經(jīng)典名方半夏瀉心湯炮制考察

朱維龍，季宏宇，閆麗莉,田 明

(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué) 研究生院，哈爾濱 150040 )

通過(guò)查閱?wèn)|漢、唐、金、明、清代著名本草文獻(xiàn)[1]，有關(guān)半夏瀉心湯基本方藥歷代本草演變不大，都遵從了原方的藥味、炮制及劑量[2].半夏瀉心湯來(lái)源于東漢張仲景所著《傷寒論》.在《傷寒論》中的記載為：半夏(半升，洗)，黃芩，干姜，人參，甘草(炙)(各三兩)，黃連(一兩)，大棗(十二枚，擘) 右七味，以水一斗，煮取六升，去滓，再煎取三升.溫服一升，日三服[3].

經(jīng)典名方物質(zhì)基準(zhǔn)的制備開發(fā)，關(guān)鍵在于現(xiàn)代生產(chǎn)工藝與傳統(tǒng)工藝保持“基本一致”，即投料用飲片質(zhì)量一致，生產(chǎn)工藝條件一致.因此，需要對(duì)藥材、飲片、中間體及物質(zhì)基準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量控制[4].根據(jù)現(xiàn)行2020《中國(guó)藥典》一部所載中藥規(guī)范名稱，處方中半夏、黃芩、干姜、人參、甘草、黃連、大棗七味藥材均為正品名稱.原文記載炮制的藥材有：半夏(洗)，甘草(炙)[5].

半夏由于具有一定毒性，因此使用前都需要經(jīng)過(guò)炮制[6].《傷寒論》 中半夏無(wú)論入湯劑還是散劑，使用之前都標(biāo)記“洗”.半夏經(jīng)過(guò)洗熟之后，毒性減弱，可以入藥使用.現(xiàn)代沿用的炮制方法主要有白礬制、姜制、石灰制等[7]，半夏經(jīng)炮制后，能降低毒性，緩和藥性，消除副作用.經(jīng)白礬水浸漂或煮后，長(zhǎng)于化痰，以燥濕化痰為主；用于濕痰咳嗽，痰熱內(nèi)結(jié)，風(fēng)痰吐逆，痰涎凝聚，咯吐不出等.經(jīng)生姜制后，善于止嘔，以溫中化痰，降逆止嘔為主，用于痰飲嘔吐，胃脘痞滿，喉痹、瘰疬等證[8].綜上所述所以姜半夏更符合本方之功效主治癥.

在歷代本草中，有關(guān)甘草炮制方法記載內(nèi)容較多，歷史上有多種記載: 剉、炒、酥炙、酒蒸、漿水炙、粳米拌炒、蜜水炙、鹽水炙、豬膽汁浸等.目前，甘草的炮制方法主要為蜜制[9]，蜜制方法最早出現(xiàn)在《肘后備急方》中治療男子陰瘡損爛.現(xiàn)代2020版《中國(guó)藥典》中炙甘草炮制要求為蜜炙[10].生甘草味甘偏涼，長(zhǎng)于清熱解毒，祛痰止咳，蜜甘草味甘偏溫，以補(bǔ)脾和胃，益氣復(fù)脈力勝.而炙甘草長(zhǎng)于補(bǔ)脾和胃，益氣復(fù)脈，用于脾胃虛弱，倦怠乏力，心動(dòng)悸，脈結(jié)代[11].所以炙甘草更符合本方之功效主治癥.

1 儀 器

1.1 儀器

紫外透射反射分析儀(ZF型，上海康華生化儀器制造有限公司)；電子分析天平(ME155DU梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司)；粉碎機(jī)(200T，永康市鉑歐五金制品有限公司)；電熱恒溫水浴鍋(HH-S，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)；電熱鼓風(fēng)干燥箱(DNP-9052，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；硅膠G薄層板(浙江省臺(tái)州市路橋四甲生化塑料廠出品)；定量點(diǎn)樣毛細(xì)管(華西醫(yī)科大學(xué)儀器廠生產(chǎn))；電子天平(JD1000-2，沈陽(yáng)龍騰電子稱量?jī)x器有限公司)；高效液相色譜儀(UltiMate 3000，Thermo scientific)

