CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg比率與艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核經(jīng)HRZE/4HR抗結(jié)核療效的相關(guān)性分析

方亞瓊 張環(huán)環(huán)

（河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院 感染科 河南洛陽(yáng) 471000）

目前在全球范圍內(nèi)艾滋病的患病率與死亡人數(shù)逐年增加，嚴(yán)重威脅人類(lèi)的生命健康[1]。艾滋病一旦合并雙重感染，會(huì)增加了臨床診治難度，患者病情會(huì)迅速惡化，預(yù)后不理想。CD4 +（Cluster of differentiation 4）淋巴細(xì)胞為人體免疫系統(tǒng)中極為重要的淋巴，在機(jī)體獲得性免疫系統(tǒng)出現(xiàn)反應(yīng)之前，可對(duì)機(jī)體進(jìn)行保護(hù)，并分泌眾多細(xì)胞因子，來(lái)誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)機(jī)體獲得性免疫功能。輔助性T 細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Regulatory cells，Treg）細(xì)胞在自身免疫性疾病、感染、腫瘤等疾病中發(fā)揮著重要作用。本研究重點(diǎn)分析，CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg比率與艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核經(jīng)HRZE/4HR抗結(jié)核療效的相關(guān)性?，F(xiàn)研究報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年3月至2018年3月本院收治的艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核患者的臨床資料進(jìn)行分析。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢查確診，具有抗人類(lèi)免疫缺陷病毒陽(yáng)性，符合我國(guó)《艾滋病診療指南（2018版）》中的標(biāo)準(zhǔn)[2]。（2）均經(jīng)CT檢查確診為繼發(fā)性肺結(jié)核；（3）均在入院后采用HRZE/4HR方案進(jìn)行抗結(jié)核治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并惡性腫瘤及肝、腎、心等重要器官?lài)?yán)重疾病者；（2）精神障礙者、化療不耐受者；（3）妊娠期、哺乳期女性；（4）真菌感染及巨細(xì)胞病毒感染者。根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究最終納入符合標(biāo)準(zhǔn)的92患者，根據(jù)治療療效差異分為有效組45例、無(wú)效組47例。有效組男21例、女24例；年齡37～78歲，平均年齡55.47S4.29歲。無(wú)效組男22例、女25例；年齡39～79歲，平均年齡55.81S4.57歲。兩組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。本研究患者均已簽署知情同意書(shū)，且經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

CD4+ T淋巴細(xì)胞檢測(cè)：采集研究對(duì)象外周靜脈血5ml。CD4+ T淋巴細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)取10 μl CD4 - FITC/CD8 - PE/CD3 - Percp單克隆抗體加人流式上樣試管中，加入50 μl全血，振蕩混勻，避光10min，溶血，于室溫放置10 min，檢測(cè)CD4+ T淋巴細(xì)胞情況。 Th17/Treg比率檢測(cè)：Treg、Th17 均采用聚蔗糖密度梯度離心法檢測(cè)。經(jīng)過(guò)取細(xì)胞懸液、避光孵育、離心洗滌等步驟，上流式細(xì)胞儀檢測(cè)。計(jì)算Treg/Th17 。[流式細(xì)胞儀生產(chǎn)廠(chǎng)家：美國(guó)BD（Becton Dickinson）公司；型號(hào)：FACSALOBUR]。

1.3 觀(guān)察指標(biāo)

1.3.1 臨床療效判定標(biāo)準(zhǔn)

同時(shí)滿(mǎn)足以下3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)即為有效[3]：（1）痰菌轉(zhuǎn)陰；（2）X現(xiàn)胸片顯示肺部病灶吸收或鈣化，或陰影較前吸收；（3）發(fā)熱、咳嗽等情況好轉(zhuǎn)。未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)即為治療無(wú)效。

1.3.2 兩組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg比較

比較兩組治療前后CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg變化情況。

1.3.3 影響治療療效的相關(guān)因素分析

收集患者的一般資料，包括性別、年齡、合并疾病、是否為初次治療、影像學(xué)檢查結(jié)果等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處

本研究數(shù)據(jù)均采用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料通過(guò)差（XSS）描述，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料通過(guò)（%）描述，并采用χ2檢驗(yàn)；采用Logistic回歸分析分析影響治療療效的相關(guān)危險(xiǎn)因素；以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患者的一般資料分析

有效組合并糖尿病例15例，合并高血壓21例，使用二線(xiàn)抗結(jié)核藥物12例；無(wú)效組合并糖尿病18例，合并高血壓19例，使用二線(xiàn)抗結(jié)核藥物11例。

2.2 兩組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg比較

治療前兩組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后兩組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，Th17/Tre降低，但有效組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)高于無(wú)效組，Th17/Tre低于無(wú)效組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg比較（±SD）

表1 兩組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg比較（±SD）

注：與治療前比較，aP<0.05；治療后，與對(duì)照組比較，bP<0.05。

組別 CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（μl -1） Th17/Tre 治療前 治療后 治療前 治療后 有效組（n=45） 78.33±20.14 433.75±63.26 78.33±20.14 10.45±2.13 無(wú)效組（n=47） 78.12±19.88 185.72±30.26 20.54±3.81 17.86±3.10

