鉀氧化-外加熱法測定,TN采用凱氏定氮法測定,TP采用NaOH堿熔-鉬銻抗比色法測定,TK采用NaOH熔融-火焰光度法測定,AN采用堿解擴(kuò)散法測定,AP采用NaHCO3浸提-鉬銻抗比色法測定,AK采用NH4OAc浸提-火焰光度法測定,pH采用酸度計法測定。

    測定上述指標(biāo)時用到的主要儀器包括:HWS-26型電熱恒溫油浴鍋,上海一恒科學(xué)儀器有限公司;KDN-1000型全自動凱氏定氮儀,上海昕瑞儀器儀表有限公司;T6新世紀(jì)型紫外可見光光度計,北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;AB204-S型火焰光度計,梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;PHS-3C型pH計,上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;BL-WM100型擴(kuò)散皿,北京艾維科電科技有限公司。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    采用Microsoft Office Excel 2010程序進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入、整理和初步分析;采用SPSS 21.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,檢驗不同海拔云南松林的土壤養(yǎng)分差異(顯著性水平選定為α=0.05);利用Canoco 5軟件進(jìn)行冗余分析(RDA),探討云南松林土壤養(yǎng)分指標(biāo)和細(xì)菌群落之間的相關(guān)性。

    使用QIIME 1.9.1軟件對獲得的高質(zhì)量微生物序列按97%的序列相似度進(jìn)行歸并,劃分運(yùn)算分類單元(OTU),基于Silva參考數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對,得到每個OTU對應(yīng)的物種分類信息;基于OTU劃分和分類地位鑒定結(jié)果,獲得每個樣本在各分類水平的群落組成;計算測序豐富度指數(shù)(Chao1)、多樣性指數(shù)(Shannon指數(shù)、Simpson指數(shù))。

    利用Origin 2019軟件制圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同海拔云南松林的土壤養(yǎng)分含量變化

    研究區(qū)不同海拔云南松林地土壤理化性質(zhì)變化明顯(圖1)。隨海拔升高:土壤pH先減小后增大,海拔1 300 m處土壤pH最高(7.72),海拔1 900 m處土壤pH最低(6.34),且不同海拔間差異顯著;TC、TN、TP含量先增加后降低,且不同海拔間差異顯著,三者的含量范圍分別為11.60~48.26、1.32~3.09、0.54~0.97 g·kg-1;AN含量先顯著增加,后顯著降低,但海拔1 300 m與2 100 m處差異不顯著,含量范圍在65.27~144.52 mg·kg-1;TK含量在各海拔處差異顯著,以海拔1 900 m處最高(0.66 g·kg-1)、海拔1 600 m處最低(0.38 g·kg-1);AP含量同樣在各海拔處差異顯著,但以海拔1 600 m處最高(2.64 mg·kg-1)、海拔1 900 m處最低(1.44 mg·kg-1);AK含量以海拔1 900 m處最高(95.25 mg·kg-1)、海拔1 600 m處最低(60.40 mg·kg-1),兩者差異顯著,且均顯著高于其他海拔處,但海拔1 300 m與海拔2 100 m處的土壤AK含量無顯著差異。

    TC,全碳;TN,全氮;TP,全磷;TK,全鉀;AN,速效氮;AP,速效磷;AK,速效鉀。下同。

    2.2 不同海拔云南松林的土壤細(xì)菌群落豐度與多樣性

    測序結(jié)果顯示,各樣品文庫的覆蓋率(coverage)在98.11%~99.01%(表2),說明測序結(jié)果能夠代表土壤中細(xì)菌群落的真實情況。從Chao1指數(shù)和OTU數(shù)來看,研究區(qū)內(nèi)各海拔的細(xì)菌群落豐度從高到低依次為1 900 m>1 600 m>2 100 m>1 300 m。Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)都是用來估算樣本中微生物多樣性的指標(biāo),在生態(tài)學(xué)中常用來定量描述一個區(qū)域的生物多樣性。Shannon指數(shù)值越大,說明群落多樣性越高;Simpson指數(shù)值越大,說明群落多樣性越低。在本研究中,Shannon指數(shù)值在海拔1 900 m最大,Simpson指數(shù)值在海拔1 900 m最小,說明云南松林土壤細(xì)菌的群落多樣性在該海拔處最高。這一結(jié)果表明,不同海拔梯度對土壤細(xì)菌多樣性的影響是不同的。

