血清Vaspin、MMP-2聯(lián)合Lp-PLA2對(duì)CAS斑塊穩(wěn)定性的診斷價(jià)值

蔣海昌 郭亞鵬 王楓 郭道騮 李磊

作者單位：1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬無(wú)錫市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，江蘇，無(wú)錫214000

2.皖南醫(yī)學(xué)院附屬弋磯山醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，安徽，蕪湖241000

頸動(dòng)脈粥樣硬化是一種常見(jiàn)的心腦血管疾病，多發(fā)生于中老年人群，病死率和致殘率較高［1］。頸動(dòng)脈不穩(wěn)定斑塊脫落后成為血流中栓子，隨血流到達(dá)大腦會(huì)堵塞遠(yuǎn)端腦動(dòng)脈，導(dǎo)致血管堵塞和狹窄，引發(fā)缺血性腦血管事件發(fā)生［2］。準(zhǔn)確評(píng)估患者勁動(dòng)脈斑塊穩(wěn)定性，進(jìn)行針對(duì)性治療對(duì)患者預(yù)后意義重大。臨床主要采用彩色多普勒超聲、CT 血管造影等評(píng)估斑塊穩(wěn)定性，但缺乏定量指標(biāo)［3］。近年來(lái)有研究認(rèn)為脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lipoprotein associated phospholipase A2，Lp-PLA2）活性升高與急性腦梗死發(fā)生和復(fù)發(fā)有關(guān)［4］。血清內(nèi)臟脂肪組織來(lái)源的絲氨酸蛋白酶抑制劑（visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，Vaspin）是一種新發(fā)現(xiàn)的脂肪細(xì)胞因子，可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞凋亡與高糖刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖，與2 型糖尿病及血管病變密切相關(guān)［5］?；|(zhì)金屬蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2，MMP-2）不僅能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)，還可以促進(jìn)血管收縮MMP2基因C 端非催化片段形成［6］。本研究將探究頸動(dòng)脈粥樣硬化患者血清Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平變化及其臨床意義，為臨床治療方案提供理論參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2019年12月在本院接受治療的98 例頸動(dòng)脈粥樣硬化患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①參照《中國(guó)頭頸部動(dòng)脈粥樣硬化診治共識(shí)》［7］的標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)超聲檢測(cè)發(fā)現(xiàn)存在高回聲、異質(zhì)回聲、等回聲以及低回聲斑塊，提示頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成；②無(wú)頸部腫塊等器質(zhì)性病變；③治療依從性高；④患者或家屬知情且自愿參與研究并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①?lài)?yán)重感染患者；②合并惡性腫瘤者；③既往有腦梗死病史；④免疫缺陷患者；⑤合并血液系統(tǒng)疾病。根據(jù)超聲檢查結(jié)果分為穩(wěn)定斑塊組（n=48 例）和不穩(wěn)性斑塊組（n=50例）。選取同期45 例健康體檢者作為對(duì)照組。三組受試者的基本資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)。

表1 3 組受試者基本資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of basic data among 3 groups［n（%），（±s）］

表1 3 組受試者基本資料比較［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of basic data among 3 groups［n（%），（±s）］

組別不穩(wěn)定斑塊組穩(wěn)定斑塊組對(duì)照組F/χ2值P 值n 50 48 45性別（男/女）32/18 28/20 26/19 0.481 0.786年齡（歲）54.82±12.51 53.61±11.24 52.29±11.67 0.541 0.583 BMI（kg/m2）23.14±4.58 22.39±4.35 23.25±4.81 0.496 0.610飲酒史20（40.00）21（43.75）17（37.78）0.354 0.838吸煙史19（38.00）18（37.50）19（42.22）0.261 0.878

1.2 方法

Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2 檢測(cè)方法：患者入院第2 d、對(duì)照組體檢當(dāng)日清晨空腹靜脈取血5 mL，2 000 r/min 離心8 min，取上清液待測(cè)。采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)Vaspin、Lp-PLA2，試劑盒均購(gòu)自上海臻科生物科技有限公司，采用明膠酶譜法檢測(cè)MMP-2，試劑盒購(gòu)自上海信帆生物科技有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明操作。

