胰腺癌患者手術(shù)前后血清S100A9、MMP-9變化及其相關(guān)性

朱曉龍 張光亮 裴建灰 朱樂(lè)恒

作者單位：平煤神馬醫(yī)療集團(tuán)總醫(yī)院普外科，河南，平頂山467000

胰腺癌是消化道常見惡性腫瘤，轉(zhuǎn)移快，患者生存時(shí)間短，病死率高。據(jù)統(tǒng)計(jì)大部分胰腺癌患者在1年左右死亡，5年生存期患者不超過(guò)4%［1］。手術(shù)是治療胰腺癌的首選方式，然而相關(guān)研究顯示胰腺癌患者手術(shù)及周圍淋巴結(jié)清掃后，生存時(shí)間一般約為11～20 個(gè)月，5年存活率不超過(guò)25%［2］。鈣結(jié)合蛋白A9 復(fù)合物（S100 calciumbinding protein A9，S100A9）可促進(jìn)免疫與炎癥修復(fù)，其異常表達(dá)上調(diào)和多種惡性腫瘤的發(fā)生及發(fā)展有關(guān)，具有促癌作用［3］?；|(zhì)金屬蛋白酶9（Matrix Metalloprotein-9，MMP-9）由結(jié)締組織細(xì)胞分泌，參與細(xì)胞外基質(zhì)降解過(guò)程，使內(nèi)皮細(xì)胞遷移增殖，促進(jìn)新血管和基底膜形成，在腫瘤周圍組織浸潤(rùn)、遠(yuǎn)隔轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用［4］。本研究將比較手術(shù)前后胰腺癌患者血清S100A9、MMP-9 含量差異，分析兩項(xiàng)指標(biāo)的相關(guān)性，分析其與臨床病理與預(yù)后的關(guān)系。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2016年5月至2018年2月原發(fā)性胰腺癌行手術(shù)治療的患者60 例作為胰腺癌組，其中男性34 例，女性26 例；平均年齡（60.25±6.04）歲；腫瘤位置：胰頭25 例，胰體11 例，胰尾24 例；腫瘤大?。骸? cm 者28 例，＞4 cm 者例32例；腫瘤分化：高分化26 例，中分化22 例，低分化12 例；臨床分期［5］：Ⅰ期8 例，Ⅱ期11 例，Ⅲ期20 例，Ⅳ期21 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《胰腺癌診治指南（2014）》胰腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］；②Karnofsky評(píng)分［7］＞60 分；③術(shù)前未接受過(guò)放化療以及其他生物治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并自身免疫或血液疾病；②合并感染性疾?。虎酆喜⒅匾K器功能障礙；④合并手術(shù)相關(guān)禁忌癥；⑤妊娠或哺乳期婦女；⑥合并認(rèn)知障礙或精神疾病。另選取30 例同期于本院進(jìn)行健康體檢者作為對(duì)照組，其中男性16 例，女性14 例；平均年齡（60.87±5.95）歲。兩組患者性別、年齡資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者或家屬簽署知情同意書。

1.2 方法

對(duì)照組于體檢當(dāng)日、胰腺癌組于術(shù)前、術(shù)后7 d、術(shù)后1 個(gè)月抽取空腹靜脈血4 mL，室溫下離心分離血清，用于S100A9 測(cè)定的血清置于-20℃條件下保存待檢，用于MMP-9 測(cè)定的血清置于-8℃條件下保存。S100A9 試劑盒來(lái)源于上海滬震實(shí)業(yè)有限公司，MMP-9 試劑盒來(lái)源于上海瑞齊生物科技有限公司，酶聯(lián)免疫吸附法操作按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。對(duì)胰腺癌組患者進(jìn)行隨訪，隨訪時(shí)間為術(shù)后2年，隨訪方式為電話隨訪和門診復(fù)查，隨訪周期為3 個(gè)月，生存起始時(shí)間為胰腺癌手術(shù)后，主要終點(diǎn)事件為死亡時(shí)間，次要終點(diǎn)事件為隨訪結(jié)束。生存期的計(jì)算方法為術(shù)后到死亡或隨訪結(jié)束所歷經(jīng)的時(shí)間。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用（）表示，組間比較行t檢驗(yàn)；采用Pearson 相關(guān)性分析血清指標(biāo)之間的關(guān)系，以P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清S100A9、MMP-9 含量比較

