肺炎支原體抗體免疫球蛋白G、免疫球蛋白M、脫氧核糖核酸檢測(cè)在診斷兒童呼吸道感染中的應(yīng)用價(jià)值

李新新

開封市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南開封 475000

肺炎支原體（MP）是兒童呼吸道感染疾病的常見病原體，對(duì)抗菌藥物的敏感性較低，易誘發(fā)兒童肺部的急性炎癥改變和呼吸道感染［1］。MP感染早期臨床表現(xiàn)為全身乏力、頭痛、發(fā)熱、咳嗽等，缺乏典型性表現(xiàn)，若不及時(shí)接受正確、有效的治療，隨著病情進(jìn)展可引起心力衰竭、肺外合并癥等，甚至誘發(fā)多器官受損，甚至威脅患兒生命安全［2-3］。故實(shí)驗(yàn)室病原學(xué)檢查至關(guān)重要。MP-脫氧核糖核酸（DNA）定量檢測(cè)和MP抗體定性檢測(cè)是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)MP的常用手段。本研究分析MP抗體免疫球蛋白（Ig）G、IgM、DNA檢測(cè)在診斷兒童呼吸道感染中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床診治提供參考，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年2月—2020年5月間開封市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科收治的80例呼吸道感染患兒為研究對(duì)象，年齡1個(gè)月～13歲，平均年齡（5.20±1.32）歲，男42例，女38例，＜1歲12例，1～＜4歲37例，4～＜8歲21例，≥8歲10例。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識(shí)（2015年版）》［4］中呼吸道感染相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)呼吸道分泌物支原體培養(yǎng)為陽(yáng)性，患兒家長(zhǎng)簽署知情同意書，凝血功能正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：入組前使用激素類藥物、免疫抑制劑治療，免疫系統(tǒng)疾病，先天性代謝障礙性疾病，營(yíng)養(yǎng)不良，血液系統(tǒng)疾病。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 方法

抽取入組患兒空腹靜脈血3 ml，轉(zhuǎn)速3 500 rpm，離心15 min，獲取上清液，用定量酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)定MP-IgG和MP-IgM，試紙盒購(gòu)自亞輝龍生物科技股份有限公司。采用一次性吸痰管吸取口咽部分泌物標(biāo)本，使用熒光探針PCR技術(shù)測(cè)定MP-DNA，試劑盒購(gòu)自達(dá)安基因股份有限公司。MP-IgG＞15 kU/L為陽(yáng)性，MP-IgM＞17 kU/L為陽(yáng)性，MP-DNA≥1×103copies/mL為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）分析不同年齡段患兒MP-IgG、 MP-DNA、MP-IgM陽(yáng)性率。（2）分析MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM單一與聯(lián)合診斷兒童呼吸道感染價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡段患兒MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM陽(yáng)性率比較

4～＜8歲組和≥8歲組MP-IgG、MP-DNA陽(yáng)性率高于＜1歲組、1～＜4歲組，MP-IgM陽(yáng)性率高于＜1歲組，MP-IgM陽(yáng)性率低于1～＜4歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；1～＜4歲組陽(yáng)性率高于＜1歲組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）； 4～＜8歲組與≥8歲組 MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM陽(yáng)性率和＜1歲組、與1～＜4歲組MP-IgG、MP-DNA陽(yáng)性率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 不同年齡段患兒MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM陽(yáng)性率比較例（%）

2.2 MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM單一與聯(lián)合診斷兒童呼吸道感染價(jià)值

MP-IgG+MP-DNA+MP-IgM診斷兒童呼吸道感染的AUC為0.778，敏感度和特異度分別為78.96%、96.21%，高于各指標(biāo)單一診斷，見表2。

表2 MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM單一與聯(lián)合診斷兒童呼吸道感染價(jià)值

3 討論

MP是引起兒童肺炎支原體肺炎和呼吸系統(tǒng)疾病的常見病原體，感染性較強(qiáng)，可經(jīng)飛沫傳播，易侵入呼吸道黏膜和纖毛上皮細(xì)胞，損傷細(xì)胞膜，并釋放大量過(guò)氧化氫、核酸酶等有毒代謝產(chǎn)物，促使細(xì)胞腫脹、溶解、壞死，引起呼吸道的急性炎癥改變［5］。因MP抗原與人體部分組織存在相同抗原，侵入人體后會(huì)促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的自身抗體，形成免疫復(fù)合物，誘發(fā)呼吸道以外的其他器官病變，如腎炎、心肌炎、腦炎等。因兒童處于生長(zhǎng)發(fā)育階段，機(jī)體各項(xiàng)機(jī)能尚未發(fā)育成熟，機(jī)體抵抗能力相對(duì)較差，尤其是免疫系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能尚未發(fā)育健全，難以抵御MP侵襲，易發(fā)生感染。以往體外培養(yǎng)是診斷MP感染的常用手段，但分離培養(yǎng)費(fèi)時(shí)、繁瑣，培養(yǎng)周期較長(zhǎng)，判斷結(jié)果需3～5周，且培養(yǎng)陽(yáng)性率低，不利于MP的早期診斷［6-7］。

機(jī)體感染MP后會(huì)刺激免疫系統(tǒng)，提高體液中可溶性白細(xì)胞介素-2受體含量，既能抑制機(jī)體細(xì)胞免疫，又能激發(fā)機(jī)體體液免疫，逐漸提高體內(nèi)Ig水平，如IgG、IgM。故，檢測(cè)MP-IgG、MP-IgM尤為重要。研究MP感染可發(fā)生于兒童任何年齡段，其中學(xué)齡期和學(xué)齡前兒童較為多見。各指標(biāo)聯(lián)合診斷能夠提高疾病檢出率。MP-IgM是機(jī)體感染MP后最早產(chǎn)生的抗體，一般可在感染后約7 d被檢測(cè)到，感染3～4周達(dá)到峰值。一般機(jī)體MP感染后不會(huì)立刻出現(xiàn)臨床癥狀，潛伏期為2～3周，待患兒就診時(shí)MP-IgM已處于較高水平，是診斷MP感染的有效指標(biāo)。但MP-IgM陰性不能否定MP感染，需監(jiān)測(cè)MP-IgG，其出現(xiàn)較晚，一般為患病后第5周達(dá)到分值，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，其含量明顯升高提示患者為近期感染，若顯著下降則為感染后期。MP-DNA監(jiān)測(cè)具有特異性強(qiáng)、檢測(cè)時(shí)間短、不受抗體水平影響、敏感度高等優(yōu)點(diǎn)，能夠彌補(bǔ)MP-IgM高峰出現(xiàn)晚的不足。

綜上所述，不同年齡段患兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不同，會(huì)影響MP的免疫應(yīng)答，MP-IgG、MP-DNA、MP-IgM是診斷兒童呼吸道感染的有效指標(biāo)，聯(lián)合診斷能夠提高檢出率。