1.3 斑塊穩(wěn)定性的評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)［8］

頸動(dòng)脈斑塊分類(lèi)：①扁平斑：內(nèi)膜回聲不光滑，局部增厚1.5～2.0 mm；②軟斑：呈局限性均勻或不均勻低回聲、弱回聲斑塊，隆起厚度超過(guò)1.5 mm，表面有連續(xù)性輪廓回聲；③硬斑：局部回聲增強(qiáng)，后方聲衰減較明顯，頸動(dòng)脈與斑塊基底附著處基底寬為寬基底，附著處基底窄為窄基底；④潰瘍型斑：斑塊粗糙不平，潰瘍邊緣為低回聲，斑塊表面缺損呈火山口樣，長(zhǎng)度、深度均大于2 mm。

穩(wěn)定斑塊：扁平斑、寬底硬斑，不穩(wěn)定型斑塊：潰瘍斑、軟斑、窄底硬斑。

1.4 觀察指標(biāo)

①檢測(cè)并比較三組受試者的Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平差異。②采用Pearson 相關(guān)性及散點(diǎn)圖分析Lp-PLA2水平與Vaspin、MMP-2的相關(guān)性。③采用ROC 曲線評(píng)估Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2 三個(gè)指標(biāo)及其聯(lián)合檢測(cè)對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的診斷價(jià)值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料采用（）表示，兩兩比較應(yīng)用t檢驗(yàn)，多組間比較行方差分析，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 組Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平比較

Vaspin水平：不穩(wěn)定斑塊組＜穩(wěn)定斑塊組＜對(duì)照組，MMP-2、Lp-PLA2水平：不穩(wěn)定斑塊組＞穩(wěn)定斑塊組＞對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 3 組Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平比較（±s）Table 2 Comparison of vaspin，MMP-2 and Lp-PLA2 levels among the 3 groups（±s）

表2 3 組Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平比較（±s）Table 2 Comparison of vaspin，MMP-2 and Lp-PLA2 levels among the 3 groups（±s）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05，與穩(wěn)定斑塊組比較，bP＜0.05。

組別不穩(wěn)定斑塊組穩(wěn)定斑塊組對(duì)照組F 值P 值n 50 48 45 Vaspin(μg/L)1.16±0.18ab 1.57±0.26a 1.92±0.38 86.629＜0.001 MMP-2(ng/mL)382.46±57.93ab 263.76±44.39a 215.48±42.64 147.536＜0.001 Lp-PLA2（g/L）116.78±33.89ab 84.59±21.76a 53.77±12.74 76.972＜0.001

2.2 頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定組患者Lp-PLA2與Vaspin、MMP-2的相關(guān)性

Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2 與MMP-2 呈正相關(guān)（r=-0.489，P＜0.05），與Vaspin 呈負(fù)相關(guān)（r=0.579，P＜0.05）。Lp-PLA2 與Vaspin、MMP-2 存在直線相關(guān)性（R2=0.118、0.112）。見(jiàn)圖1。

圖1 Lp-PLA2 與Vaspin、MMP-2 的直線相關(guān)性散點(diǎn)圖Figure 1 Scatter plot of linear correlation between Lp-PLA2 and vaspin，MMP-2

2.3 Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的診斷價(jià)值

ROC 曲線結(jié)果顯示，Vaspin、MMP-2聯(lián)合Lp-PLA2 檢測(cè)診斷效能最大，AUC 為0.946，特異性為0.967，靈敏性為0.933。見(jiàn)表3、圖2。

表3 Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的診斷價(jià)值Table 3 Diagnostic value of vaspin，MMP-2 and Lp-PLA2 levels for the stability of CAS plaques

