經(jīng)化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測梅毒抗體在梅毒患者早期診斷中的應(yīng)用研究

李嫣紅

（崇義縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西 贛州 341300）

梅毒屬于一種傳染性極強(qiáng)的性病，主要由感染蒼白梅毒螺旋體引起；其主要傳播途徑包括有性傳播、母嬰及血液傳播。梅毒可分為先天性、后天性梅毒，而人體是其唯一的傳染源。目前梅毒在我國已被劃分為乙類防治管理病種，為防控的重點(diǎn)疾病類型。人感染梅毒后，患者皮膚、黏膜會(huì)出現(xiàn)梅毒螺旋體，身體臟器功能亦會(huì)受到一定程度損傷，對(duì)患者生命安全造成嚴(yán)重威脅。但潛伏期的梅毒患者多無特異性臨床癥狀，隨著病程進(jìn)展，患者身上會(huì)出現(xiàn)皮膚潰瘍、淋巴結(jié)腫大等，嚴(yán)重者可直接損傷內(nèi)臟、血管等，最終死亡[1]。故及時(shí)診治、有效控制病情，減少器官、組織等損傷對(duì)改善患者預(yù)后具有重要意義。

血清學(xué)檢測是臨床目前診斷梅毒的常用手段。機(jī)體感染梅毒后，梅毒螺旋體將作為抗原激活機(jī)體免疫反應(yīng)，進(jìn)而產(chǎn)生相關(guān)特異性、非特異性抗體，基于此，臨床可通過血清學(xué)檢測輔助臨床早期診斷梅毒。梅毒螺旋體明膠凝集試驗(yàn)（TPPA） 是梅毒螺旋體毒株輔助診斷梅毒特異性抗體的重要方式，具有良好的診斷效果，在臨床中得以廣泛應(yīng)用；甲苯胺紅不加熱血清學(xué)試驗(yàn)（TRUST）主要是通過針對(duì)梅毒非特異性抗體來輔助臨床早期診斷梅毒；化學(xué)發(fā)光免疫分析（CLIA）是臨床診斷梅毒的一種新型梅毒特異性抗體檢測方式，由美國雅培公司提出[2-3]。上述三種檢測方式在梅毒診斷中均具有重要作用，其中TPPA主要用于該病的復(fù)查，TRUST則常用于梅毒篩查，而對(duì)CLIA在梅毒抗體檢測中的作用仍有待進(jìn)一步深入研究。因此，為進(jìn)一步明確CLIA檢測梅毒抗體在梅毒患者早期診斷中的作用，本研究通過回顧性分析需行早期梅毒診斷的患者的臨床資料，并對(duì)比分析TPPA、TRUST及CLIA在梅毒診斷中的價(jià)值。旨在為臨床診治梅毒提供可靠依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析本院2019年1月至2021年2月收治且需行早期梅毒診斷的125例患者的臨床資料。

納入標(biāo)準(zhǔn)：具有完整臨床資料；伴有皮疹、發(fā)熱等疑似梅毒感染癥狀，均需行梅毒診斷；伴有發(fā)熱、皮疹、硬下疳等癥狀；無意識(shí)、交流障礙者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：存在先天性心臟疾病者；依從性極差、中途退出；凝血功能異常者；合并其他感染性疾病者。125例患者中男69例，女56例，年齡21～74歲，平均年齡44.26S10.54歲；合并疾病：高血壓26例，糖尿病33例。

1.2 方法

所有患者行TPPA復(fù)檢，TRUST檢測梅毒非特異性抗體，CLIA檢測梅毒特異性抗體。具體如下：于清晨空腹抽取所有患者5 mL外周靜脈血，3000 r?min-1離心10 min，離心半徑10 cm，分離上層血清，置于-80℃保存待檢或立即送檢。2 NCU?mL-1梅毒抗體特異質(zhì)控血清由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀對(duì)梅毒特異性抗體行CLIA檢測，其中CLIA陽性：S/CO≥1[S/CO＝標(biāo)本化學(xué)發(fā)光反應(yīng)物的相對(duì)光單位（RLU）/cut off RLU]。TRUST試劑盒由天津生物科技有限公司提供，TRUST陽性為滴度≥1:2。TPPA試劑盒由富士瑞必歐株式會(huì)社提供，TPPA檢測陽性為培養(yǎng)板上反應(yīng)孔中央可見細(xì)胞沉積，呈散在聚集樣；陰性呈光滑紐扣樣。以上檢測步驟均嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行。

