深圳市寶安地區(qū)梅毒螺旋體抗體篩查假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)研究*

李庚娣，于 洋，張 健，劉宜仲，陳曉燕

廣東省深圳市寶安區(qū)中心血站，廣東深圳 518101

隨著我國經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，人們的生活水平得到顯著提高，自愿無償獻(xiàn)血的意識(shí)也在不斷提高。但我國的獻(xiàn)血率仍然較低，一方面是由于我國的采供血機(jī)構(gòu)起步較晚，基礎(chǔ)設(shè)施不夠完善，另一方面，我國的獻(xiàn)血制度較為嚴(yán)格，導(dǎo)致我國的血庫長時(shí)間處于緊缺狀態(tài)。梅毒螺旋體(TP)引起的梅毒是一種通過血液、母嬰、性行為傳播的慢性、系統(tǒng)性疾病[1-2]。也是我國采供血機(jī)構(gòu)篩查的主要病原微生物之一。為了保障血液安全，所使用的檢測(cè)試劑靈敏度不斷提高[3]，并通過設(shè)置灰區(qū)使檢測(cè)靈敏度進(jìn)一步提高。此策略雖然能夠使用血風(fēng)險(xiǎn)性顯著降低，但由于受到人員操作因素、儀器設(shè)備、試劑因素、檢測(cè)方法、檢測(cè)環(huán)境等方面的影響，導(dǎo)致單邊陽性、灰區(qū)結(jié)果出現(xiàn)等使假反應(yīng)性現(xiàn)象更加突出，對(duì)獻(xiàn)血者的身心和名譽(yù)造成傷害，給家庭帶來一定困擾，同時(shí)也降低了我國的無償獻(xiàn)血率。本研究依據(jù)推薦性的標(biāo)準(zhǔn)《血液篩查反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)指南》[4]探索適合本地區(qū)梅毒螺旋體抗體(抗-TP)篩查假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)的應(yīng)對(duì)策略，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 分別統(tǒng)計(jì)本血站2014-2018年抗-TP檢測(cè)的情況和2019年1月至2021年3月抗-TP的檢測(cè)情況及歸隊(duì)檢測(cè)情況。

1.2儀器與試劑 全自動(dòng)加樣儀AT+2(瑞士HAMILTO公司)；全自動(dòng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)分析儀FAME24/20(瑞士HAMILTON公司)；Xantus全自動(dòng)加樣儀(深圳愛康)；Legend和TDL-5-A離心機(jī)。2014-2018年使用抗-TP ELISA試劑[廈門新創(chuàng)試劑、北京萬泰試劑和DiaSorin(索靈)試劑]；2019年1月至2021年3月檢測(cè)抗-TP ELISA試劑使用珠海麗珠和北京萬泰試劑。TP明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)及甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)試劑盒(日本富士瑞必歐株式會(huì)社，批號(hào)：VN00111)。所有試劑均經(jīng)中國藥品生物制品鑒定所批檢合格，在有效期內(nèi)嚴(yán)格按照試劑使用說明書操作。

1.3方法 2014-2018年抗-TP檢測(cè)結(jié)果為反應(yīng)性的方法：任意一種試劑陽性即為反應(yīng)性。2019年1月至2021年3月獻(xiàn)血者歸隊(duì)方法：對(duì)于抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性的獻(xiàn)血者，屏蔽滿3個(gè)月后，由工作人員打電話通知，留取標(biāo)本，啟動(dòng)第1輪歸隊(duì)檢測(cè)的程序，并對(duì)獻(xiàn)血者做好溝通解釋工作，同時(shí)做好記錄；進(jìn)行TPPA及TRUST兩種確證試驗(yàn)，第1輪歸隊(duì)檢測(cè)后兩種抗-TP ELISA試劑均反應(yīng)性，獻(xiàn)血者永久屏蔽；抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性且確證試驗(yàn)陽性或不確定，獻(xiàn)血者永久屏蔽。第1輪歸隊(duì)檢測(cè)兩種抗-TP ELISA試劑無反應(yīng)性，且法規(guī)規(guī)定其他篩查項(xiàng)目均無反應(yīng)性，獻(xiàn)血者可以解除屏蔽?？?TP ELISA單試劑反應(yīng)性且確證試驗(yàn)陰性，獻(xiàn)血者屏蔽3個(gè)月后進(jìn)入第2輪歸隊(duì)流程。第2輪歸隊(duì)檢測(cè)項(xiàng)目為兩種抗-TP ELISA試劑的反應(yīng)性。若兩種抗-TP ELISA試劑呈反應(yīng)性，獻(xiàn)血者永久屏蔽；若兩種抗-TP ELISA試劑無反應(yīng)性，且法規(guī)規(guī)定其他篩查項(xiàng)目均無反應(yīng)性，屏蔽可以解除。解除屏蔽后首次獻(xiàn)血間隔期為3個(gè)月。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用Microsoft Excel 2010對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)表示。