    表2 不同海拔云南松林土壤的細(xì)菌豐度與多樣性

    2.3 不同海拔云南松林的土壤細(xì)菌分類

    在門分類水平上(圖2),相對豐度較大的有變形菌門(Proteobacteria)、酸桿菌門(Acidobacteria)、放線菌門(Actinobacteria)和綠彎菌門(Chloroflexi),分別占總測序序列的33.37%、24.40%、19.82%、12.06%,且在4個海拔梯度上均有;疣微菌門(Verrucomicrobia)和棒狀桿菌門(Rokubacteria)分別占總測序序列的3.57%和1.22%,僅在海拔1 300、1 900、2 100 m上共有;芽單胞菌門(Gemmatimonadetes)占總測序序列的2.06%,在海拔1 300、1 600、1 900 m上共有;Patescibacteria占總測序序列的1.07%,在海拔1 900、2 100 m上共有;其他相對豐度不足1.5%的細(xì)菌合計占總測序序列的3.69%。在4個海拔共有的細(xì)菌中,變形菌門、酸桿菌門的相對豐度在海拔1 900 m處最大,綠彎菌門的相對豐度在海拔2 100 m處最大,放線菌門的相對豐度在海拔1 600 m處最大。除上述優(yōu)勢菌群外,其他相對豐度較低的細(xì)菌群落在不同海拔下相對豐度變化不大。

    Proteobacteria,變形菌門;Acidobacteria,酸桿菌門;Chloroflexi,綠彎菌門;Actinobacteria,放線菌門;Verrucomicrobia,疣微菌門;Gemmatimonadetes,芽單胞菌門;Rokubacteria,棒狀桿菌門;Bacteroidetes,擬桿菌門;Latescibacteria,匿桿菌門。Blastocatellia(Subgroup 4),母鏈菌綱;Bacteroidia,擬桿菌綱;Actinobacteria,放線菌綱;Deltaproteobacteria,δ-變形菌綱;Rubrobacteria,紅桿菌綱;Acidimicrobiia,酸微菌綱;Chloroflexia,綠彎菌綱;Gemmatimonadetes,芽單胞菌綱;Thermoleophilia,嗜熱油菌綱;Verrucomicrobiae,疣微菌綱;Gammaproteobacteria,γ-變形菌綱;Ktedonobacteria,纖線桿菌綱;Alphaproteobacteria,α-變形菌綱;Acidobacteriia,酸桿菌綱。

    在綱分類水平上,相對豐度較大的集中于酸桿菌綱(Acidobacteriia)、α-變形菌綱(Alphaproteobacteria)、γ-變形菌綱(Gammaproteobacteria)、δ-變形菌綱(Deltaproteobacteria),合計占總測序序列的44.18%。其中,酸桿菌綱、α-變形菌綱和γ-變形菌綱在4個海拔梯度上共有,而δ-變形菌綱在海拔1 300、1 900、2 100 m上共有。α-變形菌綱、γ-變形菌綱的相對豐度在海拔1 900 m處最大,而酸桿菌綱的相對豐度在海拔1 900 m處最低,δ-變形菌綱的相對豐度在不同海拔間無顯著差異。在綱分類水平上,其他細(xì)菌群落在不同海拔的相對豐度變化不大。

    2.4 不同海拔云南松林土壤養(yǎng)分與土壤細(xì)菌群落組成和多樣性的相關(guān)性

    對不同海拔土壤細(xì)菌豐度、多樣性與土壤理化因子的相關(guān)關(guān)系進(jìn)行分析(表3),結(jié)果顯示:土壤pH值與Chao1指數(shù)、Shannon指數(shù)呈極顯著(P<0.01)負(fù)相關(guān),與Simpson指數(shù)呈顯著(P<0.05)正相關(guān);土壤TC、TN、TP、AN、AP分別與Chao1指數(shù)、Shannon指數(shù)呈極顯著(P<0.01)正相關(guān),土壤TC、TP、AP與Simpson指數(shù)呈極顯著(P<0.01)負(fù)相關(guān);土壤TN、AN與Simpson指數(shù)呈顯著(P<0.05)負(fù)相關(guān)。

