復(fù)配涂封劑調(diào)節(jié)橡膠苗低溫脅迫的生理響應(yīng)研究

程琳琳，安 鋒*，謝貴水，王紀(jì)坤，王立豐，張希財(cái)

(1.中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院 橡膠研究所，海南 ?？?571101；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部儋州熱帶作物科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，海南 儋州 571737)

天然橡膠是重要的工業(yè)原料和戰(zhàn)略物資，2019年我國橡膠樹種植面積約達(dá)114.7萬hm2，僅次于印度尼西亞和泰國(兩國橡膠種植面積均為367.6萬hm2)[1]。異于橡膠樹原產(chǎn)地的熱帶季風(fēng)氣候環(huán)境，我國植膠區(qū)地處熱帶北緣和南亞熱帶，寒害是其主要的限制因子[2]。寒害常使橡膠樹產(chǎn)量降低，也直接威脅樹體的生存，進(jìn)而影響了栽培橡膠樹的經(jīng)濟(jì)效益。根據(jù)寒害發(fā)生時(shí)的天氣條件[3]，寒害對(duì)樹干危害較嚴(yán)重的癥狀表現(xiàn)為爆皮流膠，導(dǎo)致樹皮受損甚至樹體死亡。樹干是橡膠樹產(chǎn)膠和割膠的主要部位，樹干的受害將直接影響橡膠樹的膠乳生產(chǎn)，從而嚴(yán)重影響膠園的整體產(chǎn)量。在寒害調(diào)查和評(píng)價(jià)中，樹干流膠程度是橡膠樹寒害分級(jí)的關(guān)鍵標(biāo)準(zhǔn)[4]。因此，如何減少因寒害而產(chǎn)生的爆皮流膠癥狀對(duì)橡膠樹的抗寒栽培管理至關(guān)重要。

脫落酸(ABA)作為重要的信號(hào)分子物質(zhì)，是植物抵御非生物脅迫的一種天然激素，在植物的旱、鹽、低溫等逆境反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用[5-7]，也是植物水分平衡和脅迫適應(yīng)性的重要調(diào)節(jié)因子，在植物的抗寒馴化中起著重要的作用[8]。王紀(jì)坤等[9]采用7-33-97芽接苗為材料，噴施脫落酸溶液后進(jìn)行低溫處理，發(fā)現(xiàn)ABA可以提高橡膠樹細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的含量，提高其體內(nèi)的各種保護(hù)酶活性，降低膜脂過氧化程度，從而提高其抵御低溫脅迫的能力，以25 mg/L的ABA預(yù)處理的抗寒效果最佳。殼聚糖是一種大的陽離子多糖，它是我國資源豐富且相對(duì)廉價(jià)的化合物，具有良好的成膜性、附著性和吸濕性[10]。殼聚糖能促進(jìn)植物的生長(zhǎng)與抗?jié)B透物質(zhì)的合成，增強(qiáng)清除氧自由基的能力，防止膜系統(tǒng)受破壞，從而增強(qiáng)植物自身抵抗能力[11]。殼聚糖在提高水稻幼苗[12]、茶樹[13]、草莓[14]、荔枝[15]等作物的抗寒性及種子萌發(fā)[16-18]等方面具有良好的效果，可以作為激發(fā)子啟動(dòng)植物防御系統(tǒng)，提高植物的抗冷性。在橡膠樹上，王立豐等[19]認(rèn)為0.05 g/L殼聚糖提高橡膠樹芽接苗和萌條抗寒性的效果最佳。Ca2+作為第二信使參與了植物的營養(yǎng)生長(zhǎng)、代謝調(diào)節(jié)過程。同時(shí)，作為磷脂的磷酸根和蛋白構(gòu)象靈活變化的信號(hào)，它還可以防止亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞，穩(wěn)固膜的結(jié)構(gòu)，從而使得植物適應(yīng)環(huán)境的脅迫[20]。外源CaCl2的使用改變了細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，Ca2+作為第二信使傳遞細(xì)胞外的信息到細(xì)胞內(nèi)，調(diào)節(jié)植物生理變化，從而提高植物對(duì)寒冷環(huán)境的適應(yīng)性，在胡椒[21]、番木瓜[22]、閩楠[23]等植物中均有報(bào)道。張希財(cái)?shù)萚24]在橡膠樹袋裝苗防寒中用到了CaCl2，認(rèn)為0.05～0.30 g/L CaCl2對(duì)橡膠樹袋裝苗防寒具有良好的效果。