2 結(jié) 果

2.12014-2018年抗-TP篩查反應(yīng)性與假反應(yīng)性獻(xiàn)血者情況 本血站2014-2018年抗-TP檢測(cè)共確認(rèn)的反應(yīng)性獻(xiàn)血者數(shù)分別是173、176、173、137、144例，假反應(yīng)性獻(xiàn)血者數(shù)占反應(yīng)性獻(xiàn)血者數(shù)比例為11.6%、28.4%、35.8%、38.7%、24.3%，占當(dāng)年采血者的比例分別為0.65‰、1.65‰、1.88‰、1.90‰、0.70‰。

2.22019年1月至2021年3月采用抗-TP篩查假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)策略結(jié)果分析 2019年1月至2021年3月獻(xiàn)血者抗-TP ELISA確證試驗(yàn)結(jié)果見表1。51例抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性和TPPA及TRUST結(jié)果對(duì)應(yīng)關(guān)系見表2。2019年1月至2021年3月共檢出抗-TP ELISA試劑反應(yīng)性的獻(xiàn)血者321例，檢出抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性的獻(xiàn)血者51例?？?TP ELISA單試劑陽性和TPPA及TRUST結(jié)果對(duì)應(yīng)關(guān)系看出，符合第1輪歸隊(duì)的獻(xiàn)血者有47例，在檢出抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性屏蔽滿3個(gè)月后啟動(dòng)第1次歸隊(duì)檢測(cè)的程序，實(shí)際參與第1輪歸隊(duì)檢測(cè)獻(xiàn)血者數(shù)共37例。第1輪歸隊(duì)檢測(cè)共檢測(cè)出兩種抗-TP ELISA試劑均反應(yīng)性獻(xiàn)血者2例，檢測(cè)出抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性且確證試驗(yàn)陽性或不確定獻(xiàn)血者4例，對(duì)上述獻(xiàn)血者進(jìn)行永久屏蔽；檢測(cè)抗-TP 無反應(yīng)性，且法規(guī)規(guī)定其他篩查項(xiàng)目均無反應(yīng)性獻(xiàn)血者24例，進(jìn)行解除屏蔽。檢出抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性且確證試驗(yàn)陰性獻(xiàn)血者7例，進(jìn)行第2輪檢測(cè)?？?TP無反應(yīng)性，且法規(guī)規(guī)定其他篩查項(xiàng)目均無反應(yīng)性獻(xiàn)血者2例，進(jìn)行解除屏蔽。嚴(yán)格按照抗-TP篩查假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)策略總共解除屏蔽26例。

表1 2019年1月至2021年3月無償獻(xiàn)血者抗-TP確認(rèn)結(jié)果

表2 51例抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性和TPPA及TRUST結(jié)果對(duì)應(yīng)關(guān)系(n)

2.3具體召回工作 2019年1月至2021年3月每周統(tǒng)計(jì)檢測(cè)情況，及時(shí)留取抗-TP ELISA反應(yīng)性標(biāo)本，做確認(rèn)試驗(yàn)TPPA和TRUST，將結(jié)果及時(shí)匯總，評(píng)估出第1輪歸隊(duì)的名單及時(shí)指定專人與獻(xiàn)血者溝通，并提醒獻(xiàn)血服務(wù)科以方便獻(xiàn)血者為原則采集標(biāo)本，進(jìn)行獻(xiàn)血者歸隊(duì)的檢測(cè)，檢測(cè)后的結(jié)果及時(shí)進(jìn)行總結(jié)分析。依據(jù)檢測(cè)結(jié)果及時(shí)進(jìn)行第2輪歸隊(duì)的召回檢測(cè)。3個(gè)月后進(jìn)行召回檢測(cè)，及時(shí)電話通知并做好溝通工作等相關(guān)工作。