    表3 土壤理化性質(zhì)與細(xì)菌豐富度指數(shù)、多樣性指數(shù)的相關(guān)性

    對細(xì)菌群落組成與土壤養(yǎng)分指標(biāo)進(jìn)行冗余分析,結(jié)果顯示:pH、TC、TN和AN對細(xì)菌群落組成的影響程度較強(qiáng)。土壤pH與綠彎菌門、疣微菌門、棒狀桿菌門、Patescibacteria、芽單胞菌門的相對豐度正相關(guān),與變形菌門、酸桿菌門、放線菌門、擬桿菌門、匿桿菌門(Bacteroidetes)的相對豐度負(fù)相關(guān);TC、TN和TP與放線菌門、酸桿菌門、擬桿菌門、變形菌門、匿桿菌門的相對豐度正相關(guān),與綠彎菌門、疣微菌門、棒狀桿菌門、Patescibacteria、芽單胞菌門的相對豐度負(fù)相關(guān);AP和AN與放線菌門和芽單胞菌門的相對豐度正相關(guān),與綠彎菌門、疣微菌門、棒狀桿菌門的相對豐度負(fù)相關(guān);TK、AK與變形菌門、酸桿菌門、放線菌門、擬桿菌門、匿桿菌門、綠彎菌門、疣微菌門、棒狀桿菌門、Patescibacteria的相對豐度正相關(guān),與放線菌門、芽單胞菌門的相對豐度負(fù)相關(guān)。綜上所述,土壤pH、TC、TN、AN和TP是細(xì)菌群落組成變化的主要驅(qū)動因子,對變形菌門、酸桿菌門、放線菌門、擬桿菌門、匿桿菌門等幾種優(yōu)勢菌門的影響最大。

    Proteobacteria,變形菌門;Acidobacteria,酸桿菌門;Chloroflexi,綠彎菌門;Actinobacteria,放線菌門;Verrucomicrobia,疣微菌門;Gemmatimonadetes,芽單胞菌門;Rokubacteria,棒狀桿菌門;Bacteroidetes,擬桿菌門;Latescibacteria,匿桿菌門。圖3 細(xì)菌門分類群落與養(yǎng)分指標(biāo)的冗余分析

    3 討論

    3.1 不同海拔對云南松林土壤養(yǎng)分含量的影響

    研究發(fā)現(xiàn),典型喀斯特區(qū)不同海拔云南松林的土壤pH值,及全量養(yǎng)分和速效養(yǎng)分含量存在顯著差異。土壤pH值對土壤養(yǎng)分的理化性質(zhì)和有效性、微生物群落結(jié)構(gòu),以及植物生長發(fā)育都有很大的影響[14]。在本研究中,隨著土壤pH值升高,土壤養(yǎng)分的有效性降低,這與王艷艷等[15]的研究結(jié)果相似。土壤碳、氮含量是反映土壤肥力的重要指標(biāo)[16]。本研究發(fā)現(xiàn),土壤TC、TN、AN含量隨海拔升高呈先上升后下降的趨勢,這與吳玥等[17]在戴云山研究的結(jié)果一致。原因可能是,本研究海拔梯度間跨度較大,溫度差異影響了土壤養(yǎng)分含量的積累[18]。在一定范圍內(nèi),隨海拔升高,氣溫降低,動植物殘體的分解速率減慢,造成土壤有機(jī)碳、氮礦化速率降低[19],相應(yīng)地,土壤中的碳、氮積累量增加,因此土壤養(yǎng)分含量先相應(yīng)升高。馬維偉等[20]認(rèn)為,土壤養(yǎng)分含量的變化與溫度、水分的相關(guān)性很高,土壤養(yǎng)分的積累需要相對適宜的溫度,溫度過高或者過低都會產(chǎn)生負(fù)效應(yīng)。當(dāng)海拔高度超過1 900 m后,溫濕度等因素共同作用下的環(huán)境已經(jīng)超出了喀斯特區(qū)云南松林土壤養(yǎng)分積累的閾值,因而土壤TC、TN、AN含量隨海拔升高反而呈現(xiàn)下降的趨勢。本研究中,土壤磷素含量在低海拔處較低。這可能是因為,低海拔區(qū)的溫度相對較高,磷素在土壤中的遷移轉(zhuǎn)化能力較強(qiáng)[21],更易流失,因而積累量較低。本研究中,土壤全鉀和速效鉀含量在不同海拔間無明顯規(guī)律,這可能與土壤的空間異質(zhì)性和人為因素有關(guān)[22]。

