藜麥復(fù)合物調(diào)控SIRT1/PGC-1α通路改善糖尿病小鼠肝細(xì)胞損傷

胡媛媛 姜廣建 祝嘉健 暴雪麗 連娟 段小華 劉羽桐 劉佳賢

〔摘要〕 目的 基于SIRT1/PGC-1α通路探討不同藜麥含量的藜麥復(fù)合物對糖尿病小鼠肝損傷的防治作用。方法 將23只雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為正常對照組（ZC，n=6）、模型組（MX，n=6）、藜麥復(fù)合物1組（LM1，n=6）、藜麥復(fù)合物2組（LM2，n=5）。采用高脂飲食聯(lián)合鏈脲佐菌素誘導(dǎo)建立2型糖尿病小鼠模型。給藥12周后，全自動生化儀檢測血清甘油三酯（triglyceride， TG）、總膽固醇（total cholesterol， TC）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase， ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase， AST）、空腹血糖（fasting blood glucose， FBG）、空腹胰島素（fasting insulin， FINS）含量，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)（insulin resistance index， IRI）。免疫組化及Western blot測定肝臟組織中沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information regulator 1， SIRT1）和過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α， PGC-1α）蛋白的表達(dá)水平;HE染色檢測肝臟病理變化。結(jié)果 與ZC組比較，MX組ALT、AST、TC、FBG含量及IRI均升高（P<0.01或P<0.05），TG、FINS含量均有升高趨勢（P>0.05）。與MX組比較，LM1組AST、TG、FBG、FINS含量及IRI明顯降低（P<0.01或P<0.05）;LM2組ALT、AST、FBG、FINS含量及IRI明顯降低（P<0.01或P<0.05）。病理結(jié)果顯示MX組小鼠肝細(xì)胞呈明顯脂肪病變，局灶性壞死并伴有炎性細(xì)胞浸潤;LM1和LM2組可見脂肪空泡和炎性細(xì)胞不同程度上明顯減少，細(xì)胞壞死損傷減輕，肝細(xì)胞病變程度顯著輕于MX組，其中LM2組改善最明顯。免疫組化與Western blot結(jié)果均顯示，與ZC組比較，MX組肝臟組織SIRT1及PGC-1α蛋白表達(dá)水平明顯降低（P<0.01或P<0.05））;與MX組比較，LM1及LM2組PGC-1α蛋白表達(dá)明顯升高（P<0.01或P<0.05）。免疫組化結(jié)果顯示，LM1組SIRT1的蛋白表達(dá)水平明顯升高（P<0.05）。結(jié)論 藜麥復(fù)合物可能通過促進(jìn)SIRT1/PGC-1α的表達(dá)來改善胰島素抵抗和糖脂代謝紊亂，從而減輕糖尿病肝損傷，且含量更高的藜麥復(fù)合物治療效果更為顯著。

〔關(guān)鍵詞〕 糖尿病;肝損傷;非酒精性脂肪肝;沉默信息調(diào)節(jié)因子1;過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α;藜麥復(fù)合物

〔中圖分類號〕R259 ? ? ? 〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A ? ? ? ?〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2021.12.009

Quinoa Compound Regulates SIRT1/PGC-1α Pathway to Ameliorate Hepatocellular

Injury in Diabetic Mice

HU Yuanyuan1， JIANG Guangjian1， ZHU Jiajian1， BAO Xueli2， LIAN Juan1， DUAN Xiaohua3， LIU Yutong3， LIU Jiaxian4*

（1. College of Traditional Chinese Medicine， Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100029， China; 2. The Third Affiliated Hospital， Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100029， China; 3. Gansu Chunjie Plateau Agricultural Science and Technology Co.， Ltd， Wuwei， Gansu 730000， China; 4. Beijing Zhongli Biological Technology Co.， Ltd， Beijing 101200， China）