血清S100A9、MMP-9 含量：術(shù)前＞術(shù)后7 d＞術(shù)后1 個(gè)月＞對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 血清S100A9、MMP-9 含量比較（±s）Table 1 Comparison on contents of serumS100A9 and MMP-9（±s）

表1 血清S100A9、MMP-9 含量比較（±s）Table 1 Comparison on contents of serumS100A9 and MMP-9（±s）

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與術(shù)前比較，bP＜0.05。

組別對(duì)照組胰腺癌組術(shù)前術(shù)后7 d術(shù)后1 個(gè)月n 30 60 60 60 S100A9（μg/L）150.08±14.88 211.06±20.94a 197.46±18.33ab 169.64±15.40ab MMP-9（ng/mL）18.29±1.73 91.06±8.14a 82.33±7.04ab 40.71±4.25ab

2.2 胰腺癌組患者血清S100A9、MMP-9 含量相關(guān)性分析

胰腺癌組患者術(shù)前、術(shù)后7d、術(shù)后1 個(gè)月血清S100A9水平與血清MMP-9 含量呈現(xiàn)正相關(guān)（r=0.341、0.314、0.303，均P＜0.05）。

2.3 胰腺癌組患者術(shù)前血清S100A9、MMP-9 含量與臨床病理特征的關(guān)系分析

胰腺癌組患者術(shù)前腫瘤＞4 cm、腫瘤分化程度低、臨床分期Ⅲ期或Ⅳ期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清S100A9、MMP-9 含量高于腫瘤≤4 cm、腫瘤分化程度高、臨床分期Ⅰ期或Ⅱ期、未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 患者術(shù)前血清S100A9、MMP-9 含量與臨床病理特征的關(guān)系分析（±s）Table 2 Relationship between preoperative serum S100A9，MMP-9 levels and clinicopathological features（±s）

表2 患者術(shù)前血清S100A9、MMP-9 含量與臨床病理特征的關(guān)系分析（±s）Table 2 Relationship between preoperative serum S100A9，MMP-9 levels and clinicopathological features（±s）

臨床病理特征性別年齡（歲）腫瘤位置腫瘤大小腫瘤分化臨床分期淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移男女≤60＞60胰頭胰體胰尾≤4 cm＞4 cm低分化中分化高分化Ⅰ期Ⅱ期Ⅲ期Ⅳ期無(wú)有n 34 26 29 31 25 11 24 28 32 12 22 26 8 11 20 21 28 32 S100A9（μg/L）209.77±20.06 212.75±20.98 208.05±19.97 213.88±20.43 209.98±18.77 211.03±19.43 212.20±17.05 205.11±17.73 216.27±18.43 218.96±16.33 214.63±16.75 204.39±15.64 197.41±18.30 200.71±17.95 214.30±15.40 218.60±16.63 201.73±14.95 219.22±20.66 t/F 值0.559 1.109 0.091 2.382 4.170 5.363 3.708 P 值0.548 0.272 0.913 0.021 0.020 0.008 0.001 MMP-9（ng/mL）90.80±8.03 91.40±9.05 89.05±8.71 92.94±8.08 90.76±7.05 91.21±8.46 91.30±9.01 86.11±7.84 95.39±8.28 96.77±7.46 94.06±8.43 85.89±7.01 81.64±7.41 84.25±6.95 93.07±7.77 96.30±8.08 83.13±8.01 98.00±8.44 t/F 值0.271 1.768 0.029 4.439 10.981 11.333 6.971 P 值0.787 0.082 0.971＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.4 手術(shù)后1 個(gè)月血清S100A9、MMP-9水平與預(yù)后的關(guān)系分析

60 例患者依照術(shù)后1 個(gè)月血清S100A9、MMP-9水平，將大于等于平均值的患者納入高表達(dá)組，將小于平均值的患者納入低表達(dá)組，其中S100A9 高表達(dá)患者2年生存率6.45%（2/31）低于S100A9 低表達(dá)患者的27.59%（8/29），中位生存時(shí)間14.7 個(gè)月短于S100A9 低表達(dá)患者的19.1 個(gè)月，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。MMP-9 高表達(dá)患者2年生存率8.57%（3/35）低于MMP-9 低表達(dá)患者的28.00%（7/25），中位生存時(shí)間15.3 個(gè)月短于MMP-9低表達(dá)患者的18.6 個(gè)月，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1。

圖1 手術(shù)后1 個(gè)月血清S100A9、MMP-9 不同表達(dá)狀態(tài)患者2年總生存曲線Figure 1 The 2-year overall survival curves of patients with different expressions of serum S100A9 and MMP-9 at 1 month after surgery