目前，市售割面涂封劑大多數(shù)為成膜劑、單一生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑與各種植物油脂混配，主要是通過生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑促進(jìn)樹體生長(zhǎng)，以及油脂膜使割面與外界隔離而起到物理防護(hù)作用，在樹皮防寒方面，主要是對(duì)外界低溫的被動(dòng)防御，另一方面，一旦防護(hù)膜受外界大風(fēng)、雨水等因素脫落，其防寒效果就會(huì)失去。復(fù)配割面涂封劑克服大多數(shù)市售割面涂封劑的被動(dòng)防御機(jī)制，結(jié)合脫落酸、殼聚糖、CaCl2在橡膠樹抗寒調(diào)節(jié)中的作用，誘導(dǎo)樹體自身的抗寒性，提高樹體自身抵御低溫的能力。據(jù)此，本試驗(yàn)以熱研7-33-97橡膠樹袋裝大型苗為材料，結(jié)合前人在橡膠樹防寒、抗逆方面研究效果與試驗(yàn)篩選的基礎(chǔ)上，分析了以脫落酸、殼聚糖和氯化鈣混配的割面涂封劑對(duì)低溫脅迫下橡膠樹的生理影響，為復(fù)配割面涂封劑的研發(fā)和橡膠樹抗寒栽培提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試材料為熱研7-33-97橡膠樹大型全苗(2018年8月芽接，高度為2.1～3.5 m，2019年8月從苗圃移植至育苗容器)。選擇生長(zhǎng)正常、生長(zhǎng)勢(shì)基本一致的植株作為試驗(yàn)材料。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 以市面上銷售的橡膠樹割面涂封劑為T1，以ABA 25 mg/L+殼聚糖0.05 g/L+CaCl28.0 g/L混合液與毛棕櫚油(由本單位油棕種質(zhì)資源課題組研發(fā))混配后作為T2(即新型復(fù)配割面涂封劑)，以清水作為對(duì)照(CK)。將試劑1(T1)、試劑2(T2)、清水分別涂抹在橡膠樹植株已木質(zhì)化的莖干部位，每個(gè)處理20株。自然條件下，2種試劑用清水涂抹2 d后，將所有植株移入人工氣候室中，進(jìn)行低溫脅迫處理。人工氣候室控制條件：12 h光照，12 h黑暗，相對(duì)濕度為80%；光照時(shí)段的光照強(qiáng)度為75～100 lx，溫度控制在(16±1)℃；黑暗時(shí)段的溫度控制在(4±1)℃。分別于低溫脅迫的第2、5、8天選取植株木質(zhì)化莖干的韌皮部，測(cè)定其各項(xiàng)生理指標(biāo)；從植株開始出現(xiàn)流膠癥狀時(shí)，記錄已木質(zhì)化莖干和其他部位流膠情況，低溫脅迫的第9天統(tǒng)計(jì)最終的流膠情況。

1.2.2 測(cè)定方法 每個(gè)時(shí)間梯度生理指標(biāo)測(cè)定均選取3個(gè)植株木質(zhì)化莖干韌皮部混合后設(shè)置3個(gè)重復(fù)。莖干韌皮部相對(duì)含水量和相對(duì)電導(dǎo)率測(cè)定參照李小琴等[25]的方法?？扇苄蕴?SS)和超氧陰離子(O2-·)含量采用北京索萊寶科技有限公司的試劑盒測(cè)定?？扇苄缘鞍?SP)含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250法[26]測(cè)定。游離脯氨酸(Pro)[26]含量采用酸性茚三酮法測(cè)定。丙二醛(MDA)含量采用硫代巴比妥酸法[27]測(cè)定。SOD活性采用NBT光化還原法[26]測(cè)定。POD活性采用愈創(chuàng)木酚法[27]測(cè)定。CAT活性采用紫外吸收法[28]測(cè)定。橡膠樹流膠情況根據(jù)流膠處的形狀進(jìn)行統(tǒng)計(jì)：采用游標(biāo)卡尺測(cè)量流膠的長(zhǎng)度、寬度等，然后計(jì)算各個(gè)處理的已木質(zhì)化莖干和其他部位的點(diǎn)狀和條形流膠的總面積。

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)為3次重復(fù)測(cè)定的平均值，采用Excel 2007軟件對(duì)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析，并采用Origin Pro 2018軟件進(jìn)行繪圖，多重比較采用Duncan新復(fù)極差法。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)低溫脅迫下橡膠樹莖干韌皮部相對(duì)含水量和相對(duì)電導(dǎo)率的影響

