環(huán)境檢測中檢測方法驗證工作研究

文秋紅

文秋紅湖南華中宏泰檢測評價有限公司

1 前言

生態(tài)環(huán)境檢驗檢測機構(gòu)對外出具具有證明作用的數(shù)據(jù)和結(jié)果時，應(yīng)該依照《檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定能力評價檢驗檢測機構(gòu)通用要求》（RB∕T 214—2017）和《檢驗檢測機構(gòu)管理和技術(shù)能力評價生態(tài)環(huán)境監(jiān)測要求》（RB∕T 041—2020）中的相關(guān)要求申請資質(zhì)認(rèn)定能力評價，經(jīng)資質(zhì)認(rèn)定評審?fù)ㄟ^后，方能取得檢驗檢測機構(gòu)資質(zhì)認(rèn)定證書。為保證檢測結(jié)果的正確性和有效性，采取措施和程序，有效控制檢測方法，真實、客觀地反映公司具有按照檢測方法實施檢測的能力和水平，最為重要的一項內(nèi)容是環(huán)境檢測方法驗證，此項工作具體落實時，需要從人、機、料、法、環(huán)、測等多個方面展開系統(tǒng)的確認(rèn)，提供可追溯的原始記錄，以便實驗室可以使用新的標(biāo)準(zhǔn)和方法開展相關(guān)的檢測工作。

近幾年，生態(tài)環(huán)境部發(fā)布了大量的環(huán)境保護標(biāo)準(zhǔn)，新發(fā)布的分析方法結(jié)合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求、環(huán)保工作的要求以及設(shè)備情況，體現(xiàn)方法的科學(xué)性、先進性、可行性和可操作性。新標(biāo)準(zhǔn)在使用之前，都要求生態(tài)檢驗檢測機構(gòu)在實驗室內(nèi)對項目開展方法驗證，來確保實驗室有能力按照標(biāo)準(zhǔn)方法開展檢測活動。

2 方法驗證工作概述

目前，環(huán)境檢測方法體現(xiàn)出落后性，同時相應(yīng)的設(shè)備也未能及時的更新，導(dǎo)致相關(guān)檢測的結(jié)果并不準(zhǔn)確，直接地影響到后續(xù)環(huán)保工作的開展，需要重視環(huán)境檢測方法的驗證作用。在開展相關(guān)的環(huán)境檢測工作時，應(yīng)該遵循基本的要求和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行具體的操作，但是因為檢測工作的思路并未結(jié)合實際情況加以分析，導(dǎo)致檢測結(jié)果存在著諸多的問題，如不可靠、不合理等，直接地影響到后續(xù)任務(wù)的開展，必須要重視實際的情況，采取科學(xué)的檢測思路，以此才能讓環(huán)境檢測工作的成效明顯的提升。方法驗證主要是實驗室在首次運用標(biāo)準(zhǔn)方法前進行的驗證工作。方法驗證內(nèi)容包括檢出限、精密度和準(zhǔn)確度，標(biāo)準(zhǔn)方法的驗證需要對方法特性指標(biāo)展開逐一驗證。在檢測方法的特性指標(biāo)中，需要著重展開以下分析：（1）方法檢出限：指試樣中被測物能被檢測出的最低量，無須定量。運用方法給定的檢測條件滿足置信度標(biāo)準(zhǔn)時，在樣品中定性檢出待測物質(zhì)的最低濃度和最小量。（2）精密度：是指在規(guī)定的條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)過多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差或相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表示。（3）準(zhǔn)確度：是指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度。驗證檢測結(jié)果和樣品理論、真值間的一致程度，使用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品核查和加標(biāo)回收率表示。標(biāo)準(zhǔn)方法準(zhǔn)確度驗證只要分析回收率是否滿足要求即可，由此可以適當(dāng)?shù)卦黾邮褂糜凶C標(biāo)準(zhǔn)樣品核查，以此可以更好地確保分析方法的準(zhǔn)確度。

3 環(huán)境檢測中檢測方法驗證工作的程序

環(huán)境檢測方法驗證的工作程序相對復(fù)雜，首先從工作態(tài)度上高度重視，將基本的工作內(nèi)容和步驟梳理清楚，才能確保方法驗證工作的順利開展。環(huán)境檢測方法驗證應(yīng)該從多個方面詳細(xì)的判斷，通過合理的分析相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)是否符合，明確檢測方法的可行性，為環(huán)保工作的順利開展提供有效的參考。

3.1 準(zhǔn)備階段

開展方法驗證時應(yīng)完成編寫作業(yè)指導(dǎo)書、編制原始記錄表單、報告模板和規(guī)定相應(yīng)的質(zhì)控方法與頻率、制定執(zhí)行合適的質(zhì)量控制計劃等。作業(yè)指導(dǎo)書編寫內(nèi)容涉及檢測方法的名稱、檢測方法的適用范圍、用于檢測的儀器設(shè)備，包括技術(shù)性能參數(shù)要求、所需的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（參考物質(zhì)）、被檢測樣品的管理要求、被測定的參數(shù)或量值及其范圍、檢測需要的設(shè)施環(huán)境條件、檢測步驟描述、需遵守的安全設(shè)施、檢測準(zhǔn)則和要求、需記錄的數(shù)據(jù)的分析和表達的方法。

