淺談?dòng)衩灼贩N檢驗(yàn)的方法

高珊 李成軍 盧凌霄 苗艷玲 劉雪利 呂小飛

摘 ? ?要：種子檢驗(yàn)是指按照規(guī)定的種子檢驗(yàn)程序確定種子一個(gè)或多個(gè)質(zhì)量特性的操作過程。保障種子生產(chǎn)的安全性，實(shí)現(xiàn)農(nóng)作物增產(chǎn)、農(nóng)民增收，維護(hù)農(nóng)業(yè)和諧穩(wěn)定發(fā)展，需要對(duì)種子優(yōu)化檢驗(yàn)流程，從源頭上提高種子質(zhì)量。論述了室內(nèi)檢驗(yàn)田間檢驗(yàn)方法以及做好玉米種子質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)的對(duì)策，希望能為廣大農(nóng)業(yè)工作者提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：種子;玉米;檢驗(yàn)

文章編號(hào)：1005-2690（2021）19-0125-02 ? ? ? 中國圖書分類號(hào)：S513 ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

玉米是我國的重要糧食飼料作物，關(guān)系到國民經(jīng)濟(jì)的戰(zhàn)略資源。當(dāng)前我國玉米種植面積在3 000萬 hm2以上。隨著玉米產(chǎn)業(yè)市場化、商業(yè)化的推進(jìn)，很多個(gè)人和企業(yè)都從事玉米育種的研究和種子生產(chǎn)工作。由于玉米種植能產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)效益，造成很多經(jīng)營者在育種的過程中投機(jī)取巧，因?yàn)橛衩灼贩N間遺傳特性的差異較小，使得外觀形態(tài)難以區(qū)分玉米的品種。還有些企業(yè)在售種中利用劣質(zhì)玉米品種充當(dāng)優(yōu)良品種，給種子市場和糧食生產(chǎn)造成巨大的安全隱患。

1 ? 種子檢驗(yàn)的意義

①能夠在種子檢驗(yàn)的基礎(chǔ)上更準(zhǔn)確地判斷種子的利用價(jià)值，以便篩選出符合國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的玉米品種，淘汰質(zhì)量較差的品種，提高玉米產(chǎn)量。②有助于提高玉米種子的生命活力。通過有序開展種子發(fā)芽試驗(yàn)、凈度試驗(yàn)、基因組分析等一系列檢測工作，推動(dòng)相關(guān)企業(yè)狠抓種子質(zhì)量，篩選出具有優(yōu)良性狀的種子，進(jìn)而提升玉米產(chǎn)量。③可在因種子質(zhì)量問題引起的糾紛上起到積極作用。一旦檢驗(yàn)出不符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的種子，可以在第一時(shí)間阻止其流入市場。同時(shí)在發(fā)生質(zhì)量糾紛問題時(shí)，種子檢驗(yàn)是最有效的解決方法。④種子產(chǎn)業(yè)已國際化，種子檢驗(yàn)在國際貿(mào)易中占據(jù)重要地位。通過種子檢驗(yàn)，能夠篩選出符合國際質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的品種。⑤為行政執(zhí)法提供依據(jù)，相關(guān)質(zhì)檢部門定期會(huì)對(duì)種子企業(yè)進(jìn)行抽樣檢查。

在國際貿(mào)易中，檢驗(yàn)新品種的特異性、穩(wěn)定性是一項(xiàng)重要的工作，一般由UPOV統(tǒng)一采用DUS測定。我國一般采用田間小區(qū)鑒定和室內(nèi)檢驗(yàn)方法。田間檢驗(yàn)是控制品種真實(shí)性與純度最基礎(chǔ)有效的技術(shù)手段。雖然田間品種純度符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，但在后期收獲、加工等過程中，難免存在不同品種混雜的情況。因此，還需要對(duì)種子真實(shí)性和純度進(jìn)行室內(nèi)檢測。

2 ? 品種檢驗(yàn)的方法

品種檢驗(yàn)方法有很多，根據(jù)原理可分為形態(tài)鑒定法、生理生化鑒定法、物理化學(xué)鑒定法、細(xì)胞學(xué)鑒定法、分子生物學(xué)鑒定法。根據(jù)檢驗(yàn)不同對(duì)象可分為種子測定以及幼苗測定植株測定。除此之外，根據(jù)場所可分為室內(nèi)檢驗(yàn)、田間小區(qū)種植鑒定和田間鑒定。

2.1 ? 形態(tài)鑒定法

形態(tài)鑒定法可分為3類：種子形態(tài)、幼苗形態(tài)、植株形態(tài)。種子形態(tài)又稱為籽粒形態(tài)，其鑒定是依據(jù)種子外形輪廓及顏色、種子頂部形狀及顏色、種子胚胎部位大小、種子色澤及程度等進(jìn)行逐粒觀測。這些特點(diǎn)主要由品種遺傳基因的差異決定，這種方法雖然省時(shí)、簡便、快速、直觀，但卻易受人為因素干擾，準(zhǔn)確度低，因此在市場執(zhí)法檢驗(yàn)中使用較少。

