劍蘭葉斑病菌鑒定及其生物學特性研究

沈會芳，張景欣，楊祁云，蒲小明，孫大元，林壁潤

（廣東省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所/廣東省植物保護新技術(shù)重點實驗室，廣東 廣州 510640）

【研究意義】劍蘭（Gladiolus hybridus）又名唐菖蒲，鳶尾科多年生草本植物，其花形別致、花色豐富、觀賞價值高，是世界著名的四大切花之一，在我國主要分布在廣東、四川、福建、吉林、遼寧、云南、上海、甘肅、江蘇和河北等省份。廣東省臺山市海晏鎮(zhèn)永和村自1983 年開始引進劍蘭，種植總面積86.7 hm2，一季收益約2 萬元/667m2，遠高于種植水稻的效益，是當?shù)氐闹еa(chǎn)業(yè)。但在臺山劍蘭栽培過程中，葉斑病嚴重影響劍蘭的產(chǎn)量和質(zhì)量，因此明確臺山劍蘭葉斑病菌及其生物學特性，對制定病害防治策略和篩選防治藥劑具有重要意義?！厩叭搜芯窟M展】劍蘭病害主要有根莖病害和葉斑類病害。球莖腐爛、干腐、褐腐等根莖病害為害嚴重，表現(xiàn)為根莖部腐爛、易折斷，其病原種類較多，有尖孢鐮刀菌（Fusarium oxyspoyum）、唐菖蒲青霉（Penicillium gladioli）、灰葡萄孢（Botrytis cinerea）、細鏈格孢（Alternaria tenuis）、粉紅聚端孢（Trichothecium roseum）和擬青霉（Paecilomycessp.）等，表現(xiàn)為多種病菌復合侵染［1-3］。唐菖蒲尖鐮孢（F.xyspoyumf.sp.gladioli）主要為害球莖，也可侵染葉片和花，引起干腐?。?-6］。唐菖蒲褐腐病由球腐葡萄孢菌（B.gladiolorum）侵染所致，可為害葉片、莖稈、花瓣和球莖［7-8］。劍蘭葉斑病一般局部為害、經(jīng)濟損失較小，研究相對較少，且集中在病原菌鑒定方面?，F(xiàn)報道有熒光假單孢（Pseudomonas f luoresoens）引起的瘡痂病、野油菜黃單孢菌（Xanthomonas campestrisPv.gummisadans）引起的疫病和菊歐文氏桿菌（Erwinia chrysanthemi）引起的細菌性葉斑?。?］。真菌病害僅報道有葡萄殼小圓孢菌（Coniothyrium vitivorum）引起的葉斑?。?0］。導致生產(chǎn)上一些為害較重的葉斑病菌不明確，給病害防治帶來較大難度?！颈狙芯壳腥朦c】2020 年8—12 月在臺山市海晏鎮(zhèn)永和村調(diào)研時，發(fā)現(xiàn)該村66.7 hm2劍蘭葉斑病發(fā)生嚴重，病株率高達40%～50%，嚴重達90%，部分田塊植株稀疏，損失率高達30%以上。當?shù)丶夹g(shù)人員認為是炭疽病，但使用防治炭疽病化學藥劑后，效果很不理想?！緮M解決的關(guān)鍵問題】為有效防治該病害，本研究對其病原菌進行分離鑒定，研究其生物學特性，測定其對殺菌劑的敏感性，旨在為該劍蘭葉斑病的防治提供指導。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