檢測方法驗證責(zé)任人應(yīng)該明確自身承擔(dān)的重要職責(zé)，最為關(guān)鍵的一步是對環(huán)境檢測方法的研究。通過對檢測方法標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)閱讀之后，搜索并歸納相關(guān)的信息，確定具體的流程，熟悉檢測方法的基本適用范圍、方法原理、所需用到的設(shè)備以及試劑和耗材、實驗步驟。方法驗證應(yīng)嚴(yán)格地按照相關(guān)的步驟展開，準(zhǔn)備好相應(yīng)的儀器和設(shè)施，將標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和試劑等進行嚴(yán)格把關(guān)。儀器設(shè)備應(yīng)明確工作條件，進行調(diào)整，確保其處于正常的工作狀態(tài)下，對檢測過程中的儀器設(shè)施等進行校準(zhǔn)，測量器具應(yīng)能夠符合實際的需求。容積等的校正也是關(guān)鍵問題，檢測試驗過程中具體用到的試劑以及水的純度是否達標(biāo)，應(yīng)與實驗要求相符。環(huán)境檢測方法驗證時，具體用到的溶液和物質(zhì)應(yīng)該在有效期內(nèi)合理的使用。實驗過程中的環(huán)境條件應(yīng)符合檢測方法的要求。檢測人員需要具備基本的實踐能力，對于環(huán)境檢測方法落實驗證時，還需經(jīng)過嚴(yán)格的培訓(xùn)和專業(yè)技術(shù)訓(xùn)練，以便其符合上崗標(biāo)準(zhǔn)，取得相關(guān)資質(zhì)證明后，才可參與到相應(yīng)的檢測工作中。

3.2 實驗階段

3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

根據(jù)相關(guān)檢測方法驗證的基本要求，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)校準(zhǔn)曲線的線性范圍和樣品情況，預(yù)估濃度或含量范圍確定校準(zhǔn)曲線的濃度點范圍。在方法規(guī)定的工作范圍內(nèi)確定校準(zhǔn)曲線的各個濃度點。校準(zhǔn)曲線濃度范圍均勻布置6個或以上的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)濃度(包括空白或一個低濃度標(biāo)準(zhǔn)點)。最低濃度校準(zhǔn)點應(yīng)遠(yuǎn)離檢出限，中間點為日常檢測平均濃度水平，最高濃度點為工作范圍的最高點或接近最高點。校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)每個濃度點至少要重復(fù)測定2次。

3.2.2 儀器檢出限實驗

校準(zhǔn)曲線的濃度界限內(nèi)平均設(shè)置上涵蓋著空白點和低濃度點等多個指標(biāo)在內(nèi)的校準(zhǔn)點，低濃度點可以是檢測極限的三倍到五倍，由此分析出驗證系數(shù)與技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)所要求的數(shù)值。上述驗證試驗在符合了相關(guān)的要求和標(biāo)準(zhǔn)之后，還需要進行5天的反復(fù)檢測與驗證，由此獲取到驗證分析方法的上極限值0.3 倍與0.8 倍兩種標(biāo)準(zhǔn)的液體，需要和校準(zhǔn)曲線的母液進行對比，但是不可同時稀釋，否則將會影響到具體的結(jié)果，最終的成果也需進行5天的檢測與驗證。

選擇制作相對響應(yīng)因子的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液中最低濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進行6次重復(fù)測定，對溶液中目標(biāo)物進行定量，計算測定值得標(biāo)準(zhǔn)偏差s，取標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍（3s），修約為1位有效數(shù)字作為儀器檢出限。

3.2.3 方法檢出限實驗

準(zhǔn)備空白溶液，按照樣品分析的全部步驟，重復(fù)測定7次，將各測定結(jié)果換算為樣品的濃度，計算7次平行測定的平均偏差，4倍檢出限濃度作為測定下限。環(huán)境檢測方法在是驗證的時候，具體運用到的溶液和物質(zhì)應(yīng)該在規(guī)定的期限內(nèi)合理的使用，檢測人員需要具備基本的實踐能力，對于環(huán)境檢測方法落實驗證時，還需經(jīng)過嚴(yán)格的培訓(xùn)和專業(yè)技術(shù)訓(xùn)練，以便其符合上崗標(biāo)準(zhǔn)，取得相關(guān)資質(zhì)證明后，才可參與到相應(yīng)的檢測工作中。