〔Abstract〕 Objective Based on the SIRT1/PGC-1α pathway to explore the preventive and therapeutic effects of quinoa compound with different quinoa content on liver injury in diabetic mice. Methods A total of 23 male C57BL/6J mice were randomly divided into four groups： normal control group （ZC， n=6）， model group （MX， n=6）， quinoa compound 1 group （LM1， n=6）， quinoa compound 2 group （LM2， n=5）. A high-fat diet combined with streptozotocin was used to establish a type 2 diabetic mice model. After 12 weeks of drug administration， the levels of triglyceride （TG）， total cholesterol （TC）， alanine aminotransferase （ALT）， aspartate aminotransferase （AST）， fasting blood glucose （FBG） and fasting insulin （FINS） were measured by automatic biochemical analyzer， and then the insulin resistance index （IRI） was calculated. The protein expression levels of silent information regulator 1 （SIRT1） and peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α （PGC-1α） were determined by immunohistochemistry and Western blot， and the pathological changes of liver tissues were detected by HE staining. Results Compared with the ZC group， the MX group showed an increase in serum ALT， AST， TC， FBG and IRI （P<0.01 or P<0.05）， TG and FINS contents showed an increasing trend （P>0.05）. Compared with the MX group， the levels of AST， TG， FBG， FINS and IRI in the LM1 group were all significantly decreased （P<0.01 or P<0.05）; the levels of ALT， AST， FBG， FINS and IRI in LM2 group were significantly decreased （P<0.01 or P<0.05）. Pathological results showed that liver cells in MX group showed obvious fatty lesion， focal necrosis and inflammatory cell infiltration. In LM1 group and LM2 group， fat vacuoles and inflammatory cells were significantly reduced to varying degrees， cell necrosis and injury were alleviated， and the degree of hepatocellular lesion was significantly lighter than that in MX group， among which the improvement was most obvious in LM2 group. Immunohistochemical and Western blot results showed that SIRT1 and PGC-1α protein expression levels were significantly decreased in MX group compared with ZC group （P<0.01 or P<0.05）; compared with MX group， the expression of PGC-1α in LM1 group and LM2 group was significantly increased （P<0.01 or P<0.05）. Immunohistochemical results showed that the protein expression level of SIRT1 in LM1 group was significantly increased （P<0.05）. Conclusion The quinoa compound may alleviate diabetic liver injury by ameliorating insulin resistance and glycolipid metabolism disorders by promoting the expression of SIRT1/PGC-1α， and the effect was more significant with higher quinoa content.

〔Keywords〕 diabetes; liver injury; nonalcoholic fatty liver disease; silent information regulator 1; peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α; quinoa compound

糖尿病（diabetes mellitus， DM）已成為全球最具挑戰(zhàn)性的公共衛(wèi)生問題之一，到2045年全球DM發(fā)生預(yù)計(jì)將達(dá)到7億[1]。越來越高的患病率和死亡率要求更有效的治療藥物，尤其是DM并發(fā)癥，DM肝損傷是近年來引起重視的DM主要并發(fā)癥。2型DM的主要致病基礎(chǔ)為胰島素抵抗造成的糖脂代謝紊亂，作為糖脂代謝重要靶器官的肝臟主要表現(xiàn)為非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）病變。研究證實(shí)，沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information regulator 1， SIRT1）和過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α， PGC-1α）與糖脂代謝關(guān)系密切，并參與體內(nèi)脂肪酸和葡萄糖的合成、代謝和輸出，在DM肝損傷發(fā)病過程中起著重要作用[2-3]。除了應(yīng)用常規(guī)藥物治療DM外，選擇低血糖生成指數(shù)食物也是DM患者控制血糖的關(guān)鍵性措施之一，可有效降低DM并發(fā)癥的發(fā)生率。