3 討論

胰腺癌的早期診斷仍缺乏客觀有效的指標(biāo)，探尋胰腺癌有效診斷標(biāo)志物是臨床重要難題之一。近年來(lái)，關(guān)于胰腺癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制研究有了較大進(jìn)展，多種蛋白或基因均參與其發(fā)生及發(fā)展過(guò)程［8］。

S100A9 是鈣結(jié)合蛋白S100 家族的重要成員之一，參與多種癌細(xì)胞初始發(fā)育和轉(zhuǎn)移性疾病發(fā)展過(guò)程［9］。胰腺癌患者S100A9 可能通過(guò)TGF-β/SMAD4 信號(hào)通路影響腫瘤的生長(zhǎng)及遷移，同時(shí)S100A9 作用于遠(yuǎn)處部位，如肝臟、肺等，通過(guò)改變微環(huán)境，創(chuàng)造一個(gè)有利于轉(zhuǎn)移細(xì)胞粘附及生長(zhǎng)的條件，這說(shuō)明S100A9 在胰腺癌的發(fā)生、遷移、侵襲中具有重要作用［10］。MMP-9 是研究廣泛的基質(zhì)金屬蛋白酶之一，參與多種生物過(guò)程，通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白使得細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu)，調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附性，降解血管基底膜和血管周圍基質(zhì)，促進(jìn)癌細(xì)胞侵襲及轉(zhuǎn)移，在新的腫瘤血管系統(tǒng)生成中具有不可或缺的作用［11］。相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道顯示，MMP-9蛋白在人類多種惡性腫瘤如肝癌、食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、腎癌等均呈現(xiàn)高表達(dá)，并與腫瘤的侵襲、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移等不良預(yù)后相關(guān)［12］。

臨床上可通過(guò)檢測(cè)癌癥患者血清S100A9、MMP-9 表達(dá)水平，依照其濃度變化來(lái)判斷患者手術(shù)治療后病情變化，預(yù)測(cè)患者預(yù)后狀態(tài)，發(fā)揮病情監(jiān)測(cè)作用。郭濤弦等［13］研究比較癌癥患者手術(shù)前后S100A9、MMP-9 表達(dá)水平變化，結(jié)果顯示患者手術(shù)后S100A9、MMP-9 表達(dá)水平明顯降低。本研究中胰腺癌患者手術(shù)后1 個(gè)月血清S100A9、MMP-9表達(dá)水平均明顯低于治療前，患者術(shù)后血清S100A9、MMP-9 表達(dá)趨勢(shì)與上述研究結(jié)果一致，說(shuō)明手術(shù)治療可有效降低患者S100A9、MMP-9 表達(dá)水平，改善患者疾病與預(yù)后。Mroczko 等［14］研究顯示胰腺癌患者S100A9、MMP-9 表達(dá)水平與其病理分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。本研究中，隨著腫瘤直徑增大、臨床分期升高、出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，患者血清S100A9、MMP-9 表達(dá)水平也隨之增高，這一結(jié)果更加證實(shí)了血清S100A9、MMP-9 與胰腺癌增殖及轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，其表達(dá)水平的升高，可作為胰腺癌診斷、預(yù)測(cè)預(yù)后的重要生物學(xué)標(biāo)志，這與劉翔等［15］研究報(bào)道中顯示的胰腺癌患者血清S100A9、MMP-9 高表達(dá)與其臨床病理特征相關(guān)的結(jié)論相吻合。本研究進(jìn)一步分析術(shù)后1 個(gè)月患者血清S100A9、MMP-9 含量與患者生存期的關(guān)系，結(jié)果顯示S100A9、MMP-9 高表達(dá)患者生存時(shí)間短于低表達(dá)患者，進(jìn)一步說(shuō)明血清S100A9、MMP-9含量可對(duì)胰腺癌患者的預(yù)后進(jìn)行判斷，Liao 等［16］研究結(jié)果支持本結(jié)論。

綜上所述，S100A9、MMP-9 在胰腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移與預(yù)后評(píng)估等方面具有較大的潛在價(jià)值，但其是否能夠作為胰腺癌患者預(yù)后評(píng)估的可靠指標(biāo)，還需要多中心，大樣本的臨床數(shù)據(jù)和研究支持，S100A9、MMP-9及其相關(guān)信號(hào)通路可能是胰腺癌治療中的潛在目標(biāo)之一。