圖2 ROC 曲線Figure 2 ROC curve

3 討論

缺血性腦卒中發(fā)生與頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成關(guān)系密切，動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊破裂出血、脫落會(huì)增加血管狹窄甚至栓塞風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而發(fā)生缺血性中風(fēng)［9］。醫(yī)生會(huì)根據(jù)病人血管狹窄程度和斑塊狀況分析患者病情進(jìn)而制定后續(xù)治療方案，可見(jiàn)準(zhǔn)確評(píng)估并預(yù)測(cè)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性對(duì)治療和預(yù)防缺血性腦卒中意義重大［10］。

本研究發(fā)現(xiàn)不穩(wěn)定斑塊組、穩(wěn)定斑塊組、對(duì)照組Vaspin 依次增加上升，MMP-2、Lp-PLA2水平依次下降，顯示Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2 參與介導(dǎo)斑塊形成整個(gè)過(guò)程。分析認(rèn)為炎癥反應(yīng)在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成過(guò)程中起到重要作用，Vaspin則可以經(jīng)由抑制炎癥反應(yīng)來(lái)延緩動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程，而存在斑塊患者Vaspin水平下降導(dǎo)致機(jī)體對(duì)于炎癥抑制作用減弱；MMP-2 經(jīng)由增加細(xì)胞核密度、降解細(xì)胞外基質(zhì)成分以及上調(diào)內(nèi)膜面積而為斑塊形成提供有利條件，因此MMP-2水平上升顯示機(jī)體斑塊形成增多；Lp-pla2 作為一種血管特異性炎癥介質(zhì)，參與斑塊炎癥過(guò)程，即斑塊形成和斑塊破裂過(guò)程，Lp-pla2 上升顯示斑塊形成和斑塊破裂增加［11］。國(guó)內(nèi)研究者認(rèn)為隨著冠心病患者病情加重，血清Vaspin水平明顯下降，這種下降趨勢(shì)增加了斑塊不穩(wěn)定性［12］。Chen 等［13］研究發(fā)現(xiàn)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定患者的血清MMP-2水平顯著高于不穩(wěn)定斑塊患者和健康者，與本研究結(jié)果基本一致。Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，Lp-PLA2與MMP-2 成正相關(guān)，與Vaspin 成負(fù)相關(guān)，散點(diǎn)圖結(jié)果顯示Lp-PLA2 與Vaspin、MMP-2 存在直線相關(guān)性，表明在頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定患者體內(nèi)隨著Lp-PLA2、MMP-2 相應(yīng)升高，Vaspin 會(huì)相應(yīng)降低，顯示三指標(biāo)可能一同介導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程。Wang 等［14］研究認(rèn)為L(zhǎng)p-pla2水平上升會(huì)增加動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂的風(fēng)險(xiǎn)，Lp-pla2 有助于預(yù)測(cè)中風(fēng)發(fā)生與復(fù)發(fā)。國(guó)內(nèi)研究則發(fā)現(xiàn)MMP-9、Lp-PLA2 以及C 反應(yīng)蛋白單一指標(biāo)用于評(píng)估斑塊性質(zhì)AUC 值均超過(guò)0.7，而三指標(biāo)聯(lián)合用于評(píng)估斑塊性質(zhì)AUC 值接近0.9，顯示各指標(biāo)聯(lián)合可以有效提高對(duì)于斑塊性質(zhì)評(píng)估價(jià)值［15］。本研究中ROC 曲線顯示，Vaspin、MMP-2聯(lián)合Lp-PLA2 檢測(cè)診斷效能最大，AUC 為0.946，特異性為0.967，靈敏性為0.933，也顯示三種指標(biāo)聯(lián)合有助于提高對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的預(yù)測(cè)價(jià)值。雖然Lp-PLA2在診斷頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的AUC 值較高，但特異性不高，對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的診斷仍有一定的局限性，三者聯(lián)合檢測(cè)診斷效能較高，可作為臨床診斷的新方式。

綜上所述，Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2 對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性具有一定診斷價(jià)值，三者聯(lián)合檢測(cè)具有更好診斷效能，可為臨床上預(yù)防缺血性腦卒中提供評(píng)估依據(jù)。