病害樣本：劍蘭葉斑病樣本采自廣東省臺山市海晏鎮(zhèn)永和村。培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）和查氏瓊脂（Czapek）培養(yǎng)基，配方參照方中達《植病研究方法》［11］。殺菌劑：15%咪鮮胺（Prochloraz）微乳劑，海南博士威農(nóng)用化學有限公司；80%代森錳鋅（Mancozeb）可濕性粉劑，印度聯(lián)合磷化物有限公司；75%百菌清（Chlorothalonil）可濕性粉劑、10%苯醚甲環(huán)唑（Difenoconazole）水分散粒劑、250 g/L 嘧菌酯（Azoxystrobin）懸浮劑，先正達（南通）作物保護有限公司；430 g/L戊唑醇（Tebuconazole）懸浮劑，拜耳股份公司；80%多菌靈（Carbendazim）可濕性粉劑，陜西先農(nóng)生物科技有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 病害樣品采集及病原菌分離 2020 年8—12 月在臺山市永和村調(diào)查劍蘭葉斑病的發(fā)生為害情況，記錄其田間病狀，采集病葉樣本，在葉片病斑病健交界處剪取小塊組織樣本（2 mm×2 mm），參照方中達［11］的常規(guī)組織分離方法，經(jīng)表面消毒后接到PDA 平板，26 ℃黑暗培養(yǎng)5 d，將分離得到的真菌進行單孢分離，接種到PDA 平板上培養(yǎng)成熟后，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 致病性測定 選取劍蘭中上部葉片，用75%乙醇將葉片擦拭一遍后晾干。4 株純化菌株在26 ℃培養(yǎng)8 d 后，切取菌絲塊，將菌絲面貼在健康劍蘭葉片上，以無菌瓊脂塊貼在葉片上作對照，每個處理3次重復，每個重復10片葉，在26 ℃、90%相對濕度條件下培養(yǎng)，每隔24 h 觀察葉片發(fā)病情況，待出現(xiàn)明顯病害癥狀后進行病原菌分離、純化。

1.2.3 病原菌形態(tài)觀察 將致病菌株接種到PDA平板上，26 ℃黑暗培養(yǎng)，每隔24 h 觀察記錄菌落形態(tài)和顏色變化，培養(yǎng)8 d 后制片，在光學顯微鏡下觀察菌絲以及孢子、分生孢子梗的顏色、形態(tài)，測量孢子、分生孢子梗大小（n=50）。

1.2.4 病原菌rDNA-ITS 序列分析 采用CTAB 法提取代表菌株Cg TS 的基因組DNA，用真菌rDNA-ITS 通用引物ITS4/ITS5（ITS4：5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’；ITS5：5’-GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG-3’）對病原菌ITS 區(qū)進行PCR 擴增以及Sanger 測序。將測序的rDNA-ITS 序列在NCBI 網(wǎng)站上作BLAST 比對，提取GenBank 中相同種、屬的rDNA-ITS 序列，使用 DNAMAN 和 Mega 7.0 軟件進行序列比對和進化樹分析。

1.2.5 溫度對葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響將PDA 倒入直徑9 cm 培養(yǎng)皿中，制成平板。在PDA 上培養(yǎng)8 d 的代表菌株Cg TS 菌落外圍切取直徑8 mm 菌絲塊，接入平板中央，設(shè)置10、15、20、22、24、26、28、30、32、35 ℃10 個溫度處理。每個處理3 次重復，每個重復5 個培養(yǎng)皿。黑暗培養(yǎng)8 d 后，十字交叉法測量菌落直徑后，每皿加10 mL 清水，用涂布棒刮掉菌落孢子，混勻后，采用血球計數(shù)板鏡檢孢子量。

1.2.6 pH 對葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響用NaOH 和HCl 溶液在無菌條件將PDA 培養(yǎng)基的pH 調(diào) 至3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0后，制成平板，接入菌株Cg TS 菌絲塊，每個處理3 次重復，每個重復5 個培養(yǎng)皿。26 ℃黑暗培養(yǎng)8 d 后，按1.2.5 方法測量菌落直徑和產(chǎn)孢量。

1.2.7 光照對葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響制備PDA 平板，接入菌株Cg TS 菌絲塊，設(shè)置全光照、全黑暗及12 h 光暗交替3 個處理。每個處理3 次重復，每個重復5 個培養(yǎng)皿。26 ℃培養(yǎng)8 d 后，按1.2.5 方法測量菌落直徑和產(chǎn)孢量。

1.2.8 碳源對葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響以Czapek 為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，將蔗糖分別用葡萄糖、蔗糖、木糖、可溶性淀粉、麥芽糖、山梨醇、甘露醇和甘油替代，配制培養(yǎng)基，以無碳源為對照，滅菌制成平板，接入菌株Cg TS 菌絲塊。每個處理3 次重復，每個重復5 個培養(yǎng)皿。26 ℃黑暗培養(yǎng)10 d 后，按1.2.5 方法測量菌落直徑和產(chǎn)孢量。