    3.2 云南松林土壤細(xì)菌群落組成特點及其對海拔梯度的響應(yīng)

    前人研究表明,海拔對土壤細(xì)菌組成和多樣性的影響不盡相同。Fierer等[23]發(fā)現(xiàn),細(xì)菌多樣性沒有顯著的海拔梯度差異;Bryant等[24]發(fā)現(xiàn),微生物多樣性隨海拔梯度上升而增加。本研究中,隨海拔升高,Chao1指數(shù)和Shannon指數(shù)整體趨勢為先增大后減小,而Simpson指數(shù)的整體趨勢為先減小而后增大,且細(xì)菌多樣性與土壤pH值,及全碳、全氮、全磷和相應(yīng)的速效養(yǎng)分含量有顯著相關(guān)性。林耀奔等[25]發(fā)現(xiàn),有機(jī)質(zhì)含量高、pH值低的環(huán)境更適于微生物的生存和繁殖;楊立賓等[26]發(fā)現(xiàn),有機(jī)碳、氮、磷含量高的土壤中微生物數(shù)量最多,原因是細(xì)菌分解主要發(fā)生在有機(jī)質(zhì)含量高的土壤中。本研究中,在1 300~1 900 m,土壤有機(jī)碳、氮、磷含量逐漸升高,細(xì)菌的數(shù)量與多樣性也隨之增加。

    本研究在土壤中檢測出變形菌門、酸桿菌門、放線菌門、綠彎菌門等優(yōu)勢細(xì)菌類群,其中,變形菌門的相對豐度最大,這與趙愛花等[27]在落葉闊葉林土壤上的研究結(jié)果一致。李艷春等[28]發(fā)現(xiàn),在福建茶園土壤中,變形菌門是最主要的細(xì)菌類群,其代謝活動是土壤中最主要的細(xì)菌活動,隨著土壤氮素含量增加,變形菌門的豐度增加。這與本研究中土壤全氮含量與變形菌門細(xì)菌相對豐度正相關(guān)的結(jié)果一致。Jangid等[29]發(fā)現(xiàn),在熱帶森林和農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)中,變形菌、酸桿菌占比很大;Fierer等[30]發(fā)現(xiàn),在溫帶森林土壤中豐度最大的細(xì)菌為酸桿菌;Yuan等[31]在青藏高原草地土壤、Liu等[32]在東北黑土中也發(fā)現(xiàn),含量最豐富的細(xì)菌類群是酸桿菌。但在本研究中,酸桿菌門、放線菌門的相對豐度低于變形菌門。這說明,不同類型土壤中微生物的優(yōu)勢類群不盡相同,不同環(huán)境的微生物既具有豐富多樣性的特點,又具有類群相似性的特點[33]。

    土壤細(xì)菌群落組成對土壤理化性質(zhì)的變化較為敏感,尤其是土壤碳庫和pH值對細(xì)菌群落組成的影響最為明顯[34]。本研究發(fā)現(xiàn),土壤pH值與酸桿菌門細(xì)菌的相對豐度負(fù)相關(guān),而土壤全碳、全氮、全磷含量與酸桿菌門正相關(guān)。這是因為,酸桿菌屬于嗜酸菌,更適宜在酸性環(huán)境中生存[35]。同時,酸桿菌門細(xì)菌具有編碼纖維素酶和淀粉水解酶的基因序列,可加速分解動植物殘體產(chǎn)生有機(jī)質(zhì)等養(yǎng)分[36]。綠彎菌門細(xì)菌需要消耗有機(jī)質(zhì)來供應(yīng)代謝活動所需要的能量[37],因此綠彎菌門與土壤全碳、全氮、全磷含量負(fù)相關(guān)。本研究中,全碳、速效氮、全磷和速效磷與放線菌門正相關(guān)。這是因為,放線菌門具有促進(jìn)土壤碳、氮、磷等養(yǎng)分轉(zhuǎn)化和積累、提高土壤質(zhì)量的作用[38]。