1.2 試藥

干姜對(duì)照藥材(批號(hào)：120942-201510，中國(guó)食品藥品鑒定研究所);半夏對(duì)照藥材(批號(hào)：D17110401，Nanjing Dilger Medical tecnnology CovLtd);甘草酸銨(批號(hào)：110731-200615)中國(guó)藥品生物制品檢定所; 正丁醇、冰醋酸、石油醚(60～90 ℃)、甲酸、冰醋酸、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、甲酸、甲醇、正丁醇、鹽酸、磷酸、乙醇均為分析醇，純凈水，噴以茚三酮試液，10%硫酸乙醇溶液、乙醇均為分析純(天津市永大化學(xué)試劑有限公司)； 氫氧化鈉、硅膠G薄層板、乙腈為色譜純(DIKMA TECHNOLOGES INC.)；半夏：貴州省赫章縣1-5批(批號(hào)：YL108-181123; YL108-181124; YL108-181125; YL108-181126; 108-181127)；甘肅省西和縣6-10批(批號(hào)：YL108-181128; YL108-181129; YL108-181130; YL108-181201;YL108-181202)；甘肅省西和縣11-15批(批號(hào)：YL108-181203; YL108-181204; YL108-181205;YL108-181206;YL108-181207);甘草：內(nèi)蒙古赤峰市1-5批(批號(hào)：YL105-181122; YL105-181123; YL105-181124; YL105-181125; YL105-181126)；甘肅省岷縣6-10批(批號(hào)：YL105-181127; YL105-181128;YL105-181129;YL105-181130;YL105-181201)；甘肅省隴西縣11-115批(批號(hào)：YL105-181202;YL105-181203;YL105-181204;YL105-181205; YL105-181206)

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 姜半夏的炮制

2.1.1 半夏水浸泡時(shí)間及吸水量考察

以大約直徑1.2 cm為標(biāo)準(zhǔn)大小分開,分別稱取5批大小粒分開的半夏各50 g，共10份，分別加水500 mL浸泡，每5 h取出3粒，切開，檢查是否泡透、浸泡至內(nèi)無(wú)干心時(shí)，計(jì)錄時(shí)間，取出，淋干，稱重，計(jì)算吸水量 .

2.1.2 生姜煎煮時(shí)間考察

取生姜12.5 g，置于1 500 mL圓底燒瓶中，加水1 000 mL，加熱回流提取，每10 min吸取提取液0.2 mL，用水性微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液于微量比色皿中，采用紫外分光光度計(jì)檢測(cè)光譜圖，在最高峰216 nm處測(cè)定吸光度值，共采集10份(100 min)[12].

2.1.3 半夏煎煮時(shí)間考察

分別取2.1.1項(xiàng)的5批泡至無(wú)干心的大小半夏50 g，共10批.分別加入到生姜片煎煮液1 000 mL的生姜水中，加白礬6.25 g，共煮，每10 min取出3粒，檢測(cè)是否煮透(無(wú)硬心)，記錄煮透時(shí)間，取出，淋干，稱重，計(jì)算出率[13].

2.1.4 半夏薄層鑒別

按照姜半夏2020版《中國(guó)藥典》鑒別(2)制備供試品溶液，對(duì)照品溶液及鑒別方法.

2.2 炙甘草的炮制

2.2.1 傳統(tǒng)凈洗、浸潤(rùn)時(shí)間、吸水量及切制考察

取除雜后的5批次凈甘草藥材各100 g，分別置于網(wǎng)篩中，槍洗，然后置于方盤中，用濕棉巾覆蓋，適當(dāng)淋水，0.5 h檢測(cè)是否潤(rùn)透，計(jì)錄潤(rùn)透時(shí)間，稱重，計(jì)算吸水量率.潤(rùn)透后用鍘刀切2～4 mm片，收集切片，均勻分?jǐn)傆诜奖P上，置于鼓風(fēng)干燥箱中，80 ℃烘干，稱重，即得.