2.3 影響治療療效的相關(guān)因素分析

年齡、合并糖尿病、合并高血壓非影響艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核經(jīng)HRZE/4HR抗結(jié)核療效的相關(guān)因素（P>0.05）；復(fù)治、影像學(xué)示病灶未好轉(zhuǎn)、CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)<200μl、Th17/Tre≧10為影響艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核患者經(jīng)HRZE/4HR抗結(jié)核治療療效的的相關(guān)危險(xiǎn)因素（P<0.05），見(jiàn)表2。

表2 影響治療療效的相關(guān)因素分析[n（%）]

2.4 影響治療療效的獨(dú)立危險(xiǎn)因素分析

Logistic回歸分析顯示：復(fù)治、影像學(xué)示病灶未好轉(zhuǎn)、CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)<200 μL-1、Th17/Tre≧10為影響艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核患者經(jīng)HRZE/4HR抗結(jié)核治療療效的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P<0.05），見(jiàn)表3。

表3 影響治療療效的獨(dú)立危險(xiǎn)因素分析

3 討論

對(duì)艾滋病患者而言，結(jié)核分枝桿菌感染是最常見(jiàn)的一種感染，艾滋病感染會(huì)增加結(jié)核病的發(fā)病率。及時(shí)評(píng)估艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核患者抗結(jié)核治療療效，并針對(duì)個(gè)體化差異調(diào)整治療方案，是提高治療療效，改善預(yù)后的關(guān)鍵。

當(dāng)機(jī)體遭受艾滋病感染后，人類(lèi)免疫缺陷病毒會(huì)侵襲CD4 +淋巴細(xì)胞，導(dǎo)致CD4 +淋巴細(xì)胞數(shù)量急劇下降。當(dāng)艾滋病患者機(jī)體出現(xiàn)結(jié)核分支桿菌時(shí)，巨噬細(xì)胞大量減少，促使結(jié)合桿菌大量繁殖，因而導(dǎo)致繼發(fā)性肺結(jié)核發(fā)生。既往研究發(fā)現(xiàn)，CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)可以有效的反映艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核患者身體中的免疫狀態(tài)的情況，在患者進(jìn)行抗結(jié)核治療時(shí)，加強(qiáng)檢測(cè)CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，有助于臨床評(píng)估抗結(jié)核治療療效[4]。健康者體內(nèi)Thl7和Treg在分化和成熟方面互相制約，二者保質(zhì)平衡狀態(tài)，并可通過(guò)某些細(xì)胞因子實(shí)施細(xì)胞轉(zhuǎn)化，若體內(nèi)細(xì)胞環(huán)境改變，CD4 +淋巴細(xì)胞會(huì)促使Treg分化，并抑制Thl7產(chǎn)生。因此可以推測(cè)Th17/Treg比率與細(xì)胞免疫失衡、病情進(jìn)展密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示：治療后兩組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)升高，Th17/Tre降低，但有效組CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)高于無(wú)效組，Th17/Tre低于無(wú)效組，與既往文獻(xiàn)所得結(jié)果相符[5]?？梢?jiàn)在患者進(jìn)行抗結(jié)核治療時(shí)，加強(qiáng)檢測(cè)CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Tre，可幫助臨床評(píng)估抗結(jié)核治療療效。

本研究經(jīng)Logistic回歸分析得出：復(fù)治、影像學(xué)示病灶未好轉(zhuǎn)、CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)<200μl、Th17/Tre≧10為影響艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核患者經(jīng)HRZE/4HR抗結(jié)核治療療效的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，進(jìn)一步證實(shí)CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Tre與抗結(jié)核治療療效密切相關(guān)。臨床可通過(guò)對(duì)艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核患者抗結(jié)核治療時(shí)期加強(qiáng)CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg檢測(cè)，評(píng)估患者治療療效，控制病情惡化。

綜上所述，影響艾滋病伴繼發(fā)性肺結(jié)核患者抗結(jié)核治療療效的相關(guān)因素較多，加強(qiáng)對(duì)患者進(jìn)行CD4 +淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、Th17/Treg監(jiān)測(cè)，有助于實(shí)時(shí)掌握患者治療療效情況，盡早對(duì)治療方案做出調(diào)整，以達(dá)到最佳治療效果。

Visualizing in deceased COVID-19 patients how SARS-CoV-2 attacks the respiratory and olfactory mucosae but spares the olfactory bulb

Mona Khan, et al.

Anosmia, the loss of smell, is a common and often the sole symptom of COVID-19. The onset of the sequence of pathobiological events leading to olfactory dysfunction remains obscure. Here, we have developed a postmortem bedside surgical procedure to harvest endoscopically samples of respiratory and olfactory mucosae and whole olfactory bulbs. Our cohort of 85 cases included COVID-19 patients who died a few days after infection with SARS-CoV-2, enabling us to catch the virus while it was still replicating. We found that sustentacular cells are the major target cell type in the olfactory mucosa. We failed to find evidence for infection of olfactory sensory neurons, and the parenchyma of the olfactory bulb is spared as well. Thus, SARS-CoV-2 does not appear to be a neurotropic virus. We postulate that transient insufficient support from sustentacular cells triggers transient olfactory dysfunction in COVID-19. Olfactory sensory neurons would become affected without getting infected.

Cell. 2021 Nov 3;184(24):5932-5949.e15. doi: 10.1016/j.cell.2021.10.027.