1.2.9 氮源對葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響以Czapek 為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，將硝酸鈉分別硫酸銨、尿素、硝酸鈉、天門冬酰胺、牛肉浸膏、蛋白胨、酪氨酸替代，配制培養(yǎng)基，以無氮源為對照，滅菌制成平板，接入菌株Cg TS 菌絲塊。每個處理3 次重復，每個重復5 個培養(yǎng)皿。26 ℃黑暗培養(yǎng)10 d 后，按1.2.5 方法測量菌落直徑和產(chǎn)孢量。

1.2.10 殺菌劑對葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響 將供試殺菌劑用無菌水梯度稀釋，取1 mL 藥液加入99 mL PDA 培養(yǎng)基（45 ℃）中，混合均勻，使殺菌劑濃度為實驗所需系列濃度，平均倒入5個平皿，制成含藥平板，接入菌株Cg TS 菌絲塊，以加無菌水為對照。3 次重復，26 ℃培養(yǎng)8 d 后，用十字交叉法測量菌落直徑，計算藥劑抑制率和線性回歸方程及相關(guān)參數(shù)。

用Excel 2007 對試驗數(shù)據(jù)進行整理和繪圖，數(shù)據(jù)統(tǒng)計用DPS 軟件，采用鄧肯氏新復極差多重比較法（DMRT）進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 病原菌鑒定

2.1.1 病害田間癥狀 初始發(fā)病時，劍蘭葉片上出現(xiàn)白色針狀小點，后變?yōu)榧t褐色或紅棕色小點。環(huán)境適宜時，病斑擴大，呈梭形、紡錘形或不規(guī)則形病斑，病健交界處有明顯紅棕或紅褐色線紋，外圍有黃色暈圈，內(nèi)部淺紅棕或淺紅褐色（圖 1A）。濕度較大時，病斑可見黑色霉層。老葉和嫩葉均可發(fā)病，多個病斑可連合成長條斑（圖1B），后期葉片上密布病斑，造成葉片部分或整片枯死。病害發(fā)生嚴重時整塊田劍蘭植株發(fā)病，在圖1C 中，與右邊發(fā)病輕的田塊相比，左邊發(fā)病重田塊劍蘭植株稀疏，損失較大。

圖1 劍蘭葉斑病田間及接種癥狀Fig.1 Field and inoculation symptoms of leaf spot on gladiolus

2.1.2 病原菌分離及致病性測定 對病害樣本進行組織分離，得到4 個菌株，單孢分離純化，接入PDA，26 ℃培養(yǎng)8 d，切取菌絲塊無傷接種在劍蘭葉片上，測定各菌株對劍蘭的致病性，接種3～5 d 后，葉片均出現(xiàn)病斑（圖1D），與田間癥狀相似，接種發(fā)病率達100%，無菌瓊脂塊接種葉片不發(fā)病。從接種后病斑再分離獲得的菌株與接種菌株形態(tài)一致，符合柯赫氏法則，表明4 個菌株均是劍蘭葉斑病的致病菌。

2.1.3 病原菌形態(tài)特征 4 株菌株在PDA 上菌落致密，氣生菌絲茂盛，絨狀，菌落墨黑色（圖2A），背面黑色。分生孢子梗褐色，多單生，具隔膜，頂端屈膝狀，頂部產(chǎn)孢區(qū)顏色逐漸變淡，大小為51.0～80.0 μm×4.0～7.6 μm，頂生或側(cè)生分生孢子（圖 2B、C）。分生孢子褐色、弓形、光滑、中間寬兩端窄，常向一側(cè)彎曲，多為4 個細胞，3 個隔膜，中間2 個細胞顏色較深，兩端2 個細胞色淡，大小為23.5～32.0 μm×11.5～16.0 μm（圖2D）。4 個菌株形態(tài)特征一致，根據(jù)菌株培養(yǎng)性狀、分孢梗和分生孢子的形態(tài)和大小，參照陸家云《植物病原真菌學》［12］，將4 個菌株初步鑒定為彎孢屬（CurvulariaBoedin）真菌。

圖2 劍蘭葉斑病菌在PDA 培養(yǎng)基上的菌落、分孢梗和分生孢子形態(tài)Fig.2 Colony,conidiophore and conidial morphology of the pathogen of leaf spot on gladiolus on PDA medium