2.2.2 煉蜜配制體積分?jǐn)?shù)及用量考察

取凈甘草片100 g，共10批，取煉蜜25 g，6份，分別加水配制成0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.40、0.45、0.50(g/mL)，溶液體積分別為150、125、108、96、87、81、75、70、67、63 mL.取凈甘草片100 g，10份，分別淋入甘草片中，拌勻，悶潤(rùn)透.計(jì)錄悶潤(rùn)結(jié)果.置炒鍋內(nèi)，用文火炒至黃色至深黃色，不粘手時(shí)取出，記錄炒制時(shí)間，放涼，稱重，計(jì)算成品出率[9].

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 姜半夏炮制結(jié)果

3.1.1 半夏水浸泡時(shí)間及吸水量

見(jiàn)表1.

表1 半夏藥材清水浸泡時(shí)間及吸水量考察結(jié)果Table 1 Investigation results of Pinellia medicinal materials soaking time and water absorption in clear water

結(jié)果分析：大粒半夏在60～70 h浸泡至無(wú)干心，平均吸水率為96.7%，小粒半夏在50～55 h浸泡至無(wú)干心，平均吸水率為94.1%.為了使半夏完全浸泡至無(wú)干心，確定大粒半夏的浸泡時(shí)間為70 h，小粒半夏的浸泡時(shí)間為55 h.

3.1.2 生姜煎煮時(shí)間

如表2和圖1所示.

表2 生姜片煎煮時(shí)間考察結(jié)果Table 2 Investigation results of ginger slice decoction time

圖1 生姜片煎湯液紫外吸光度折線圖Figure 1 Line graph of UV absorbance of ginger slice decoction liquid

結(jié)果分析：由表2生姜片煎煮時(shí)間考察結(jié)果和圖1生姜片煎湯液紫外吸光度折線圖分析，在60 min后生姜片煎湯液的吸光度趨于平衡，吸光度的變異系數(shù)為2.4%，繼續(xù)煎煮對(duì)其成分不具有顯著影響.因此，確定生姜片的煎煮時(shí)間為60 min[13].

3.1.3 姜半夏半夏煎煮時(shí)間考察結(jié)果

如表3所示.

表3 半夏煎煮時(shí)間考察結(jié)果表Table 3 Investigation results of Pinellia decocting time

結(jié)果分析：為了保證半夏與白礬完全煮透，確定大粒半夏煎煮時(shí)間為90 min，小粒半夏煎煮時(shí)間為70 min.因此確定姜半夏制法為取凈半夏，以直徑約為1.2 cm標(biāo)準(zhǔn)大小分開，用10倍量的水分別浸泡大粒半夏70 h，小粒半夏55 h至內(nèi)無(wú)干心取出；另取生姜切片煎煮60 min，加白礬共煮，大粒半夏煎煮90 min、小粒半夏煎煮70 min煮透至內(nèi)無(wú)硬心，取出，切薄片，60 ℃烘干.

用量：每10 kg凈半夏，用生姜25 kg，白礬12.5 kg.

3.1.4 半夏的TLC定性鑒別結(jié)果

如圖2示.結(jié)果分析：15批次供試品色譜中，在與半夏對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，在與干姜對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn).與藥典中姜半夏的TLC鑒別方法一致，表明此結(jié)果參考意義較高，15批姜半夏飲片TLC鑒別均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)[14].

1～15—15批次姜半夏飲片供試品； 16—半夏對(duì)照藥材； 17—干姜對(duì)照藥材圖2 15批姜半夏飲片TLC鑒別圖譜Figure 2 TLC identification map of 15 batches of ginger pinellia decoction pieces

3.2 炙甘草炮制參數(shù)的確定

3.2.1 傳統(tǒng)凈洗、浸潤(rùn)時(shí)間、吸水量結(jié)果

見(jiàn)表4.

表4 甘草藥材切制實(shí)驗(yàn)結(jié)果表Table 4 Table of results of cutting experiment of licorice herbs

結(jié)果分析：由表4數(shù)據(jù)可知，甘草的入藥部位為干燥根和根莖，由于藥材產(chǎn)地不同及根粗細(xì)差距，所以將甘草藥材浸潤(rùn)時(shí)間有一定的差異，根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，藥材潤(rùn)透時(shí)間可確定為8 h，吸水率為87%以上，出成品率84%以上.