3.2.4 方法精密度實驗

方法的精密度代表了檢測人員檢測過程中所獲得的檢測結(jié)果的穩(wěn)定水平。取配制好的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液中的中間濃度點，連續(xù)測定7 次，計算精密度。樣品按照檢測方法規(guī)定進行樣品制備、前處理、儀器分析和數(shù)據(jù)處理步驟，計算所得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。精密度實驗階段，需要重視可靠的方式，以此保證相關(guān)的實驗成果符合預(yù)期目標(biāo)，達到理想化的成效。

3.2.5 方法準(zhǔn)確度實驗

方法的準(zhǔn)確度可稱為方法的正確度，用測定加標(biāo)回收率來表示方法的準(zhǔn)確度。在樣品中加入一定量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)測定其回收率，至少測試7次加標(biāo)樣，記錄測試結(jié)果用樣品加標(biāo)測定結(jié)果扣除空白樣的測定值以計算回收率。

3.2.6 數(shù)據(jù)記錄

檢測人員在方法驗證過程中應(yīng)詳細(xì)記錄檢測的整個過程，包括樣品的制備方法、檢測環(huán)境、檢測參數(shù)、注意事項、分析結(jié)果等。

數(shù)據(jù)記錄對于環(huán)境保護工作的開展具有重要的指導(dǎo)作用，因此需要重視數(shù)據(jù)記錄的真實性和可靠性。檢測方法驗證的數(shù)據(jù)記錄是一個關(guān)鍵的內(nèi)容，需要對檢測方法驗證試驗中的相關(guān)數(shù)據(jù)信息加以整合，只有將全過程的數(shù)據(jù)進行詳細(xì)的記錄并分析，如檢測樣品的處理數(shù)據(jù)和非標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的使用情況等，才能更好地為測試結(jié)果的可溯源性提供保障，嚴(yán)格的依照相關(guān)的管理規(guī)定保存實際記錄，以便達到6年以上。

3.3 報告階段

3.3.1 結(jié)果評價

檢測限和校準(zhǔn)曲線等應(yīng)該符合相關(guān)的情況，以此才能更好地適應(yīng)實際的需求和基本的環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)，促使著相關(guān)工作的開展更加順利。檢測中的檢測限不可大于檢測方法中的相關(guān)極限，若是超出了一定的范圍，勢必影響到后續(xù)工作的落實，也會對具體的環(huán)保策略的制定造成影響。校準(zhǔn)曲線的截距值應(yīng)驗證分析的結(jié)果應(yīng)和標(biāo)準(zhǔn)方法中的要求相對應(yīng)，符合斜率截距采用的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，則能夠與標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值保持著一致。精度結(jié)果的評價，方法驗證的誤差以及標(biāo)準(zhǔn)誤差需要與檢測驗證方法的要求精度保持一致，檢測方法未提出明確的規(guī)定時，需要結(jié)合相關(guān)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的技術(shù)規(guī)定加以執(zhí)行。

3.3.2 確認(rèn)報告編寫

方法驗證報告中應(yīng)包括對檢測人員具備的技能及能力的確認(rèn)，對現(xiàn)有設(shè)備適用性的評價，諸如是否具有所需的標(biāo)準(zhǔn)∕參考物質(zhì)，對設(shè)施和環(huán)境條件的評價，對試劑等材料的驗證，方法性能指標(biāo)的驗證，可能包括檢出限、重復(fù)性、正確度等，以及標(biāo)準(zhǔn)中的其他要求。

環(huán)境檢測方法驗證實驗完成后，檢測項目的主管人員應(yīng)該嚴(yán)格的依照相關(guān)的編制環(huán)境檢測方法確認(rèn)實際的報告信息，編制完成之后需要嚴(yán)格的遵循著相關(guān)規(guī)程，合理的履行報告上的審批程序，之后采取實際的行動落到實處，將報告的審核方案確定到位之后，交由技術(shù)主管人員適當(dāng)?shù)陌才挪⒑侠淼牟贾煤脤徍诵〗M，安排專業(yè)的人員參與到相應(yīng)的工作中，由此更好地完成具體的指標(biāo)。報告審核時，還需從實驗室儀器設(shè)備和環(huán)境狀況等多個角度和因素上展開分析，如人員、儀器設(shè)備和實驗試劑耗材等，審核完成之后，需要交由審核小組簽字并加以確認(rèn)，批準(zhǔn)之后才可實施。

4 結(jié)語

環(huán)境檢測中檢測方法的驗證是一項至關(guān)重要的內(nèi)容，屬于檢測機構(gòu)出具可靠質(zhì)量報告的重要條件，驗證工作的落實對于檢測機構(gòu)具有較大的影響力?，F(xiàn)階段，很多的檢測機構(gòu)運用到較多的檢測設(shè)備和儀器，要求檢測人員具備較高的專業(yè)水準(zhǔn)，富有實際操作的技能，可以靈活的使用相關(guān)的理論支持具體的行動。環(huán)境檢測機構(gòu)需要格外的重視驗證工作的穩(wěn)步推進，確保各項環(huán)境檢測業(yè)務(wù)能夠順利地開展，真正地為環(huán)境保護提供有力的指導(dǎo)。