MMP-9(基質(zhì)金屬蛋白酶)在妊高癥患者胎盤中的表達水平與母嬰結(jié)局的相關(guān)性研究

李廈潔，朱立莖，梁麗華

（東莞市石碣醫(yī)院，廣東 東莞 523290）

對于婦女在妊娠中的高血壓則是屬于妊娠期比較特有的一種疾病，以妊娠中晚期出有高血壓、水腫、蛋白尿等臨床特征。其病例變化主要是通過全身的小動脈一般發(fā)生痙攣，一般在我國這種疾病的并發(fā)為10%左右。另外就是在此過程中，金屬基質(zhì)的蛋白酶（MMPS）能夠比較好的降低相關(guān)的外基質(zhì)的蛋白酶，各種成份可被其組織抑制物(tissueinhibitorsofmetalloproteinases, TIMPs)具有一定的抑制性, 其活性依賴于鈣、鎂等金屬性的離子濃度，參與創(chuàng)傷修復(fù)、腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移等過程，與排卵、受精卵著床、一般在胎盤形成的過程中，月經(jīng)已經(jīng)宮頸的擴張等一些生殖系統(tǒng)的密切程度具有一定的相關(guān)性。另外就是對于MMP9 和TIMP1 則是互相的影響以及滋養(yǎng)層細胞的重要生化性的介質(zhì)，另外就是在癲癇的前期（PE）則是出現(xiàn)相關(guān)的高血壓、尿蛋白以及出現(xiàn)的各種的頭疼等眼花等針狀的發(fā)生，嚴重的患者則會出現(xiàn)相關(guān)的溶血以及血小板不斷的減少，對于妊娠期間的高血壓疾病主要威脅母嬰的健康，進一步的嚴重會導致母嬰的死亡以及嬰兒發(fā)病率的不斷增加主要原因之一。根據(jù)相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)，該病對于細胞的滋養(yǎng)以及侵蝕子宮的螺旋的動脈的線等以及胎盤生理性障礙具有一定的關(guān)系。一旦MMP-9 的滋養(yǎng)細胞植入到細胞中，則是發(fā)揮重要的作用。妊娠期高血壓疾病患者胎盤MMP-9 表達明顯低于正常妊娠，MMP-9 的相關(guān)的趨勢在不斷的下降，再有就是在妊娠期的高血壓患者MMP-9 比較低的，這樣長期以往導致相關(guān)的細胞的能力不斷的出現(xiàn)下降的趨勢，繼而抑制了相關(guān)的細胞的侵入性，最后導致相關(guān)的發(fā)育不良，MMP-9 的滋養(yǎng)細胞的這種能力下降，進一步的滋養(yǎng)潤了細胞的各種的潤侵性。最后導致的因素就是發(fā)育不良。MMP-9 具有一定的降解相關(guān)的細胞的外基質(zhì)的相關(guān)成分的作用，在ITMP-1 調(diào)控作用下，MMP-9 在相關(guān)的絨毛的滋養(yǎng)不斷的進入相關(guān)的母體的細胞，這種進入母體的細胞可以說發(fā)揮著一定的作用，隨著近些年人們對于妊娠的高血壓的發(fā)病率可以說不斷上升，其中對于孕婦、新生兒的死亡主要原因，但是就目前為止，對于其中的妊娠的高血壓的一些發(fā)病機理，醫(yī)生并不是非常的清楚，這個主要的核心可能是和胎盤的組織中的MMP-9 和ITMP-1 的相關(guān)表達具有一定的關(guān)系，其中根據(jù)我們相關(guān)的組織中的MMP-9 的表達能力在不斷的出現(xiàn)下降，進一步的引起胎盤的局部出現(xiàn)缺血以及缺氧，最后導致相關(guān)的胎盤的妊娠的高血壓。

該研究通過測定正常孕婦、妊高癥、子癇前期、子癇前期重度各個級別的孕婦各15 例共60 例胎盤組織MMP9 的表達，本文的主要核心就是探索相關(guān)的基質(zhì)蛋白酶的9 在妊娠的高血壓期間的發(fā)病機理以及作用。

1 資料與方法

1.1 病例選擇標準

納入標準:①符合《婦產(chǎn)科學》中有關(guān)子癇前期的診斷及分類標準；②單胎妊娠，產(chǎn)前無明顯子宮收縮；③患者及其家屬知情同意后自愿參與本研究，并簽署知情同意書。排除標準：①存在慢性高血壓、心臟病、糖尿病、慢性腎病及免疫性疾病等病史；②臨床資料不完整；③不配合本研究者。1.2 一般資料

自2019年12月至2021年12月，我院正常孕婦、妊高癥、子癇前期、子癇前期重度各個級別的孕婦各15 例共60例為研究對象。病例均無其他產(chǎn)科并發(fā)癥及原發(fā)性肝腎疾病，年齡（27±1.7）周歲，平均孕周（37±1.1）周，各組間年齡及孕周均無顯著差異。1.3 方法