2.1.4 病原菌rDNA-ITS 的序列分析及同源性用真菌rDNA-ITS 通用引物擴增出代表菌株Cg TS 的rDNA-ITS 序列，長度為 610 bp，提交至GenBank，獲得登錄號 MW426196.1。利用 rDNAITS 序列在 NCBI 數(shù)據(jù)庫進行同源性比對，結(jié)果顯示菌株Cg TS 的rDNA-ITS 序列與唐菖蒲彎孢霉C.gladioli序列（LT631345.1）的同源性為 99.49%。進一步進行系統(tǒng)進化分析（圖3），Cg TS 與唐菖蒲彎孢霉（C.gladioli）聚類到一起，形成明顯分支，而車軸草彎孢霉（C.trifolii）則聚類到另一分支，表明病原菌與車軸草彎孢霉親緣關(guān)系相對較遠。綜合菌株培養(yǎng)性狀、形態(tài)特征和 ITS 序列比對結(jié)果，將劍蘭葉斑病菌鑒定為唐菖蒲彎孢霉（C.gladioliBoerema &Hamers）。

圖3 基于菌株Cg TS 的rDNA-ITS 序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3 Phylogenetic tree based on rDNA-ITS sequences of Gg TS strain

2.2 病原菌生物學特性及對殺菌劑敏感性測定

2.2.1 溫度對病原菌菌絲生長和產(chǎn)孢量的影響病原菌在10～35 ℃范圍內(nèi)均可生長，但在10 ℃和35 ℃時生長量極少。最適菌絲生長溫度為26～30℃，28 ℃時菌落直徑最大。在供試溫度范圍內(nèi)，病原菌產(chǎn)孢量變化與菌絲生長趨勢基本一致，但在26 ℃時產(chǎn)孢量最大，達3.054×106個/皿（圖4）。

圖4 溫度對劍蘭葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響Fig.4 Effect of temperature on mycelia growth and spore production of Curvularia gladioli from gladiolus

2.2.2 pH 對病菌原菌絲生長和產(chǎn)孢量的影響pH 為3～10 范圍內(nèi)病菌均能生長和產(chǎn)孢，在5～7偏酸范圍內(nèi)菌絲生長和產(chǎn)孢量較好，當pH 趨于堿性時，菌絲生長量及產(chǎn)孢量迅速降低。在pH值為7 時，菌落直徑和產(chǎn)孢量最大，分別為65.20 mm 和2.736×106個/皿（圖5）。表明偏酸至中性環(huán)境適于病菌生長和產(chǎn)孢。

圖5 pH 對劍蘭葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響Fig.5 Effect of pH on mycelia growth and spore production of Curvularia gladioli from gladiolus

2.2.3 光照對病原菌菌絲生長和產(chǎn)孢量的影響全光照處理時，病菌氣生菌絲旺盛，菌落直徑為58.5 mm，顯箸大于12 h 光暗交替和全黑暗處理。但全黑暗條件下的產(chǎn)孢量為2.58×106個/皿，顯著高于12 h 光暗交替和全光照處理的產(chǎn)孢量。可見光照利于該病菌菌絲生長，而黑暗刺激病菌產(chǎn)孢。

2.2.4 碳源對病原菌原菌絲生長和產(chǎn)孢量的影響病菌在無碳培養(yǎng)基上可生長，但菌落極稀薄，不產(chǎn)孢。以可溶性淀粉為碳源時，菌絲生長速度最快，菌落直徑達到52.00 mm，菌落濃密，其次為木糖、葡萄糖和麥芽糖。山梨醇利于病菌產(chǎn)孢，產(chǎn)孢量為0.77×106個/皿，其次是葡萄糖和木糖（表1）?？梢?，木糖和葡萄糖利于病菌生長和孢子產(chǎn)生，可溶性淀粉利于菌絲生長，山梨醇利于產(chǎn)孢。

表1 不同碳源對劍蘭葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響Table 1 Effects of different carbon sources on the mycelial growth and spore production of Curvularia gladioli from gladiolus