低溫下，植株的吸水量減少，在低溫脅迫的開始，植株主要通過降低含水量來達(dá)到抵御低溫的目的。如圖1所示，在低溫脅迫2～5 d的過程中，植株相對(duì)含水量(RWC)呈下降的趨勢(shì)。后期，由于植物對(duì)低溫脅迫的適應(yīng)性，5～8 d過程中，植株的RWC又有所升高。由于復(fù)配割面涂封劑可以有效提高細(xì)胞液濃度，維持細(xì)胞的滲透壓，減緩低溫脅迫下橡膠樹莖干韌皮部RWC的降低，所以，T2的植株RWC與T1和CK相比，效果達(dá)到了顯著(P<0.05)或者極顯著水平(P<0.01)，低溫處理2、5、8 d，T2分別比T1和CK提高了4.24%、4.35%、1.88%和5.98%、6.44%、4.51%。

圖1 不同處理對(duì)橡膠樹莖干韌皮部相對(duì)含水量和相對(duì)電導(dǎo)率的影響

植物組織相對(duì)電導(dǎo)率的大小反映了其細(xì)胞電解質(zhì)滲出相對(duì)含量的高低。不同處理在低溫脅迫2～8 d過程中，低溫脅迫的開始，植株對(duì)低溫具有一定的適應(yīng)性，但是隨著低溫時(shí)間的延長(zhǎng)，植株細(xì)胞膜出現(xiàn)了一定的損傷，所以細(xì)胞液部分外漏，與植株莖干韌皮部RWC的變化趨勢(shì)一致，植株莖干韌皮部REC呈先下降后升高的變化趨勢(shì)。由于T2的效果較優(yōu)，有效緩解了細(xì)胞電解質(zhì)的滲出量，從而減緩了橡膠樹莖干韌皮部REC的升高，與T1和CK相比，低溫處理2、5、8 d時(shí)，分別降低35.32%、21.38%、21.44%和40.00%、35.40%、22.13%，差異均達(dá)到了極顯著水平(P<0.01)。

數(shù)值為3個(gè)數(shù)值的平均值，誤差棒為標(biāo)準(zhǔn)差，小寫字母表示處理間存在顯著差異(P<0.05)，大寫字母表示處理間存在極顯著差異(P<0.01)。下同。

2.2 不同處理對(duì)低溫脅迫下橡膠樹莖干韌皮部滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量的影響

低溫下，植物細(xì)胞產(chǎn)生Pro、SP、SS等一系列滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)，其中游離脯氨酸可以穩(wěn)定植物組織代謝和細(xì)胞原生質(zhì)體的膠體狀態(tài)，降低植物的冰點(diǎn)；可溶性蛋白可以提高細(xì)胞保水能力；可溶性糖可以維持植物細(xì)胞膨壓。低溫處理2～5 d，植株細(xì)胞外滲減少，組織中Pro外滲減少，所以，Pro先呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，隨著低溫脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)胞有了一定的損傷，組織外滲有所增加，所以Pro含量又有所增加。

由圖2可知，經(jīng)不同試劑處理后，植株莖干韌皮部游離Pro含量呈先下降后上升的趨勢(shì)。低溫2～5 d過程中，由于植株自身的保護(hù)作用，細(xì)胞含水量降低，組織中SP和SS含量增加，隨著5～8 d低溫環(huán)境的延續(xù)，SP結(jié)構(gòu)被破壞，SS發(fā)生降解，因而植株莖干韌皮部中SP和SS含量又呈現(xiàn)了下降趨勢(shì)。由于T2可以有效提高橡膠樹莖干韌皮部游離Pro、SP、SS等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的含量，有效地避免了低溫對(duì)植株的損傷，與T1和CK相比，Pro、SP、SS含量差異均達(dá)到了顯著(P<0.05)或極顯著水平(P<0.01)。

圖2 不同處理對(duì)低溫脅迫下橡膠樹莖干韌皮部滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響

2.3 不同處理對(duì)低溫脅迫下橡膠樹莖干韌皮部產(chǎn)生活性氧的影響

低溫脅迫造成植物體內(nèi)氧代謝的加速，植物就會(huì)產(chǎn)生大量包含O2-·在內(nèi)的活性氧物質(zhì)，MDA是植物細(xì)胞膜脂過氧化的產(chǎn)物，它的含量體現(xiàn)了細(xì)胞膜受損的程度，低溫脅迫下，由于植株膜系統(tǒng)受低溫脅迫的影響，橡膠樹植株組織中O2-·和MDA的含量逐漸上升。后期，由于植株組織滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的產(chǎn)生，對(duì)植株細(xì)胞膜系統(tǒng)產(chǎn)生了一定的保護(hù)作用，MDA和O2-·的含量又逐漸降低。但是，與T1和T2不同的是：CK可能是滲透物質(zhì)含量較低的原因，導(dǎo)致O2-·含量一直呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。