藜麥性溫味苦，是莧科藜屬一年生雙子葉植物[4]。研究表明，藜麥屬于低血糖生成指數(shù)食物，可有效降低碳水化合物的水解及葡萄糖的生物利用率、降低總膽固醇及低密度脂蛋白濃度，具有降低血糖、抑制肥胖、抗氧化、抗炎、抗腫瘤等重要作用[4-7]。葛根是一種常見的“藥食同源”植物，為豆科植物野葛的干燥根?！吨腥A人民共和國藥典》[8]記載：“葛根味甘、辛，性涼，具有解肌退熱、透疹、生津止渴等功效，主治外感發(fā)熱，麻疹不透，陰虛消渴等癥?！笔w麥亦是一種“藥食同源”作物，為蓼科蕎麥屬雙子葉植物?！侗静菥V目·谷部·蕎麥》記載：“蕎麥……甘、平、寒、無毒……降氣寬腸，磨積滯，消熱腫風(fēng)痛，除白濁白帶，脾積泄瀉?！?/p>

本研究采用高脂高糖飲食結(jié)合鏈尿佐菌素（streptozotocin， STZ）誘導(dǎo)建立2型DM小鼠模型，探討不同藜麥含量的藜麥復(fù)合物對DM肝損傷的作用及其對肝臟組織中SIRT1及PGC-1α表達(dá)的影響。

1 材料與方法

1.1 ?實(shí)驗(yàn)動物和飼料

23只8周齡雄性C57BL/6J小鼠，體質(zhì)量（22±2） g，購自北京斯貝弗生物技術(shù)有限公司，動物許可證號：SCXK（京）2016-0002。動物飼養(yǎng)于北京中醫(yī)藥大學(xué)SPF級動物房，可隨意飲用自來水和食物。光/暗循環(huán)為12 h/12 h，室溫控制在（23±2） ℃，相對濕度為（55±10）%。高脂飲食（MD12032）和標(biāo)準(zhǔn)飲食（MD12031）均來自江蘇醫(yī)藥生物醫(yī)學(xué)有限公司。本實(shí)驗(yàn)均符合北京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物倫理學(xué)相關(guān)規(guī)定的要求。

1.2 ?實(shí)驗(yàn)藥物

藜麥（批號：SC10162062300206）、蕎麥（批號：SC10162062300206）均購于甘肅純潔高原農(nóng)業(yè)科技有限公司，葛根購于北京同仁堂藥材有限公司。藜麥復(fù)合物1：藜麥50%+葛根10%+蕎麥10%。藜麥復(fù)合物2：藜麥占比70%+葛根10%+蕎麥10%，其余成分均需保密。藜麥復(fù)合物1和藜麥復(fù)合物2的制備在北京中醫(yī)藥大學(xué)DM研究中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。用電動攪拌機(jī)將藜麥、葛根、蕎麥等成分打成粉末按比例混合，制作成標(biāo)準(zhǔn)鼠糧大小的食物，4 ℃儲存。

1.3 ?主要試劑及儀器

STZ（批號：S0130）購自美國Sigma公司;PGC-1α（批號：10004320）、SIRT1（批號：00077161）抗體均購自美國Proteintech公司;BCA蛋白定量檢測試劑盒（批號：CR2101016）購于武漢塞維爾生物科技有限公司;DAB顯色試劑盒（批號：2010A1201）、兔二步法檢測試劑盒（批號：2004B1209）、小鼠二步法檢測試劑盒（批號：2023B1124）均購于北京中杉金橋公司;蘇木素染色液（批號：20190909）、伊紅染色液（批號：20190318）均購自北京索萊寶生物科技有限公司;全自動生化儀（型號：BS-420，深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）;輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)（型號：RM 2255，德國Leica Biosystems公司）;全自動多功能酶標(biāo)儀（型號：FLUOstar Omega，德國BMG Labtech公司）。