以TPPA檢測結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，比較TRUST、CLIA檢測診斷梅毒的敏感性、特異性及準(zhǔn)確性。比較CLIA檢測對(duì)不同梅毒抗體S/CO患者早期梅毒診斷結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件包處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（SSD）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有意義。

2 結(jié)果

2.1 TPPA、TRUST及CLIA檢測對(duì)125例患者的梅毒陽性檢出率比較

125例患者中，TPPA檢測出18例陽性，檢出率為14.40%。TRUST檢測出10例，檢出率為8.00%。CLIA檢測出21例，檢出率為16.80，明顯高于TRUST檢測（P＜0.05）。但CLIA、TPPA檢測比較無差異（P＞0.05）。

2.2 TRUST、CLIA檢測診斷梅毒的敏感性、特異性及準(zhǔn)確性比較

TRUST檢測對(duì)梅毒診斷敏感性、特異性及準(zhǔn)確性分別為61.11%、98.13%、92.80%；CLIA檢測分別為100.00%、97.20%、97.60%。CLIA檢測診斷早期梅毒的敏感性顯著高于TRUST檢測（P＜0.05）；兩者特異性、準(zhǔn)確性比較無明顯差異（P＞0.05），見表1。

表1 TRUST、CLIA檢測診斷梅毒的敏感性、特異性及準(zhǔn)確性比較

2.3 CLIA檢測對(duì)不同梅毒抗體S/CO患者早期梅毒診斷結(jié)果比較

CLIA檢測S/CO為1～5者經(jīng)TPPA檢測為陽性的符合率均為80.00%，CLIA檢測S/CO為6～10、＞10者經(jīng)TPPA檢測為100.00%，見表2。

表2 CLIA檢測對(duì)不同梅毒抗體S/CO患者梅毒診斷結(jié)果比較

3 討論

機(jī)體經(jīng)梅毒感染后，機(jī)體免疫反應(yīng)被激活，進(jìn)而產(chǎn)生特異性與非特異性抗體，基于此，臨床通過檢測患者血清學(xué)指標(biāo)可輔助臨床進(jìn)行診斷。TPPA檢測具有較高的特異性、敏感性。但該檢測方式操作較為繁瑣，且消耗時(shí)間較長，臨床適應(yīng)性較低，存在一定局限性[4]。

CLIA 是監(jiān)測抗體、激素等物質(zhì)的一種免疫測定手段，臨床應(yīng)用較多。該方式很好的結(jié)合了免疫反應(yīng)與化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)，具有高特異性、敏感性及操作便利等優(yōu)勢(shì)，在疾病篩查中具有較高的價(jià)值。

TRUST檢測是以正常牛心肌的心類脂作為抗原檢測血清中反應(yīng)素的一種方法[10]。但部分梅毒患者非特異性抗體出現(xiàn)較晚，故該檢測方法漏診率較高。本研究通過對(duì)比TPPA、TRUST及CLIA檢測的診斷效能發(fā)現(xiàn)，在上述三種檢測方式中，以CLIA檢測對(duì)梅毒陽性檢出率最高。黃聲凱[5]等人通過采用TRUST及CLIA檢測梅毒螺旋體，發(fā)現(xiàn)CLIA檢測靈敏度可高度97.96%，明顯高于TRUST檢測，與本研究結(jié)果報(bào)道相符，說明采用CLIA檢測效能更佳。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，CLIA檢測S/CO為6～10、＞10者經(jīng)TPPA檢測為100.00%，高于S/CO為1～5的80.00%。但殷麗麗[12]等人發(fā)現(xiàn)，CLIA檢測S/CO為1～5者符合率僅為42.86%%，較本組研究低，推測可能與本研究納入樣本量、醫(yī)院設(shè)備等因素有關(guān)。

綜上所述，經(jīng)CLIA檢測梅毒抗體在梅毒患者診斷中具有較高的敏感性、特異性，且操作簡便快捷，具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值。