由圖3可知，不同試劑處理后，在低溫脅迫2、5、8 d時(shí)，T2植株莖干韌皮部中的MDA含量，T2分別比T1和CK降低40.26%、34.95%、34.00%和48.46%、49.31%、53.48%，差異均達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。植株莖干韌皮部的O2-·含量，T2分別比T1和CK降低45.87%、23.14%、32.03%和56.64%、31.29%、43.93%，差異均達(dá)到極顯著水平(P<0.01)。以上結(jié)果表明，T2在降低低溫脅迫下，橡膠樹莖干韌皮部的MDA和O2-·含量方面，效果優(yōu)于T1和CK。

圖3 不同處理對(duì)橡膠樹莖干韌皮部丙二醛和超氧陰離子含量的影響

2.4 不同處理對(duì)低溫脅迫下橡膠樹莖干韌皮部活性氧清除相關(guān)酶類的影響

逆境下，為了避免植物產(chǎn)生的活性氧(ROS)對(duì)生物系統(tǒng)的氧化傷害，植物細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生一系列酶類抗氧化劑來克服活性氧的毒性。SOD可以有效清除植物細(xì)胞內(nèi)O2-·的含量，從圖4可知，SOD活性隨著低溫脅迫的延長(zhǎng)而呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)，與圖3中的O2-·含量變化并不一致，可能是SOD清除了大量超氧陰離子而致使SOD的活性有所下降的緣故，T2分別比T1和CK高出16.81%、1.85%、10.70%和97.37%、19.04%、13.77%，差異達(dá)到顯著(P<0.05)或極顯著水平(P<0.01)。POD可以有效降低因低溫脅迫而產(chǎn)生的氧自由基，POD活性的變化趨勢(shì)與MDA含量的變化趨勢(shì)一致，這證明了POD在降低氧自由基對(duì)細(xì)胞膜過氧化中的作用，T2的橡膠樹莖干韌皮部POD分別比T1和CK高41.58%、41.79%、38.07%和1.23倍、1.29倍、1.20倍。CAT可以有效分解H2O2。CAT活性的變化趨勢(shì)與POD活性的變化趨勢(shì)一致：先上升后下降，T2分別比T1和CK高出1.83倍、47.93%、63.56%和3.48倍、2.07倍、2.34倍，差異達(dá)到顯著(P<0.05)或極顯著水平(P<0.01)。以上結(jié)果表明，與T1、CK相比，在提高低溫脅迫下橡膠樹莖干韌皮部活性氧清除系統(tǒng)中SOD、POD和CAT等相關(guān)酶活性方面，T2的效果更佳。

圖4 不同處理對(duì)低溫脅迫下橡膠樹莖干韌皮部SOD、POD、CAT活性的影響

2.5 不同處理對(duì)低溫脅迫下橡膠樹流膠的影響

低溫脅迫的第4天，植株開始出現(xiàn)流膠癥狀，低溫脅迫的第8天，植株流膠癥狀達(dá)到頂峰。流膠多出現(xiàn)在植株莖干的葉痕處、未木質(zhì)化的復(fù)葉葉柄處及幼嫩莖干處。對(duì)于已木質(zhì)化莖干，T2流膠個(gè)數(shù)比T1和CK均減少83.33%，T2流膠面積比T1和CK分別減少90.97%和98.81%；對(duì)于其他部位，T2流膠個(gè)數(shù)比T1和CK分別減少20.00%和65.22%，T2流膠面積比T1和CK分別減少91.37%和53.37%(表1)。由此可知，低溫脅迫下，T2既有效降低了橡膠樹涂抹復(fù)合涂封劑的流膠癥狀，也促進(jìn)了未涂抹部位抵御寒害的能力，降低了未涂抹部位流膠癥狀的發(fā)生。