1.4 ?動物分組與處理

適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機(jī)選取6只小鼠作正常對照組（ZC），繼續(xù)以標(biāo)椎飼料飼養(yǎng)。在文獻(xiàn)[9]的基礎(chǔ)上略作修改復(fù)制動物模型：高脂飼料喂養(yǎng)4周后，禁食12 h，給予一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（100 mg/kg）。ZC組予以同體積檸檬酸緩沖液。在第5周和第6周通過尾靜脈取血測定小鼠的空腹血糖。2次空腹血糖水平均不低于11.1 mmol/L的小鼠視為造模成功的DM小鼠[10]。將DM小鼠隨機(jī)劃分為模型組（MX，高脂飼料，n=6），藜麥復(fù)合物1組（LM1，藜麥復(fù)合物1，n=6），藜麥復(fù)合物2組（LM2，藜麥復(fù)合物2，n=5），繼續(xù)喂養(yǎng)12周，期間自由飲食飲水。

1.5 ?標(biāo)本采集

實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將所有小鼠禁食不禁水處理12 h，摘眼球取血，迅速分離血清，保存于-80 ℃冰箱用于生化指標(biāo)檢測;切取肝臟，部分固定于4%多聚甲醛溶液用于病理切片，剩余肝臟組織置于液氮中冷凍后保存在-80 ℃冰箱用于后續(xù)蛋白檢測等。

1.6 ?觀察指標(biāo)

1.6.1 ?血清生化指標(biāo)測定 ?采用全自動生化儀測定血清甘油三酯（triglyceride， TG）、總膽固醇（total chol?

esterol， TC）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，

ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase， AST）、空腹血糖（fasting blood glucose， FBG）及空腹胰島素（fasting insulin， FINS）含量;胰島素抵抗指數(shù)（insulin resistance index， IRI）=空腹血糖×空腹胰島素/22.5[11]。

1.6.2 ?肝臟組織病理學(xué)檢查 ?肝臟組織常規(guī)固定脫水、透明、包埋、切片，行蘇木素-伊紅染色，光鏡下觀察肝臟病理形態(tài)學(xué)改變。

1.6.3 ?免疫組織化學(xué)觀察肝臟組織中SIRT1、PGC-1α蛋白的表達(dá) ?肝臟組織切片，脫蠟，抗原修復(fù)，山羊血清封閉1 h，加入一抗[PGC-1α（1∶200）、SIRT1（1∶200）]，4 ℃過夜，室溫下滴加聚合物輔助劑孵育30 min，PBS洗滌之后滴加二抗，室溫下孵育30 min，DAB顯色，蘇木素復(fù)染，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。拍照，并采用Image Pro Plus v6.0軟件測定SIRT1、PGC-1α的平均積分光密度值。

1.6.4 ?Western blot檢測肝臟組織中SIRT1、PGC-1α蛋白的表達(dá) ?取50 mg凍存的肝臟組織，加入1 mL RIPA裂解液提取總蛋白，12 000 r/min離心10 min（離心半徑為6.5 cm），收集上清液即為總蛋白溶液，使用BCA蛋白定量檢測試劑盒測定蛋白濃度。各組取40 μg蛋白量上樣，轉(zhuǎn)膜至PVDF膜上。將膜封閉1 h后，加入一抗[SIRT1（1∶800）、PGC-1α（1∶5000）] 4 ℃過夜，洗膜，相應(yīng)二抗（1∶5000）室溫孵育1 h，顯色，拍片。采用ImageJ對圖像進(jìn)行分析，灰度值以IntDen表示，將目的蛋白與內(nèi)參灰度值的比值作為蛋白的表達(dá)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.7 ?統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)資料采用GraphPad Prism 8.0.2統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用“x±s”表示，對正態(tài)分布、方差齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析檢驗(yàn)（One-Way ANOVA），對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行非參數(shù)（Kruskal-Wallis）檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ?藜麥復(fù)合物對DM小鼠肝功能、糖脂代謝及胰島素抵抗的影響

與ZC組比較，MX組ALT、AST、TC、FBG含量及IRI均升高（P<0.01或P<0.05），TG、FINS含量均有升高趨勢（P>0.05）。與MX組比較，LM1組AST、TG、FBG、FINS含量及IRI均降低（P<0.01或P<0.05），ALT、TC含量均有降低趨勢（P>0.05）;LM2組ALT、AST、FBG、FINS含量及IRI均降低（P<0.01或P<0.05），TG、TC含量均有降低趨勢（P>0.05）。見表1-2。

