不同血凝分析儀纖維蛋白原檢出限及原因分析

董慧 占建麗 謝靜

武夷山市立醫(yī)院檢驗(yàn)科 福建武夷山 354300

Fbg 也稱凝血因子I，是在肝臟中合成的一種大分子球蛋白，后主要分布于血漿中，正常血漿濃度為2.0～4.0g/L，是血液纖溶系統(tǒng)的一項(xiàng)重要指標(biāo)[1]。Fbg在凝血過程中，經(jīng)機(jī)體內(nèi)外凝血途徑產(chǎn)生的凝血酶作用下生成纖維蛋白單體，后者再在XIII 因子與鈣離子的作用下轉(zhuǎn)化交聯(lián)成穩(wěn)定的纖維蛋白多聚體（纖維蛋白），形成包羅紅細(xì)胞、血小板和白細(xì)胞等的纖維蛋白網(wǎng)[2]。同時(shí)，F(xiàn)bg 也是任何基于凝固法檢測原理的血凝試驗(yàn)的核心，其結(jié)果決定了其他血凝項(xiàng)目檢測結(jié)果的可靠性[3]。本研究分析了不同血凝分析儀纖維蛋白原檢出限及原因，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源

抽取2019 年4 月～2019 年5 月于武夷山市立醫(yī)院就診的80 例患者作為研究對象，抽取患者清晨空腹靜脈血制為無菌標(biāo)本，由檢驗(yàn)科同一醫(yī)師進(jìn)行檢驗(yàn)。置于按1：9 配置的0.109 mmol/L 枸櫞酸鈉抗凝液的試管（成品）中，3000 r/min 常溫離心10 分鐘，分離血漿。標(biāo)本應(yīng)避免溶血、黃疸、脂血及藥物等干擾，濃度盡可能覆蓋檢測項(xiàng)目線性范圍。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑

采用Sysmex 公司生產(chǎn)的CS5100 全自動(dòng)血凝分析儀與CA1500 全自動(dòng)血凝分析儀。購買CS5100 與CA1500 型Sysmex 系列全自動(dòng)血凝分析儀原裝配套試劑，包括配套的校準(zhǔn)品（LOT503259B）、質(zhì)控品（①548265A-異常血漿；②548068B-正常血漿）、試劑及洗液。

1.2.2 檢測方法

Thrombin Reagent 試劑冰箱取出后蒸餾水復(fù)溶，平衡室溫15 分鐘。采用CS5100 型全自動(dòng)血凝分析儀，進(jìn)行相應(yīng)校準(zhǔn)、線性、檢測限試驗(yàn)及攜帶污染率檢測（Fbg 值的誤差EA 在CLIA’88 的允許誤差范圍內(nèi)）。采用Von Clauss 法對標(biāo)本進(jìn)行檢測，另將所有標(biāo)本置于CA1500 血凝分析儀上測量Fbg 含量原倍值及1/2 稀釋值。

1.2.3 分析方法

Fbg 在正常血漿濃度為2.0～4.0g/L，所有標(biāo)本檢測完成后按FIB 含量分為三組：小于2.0g/L（29 例）、2.0g/L～4.0g/L（36 例）、大于4.0g/L（15 例）。分別對兩種儀器的Fbg 標(biāo)本檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)均用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用配對t 檢驗(yàn)，并進(jìn)行相關(guān)性分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

（1）當(dāng)血漿內(nèi)Fbg 含量小于2.0g/L 時(shí)，不同機(jī)型與是否稀釋無顯著性差異（P ＞0.05）;（2）當(dāng)血漿內(nèi)Fbg 含量在2.0～4.0g/L 時(shí)，不同機(jī)型原倍值測定結(jié)果無顯著差異（P ＞0.05），不同機(jī)型與1/2 稀釋測定結(jié)果、同一機(jī)型與1/2 稀釋測定結(jié)果比較存在顯著差異（P＜0.05）；（3）當(dāng)血漿內(nèi)Fbg 含量大于4.0g/L 時(shí)，不同機(jī)型原倍值測定結(jié)果與同一機(jī)型與1/2 稀釋測定結(jié) 果比較存在顯著性差異（P ＜0.05）。見表

表 不同血凝分析儀測定的Fbg 含量比較（）

表 不同血凝分析儀測定的Fbg 含量比較（）

3 討論

纖維蛋白原（Fbg）作為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（APRP），其增加往往是機(jī)體的一種非特異反應(yīng)表現(xiàn)。在機(jī)體發(fā)生炎癥感染、組織損傷、心梗及腫瘤時(shí)，其血漿濃度會(huì)顯著上升，會(huì)使血液處于高凝狀態(tài)，易產(chǎn)生血栓，發(fā)生心梗/猝死，普遍認(rèn)為Fbg 升高是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[4]。而Fbg 水平越高，危險(xiǎn)性亦越大。如在心肌梗死病程中，再梗死多發(fā)生在Fbg 水平超過7g/L的患者。腎病綜合征患者因低蛋白血癥刺激肝臟代償性合成Fbg，甚至可高達(dá)10.0g/L。

近年來隨著全自動(dòng)血凝分析儀器在臨床試驗(yàn)中的廣泛應(yīng)用，檢測Fbg 最常用的是Von Clauss 法（國際標(biāo)準(zhǔn)定量法）[5]。Von Clauss 法的原理是：將足量的凝血酶加到乏血小板的待測血漿中，促使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白，從而使血漿凝固，結(jié)果較目前的其他方法也更為準(zhǔn)確，因而將其運(yùn)用到了本研究中Fbg 的檢測中。

本科室在過去的幾年均采用SysmexCA1500 全自動(dòng)血凝分析儀對患者的Fbg 進(jìn)行檢測，科室對Fbg 的線性范圍無深入了解，且未對高Fbg 含量進(jìn)行稀釋重測的情況，臨床上也鮮有對高纖維蛋白原血癥的重視，所以導(dǎo)致多年未出現(xiàn)高Fbg 含量檢測值的情況。所以血凝儀能否檢測出高值Fbg 含量對臨床的意義也顯得越來越重要。

在本次研究中用到的CS5100 血凝分析儀與CA1500 血凝分析儀都是全自動(dòng)的，相較于大部分基層醫(yī)院使用的不能直接進(jìn)行機(jī)內(nèi)自動(dòng)稀釋的自動(dòng)或半自動(dòng)血凝檢測儀性能更為優(yōu)越，根據(jù)研究結(jié)果顯示，CS5100 全自動(dòng)血凝分析儀比CA1500 全自動(dòng)血凝分析儀更易檢出血漿原倍值的高值Fbg 含量，但CA1500全自動(dòng)血凝分析儀檢驗(yàn)稀釋后的血漿高值Fbg 含量較同機(jī)型原倍值更高。因CA1500 血凝分析儀無法自動(dòng)對高纖維蛋白原標(biāo)本進(jìn)行稀釋，當(dāng)Fbg 超出其線性范圍時(shí)，則無法獲得實(shí)際的高Fbg 濃度值。所以當(dāng)在CA1500 上做的纖維蛋白原濃度檢測值大于4g/L 時(shí)，建議機(jī)外稀釋再做一遍或放到CA5100血凝儀上復(fù)查，以減低實(shí)驗(yàn)過程中的檢測誤差。

綜上所述，在使用不同血凝分析儀檢測Fbg 所以要明確了解本科室血凝儀的線性范圍，明確哪些值需要進(jìn)行手工稀釋復(fù)查，制定針對該血凝儀的復(fù)查標(biāo)準(zhǔn)，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床提供準(zhǔn)確、及時(shí)的檢測結(jié)果。