果蔬農(nóng)殘快速檢測(cè)技術(shù)在實(shí)踐工作中的應(yīng)用探討

曾春花 陳錫成 鐘家艷 許紹峰 韋良英

(1.防城港市防城區(qū)農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊(duì)，廣西 防城港 538021；2.防城港市防城區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，廣西 防城港 538021）

水果蔬菜是人民大眾日常生活的必需品。隨著我國(guó)人民物質(zhì)生活水平的不斷提高和社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問(wèn)題日益突出，尤其是蔬果中的農(nóng)藥殘留量超標(biāo)問(wèn)題，直接影響人民大眾的身體健康和農(nóng)產(chǎn)品在市場(chǎng)的競(jìng)爭(zhēng)力，并已成為國(guó)家和公眾高度重視和關(guān)注的問(wèn)題。水果、蔬菜的農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法直接關(guān)系到水果、蔬菜果蔬行業(yè)食品質(zhì)量安全監(jiān)管的成效。因此，做好果蔬農(nóng)殘檢測(cè)和監(jiān)管工作，是保護(hù)人民生命安全，增強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的重要措施。

1.目前農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法

農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法大致可分為三大類：生物測(cè)定法、化學(xué)分析法、兼生物及化學(xué)的免疫分析法和生化檢測(cè)法。

1.1 農(nóng)藥殘留的生物測(cè)定技術(shù)

利用指示生物的生理生化反應(yīng)來(lái)判斷農(nóng)藥殘留及其污染情況，該方法一般作為引起中毒農(nóng)產(chǎn)品現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。

1.2 農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測(cè)

農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢測(cè)方法有分光光度法、極譜法、原子吸收光譜法、薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法、色質(zhì)聯(lián)用法等，這些分析方法有的靈敏度不高，有的需要昂貴的儀器，還有的需要特殊的設(shè)備，這對(duì)廣泛、大量的開(kāi)展水果蔬菜農(nóng)殘檢測(cè)有一定的局限性。

1.3 農(nóng)藥殘留的生化檢測(cè)

有機(jī)磷與氨基甲酸酯農(nóng)藥共為神經(jīng)系統(tǒng)乙酰膽堿脂酶抑制物，因此可以利用農(nóng)藥靶標(biāo)酶-乙酰膽用堿酯酶（AChE）受抑制的程度來(lái)檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。該方法具有快速方便、前處理簡(jiǎn)單、儀器相對(duì)簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，適用于現(xiàn)場(chǎng)的定性和半定量測(cè)定，目前已開(kāi)發(fā)出了相應(yīng)的各種速測(cè)卡和速測(cè)儀。由于蔬菜、水果類鮮食農(nóng)產(chǎn)品保存時(shí)間相對(duì)較短的特點(diǎn)，目前常用的方法是生化檢測(cè)法中的快速檢測(cè)技術(shù)——酶抑制法。

2.速測(cè)儀法（酶抑制分光光度法）特點(diǎn)和應(yīng)用情況

2.1 酶抑制法是指根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶活性的抑制作用，通過(guò)計(jì)算待測(cè)樣品對(duì)乙酰膽堿酯酶活性的抑制率定性判斷其中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥及其存在總量的一種快速初篩方法。目前已被列為國(guó)家推薦標(biāo)準(zhǔn)（GB/T5009.199-2003）的酶抑制率法具有快速，操作簡(jiǎn)便，成本低廉等特點(diǎn)，已成為對(duì)果蔬中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速定性初篩檢測(cè)的主流技術(shù)之一。

2.2 目前我區(qū)廣泛使用的農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法主要有兩大類：色譜檢測(cè)法和速測(cè)儀法。色譜檢測(cè)法用作農(nóng)殘定量分析，可為農(nóng)藥殘留執(zhí)法提供依據(jù)，主要分布在省級(jí)和地市級(jí)相關(guān)部門，個(gè)別縣市也具有一定的檢測(cè)能力。速測(cè)儀法只能作農(nóng)殘定性分析，但它具有短時(shí)間內(nèi)能夠檢測(cè)大量樣本、檢測(cè)成本低，對(duì)于檢測(cè)人員技術(shù)水平要求低，易于在基層推廣等特點(diǎn)，是目前我國(guó)控制高毒農(nóng)藥殘留的一種有效方法，廣泛用于蔬菜、水果生產(chǎn)基地和批發(fā)市場(chǎng)等，主要用來(lái)防止有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留嚴(yán)重超標(biāo)的蔬菜和水果流入市場(chǎng)。

3.速測(cè)儀法（酶抑制法）使用過(guò)程中應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題

3.1 速測(cè)儀法的優(yōu)缺點(diǎn)：

3.1.1 優(yōu)點(diǎn)：在于簡(jiǎn)單方便，快捷、成本低廉。整個(gè)檢測(cè)過(guò)程只需30 分鐘左右，它可以作為傳統(tǒng)儀器分析方法的有益補(bǔ)充，針對(duì)市場(chǎng)、基地果蔬農(nóng)藥殘留量進(jìn)行快速篩選監(jiān)測(cè)，保證上市蔬果食用的相對(duì)安全性。