2.2 ? 幼苗形態(tài)鑒定法

幼苗形態(tài)鑒定是根據(jù)幼苗芽鞘部位顏色、子葉顏色、形狀、大小來判別品種。這種方法雖然易操作、成本低，但容易受環(huán)境等因素影響，且幼苗特異性狀少，所以應(yīng)用較少。

2.3 ? 生理生化鑒定法

生理生化鑒定法是根據(jù)種子的生理生化反應(yīng)和生理生化技術(shù)實(shí)現(xiàn)品種檢測。它是使用電泳技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)測定品種的蛋白質(zhì)或同工酶的分析。

2.4 ? 物理化學(xué)鑒定法

物理化學(xué)鑒定法分為物理鑒定和化學(xué)鑒定。物理鑒定法分為熒光鑒別法和煮沸鑒別法?；瘜W(xué)鑒定法是根據(jù)種子在化學(xué)反應(yīng)中表現(xiàn)的不同特性來實(shí)現(xiàn)品種鑒定，如碘化鉀染色法和苯酚顏色法。但這兩種方法可以鑒別的種子品種有限，所以在市場中應(yīng)用較少。

2.5 ? 分子生物學(xué)鑒定法

分子生物學(xué)鑒定法是在分子水平上根據(jù)DNA或RNA之間的差異進(jìn)行鑒定。較為常用的方法有以PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的簡單重復(fù)序列（SSR）、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性（RAPD）、以雜交為基礎(chǔ)的限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）、擴(kuò)增片段長度多態(tài)（AFLP），其共同的特點(diǎn)是不受環(huán)境、組織器官的影響，檢測結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定，重復(fù)性高。由于分子生物學(xué)檢測方法有諸多優(yōu)點(diǎn)，越來越多的種子企業(yè)利用DNA分子標(biāo)記技術(shù)開展品種純度和真實(shí)性鑒定，其中SSR是應(yīng)用最廣泛的DNA分子標(biāo)記技術(shù)。

2.5.1 ? SSR標(biāo)記的原理和特點(diǎn)

SSR是由幾個(gè)核苷酸串聯(lián)重復(fù)而成，大小在100 bp以內(nèi)的DNA片段SSR標(biāo)記成共顯性遺傳，其可辨別出雜交種子的雜合體和純合體，結(jié)果穩(wěn)定性和重復(fù)性高，是目前應(yīng)用最廣泛的分子標(biāo)記技術(shù)。

2.5.2 ? SSR分子標(biāo)記在鑒定品種真實(shí)性和純度上的優(yōu)點(diǎn)

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，分子生物學(xué)技術(shù)已逐步應(yīng)用于玉米種子的檢測中。SSR分子標(biāo)記更易觀測遺傳多樣性，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用。具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)。

①標(biāo)記數(shù)量多，所提供信息量大，準(zhǔn)確度高。②SSR標(biāo)記具有共顯性的特點(diǎn)，一個(gè)標(biāo)記大多具有幾個(gè)等位基因，能在不同品系間獲得多態(tài)性標(biāo)記位點(diǎn)，所以適合雜交種的純度鑒定。③SSR標(biāo)記操作過程簡單，3 h就可以取得鑒定結(jié)果。④SSR分子鑒定費(fèi)用相對(duì)較低，一般分子實(shí)驗(yàn)室有能力購買設(shè)備并開展工作。⑤整個(gè)操作過程在室內(nèi)完成，不受季節(jié)、環(huán)境等因素影響。

應(yīng)用20個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)對(duì)59個(gè)日本粳稻品種的多樣性進(jìn)行分析[1]。結(jié)果表明，17個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)可以區(qū)分59個(gè)品種，大部分品種利用5個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)，能夠加以鑒定，篩選出一批具有較高多態(tài)性的水稻親本上的SSR引物，并與田間鑒定結(jié)果比較[2]。試驗(yàn)表明，SSR鑒定結(jié)果和田間鑒定結(jié)果無明顯差異，SSR標(biāo)記法可以用于雜交水稻純度鑒定。

3 ? 做好種子質(zhì)量檢驗(yàn)的策略

3.1 ? 完善種子檢驗(yàn)平臺(tái)

種子質(zhì)量與其自身的凈度、純度、發(fā)芽率、水分等有密切關(guān)系。想要培育出優(yōu)質(zhì)、高效、高產(chǎn)的玉米，必須要確保品種的優(yōu)質(zhì)性。目前，種子檢驗(yàn)主要是檢驗(yàn)種子質(zhì)量，對(duì)于種子品質(zhì)并不太注重。如果想要得到優(yōu)良品質(zhì)的種子，就需要加強(qiáng)種子檢驗(yàn)內(nèi)容，加快建立質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)體系，強(qiáng)化種子質(zhì)量和品質(zhì)等多項(xiàng)工作的檢驗(yàn)流程，以促進(jìn)優(yōu)質(zhì)種子的培育種植。種子檢驗(yàn)平臺(tái)主要負(fù)責(zé)對(duì)種子質(zhì)量進(jìn)行抽樣檢查和檢驗(yàn)相關(guān)工作，并提供種子質(zhì)量咨詢和培訓(xùn)等服務(wù)。為了使種子質(zhì)量檢驗(yàn)監(jiān)督能夠長期化、廣泛化，需要加大資金投入力度，對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行改造升級(jí)，同時(shí)參考國內(nèi)外寶貴經(jīng)驗(yàn)，提升種子質(zhì)量和品質(zhì)的檢驗(yàn)效率。