3 討 論

對(duì)抗-TP反應(yīng)性的獻(xiàn)血者采取永久屏蔽的策略能夠在一定程度上保護(hù)受血者安全[5-6]，但也使部分獻(xiàn)血者由于假反應(yīng)性結(jié)果而不能再次獻(xiàn)血，特別是對(duì)于熱愛無償獻(xiàn)血事業(yè)的固定無償獻(xiàn)血者，同時(shí)假反應(yīng)性的檢測(cè)結(jié)果可能對(duì)獻(xiàn)血者的身心和名譽(yù)造成傷害和困擾[7]。

近年來，我國多地區(qū)對(duì)血液篩查反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)的可行性進(jìn)行了較多研究[8-9]。劉智敏等[10]對(duì)韶關(guān)市TP反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)模式策略進(jìn)行研究，結(jié)果表明，在進(jìn)行兩次抗-TP ELISA檢測(cè)與TPPA檢測(cè)后，有5例判定為假反應(yīng)性，占比為10%。本研究前期結(jié)果提示，2014-2018年抗-TP檢測(cè)共確認(rèn)的反應(yīng)性獻(xiàn)血者數(shù)分別是173、176、173、137、144例，假反應(yīng)性獻(xiàn)血者數(shù)占反應(yīng)性獻(xiàn)血者數(shù)比例為11.6%、28.4%、35.8%、38.7%、24.3%，提示每年假反應(yīng)獻(xiàn)血者均高達(dá)數(shù)十人，統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，5年來有超過200例獻(xiàn)血者被誤判為TP反應(yīng)性獻(xiàn)血者，若每位獻(xiàn)血者每年獻(xiàn)血2次，每次200 mL，每年有400 U血液未能被采集，這無疑是一項(xiàng)重大損失，也加劇了血庫緊張的局面。在使用抗-TP篩查假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)策略后，2019年1月至2021年3月共檢出抗-TP ELISA試劑反應(yīng)性的獻(xiàn)血者321例，檢出抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性的獻(xiàn)血者51例?？?TP ELISA單試劑陽性和TPPA及TRUST結(jié)果對(duì)應(yīng)關(guān)系看出，符合第1輪歸隊(duì)的獻(xiàn)血者有47例，在檢出抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性屏蔽滿3個(gè)月后啟動(dòng)第1次歸隊(duì)檢測(cè)的程序，實(shí)際參與第1輪歸隊(duì)檢測(cè)獻(xiàn)血者數(shù)共37例。第1輪歸隊(duì)檢測(cè)共檢測(cè)出兩種試劑抗-TP ELISA試劑均反應(yīng)性獻(xiàn)血者2例，檢測(cè)出抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性且確證試驗(yàn)陽性或不確定獻(xiàn)血者4例，對(duì)上述獻(xiàn)血者進(jìn)行永久屏蔽；檢測(cè)抗-TP 無反應(yīng)性，且法規(guī)規(guī)定其他篩查項(xiàng)目均無反應(yīng)性獻(xiàn)血者24例，進(jìn)行解除屏蔽。檢出抗-TP ELISA單試劑反應(yīng)性且確證試驗(yàn)陰性獻(xiàn)血者7例，進(jìn)行第2輪檢測(cè)?？?TP無反應(yīng)性，且法規(guī)規(guī)定其他篩查項(xiàng)目均無反應(yīng)性獻(xiàn)血者2例，進(jìn)行解除屏蔽。嚴(yán)格按照抗-TP篩查假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)策略總共解除屏蔽26例。導(dǎo)致假反應(yīng)性產(chǎn)生的原因有很多，如人員操作因素、儀器設(shè)備、試劑因素、檢測(cè)方法、檢測(cè)環(huán)境等[11]。

近年來，有部分假反應(yīng)性獻(xiàn)血者對(duì)血站的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行投訴，因此，對(duì)這些假反應(yīng)性獻(xiàn)血者的確認(rèn)及隨訪跟蹤具有重要意義，同時(shí)，對(duì)于提高血站對(duì)獻(xiàn)血者服務(wù)的水平也具有重要意義，可以進(jìn)一步推動(dòng)無償獻(xiàn)血事業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

本研究通過對(duì)抗-TP篩查假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)策略進(jìn)行探索，使假反應(yīng)性的獻(xiàn)血者回歸到無償獻(xiàn)血隊(duì)伍中具有重要意義。通過對(duì)抗-TP篩查假反應(yīng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)策略進(jìn)行探索，以及對(duì)反應(yīng)性結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)，初步得出使假反應(yīng)性的獻(xiàn)血者重新獲得獻(xiàn)血資格的技術(shù)路線，可減少固定無償獻(xiàn)血隊(duì)伍的流失。