Wnt/β-catenin信號通路在胎兒生長受限新生兒外周血中表達及臨床意義*

冷茂東，黃和緩

(1.鄭州大學附屬兒童醫(yī)院 鄭州市兒童醫(yī)院感染與免疫重點實驗室檢驗科，鄭州 450018；2.鄭州大學第三附屬醫(yī)院科研中心，鄭州 450000)

胎兒生長受限 (fetal growth restriction，F(xiàn)GR)是指胎兒難以達到基因生長潛力的狀態(tài)，即胎兒胎盤質(zhì)量、頭圍、身長、體質(zhì)量及腎臟組織發(fā)育狀態(tài)與孕周不符，嚴重影響新生兒的生長發(fā)育及生命安全[1-2]。隨著分子生物學的不斷發(fā)展，靶標篩查及靶向治療已成為現(xiàn)代醫(yī)學研究的焦點，研究[3-5]發(fā)現(xiàn)Wnt/β-連環(huán)蛋白(β-catenin)信號通路與骨代謝、骨發(fā)育、胚胎頭頸發(fā)育及腎臟發(fā)育密切相關(guān)。然而現(xiàn)階段關(guān)于Wnt/β-catenin信號通路與FGR新生兒生長參數(shù)關(guān)聯(lián)報道較少?；诖?，本研究檢測了FGR新生兒外周血中Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白表達情況，并與新生兒生長參數(shù)進行相關(guān)性分析，為臨床FGR新生兒生長發(fā)育干預(yù)方案提供一定的基礎(chǔ)依據(jù)及理論支持,報道如下。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2019年5月—2020年12月于鄭州大學第三附屬醫(yī)院分娩的73例孕婦作為研究對象，分娩后根據(jù)胎齡及出生體質(zhì)量百分位數(shù)之間的關(guān)系[6]分為FGR組22例、適于胎齡兒組(AGA組)34例及大于胎齡兒組(LGA組)17例。納入標準：單胎孕婦；FGR組新生兒符合FGR有關(guān)診斷標準[7]；新生兒Apgar評分均大于8分[8]；臨床資料完整；產(chǎn)檢時未發(fā)現(xiàn)畸形征象。排除標準：出現(xiàn)羊水污染、宮內(nèi)窒息、宮內(nèi)感染、遺傳病等；巨大兒；妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥或妊娠期高血壓等并發(fā)癥者；既往存在吸煙飲酒史者。全部孕婦均已知情同意，且本研究通過醫(yī)學倫理委員會審批。3組孕婦年齡、孕周及胎兒性別差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。

表1 3組孕婦、胎兒一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白：在產(chǎn)婦分娩后立即采集起臍靜脈血5 mL，離心取上清，根據(jù)酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒說明書操作步驟檢測Wnt信號蛋白中7a(Wnt7a)、Wnt信號蛋白中7b(Wnt7b)、β-catenin、軸抑制蛋白2(Axin2)、糖原合酶激酶3(GSK-3β)表達水平，ELISA試劑盒購于貝克曼庫爾特公司。

1.2.2 觀察指標 新生兒生長參數(shù)：在新生兒斷臍后，檢測并記錄新生兒的體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、頭圍、身長、胎盤質(zhì)量、體質(zhì)量，其中BMI=體質(zhì)量(kg)/身高2(m2)。對Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白水平與新生兒生長參數(shù)進行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 3組新生兒生長參數(shù)比較 3組新生兒BMI、頭圍、身長、胎盤質(zhì)量、體質(zhì)量比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；與LGA組比較，F(xiàn)GR組和AGA組新生兒BMI、頭圍、身長、胎盤質(zhì)量、體質(zhì)量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；與AGA組比較，F(xiàn)GR組新生兒BMI、頭圍、身長、胎盤質(zhì)量、體質(zhì)量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組新生兒生長參數(shù)比較

2.2 3組Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白比較 3組新生兒臍血中Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；與LGA組比較，F(xiàn)GR組和AGA組新生兒臍血中Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β水平降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；與AGA組比較，F(xiàn)GR組新生兒臍血中Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β水平降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 3組Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白比較

2.3 Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白與FGR新生兒生長參數(shù)的相關(guān)性 FGR新生兒臍血中Wnt7a、Axin2 及GSK-3β水平與新生兒生長參數(shù)呈正相關(guān)(P<0.05)，而Wnt7b與新生兒身長無明顯相關(guān)(P>0.05)，β-catenin與頭圍及體質(zhì)量無明顯相關(guān)(P>0.05)。見表4。