表1 低溫脅迫下調(diào)節(jié)劑使用對(duì)橡膠樹流膠的影響

3 結(jié)論與討論

寒害作為中國天然橡膠樹種植區(qū)主要的氣象災(zāi)害之一，也是中國植膠區(qū)特有的主要限制性因子[29]。由于氣候的變化，橡膠樹寒害發(fā)生總體呈逐年減少的趨勢(shì)。但是，不斷增加的極端天氣事件致使嚴(yán)重或特重的橡膠樹寒害呈上升的趨勢(shì)，天然橡膠的產(chǎn)量面臨巨大的挑戰(zhàn)[30]，主要體現(xiàn)在以下2個(gè)方面：一是全球變暖造成的樹體物候期提前所遭遇的突如其來的寒害，二是全球變暖引起的植膠區(qū)北移而增加的遭受寒害的風(fēng)險(xiǎn)[3]。橡膠樹寒害樹冠受寒癥狀為嫩葉枯焦，葉片、枝條干枯，莖干受害表現(xiàn)為黑斑，外層或整個(gè)樹皮受害，嚴(yán)重出現(xiàn)爆皮流膠和由于莖基流膠的“爛腳”癥狀[31]。橡膠樹爆皮流膠可能發(fā)生在樹體的所有部位，但是由于橡膠樹生產(chǎn)的特殊性，樹干爆皮流膠危害最嚴(yán)重。因此，如何采取相應(yīng)的栽培技術(shù)措施以減少流膠癥狀的發(fā)生和探索橡膠樹耐受低溫脅迫的機(jī)理，對(duì)橡膠樹的抗寒栽培至關(guān)重要。生產(chǎn)中常用割面涂封劑在橡膠樹停割后對(duì)割面進(jìn)行涂封，以達(dá)到橡膠樹對(duì)寒害的預(yù)防，但是，大多數(shù)市售的割面涂封劑僅由成膜劑、單一生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑與各種植物油脂混配而成，主要是通過生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑促進(jìn)樹體生長(zhǎng)及油脂膜使割面與外界隔離起到物理防護(hù)作用，只能使樹體進(jìn)行被動(dòng)地防御寒害。在本研究中，復(fù)配割面涂封劑可以誘導(dǎo)樹體自身抵御低溫脅迫的各種機(jī)制，有效促進(jìn)橡膠樹的冷馴化，并降低了低溫脅迫下橡膠樹植株流膠癥狀的發(fā)生，對(duì)于實(shí)際生產(chǎn)具有重要的應(yīng)用依據(jù)。