3.1.2 缺點(diǎn)：酶試劑易失活，導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定，檢測(cè)結(jié)果誤差較大，重復(fù)性不好，實(shí)際應(yīng)用中的確認(rèn)率大約為60%～70%左右；存在檢測(cè)盲區(qū)，只能檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯兩類農(nóng)藥，不能檢測(cè)有機(jī)氯類、菊酯和其它類別的劇毒農(nóng)藥；不適合檢測(cè)蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄等容易出現(xiàn)假陽(yáng)性的農(nóng)產(chǎn)品；需要對(duì)檢測(cè)人員進(jìn)行專門培訓(xùn)，否則將會(huì)對(duì)出現(xiàn)的問(wèn)題無(wú)法正確處理或判斷，得出錯(cuò)誤的結(jié)果。

3.2 快速檢測(cè)法的“檢測(cè)盲區(qū)”假陽(yáng)性的產(chǎn)生和避免方法

3.2.1 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)法的“檢測(cè)盲區(qū)”假陽(yáng)性的產(chǎn)生：一方面，由于各蔬菜品種間（蔥蒜類、香菜、韭菜、番茄、胡蘿卜、橘子、辣椒）等含有對(duì)酶有影響次生物質(zhì)容易產(chǎn)生假陽(yáng)性，對(duì)檢測(cè)抑制率有不同干擾和影響，使一般的快速檢測(cè)方法難以區(qū)分與農(nóng)殘抑制作用的比例關(guān)系容易造成誤判（假陽(yáng)性）；另一方面，因色素的干擾可能影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。當(dāng)待測(cè)樣品的色素（如：葉綠素、胡蘿卜素等）含量較高會(huì)使測(cè)得的透過(guò)率非常低，從而造成對(duì)吸光度隨時(shí)間變化值計(jì)算的錯(cuò)誤，影響檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

3.2.2 針對(duì)果蔬快速檢測(cè)法出現(xiàn)假陽(yáng)性的情況，可利用檢測(cè)平臺(tái)系統(tǒng)中的《果蔬農(nóng)藥殘留比對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)》（即標(biāo)椎對(duì)照庫(kù)），初步解決了應(yīng)用“酶抑制率法+分光光度法”檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留時(shí)存在的部分“檢測(cè)盲區(qū)”，在一定程度上避免了檢測(cè)結(jié)果的假陽(yáng)性，并實(shí)現(xiàn)了檢測(cè)過(guò)程中對(duì)吸收光譜的自動(dòng)校準(zhǔn)。在實(shí)際工作中如果準(zhǔn)備檢測(cè)《果蔬農(nóng)藥殘留比對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)》的樣品時(shí)，先在“比對(duì)數(shù)據(jù)庫(kù)”（即標(biāo)椎對(duì)照庫(kù)）選擇相應(yīng)的果蔬名稱裝入對(duì)應(yīng)檢測(cè)的通道進(jìn)行檢測(cè)，可以有效避免產(chǎn)生假陽(yáng)性。若被測(cè)樣本的酶抑制率＜50%為安全果蔬：若被測(cè)樣本的酶抑制率≥50%為農(nóng)藥殘留的毒性超標(biāo)，建議重復(fù)一次，如果再超標(biāo)可送有關(guān)部門進(jìn)一步做定量檢測(cè)。

3.3 規(guī)范操作，科學(xué)使用和保存檢測(cè)試劑

3.3.1 規(guī)范操作。采用酶抑制法進(jìn)行果蔬農(nóng)殘檢測(cè)時(shí)，配制試劑建議使用蒸餾水或純凈水，不能直接用自來(lái)水配制，如用含有雜質(zhì)的水配制試劑會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果；要選取有代表性的蔬果進(jìn)行檢測(cè)，注意不能用水沖洗所需檢測(cè)的蔬菜水果樣品的可食部分，如樣品沾有泥土或水時(shí)，可用濾紙或干凈毛巾擦，再切碎，用四分法稱量；所要稱量的物品必須放在稱量容器中或稱量紙上，不能直接把物品放在稱量盤上；樣品加入底物后應(yīng)立即上儀器檢測(cè)，盡量縮短操作時(shí)間，否則空白值變小。嚴(yán)格控制檢測(cè)環(huán)境溫、濕度，尤其是溫度應(yīng)控制在20～25 ℃，確保酶的活性。

3.3.2 嚴(yán)格控制試劑保存條件。包裝好未配制的“農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)試劑”必須在冰箱的冷凍層保存，使用時(shí)再溶解。夏季時(shí)節(jié)，酶、底物、顯色劑易變質(zhì)失效，應(yīng)對(duì)配制過(guò)的溶液分裝，即取即用。配制好的酶液和底物在4℃的儲(chǔ)藏箱內(nèi)可保存1 周，過(guò)期使用會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

4.小結(jié)

我國(guó)農(nóng)藥的施用量和產(chǎn)量占世界第一。如何監(jiān)管控制好水果蔬菜農(nóng)藥殘留量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一就是對(duì)果蔬中農(nóng)藥殘留量及時(shí)、準(zhǔn)確的分析檢測(cè)。因此，在縣鄉(xiāng)級(jí)基層負(fù)責(zé)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管檢測(cè)的工作人員需要進(jìn)行專門的檢測(cè)業(yè)務(wù)技術(shù)培訓(xùn)，熟悉檢測(cè)技術(shù)規(guī)程，提高檢測(cè)人員的業(yè)務(wù)水平，以便對(duì)所轄區(qū)域的果蔬開(kāi)展風(fēng)險(xiǎn)（例行）監(jiān)測(cè)，并確保監(jiān)測(cè)品種和范圍對(duì)本地主要食用農(nóng)產(chǎn)品、基地和生產(chǎn)、收儲(chǔ)、銷售環(huán)節(jié)全覆蓋。只有如此，才能確保廣大人民群眾“舌尖上的安全”。