    綜上所述,典型喀斯特區(qū)云南松林土壤養(yǎng)分與細(xì)菌群落組成和多樣性對不同海拔的響應(yīng)顯著,土壤養(yǎng)分含量是影響土壤細(xì)菌群落組成與多樣性的主要因子,不同海拔土壤養(yǎng)分含量的變化會導(dǎo)致細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)發(fā)生明顯的規(guī)律性變化。

    猜你喜歡
    松林菌門海拔
    Implementation and application of PyNE sub-voxel R2S for shutdown dose rate analysis
    高海拔的甘南
    散文詩(2021年22期)2022-01-12 06:14:04
    野生樹鼩與人工飼養(yǎng)樹鼩消化道不同部位微生物組成的比較研究
    饑餓與重攝食對河蟹腸道菌群結(jié)構(gòu)的影響
    南美三大高海拔球場
    昆蟲體內(nèi)微生物多樣性的影響因素研究進(jìn)展
    妊娠期糖尿病腸道菌群變化及臨床價值分析
    海拔4000米的父愛
    我的爺爺和長征
    霍松林詩詞選
    性色avwww在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 国产免费一级a男人的天堂| 日本成人三级电影网站| 久久精品国产综合久久久| 国产 一区 欧美 日韩| 久久久国产成人精品二区| 国产精品亚洲av一区麻豆| 精品一区二区三区视频在线 | 亚洲国产色片| 国产亚洲精品久久久com| 岛国在线免费视频观看| 嫩草影院精品99| 午夜福利18| 久久久久久人人人人人| 日本成人三级电影网站| 国产精品98久久久久久宅男小说| 免费观看精品视频网站| 成人鲁丝片一二三区免费| 老司机福利观看| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 欧美成人a在线观看| 哪里可以看免费的av片| 搡老岳熟女国产| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲人成网站高清观看| 午夜激情福利司机影院| 国产精品久久视频播放| 中文字幕熟女人妻在线| 免费av毛片视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| av天堂中文字幕网| 久久久久久久久中文| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 看黄色毛片网站| 免费人成在线观看视频色| 高清在线国产一区| 欧美日韩黄片免| 亚洲av五月六月丁香网| 少妇高潮的动态图| 老司机在亚洲福利影院| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 午夜日韩欧美国产| 窝窝影院91人妻| 99热精品在线国产| 一级毛片高清免费大全| 国产综合懂色| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 久久亚洲精品不卡| 午夜福利18| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 老汉色∧v一级毛片| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 免费av不卡在线播放| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 91在线观看av| 欧美日韩国产亚洲二区| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 99视频精品全部免费 在线| 在线a可以看的网站| 校园春色视频在线观看| 免费在线观看亚洲国产| 日韩亚洲欧美综合| 在线免费观看不下载黄p国产 | 看免费av毛片| 国产成人啪精品午夜网站| 制服人妻中文乱码| 真实男女啪啪啪动态图| 国产色婷婷99| 国产高清videossex| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲av第一区精品v没综合| 免费大片18禁| 一夜夜www| 免费高清视频大片| 国内揄拍国产精品人妻在线| 日本免费一区二区三区高清不卡| 国内精品一区二区在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 精品久久久久久久久久久久久| 成年免费大片在线观看| 青草久久国产| 老鸭窝网址在线观看| 香蕉丝袜av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产欧美日韩一区二区三| 国产精品,欧美在线| 免费电影在线观看免费观看| 他把我摸到了高潮在线观看| 熟女电影av网| 9191精品国产免费久久| 三级毛片av免费| 亚洲国产色片| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 国产一区二区在线av高清观看| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产精品,欧美在线| 午夜福利在线在线| 国产精品亚洲美女久久久| 国产av麻豆久久久久久久| xxx96com| 观看免费一级毛片| 久久国产精品人妻蜜桃| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 99国产综合亚洲精品| 淫秽高清视频在线观看| 日本 欧美在线| 一夜夜www| 最后的刺客免费高清国语| 免费大片18禁| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲av一区综合| 深夜精品福利| 97超视频在线观看视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 深夜精品福利| 国产黄a三级三级三级人| 国产精品日韩av在线免费观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 成人特级av手机在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 