3.2 ? 提升種子檢驗(yàn)技術(shù)研究

從種子生產(chǎn)到種植需要經(jīng)過許多工作流程，所以種子經(jīng)常會(huì)成為病蟲害跨地區(qū)傳播的載體。先進(jìn)的檢驗(yàn)技術(shù)和儀器可以保證種子檢驗(yàn)質(zhì)量。

在技術(shù)方面，一是要掌握和種子健康檢測有關(guān)的技術(shù);二是要研究種子健康度、發(fā)芽率以及玉米產(chǎn)量之間的關(guān)系;三是要防治當(dāng)?shù)爻Ｒ姷牟∠x害。在儀器方面，先進(jìn)的檢驗(yàn)儀器能夠提高種子檢驗(yàn)結(jié)果的精準(zhǔn)度，同時(shí)能夠減少檢驗(yàn)時(shí)間，提高使用效率。在經(jīng)費(fèi)允許的前提下，要淘汰老舊設(shè)備，并定期校核檢驗(yàn)儀器[3]。

在人員方面，技術(shù)人員的能力和素質(zhì)對(duì)種子檢驗(yàn)質(zhì)量有直接影響。要想打造一支高素質(zhì)、綜合能力強(qiáng)的團(tuán)隊(duì)。首先，要提高技術(shù)人員的專業(yè)能力，讓技術(shù)人員熟練掌握檢驗(yàn)技術(shù)，熟練設(shè)備檢驗(yàn)操作[4];其次，要加強(qiáng)培訓(xùn)，不斷地為技術(shù)人員提供新的技術(shù)方法，讓技術(shù)人員能夠掌握先進(jìn)的技術(shù)，又促進(jìn)技術(shù)人員之間的學(xué)術(shù)探討和溝通;最后，要充分激發(fā)技術(shù)人員的積極性和創(chuàng)造性，創(chuàng)新工作方式方法，提高工作效率。

3.3 ? 控制好玉米種子的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)

種子的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)是衡量種子生產(chǎn)安全性的重要措施。在檢驗(yàn)過程中，只有符合標(biāo)準(zhǔn)的種子才能夠投入市場，但這一標(biāo)準(zhǔn)與品種優(yōu)良無關(guān)。在檢驗(yàn)過程中，發(fā)現(xiàn)企業(yè)銷售沒有審批的品種，檢驗(yàn)人員要及時(shí)上報(bào)給當(dāng)?shù)胤N子管理部門，要嚴(yán)禁管理在市面上流通的不符合規(guī)定的種子，防止農(nóng)民遭受經(jīng)濟(jì)損失。在抽檢過程中，發(fā)現(xiàn)純度、質(zhì)量等不符合規(guī)定的種子，應(yīng)及時(shí)與檢驗(yàn)部門和企業(yè)聯(lián)系，責(zé)令其整改。技術(shù)人員只有嚴(yán)格遵守操作流程，才能更好地開展檢驗(yàn)工作，確保種子質(zhì)量。同時(shí)，種子生產(chǎn)企業(yè)和科研院所應(yīng)研究與優(yōu)化檢驗(yàn)方式方法，這樣才能更高效地檢驗(yàn)種子質(zhì)量。從檢驗(yàn)方法上看，室內(nèi)檢驗(yàn)主要是檢驗(yàn)發(fā)芽率、水分、純度、基因工程等，室外檢驗(yàn)主要是檢驗(yàn)玉米種植純度[5]。

總之，玉米種子檢驗(yàn)對(duì)于種業(yè)生產(chǎn)至關(guān)重要，其既有利于相關(guān)企業(yè)更好地生產(chǎn)經(jīng)營種子，也為政府開展種子質(zhì)量監(jiān)督工作提供幫助，同時(shí)保障農(nóng)民收入和市場質(zhì)量安全。品種真實(shí)性和純度是檢驗(yàn)玉米種子質(zhì)量的重要指標(biāo)。因品種真實(shí)性和純度問題造成大規(guī)模檢查，不僅侵害了農(nóng)民的利益，而且還影響了社會(huì)的穩(wěn)定。目前我國種子經(jīng)營主體眾多，市場監(jiān)管技術(shù)較為落后，假冒偽劣種子絡(luò)繹不絕，套牌侵權(quán)問題日趨嚴(yán)重，種子市場秩序較為混亂。分子生物學(xué)檢測技術(shù)為解決這類問題提供了有效的解決方法，加快研發(fā)和應(yīng)用分子檢測技術(shù)是當(dāng)前種子安全管理工作的緊迫任務(wù)。

參考文獻(xiàn)：

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