2.2 ?藜麥復(fù)合物對DM小鼠肝臟形態(tài)學(xué)改變的影響

HE染色結(jié)果顯示，ZC組小鼠肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞呈多邊形，大小形態(tài)一致;MX組小鼠肝細(xì)胞呈明顯脂肪病變，可見肝細(xì)胞體積增大，部分細(xì)胞核變型和核偏位，局灶性壞死，壞死區(qū)和匯管區(qū)可見程度不一的炎性細(xì)胞浸潤;LM1和LM2組可見脂肪空泡和炎性細(xì)胞不同程度上明顯減少，細(xì)胞壞死損傷減輕，肝細(xì)胞病變程度顯著輕于MX組，其中LM2組改善最明顯。見圖1。

2.3 ?免疫組織化學(xué)法檢測DM小鼠肝臟組織中SIRT1和PGC-1α蛋白的表達(dá)

與ZC組比較，MX組肝臟組織SIRT1及PGC-1α表達(dá)水平均降低（P<0.01）。與MX組比較，LM1及LM2組SIRT1及PGC-1α表達(dá)均升高（P<0.01或P<0.05）。見圖2。

2.4 ?Western blot檢測DM小鼠肝臟組織中SIRT1和PGC-1α蛋白的表達(dá)

與ZC組比較，MX組小鼠肝臟組織的SIRT1和PGC-1α蛋白表達(dá)水平降低（P<0.01或P<0.05）。與MX組比較，LM1組PGC-1α的蛋白表達(dá)升高（P<0.05），SIRT1的蛋白表達(dá)水平有升高趨勢（P>0.05）;LM2組SIRT1和PGC-1α的蛋白表達(dá)水平均升高（P<0.01或P<0.05）。見圖3。

3 討論

DM屬中醫(yī)學(xué)“消渴病”范疇，“消渴”又稱“消癉”“消中”“肺消”。中醫(yī)學(xué)多認(rèn)為消渴病的病機(jī)主要在于陰津虧損（陰虛為本）、燥熱偏勝（燥熱為標(biāo)），病位主在肺、胃、腎[12]。因此，多以滋陰法或滋陰益氣法論治消渴病。葛根“主治消渴身大熱者，從胃府而宣達(dá)水谷之津”，可直接生津液，而補(bǔ)胃陰以治消渴?！鹅`樞·五變》認(rèn)為“五藏皆柔弱者，善病消癉”，指出五臟功能虛弱易致“消渴”，而蕎麥“續(xù)精神，煉五臟滓穢”，可增強(qiáng)五臟功能以防治消渴。古代中醫(yī)更有“五谷為養(yǎng)”“精生于谷”的思想，藜麥可通過養(yǎng)護(hù)五臟之精，以達(dá)到防治疾病的功效?，F(xiàn)代藥理研究顯示，葛根素為葛根的主要活性成分，具有抗炎、解熱、降血壓、降血脂、降血糖、抗癌、保肝等藥理作用，臨床廣泛應(yīng)用于高血壓、DM及其并發(fā)癥、心腦血管疾病、腫瘤、炎癥等方面[13];蕎麥營養(yǎng)價值豐富，含有其他禾谷類糧食缺乏的黃酮類生物活性成分，具有抗炎、降血糖、降血脂、抗腫瘤、抗癌等功能，可用于治療高血壓、DM、炎癥、腫瘤等疾病[14-15];藜麥富含多不飽和脂肪酸，其中歐米伽3脂肪酸含量很高，不僅能促進(jìn)腦細(xì)胞和神經(jīng)的發(fā)育，還能顯著降低甘油三酯和血膽固醇，增加胰島組織β細(xì)胞活性，廣泛用于抑制高血壓、高血脂、DM等疾病[16]?；诖耍x擇以復(fù)合物的形式進(jìn)行干預(yù)，起到協(xié)同增效的作用。