男女视频在线观看网站免费| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 日韩欧美在线乱码| 久久香蕉精品热| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 1000部很黄的大片| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲专区中文字幕在线| 日本五十路高清| 国产成人系列免费观看| 草草在线视频免费看| 丰满的人妻完整版| 亚洲av免费在线观看| 老汉色av国产亚洲站长工具| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲av熟女| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 男插女下体视频免费在线播放| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国内精品美女久久久久久| 国产高潮美女av| 国产爱豆传媒在线观看| 亚洲专区中文字幕在线| 国产精品影院久久| 久久精品人妻少妇| 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美日韩国产亚洲二区| 可以在线观看毛片的网站| av片东京热男人的天堂| 欧美成人免费av一区二区三区| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 午夜福利在线观看吧| 日本一二三区视频观看| 亚洲成人久久爱视频| 免费在线观看亚洲国产| 欧美极品一区二区三区四区| 精品久久久久久久久久免费视频| 国产精品野战在线观看| 欧美日本视频| 国产免费男女视频| 欧美日韩综合久久久久久 | 变态另类丝袜制服| 综合色av麻豆| 岛国在线免费视频观看| 精品一区二区三区视频在线 | 好男人电影高清在线观看| 国产伦精品一区二区三区视频9 | aaaaa片日本免费| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 一级毛片女人18水好多| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 久久久久免费精品人妻一区二区| 成人国产综合亚洲| 身体一侧抽搐| 国产乱人视频| 国产不卡一卡二| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产精品久久视频播放| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国模一区二区三区四区视频| 国产69精品久久久久777片| 亚洲第一电影网av| 中文字幕久久专区| 欧美精品啪啪一区二区三区| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久人人精品亚洲av| 他把我摸到了高潮在线观看| 久久久久久大精品| 一区二区三区免费毛片| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 舔av片在线| 国产91精品成人一区二区三区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 久久6这里有精品| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| av在线蜜桃| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 色精品久久人妻99蜜桃| 中国美女看黄片| 国产日本99.免费观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 日韩大尺度精品在线看网址| 激情在线观看视频在线高清| 波多野结衣高清无吗| 美女黄网站色视频| 欧美成人a在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 久久久久精品国产欧美久久久| 脱女人内裤的视频| 特级一级黄色大片| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲精品成人久久久久久| 麻豆国产97在线/欧美| 一个人观看的视频www高清免费观看| 青草久久国产| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 少妇高潮的动态图| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 一进一出好大好爽视频| 香蕉丝袜av| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 国产精品野战在线观看| h日本视频在线播放| 亚洲乱码一区二区免费版| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 久久6这里有精品| 欧美日韩一级在线毛片| 午夜久久久久精精品| 日韩欧美在线乱码| 午夜影院日韩av| 久久精品影院6| 最近最新免费中文字幕在线| 国产视频内射| 成人一区二区视频在线观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 成人av一区二区三区在线看| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 国产黄a三级三级三级人| 夜夜爽天天搞| 国产高潮美女av| 国产精品亚洲一级av第二区| 午夜福利在线在线| 久久久久久久久久黄片| 很黄的视频免费| xxx96com| 国产乱人伦免费视频| 国产av在哪里看| 亚洲精品色激情综合| 免费看十八禁软件| 久久草成人影院| 日韩欧美在线乱码| 国产免费一级a男人的天堂| 99久久精品热视频| 制服丝袜大香蕉在线| 国产成人av教育| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 亚洲无线观看免费| 精品一区二区三区人妻视频| av欧美777| 超碰av人人做人人爽久久 | 精品久久久久久成人av| 搡老熟女国产l中国老女人| 久久国产精品影院| 