2.2.5 氮源對病原菌菌絲生長和產(chǎn)孢量的影響在無氮培養(yǎng)基上，病菌可生長，菌落極稀薄，不產(chǎn)孢。有機氮源牛肉膏利于菌絲生長，菌落直徑達64.25 mm，菌落致密濃厚，其次是蛋白胨、天門冬酰胺和硫酸銨。牛肉膏作為氮源時，病原菌產(chǎn)孢量最大、為2.37×106個/皿，其次為酪氨酸，而以硫酸銨和尿素為氮源時不產(chǎn)孢（表2）?？梢?，有機氮源牛肉膏利于病菌菌絲生長和產(chǎn)孢。

表2 不同氮源對劍蘭葉斑病菌菌絲生長和產(chǎn)孢的影響Table 2 Effects of different nitrogen sources on the mycelial growth and spore production of Curvularia gladioli from gladiolus

2.2.6 不同殺菌劑對病原菌菌絲生長的毒力測定抑菌中濃度EC50是衡量殺菌劑毒力的可靠標準，數(shù)值越小表明殺菌劑抑菌效果越好。由表3 可知，7 種殺菌劑對病菌菌絲生長均有抑制作用，其中咪鮮胺和代森錳鋅的抑菌作用最強、EC50分別為1.23 和2.81 μg/mL，戊唑醇的抑菌作用次之、EC50為 6.63 μg/mL。傳統(tǒng)的廣譜殺菌劑百菌清和多菌靈對病菌的抑制效果相對較差，尤其是多菌靈，EC50高達1 518.00 μg/mL，表明其對劍蘭葉斑病菌菌絲生長的抑制效果極差。

表3 7 種殺菌劑對劍蘭葉斑病菌菌絲生長的毒力Table 3 Toxicity of seven fungicides against mycelial growth of Curvularia gladioli from gladiolus

3 討論

2020 年在廣東臺山永和村發(fā)現(xiàn)劍蘭葉斑病發(fā)生嚴重，分離病原菌后鑒定為唐菖蒲彎孢霉（C.gladioliBoerema &Hamers）。彎孢屬真菌可寄生多種植物，如玉米、大麥、燕麥、水稻、黑麥、高粱、甘蔗、小麥、三葉草、唐菖蒲、草坪草等，引起葉斑、種子變色和苗枯等癥狀。文獻記載，美國1947 年曾有劍蘭彎孢霉葉斑病發(fā)生的報道，先在佛羅里達州發(fā)現(xiàn)此病，嚴重威脅當?shù)氐膭μm切花生產(chǎn)，毀掉數(shù)百英苗劍蘭，隨后又在亞拉巴馬州發(fā)現(xiàn)此?。?3］。波蘭［14］、印度［15-16］及巴西［17］也相繼報道了該病的發(fā)生，給當?shù)貏μm產(chǎn)業(yè)造成嚴重損失?；诜稚咦哟笮『颓秩炯闹鞯姆绞?，該病菌在1956 年被命名為車軸草彎孢唐菖蒲變種（C.trifoliif.sp.gladioli）［18］，1989 年根據(jù)分生孢子第3 個細胞的明顯彎曲及孢子長寬比較小，將病菌與車軸草彎孢霉（C.trifolii）區(qū)分開來，修訂為唐菖蒲彎孢霉（C.gladioli）［19］。據(jù)報道，在彎孢屬中，新月彎孢霉（C.lunata）、蒼白彎孢霉（C.pallescens）和唐菖蒲彎孢霉（C.gladioli）均可侵染引起劍蘭葉斑?。?0-21］。在我國，深圳動植物檢疫所劍蘭花枯萎葉斑病調(diào)查組（1986）報道，深圳平湖區(qū)發(fā)生劍蘭花枯萎病，鑒定病原菌為新月彎孢霉（C.lunata）［22］。張猛等［23］報道了彎孢屬3 個中國新記錄種，其中車軸草彎孢唐菖蒲變種分離自唐菖蒲植株，記錄了菌株的培養(yǎng)和形態(tài)特征，但在田間病害癥狀、病菌致病性等方面均無相關(guān)描述。本研究首次在國內(nèi)明確鑒定廣東臺山永和村劍蘭葉斑病病原菌為唐菖蒲彎孢霉（C.gladioliBoerema &Hamers）。