橡膠樹抗寒生理研究的早期，組織含水量、細(xì)胞透性、代謝過程中清除自由基的酶類、起滲透調(diào)節(jié)作用的有機(jī)物質(zhì)等生理指標(biāo)就已作為評(píng)價(jià)橡膠樹抗寒能力的基本參數(shù)[2]。低溫脅迫發(fā)生時(shí)，生物膜的膜相從液晶相轉(zhuǎn)變?yōu)槟z相，細(xì)胞外部滲透壓膨脹，膜上產(chǎn)生更多的諸如超氧陰離子、過氧化氫等的氧自由基，加快了膜脂過氧化產(chǎn)物MDA的積累，致使膜發(fā)生破裂，膜透性增加，膜內(nèi)攜帶水的可溶性滲透物質(zhì)滲出，植物含水量降低，植物組織相對(duì)電導(dǎo)率上升[32]。由于ABA是植物水分平衡和脅迫適應(yīng)的重要調(diào)節(jié)因子，明顯增強(qiáng)植物抗氧化防御系統(tǒng)，增加植物滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量，激發(fā)植物對(duì)低溫等逆境的適應(yīng)性響應(yīng)，引發(fā)植物冷馴化，提高植物抗寒性[33-34]。Rouhollah等[35]在外源ABA對(duì)“Sultana”葡萄低溫脅迫下影響的研究中，發(fā)現(xiàn)ABA可以提高低溫脅迫下“Sultana”葡萄葉片相對(duì)含水量、可溶性糖、脯氨酸和總酚化合物的增加，降低相對(duì)電導(dǎo)率。魯榮海等[36]在脫落酸處理對(duì)低溫脅迫下茄子幼苗生理生化影響的研究中，發(fā)現(xiàn)噴施不同濃度的ABA處理均能提高低溫脅迫下茄子幼苗SOD、POD、CAT的活性，增加其SS、SP的含量，降低其REC和MDA含量，促進(jìn)茄子幼苗在低溫下的生長(zhǎng)，緩解低溫對(duì)茄子幼苗的傷害，并提高茄子幼苗對(duì)低溫脅迫的抵御能力。殼聚糖是甲殼素經(jīng)強(qiáng)堿脫乙酰的產(chǎn)物，也叫甲殼胺，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用較為廣泛，可以有效提高作物抗逆性[37]。殼聚糖(chitosan)可以降低低溫脅迫玉米幼苗的MDA含量和REC，提高SS和Pro含量，提高過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT)活性，從而提高其抵御低溫的能力[38]。王沛等[39]在噴施殼聚糖對(duì)核桃抗凍性影響的研究中，發(fā)現(xiàn)外源殼聚糖可以顯著提高核桃枝條內(nèi)SOD、CAT、POD活性及Pro含量，提高核桃樹的抗寒性。劉術(shù)均等[40]發(fā)現(xiàn)葉面噴施殼聚糖溶液可以有效地提高低溫脅迫下茄子幼苗的Pro、SS含量，提高SOD、CAT、POD的活性，延緩細(xì)胞質(zhì)膜過氧化的進(jìn)程，維持細(xì)胞膜的完整性，最終降低其低溫冷害指數(shù)，提高茄子幼苗抵御低溫的能力。Ca2+是植物在非脅迫和脅迫條件下生長(zhǎng)發(fā)育必需的基本元素，它具有構(gòu)造元素(細(xì)胞壁、細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)成分)和第二信使的雙重作用。黃玉婷等[41]為了解鈣離子信號(hào)通路與茶樹抗寒性之間的關(guān)系，采用人工模擬低溫和外源施用鈣調(diào)素(CaM)抑制劑、鈣信號(hào)通道抑制劑和CaCl2，測(cè)定茶樹葉片抗寒相關(guān)生理指標(biāo)，結(jié)果表明：鈣調(diào)素抑制劑和鈣信號(hào)通道抑制劑使低溫脅迫下茶樹SOD活性降低；外源Ca2+則提高了其SOD活性。廉潔等[42]在CaCl2對(duì)低溫脅迫下番茄幼苗的影響中發(fā)現(xiàn)，外源CaCl2維持了低溫脅迫下植株內(nèi)部SOD、POD活性穩(wěn)定，清除植株體內(nèi)過量氧化物，對(duì)抗冷脅迫對(duì)植株造成的損害，從而提高耐冷型番茄品種應(yīng)對(duì)冷脅迫的能力。但這些研究均局限于單一物質(zhì)對(duì)植物抗寒生理的影響。在本研究中，復(fù)合割面涂封劑由ABA、殼聚糖、CaCl2復(fù)配而成，處理橡膠樹植株后，維持了低溫脅迫下韌皮部細(xì)胞RWC，減緩了電解質(zhì)滲出率REC的升高，降低了活性氧物質(zhì)O2-·含量和膜脂過氧化物的MDA含量，增加了滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)Pro、SP、SS的含量，增強(qiáng)了抗氧化系統(tǒng)中SOD、POD、CAT的活性，保護(hù)了脂膜系統(tǒng)，降低了低溫對(duì)植株的傷害，提高了植株抵御寒冷的能力，從而降低了植株流膠癥狀的發(fā)生率，因此，新型割面涂封劑有效提高了植株的抗寒性。

有機(jī)物(激素或非激素)與無機(jī)物復(fù)配的抗寒調(diào)節(jié)物質(zhì)是利用它們相互間的協(xié)同誘導(dǎo)效應(yīng)，激發(fā)植物一系列生理生化反應(yīng)，從而提高植物抗寒性。復(fù)配劑的效果優(yōu)于單一抗寒調(diào)節(jié)物質(zhì)，在棉花[43]、玉米[44]、油菜[45]等作物上均有報(bào)道。本研究中所用的抗寒調(diào)節(jié)物質(zhì)是基于ABA[9]與殼聚糖[19]在提高橡膠樹抗寒性的基礎(chǔ)上，與無機(jī)物CaCl2混配，結(jié)合ABA在植物冷馴化、殼聚糖在作物抗寒及CaCl2在植物逆境脅迫中的有效調(diào)節(jié)作用，有效增強(qiáng)了橡膠樹植株質(zhì)膜的相對(duì)穩(wěn)定性，維持了組織的水分平衡，促進(jìn)了其抗氧化防御系統(tǒng)的作用，最終提高了低溫脅迫下橡膠苗的抗寒性，有效降低了植株因低溫造成流膠癥狀的發(fā)生率，對(duì)橡膠樹新型割面涂封劑的研發(fā)、抗寒栽培措施的實(shí)施及抗寒機(jī)理探索提供了重要的理論依據(jù)。