国产一区二区在线观看日韩 | 国产美女午夜福利| 怎么达到女性高潮| 成人国产一区最新在线观看| 国产精品一及| 久久久久久久精品吃奶| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品98久久久久久宅男小说| 深夜精品福利| 免费在线观看亚洲国产| 伊人久久精品亚洲午夜| www日本黄色视频网| 观看美女的网站| 免费看日本二区| 成年版毛片免费区| 国产精品香港三级国产av潘金莲| av视频在线观看入口| 国产久久久一区二区三区| 窝窝影院91人妻| 老汉色∧v一级毛片| 亚洲激情在线av| 日本免费a在线| 欧美日韩福利视频一区二区| 99久久成人亚洲精品观看| 成人永久免费在线观看视频| 两个人的视频大全免费| 午夜免费观看网址| 日本免费a在线| x7x7x7水蜜桃| 成人欧美大片| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 午夜福利18| 一二三四社区在线视频社区8| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 精品日产1卡2卡| 欧美日韩国产亚洲二区| 中文字幕av成人在线电影| 丰满人妻一区二区三区视频av | 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 午夜精品一区二区三区免费看| 在线观看66精品国产| 国产一区二区在线观看日韩 | 日韩有码中文字幕| 亚洲av成人精品一区久久| 婷婷精品国产亚洲av| 啦啦啦免费观看视频1| 听说在线观看完整版免费高清| 在线观看日韩欧美| 国产成人a区在线观看| 黄色成人免费大全| 国产69精品久久久久777片| 91在线观看av| 免费看a级黄色片| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲电影在线观看av| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品日韩av在线免费观看| 两个人视频免费观看高清| 99久久综合精品五月天人人| 欧美日本视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 18禁黄网站禁片午夜丰满| 脱女人内裤的视频| 嫩草影视91久久| 麻豆国产97在线/欧美| 国产欧美日韩一区二区精品| 日韩大尺度精品在线看网址| 在线观看66精品国产| 久久久成人免费电影| av专区在线播放| 色哟哟哟哟哟哟| 国产一区二区在线av高清观看| bbb黄色大片| 日日夜夜操网爽| 国产黄a三级三级三级人| 免费观看精品视频网站| 午夜两性在线视频| 嫩草影院精品99| 国产成人欧美在线观看| 中文亚洲av片在线观看爽| 草草在线视频免费看| 一边摸一边抽搐一进一小说| 欧美国产日韩亚洲一区| 国产精品1区2区在线观看.| 欧美在线黄色| 最近最新免费中文字幕在线| www.熟女人妻精品国产| 国产精品1区2区在线观看.| 色吧在线观看| 午夜精品在线福利| 淫妇啪啪啪对白视频| 成年女人看的毛片在线观看| 十八禁网站免费在线| 欧美乱妇无乱码| 怎么达到女性高潮| 一区二区三区高清视频在线| АⅤ资源中文在线天堂| 久9热在线精品视频| 日韩大尺度精品在线看网址| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲熟妇熟女久久| 婷婷丁香在线五月| 国产黄片美女视频| 欧美午夜高清在线| 可以在线观看的亚洲视频| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 午夜福利在线在线| 精品久久久久久成人av| 又紧又爽又黄一区二区| 美女黄网站色视频| 在线观看日韩欧美| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产精品久久久人人做人人爽| 日韩高清综合在线| 国模一区二区三区四区视频| 国产精品一区二区免费欧美| 12—13女人毛片做爰片一| 国产一区二区在线av高清观看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产伦在线观看视频一区| 日本 av在线| 久久九九热精品免费| 免费av观看视频| 色噜噜av男人的天堂激情| 男女视频在线观看网站免费| 国产精品久久久久久精品电影| aaaaa片日本免费| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 男人舔女人下体高潮全视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 亚洲在线自拍视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 一夜夜www| 亚洲天堂国产精品一区在线| 免费在线观看影片大全网站| 丰满乱子伦码专区| 99久国产av精品| 九九在线视频观看精品| 久久精品影院6| 校园春色视频在线观看| 精品一区二区三区人妻视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 欧美日韩福利视频一区二区| 国产毛片a区久久久久| 国产精品免费一区二区三区在线| 熟女人妻精品中文字幕| 激情在线观看视频在线高清| 色综合站精品国产| 成年女人毛片免费观看观看9| 小说图片视频综合网站| 国产av不卡久久| 国产精品亚洲av一区麻豆| 免费av不卡在线播放| 老汉色av国产亚洲站长工具| 国产日本99.