表4 Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白與FGR新生兒生長參數(shù)的相關(guān)性

3 討論

近些年來FGR在婦產(chǎn)科發(fā)病率呈逐年上升趨勢，研究[9]表明FGR的發(fā)生可能會影響新生兒體質(zhì)量、BMI、胎盤質(zhì)量、身長、頭圍等生長參數(shù)，導致其生長發(fā)育受限，甚至病情嚴重可造成新生兒死亡。本研究結(jié)果顯示，BMI、頭圍、身長、胎盤質(zhì)量、體質(zhì)量在LGA組、AGA組及FGR組中依次呈降低趨勢。進一步證實FGR新生兒生長發(fā)育受限，這一結(jié)果與張巧璇等[10]報道相符，其認為胎兒的生長發(fā)育與多種因素影響有關(guān)，如孕婦病理生理條件、胎兒所處環(huán)境、臍帶及胎盤等。因此，了解參與FGR發(fā)生發(fā)展的相關(guān)因素，對其臨床診治方案的制訂具有推動意義。

研究[11]表明，Wnt/β-catenin信號通路是一條與細胞生長分化及發(fā)育有關(guān)的傳統(tǒng)信號通路，其控制許多細胞和組織器官發(fā)育過程，包括細胞增殖、細胞命運決定和組織穩(wěn)態(tài)，影響Wnt/β-catenin通路的突變通常會導致疾病、癌癥進展和發(fā)育缺陷。THEKA等[11]研究發(fā)現(xiàn)，多種因素控制著胚胎干細胞的多能性，包括Wnt/β-catenin信號通路，這對胚胎干細胞的分化和增殖至關(guān)重要，還發(fā)現(xiàn)持續(xù)的Wnt/β-catenin信號可維持正常的印記控制區(qū)甲基化和胚胎干細胞的穩(wěn)態(tài)，是基因組穩(wěn)定性的關(guān)鍵調(diào)控因子。因此，本研究推測Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白與FGR新生兒生長參數(shù)存在一定的關(guān)聯(lián)。然而現(xiàn)階段臨床上關(guān)于此類報道并不多見。

Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白包括Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β等因子，其中Wnt7a、Wnt7b 屬于經(jīng)典的Wnt 信號通路的關(guān)鍵配體，與腎臟發(fā)育及血管內(nèi)皮的形成相關(guān)[12-13]。Axin2作為Wnt/β-catenin特異性的轉(zhuǎn)錄靶點，發(fā)育中的腎臟Axin2與Wnt7b呈現(xiàn)依賴性表達[14-15]。GSK-3β可對β-catenin氨基端進行磷酸化，此外，GSK-3β蛋白當被其上游激酶降解磷酸化后，可抑制Wnt/β-catenin信號通路表達[16]。

本研究結(jié)果顯示，新生兒臍血中Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β水平在LGA組、AGA組及FGR組中依次呈降低趨勢，與新生兒生長參數(shù)降低趨勢一致。因此，本研究推測Wnt/β-catenin信號通路相關(guān)蛋白表達與FGR新生兒生長參數(shù)存在一定的相關(guān)性。為進一步驗證這一推測，本研究相關(guān)性結(jié)果顯示，F(xiàn)GR新生兒臍血中Wnt7a、Axin2及GSK-3β水平與新生兒生長參數(shù)呈正相關(guān)，提示W(wǎng)nt/β-catenin信號通路的激活可促進新生兒的生長發(fā)育，而FGR新生兒的生長發(fā)育受限與Wnt/β-catenin信號通路被抑制有關(guān)。分析原因可能是：該通路的活性在FGR發(fā)生發(fā)展過程中逐漸沉默，導致許多印跡控制區(qū)DNA甲基化丟失，染色質(zhì)抑制因子的缺失和反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的激活，導致胚胎干細胞分化受損，進而難以維持胚胎干細胞的穩(wěn)態(tài)，導致FGR新生兒生長發(fā)育受限，具體生物學作用機制有待進一步深入研究。

綜上所述，與正常新生兒相比，F(xiàn)GR新生兒生長發(fā)育受限，可能與Wnt/β-catenin信號通路活性降低有關(guān)。