已知2型DM與肝損傷有著復(fù)雜的聯(lián)系，其引起的肝損傷以NAFLD最為常見。NAFLD現(xiàn)已被公認(rèn)為全球最常見的慢性肝病，是一種以肝臟脂肪沉積過多為特征的疾病狀態(tài)[17]。NAFLD常見于2型DM和肥胖癥患者，與胰島素抵抗和血脂異常密切相關(guān)。已證實(shí)NAFLD的發(fā)展過程與許多代謝因素相關(guān)，但仍未知該疾病的具體發(fā)病機(jī)制[18]。研究發(fā)現(xiàn)藜麥[19-21]、葛根[22]能夠改善胰島素抵抗和糖脂代謝紊亂。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，DM會引起小鼠肝損傷，表現(xiàn)為血清ALT、AST水平顯著升高（P<0.01）和典型肝臟組織病理學(xué)改變。同時，藜LM1和LM2可不同程度降低血清AST、FGB、FINS含量及IRI（P<0.01或P<0.05），改善胰島素抵抗和糖脂代謝紊亂。HE染色結(jié)果顯示藜麥復(fù)合物能夠減輕肝細(xì)胞脂肪樣變性和炎性細(xì)胞浸潤，其中藜麥含量更高的LM2更能改善DM小鼠肝損傷。

SIRT1是一類腺嘌呤二核苷酸依賴性去乙?；?，已被證明與NAFLD的病理生理相關(guān)[2]。SIRT1參與各種細(xì)胞生理過程，例如維持脂質(zhì)和葡萄糖的穩(wěn)態(tài)，是代謝的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。該酶在肝臟中高度表達(dá)，抑制SIRT1會上調(diào)糖異生和脂肪生成相關(guān)基因的表達(dá)，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)糖脂質(zhì)代謝紊亂[23]。研究發(fā)現(xiàn)SIRT1蛋白的表達(dá)在胰島素抵抗DM和NAFLD患者中均降低[24]。可通過增加SIRT1的表達(dá)，改善胰島素抵抗進(jìn)而減輕氧化應(yīng)激達(dá)到治療NAFLD的效果[25]。研究表明[26]，過表達(dá)SIRT1可通過PGC-1α轉(zhuǎn)導(dǎo)通路改善脂質(zhì)代謝。PGC-1α活性受SIRT1的調(diào)節(jié)，并且二者都是維持細(xì)胞能量穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵[27]。因此，SIRT1/PGC-1α可能是肝損傷的關(guān)鍵靶點(diǎn)。PGC-1α是一種核轉(zhuǎn)錄共激活因子，研究表明[3]，在糖脂質(zhì)代謝過程中PGC-1α與胰島素抵抗、肝糖原異生和脂肪酸代謝關(guān)系密切，并且通過影響線粒體呼吸的關(guān)鍵酶在能量代謝中發(fā)揮重要作用，并且這些已經(jīng)被公認(rèn)是參與NAFLD的重要發(fā)生機(jī)制。體外實(shí)驗(yàn)亦證實(shí)可通過上調(diào)SIRT1/PGC-1α蛋白的表達(dá)，改善NAFLD[28]。

本研究結(jié)果提示藜麥復(fù)合物可能通過上調(diào)SIRT1和PGC-1α蛋白的表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)肝臟糖脂質(zhì)代謝，改善胰島素抵抗，從而發(fā)揮對肝臟的保護(hù)作用，改善DM肝損傷。且藜麥含量更高的藜麥復(fù)合物2對DM肝損傷的保護(hù)作用更為顯著。

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〔收稿日期〕2021-09-17

〔基金項(xiàng)目〕國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81774171）;北京中醫(yī)藥大學(xué)橫向課題（2180071720024）。

〔作者簡介〕胡媛媛，女，在讀碩士研究生，研究方向：中西醫(yī)結(jié)合防治糖尿病。

〔通信作者〕*劉佳賢，男，碩士，助理研究員，E-mail：Jiaxian-Liujxliu89@gmail.com。