①標本采集及處理：組織塊樣本提取，待胎盤娩出后，切取胎盤中央肉眼觀察無病變的組織1g，立即置于-20 攝氏度冰凍保存。②Western blot 測定組織中MMP-9 相關(guān)的表達水平，大約將相關(guān)的500mg 的組織以及樣本的加入其中大約是400ul%NP-40 的裂解溶液中上海江萊生物科技有限公司）混勻，一般在一定數(shù)量的蛋白酶進行印制以后的4 攝氏度，轉(zhuǎn)速為10000r/min 下離心5min，不斷的進行相關(guān)的溶液的測定以及蛋白的濃度，在相關(guān)的蛋白的20ug 上清野，加入相關(guān)的8%SDS 聚丙烯的凝膠中進行相關(guān)的垂直電泳測定，然后在轉(zhuǎn)速的纖維的進行互相的轉(zhuǎn)化。硝化纖維素膜與Anti-MMP9抗體（BA0573，boster）于4 攝氏度下過夜孵育（1:200）。③結(jié)果判定：通過灰度值計算得到MMP-9 的量, 其含量處于總體水平5%之下的樣本判定為陰性(-), 5% ～15%判定為弱陽性(+), 16% ～50%判定為陽性(++), >50%判定為強陽性(+++)。

1.4 統(tǒng)計學處理

所得數(shù)據(jù)用SPSS13.0 軟件包進行統(tǒng)計分析，根據(jù)資料性質(zhì)采用Kruskal-Wallis 秩和檢驗和Spearman 秩相關(guān)，P<0.05有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組比較，差異顯著性（P<0.01）即妊娠期高血壓疾病患者胎盤中MMP-9 含量明顯低于正常。詳見表1。

表1 MMP-9 在妊娠期高血壓疾病患者與正常妊娠患者胎盤母面中的表達及比較

2.2 結(jié)果顯示，妊高癥組的母嬰不良結(jié)局發(fā)生率顯著高于正常組，P<0.05，詳見表2。

表2 兩組母嬰不良并發(fā)癥發(fā)生率比較

2.3 結(jié)果顯示，MMP-9 表達水平與孕周、胎盤重量、胎兒體質(zhì)量均成正相關(guān)，P<0.05,詳見表3。

表3 MMP-9 表達水平與臨床相關(guān)因素的相關(guān)性

3 討論

近些年研究表明，妊娠的高血壓的并發(fā)疾病的發(fā)生的妊娠的早期的滋養(yǎng)不斷的侵蝕各種的相關(guān)的妊娠高血壓的患病以及各種的螺旋的小動脈的血管的異常的現(xiàn)象，絨毛的滋養(yǎng)的相關(guān)侵蝕能力不斷的下降以及范圍不斷的縮小。這個過程的與MMP-9 失去的密切的相關(guān)。國外的學者對于MMP 的妊娠的高血壓疾病的相關(guān)的研究，在Kolben 等[11]利用相關(guān)的ELLSA 法子檢測提前的提前的溶液的MMP-9 的含量，發(fā)現(xiàn)了相關(guān)的HELLP 綜合的患者的低于正常。Lim 等[12]對于癲癇的患者以及正常胎盤的滋養(yǎng)的進行細胞的體外的培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)一些癲癇前期的組織以及各種的滋養(yǎng)的層的細胞的侵蝕能力以及各種的體外的培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)了癲癇期間組織以及各種的滋養(yǎng)的細胞的侵蝕能力在不斷的降低，表達的MMP-9 能力不斷的下降，滋養(yǎng)細胞表達MMP-9 能力不斷下賤，滋養(yǎng)的細胞的對于子宮螺旋的動脈的侵蝕不足，是的相關(guān)的胎盤入過淺，侵入脫膜段，在子宮的動脈的沒有經(jīng)歷正常的妊娠的生時候，妊娠的變化但是實際的保持的相對的狹窄的管徑的對于縮管的物質(zhì)的反應(yīng)，進而造成相關(guān)的胎盤缺血。另外就是對于相關(guān)的胎盤的血管的不足以及發(fā)育的缺陷，最終導致母體的系統(tǒng)性管的內(nèi)皮的損失組織以及相關(guān)妊娠出現(xiàn)高血壓等一些列的針狀，因此, 妊娠期高血壓疾病患者可能由于母胎免疫平衡失調(diào)，導致MMP-9 的分泌減少。

該研究發(fā)現(xiàn)在胎盤上子癇前期組中MMP-9 的表達明顯少于正常孕足月組 (P<0.05), 提示MMP-9 水平變化在妊娠期高血壓疾病的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。妊娠期高血壓疾病各組胎盤上MMP-9 的減少與其胎盤病理改變有密切的關(guān)系, MMP-9 的減少直接影響胎盤滋養(yǎng)細胞對螺旋小動脈的逆向侵潤, 即胎盤對子宮肌層組織的侵蝕深度不足 (胎盤淺著床)以致發(fā)生胎盤缺血、缺氧等一系列病理變化, 引起妊娠期高血壓疾病的發(fā)生。 因此認為妊娠MMP-9 的紊亂參與了妊娠期高血壓疾病的病理生理變化, 其表達的異常對于妊娠期高血壓疾病的發(fā)生具有重要意義, 為妊娠期高血壓的預(yù)防和治療有了一個大致方向，對其進一步的研究為妊娠期高血壓疾病的病因?qū)W開辟了新的途徑。