該病在臺山永和村發(fā)生嚴重，大部分田塊發(fā)病率達40%～50%，嚴重田塊發(fā)病率達90%，病害損失率大于30%，成為制約劍蘭產(chǎn)業(yè)的重要因素。致病力測定顯示該病菌致病力較強，無需傷口，可直接侵入植株，造成病斑，表明病菌孢子可通過雨水濺射、灌溉水漫灌傳播到健康植株，連片為害。生物學特性研究顯示，在26～30 ℃范圍內(nèi)和pH 5.0～7.0 偏酸范圍內(nèi)病菌菌絲生長和產(chǎn)孢量較好，光照利于菌絲生長，黑暗利于產(chǎn)孢。廣東省常年高溫高濕，光照時間長，臺山市永和村劍蘭種植區(qū)土壤經(jīng)檢測偏酸性，當?shù)剡m宜的環(huán)境因素利于病菌傳播為害。常佳迎等［24］也報道黑暗利于新月彎孢霉（C.lunata）孢子產(chǎn)生，李曉宇等［25］對玉米彎孢葉斑病菌畫眉草彎孢霉（C .eragrostidis）、新月彎孢霉（C.lunata）、棒狀彎孢霉（C.clavato）和中隔彎孢霉（C.intermedia）的生物學特性進行比較,4 種彎孢霉生長適溫為25～30 ℃,產(chǎn)孢適溫為25～35 ℃,最適pH 為6.0～7.0，光照促進菌絲生長。本研究顯示唐草蒲彎孢霉與以上4 個彎孢霉種的生物學特性相似。

測定7 種常用殺菌劑對病原菌菌絲生長的毒力，發(fā)現(xiàn)咪鮮胺和代森錳鋅抑菌作用最強，EC50分別為1.23 和2.81 μg/mL。Pawar［26］報道代森錳鋅對劍蘭葉斑病菌新月彎孢霉（C.lunata）和蒼白彎孢霉（C.pallescens）有較強的抑制作用。賀春萍等［27］測定9 種殺菌劑對西瓜葉枯病菌新月彎孢霉（C.lunata）的毒力，咪鮮胺和代森錳鋅的 EC50分別為1.17、4.02 μg/mL，抑菌效果最好。桑利偉等［28］報道25%咪鮮胺水乳劑對香蕉新月彎孢霉葉斑病菌（C.lunata）菌絲生長有較好的抑制效果。黃嫻等［29］報道80%代森錳鋅可濕性粉劑和50%咪鮮胺錳鹽可濕性粉劑對溫郁金葉枯病菌棒狀彎孢霉（C.clavata）有明顯抑制作用。蘇勇等［30］報道對柚木彎孢霉葉斑病菌（C.lunata）抑菌效果最好的殺菌劑是咪鮮胺乳油?？梢?，咪鮮胺和代森錳鋅對多種作物彎孢霉葉斑病菌有較好的抑制作用。百菌清和多菌靈是廣譜型殺菌劑，用于多種真菌葉斑病的防治，但唐草蒲彎孢霉對兩種藥劑不敏感，尤其是多菌靈對病菌的EC50高達1 518.00 μg/mL，抑菌效果極差。調(diào)研發(fā)現(xiàn)，農(nóng)戶多使用多菌靈、百菌清等廣譜性殺菌劑防治病害，可能是病害防治效果差的重要原因之一。劍蘭葉斑病菌對咪鮮胺和代森錳鋅敏感，其中代森錳鋅價格相對便宜、成本較低，下一步將進行田間藥效試驗來驗證咪鮮胺和代森錳鋅的防治效果，以期為該病害防控推薦有效藥劑。

4 結(jié)論

廣東臺山永和村劍蘭葉斑病發(fā)生嚴重，病原菌為唐菖蒲彎孢霉（C.gladioli），該菌致病力較強，無需傷口，可直接侵入植株。病菌適宜生長溫度為26～30 ℃，適宜生長pH 為5.0～7.0，廣東臺山4～11 月的平均氣溫均在26℃以上，且劍蘭種植區(qū)的土壤偏酸性，環(huán)境條件均有利于病害發(fā)展，造成劍蘭葉斑病發(fā)生嚴重，因此需加強劍蘭葉斑病的預報和防治工作。病菌對咪鮮胺和代森錳鋅敏感，EC50分別為1.17、4.02 μg/mL，可用于病害防治；廣譜型殺菌劑百菌清、多菌靈抑菌效果極差，不建議用于病害防治。