3.2.2 蜜炙甘草炮制研究

煉蜜配制體積分?jǐn)?shù)結(jié)果見(jiàn)表5.

結(jié)果分析：確定100 g凈甘草加煉蜜質(zhì)量濃度為0.25 g/mL，即煉蜜25 g加沸水至100 mL,浸泡70 min左右至完全潤(rùn)透.因此炙甘草制法為取甘草凈藥材，搶水洗，悶潤(rùn)8 h至內(nèi)無(wú)白心，切薄片，80 ℃烘干.取凈甘草片加煉蜜質(zhì)量濃度0.25 g/mL，即煉蜜25 g加沸水至100 mL,浸泡70 min左右至完全潤(rùn)透，置炒鍋內(nèi)，用文火炒至黃色至深黃色，不粘手時(shí)取出,即得，用量：用煉蜜，每100炮炙品用煉蜜25 kg.

表5 煉蜜配制體積分?jǐn)?shù)及潤(rùn)透結(jié)果Table 5 The volume fraction of condensed honey and the results of wetting through

3.2.3 炙甘草的TLC定性鑒別

按照甘草2020版《中國(guó)藥典》鑒別(2)項(xiàng)制備供試品溶液，對(duì)照品溶液及鑒別方法.結(jié)果如圖3顯示.

1～15—甘草；15—批供試品；16—甘草酸單銨鹽對(duì)照； 17—甘草對(duì)照藥材圖3 15批炙甘草飲片TLC鑒別圖譜Figure 3 TLC identification map of 15 batches of roasted licorice pieces

結(jié)果分析：色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的顏色的熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的顏色熒光斑點(diǎn).此方法與2020版《中國(guó)藥典》中甘草的TLC鑒別方法一致，表明此結(jié)果參考意義較高，即十五批炙甘草飲片TLC鑒別均合格.

3.2.4 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

參照藥典并查閱文獻(xiàn)，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，以0.05%磷酸溶液為流動(dòng)相B，梯度洗脫(0～8 min，19%A；8～35 min， 19%→50%A；35～36 min，50%→100%A；36～40 min，100%→19%A；40～50 min， 19%A)，檢測(cè)波長(zhǎng)為 237 nm，柱溫：30℃，流速：1.0 mL/min，進(jìn)樣量 10 μL；理論板數(shù)按甘草苷峰計(jì)算應(yīng)不低于5 000[15].

1)對(duì)照品溶液的制備

取甘草苷對(duì)照品、甘草酸銨對(duì)照品適量，精密稱定，加70%乙醇分別制成每l mL含甘草苷20 μg、甘草酸銨0.2 mg的溶液，即得(甘草酸質(zhì)量=甘草酸銨質(zhì)量/1.020 7).

2)供試品溶液的制備

取本品粉(過(guò)三號(hào)篩)約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇100 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理(功率250 W，頻率40 kHz)30 min，冷卻，再稱定質(zhì)量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得.

3)測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得[11].15批次炙甘草飲片的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表6.

表6 炙甘草飲片測(cè)定表Table 6 Determination of the content of roasted licorice pieces

結(jié)果分析：2020版《中國(guó)藥典》規(guī)定，本品按干燥品計(jì)算，含甘草苷(C21H22O9)不得少于0.50%；甘草酸(C42H62O16)不得少于1.0%.由表6數(shù)據(jù)可知，炙甘草中甘草苷及甘草酸的百分含量均符合標(biāo)準(zhǔn).

4 討 論

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)古代本草文獻(xiàn)查閱以及2020版《中國(guó)藥典》的要求，對(duì)經(jīng)典名方《半夏瀉心湯》中半夏和甘草的炮制方法確定.本文通過(guò)古本草確定了藥物的炮制方法，按照藥典要求，對(duì)姜半夏和炙甘草的詳細(xì)參數(shù)進(jìn)行了考證，從而保證經(jīng)典名方的質(zhì)量，提高療效.本實(shí)驗(yàn)還有一些不足之處：1)未做大批量實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證結(jié)果的準(zhǔn)確性，在大生產(chǎn)過(guò)程中可能有一些出入；2)由于姜半夏未在《中國(guó)藥典》查詢到有效成分含量方法，所以未做含量檢測(cè)，可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果.