免费观看| 成人国产综合亚洲| 日韩欧美三级三区| 三级毛片av免费| 天天一区二区日本电影三级| 午夜免费观看网址| 女警被强在线播放| 又黄又爽又免费观看的视频| 久久久久久久久久黄片| 国产成人av教育| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 在线免费观看的www视频| 99久久精品国产亚洲精品| 欧美最新免费一区二区三区 | 国产精品亚洲美女久久久| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| tocl精华| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 色吧在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 在线a可以看的网站| 欧美一区二区国产精品久久精品| 午夜视频国产福利| 国产一区二区三区视频了| 综合色av麻豆| 亚洲精品乱码久久久v下载方式 | 日本 欧美在线| 国产av麻豆久久久久久久| avwww免费| 免费在线观看亚洲国产| 成年女人看的毛片在线观看| 性色av乱码一区二区三区2| 国产 一区 欧美 日韩| 国产一区在线观看成人免费| 性欧美人与动物交配| 12—13女人毛片做爰片一| 69av精品久久久久久| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 手机成人av网站| 欧美一区二区国产精品久久精品| 黄色丝袜av网址大全| av中文乱码字幕在线| 男人的好看免费观看在线视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 麻豆国产97在线/欧美| 日本在线视频免费播放| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 俺也久久电影网| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 一个人免费在线观看的高清视频| 级片在线观看| 国产真实伦视频高清在线观看 | 国产aⅴ精品一区二区三区波| 国产高潮美女av| 母亲3免费完整高清在线观看| 日日夜夜操网爽| 久久99热这里只有精品18| 欧美3d第一页| 12—13女人毛片做爰片一| 夜夜爽天天搞| 成人永久免费在线观看视频| 欧美一区二区国产精品久久精品| 99久久精品一区二区三区| 一进一出好大好爽视频| 成人亚洲精品av一区二区| 精品久久久久久,| 成人av在线播放网站| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 69人妻影院| 看黄色毛片网站| 日本精品一区二区三区蜜桃| 亚洲精品456在线播放app | 日韩高清综合在线| av福利片在线观看| 欧美成人性av电影在线观看| 成人精品一区二区免费| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 首页视频小说图片口味搜索| 动漫黄色视频在线观看| 色播亚洲综合网| 无限看片的www在线观看| 天堂√8在线中文| 国产在视频线在精品| 美女大奶头视频| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲成人久久爱视频| 国产精品久久久久久久电影 | 亚洲在线观看片| 日韩欧美三级三区| 在线播放国产精品三级| 亚洲片人在线观看| 91麻豆av在线| 无遮挡黄片免费观看| 国产中年淑女户外野战色| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 白带黄色成豆腐渣| 精品免费久久久久久久清纯| 99久久精品一区二区三区| 国产成年人精品一区二区| 一本精品99久久精品77| 久久国产精品影院| 国产三级黄色录像| 国产高清三级在线| 亚洲片人在线观看| 国产69精品久久久久777片| 国产爱豆传媒在线观看| 美女cb高潮喷水在线观看| 国语自产精品视频在线第100页| 欧美一区二区亚洲| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产综合懂色| 国产成年人精品一区二区| 国产精品一区二区免费欧美| 99热只有精品国产| 天堂影院成人在线观看| 午夜免费观看网址| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 日韩欧美在线二视频| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 成人鲁丝片一二三区免费| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 一级黄片播放器| 波多野结衣高清无吗| 美女高潮的动态| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 色哟哟哟哟哟哟| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 亚洲精品色激情综合| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产主播在线观看一区二区| 欧美极品一区二区三区四区| 国产成人系列免费观看| 两人在一起打扑克的视频| 午夜福利在线在线| x7x7x7水蜜桃| 国产男靠女视频免费网站| 精品无人区乱码1区二区| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 午夜影院日韩av| 又爽又黄无遮挡网站| 村上凉子中文字幕在线| 国产中年淑女户外野战色| 97碰自拍视频| 色视频www国产| 丁香欧美五月| 成人亚洲精品av一区二区| 国产不卡一卡二| 亚洲久久久久久中文字幕| 精品国产三级普通话版| 亚洲不卡免费看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 亚洲男人的天堂狠狠| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲av不卡在线观看| 啦啦啦免费观看视频1| 色综合欧美亚洲国产小说| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 特大巨黑吊av在线直播| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 在线观看一区二区三区| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产主播在线观看一区二区| 国产av一区在线观看免费| 免费av毛片视频| 国产色婷婷99| АⅤ资源中文在线天堂| 99热这里只有是精品50| 免费高清视频大片| 麻豆一二三区av精品| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美在线一区亚洲| 在线a可以看的网站| 国产亚洲精品久久久com|