乳及乳制品中致病菌檢測技術(shù)的研究進(jìn)展

卜秀秀 王莉娜

(蒙牛乳業(yè)(焦作)有限公司，河南 焦作 454150)

1 分子生物學(xué)技術(shù)

分子生物學(xué)技術(shù)是生物學(xué)的一個(gè)分支，其主要研究概念是在分子水平上進(jìn)一步研究生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，分子生物學(xué)技術(shù)是依據(jù)生物、化學(xué)、生物物理學(xué)、生物遺傳學(xué)等多方面知識(shí)生成的，其主要研究對象是酶、核酸以及蛋白質(zhì)。運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù)檢測乳及乳制品中致病菌首先需要明確檢測原理。20世紀(jì)中后期，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)酶能夠切割DNA，并有重組DNA的可能，這也成為當(dāng)前乳及乳制品中致病菌檢測的重要理論依據(jù)，而該理論在當(dāng)前也成為PCR技術(shù)的重要依據(jù)。

PCR技術(shù)是通過向特定酶中注入熒光劑，這類酶的特定對象一般是食源性致病菌。當(dāng)注入熒光劑的酶進(jìn)入實(shí)驗(yàn)材料中，若實(shí)驗(yàn)材料中存在食源性致病菌，那么酶就會(huì)與實(shí)驗(yàn)材料中的食源性致病菌進(jìn)行反應(yīng)，切割致病菌DNA鏈條再進(jìn)行重組，重組完成后，原食源性致病菌DNA鏈條中能夠檢測出熒光反應(yīng)，以此來推斷檢測材料中是否含有食源性致病菌。這類檢測方法具有檢測時(shí)間短、檢測成本低、檢測效率高等優(yōu)點(diǎn)，但同時(shí)也存在可檢測目標(biāo)單一的缺點(diǎn)，往往運(yùn)用到更具有針對性的檢測過程中[1]。

2 免疫學(xué)技術(shù)

免疫學(xué)技術(shù)本身是研究生物體對致病細(xì)菌或病毒、微生物等的防御能力，以及防御力失調(diào)后的調(diào)整及治療的科學(xué)。免疫學(xué)技術(shù)的運(yùn)用極為廣泛，現(xiàn)代人普遍接種的疫苗就是免疫學(xué)技術(shù)的成果，免疫學(xué)也涉及自身免疫病等內(nèi)容，而器官移植后的免疫排斥及免疫抑制也是當(dāng)前免疫學(xué)技術(shù)的主要研究對象，是當(dāng)前社會(huì)重要的生物學(xué)科及醫(yī)學(xué)科研的內(nèi)容。免疫學(xué)技術(shù)為乳及乳制品中的致病菌檢測提供了重要檢測依據(jù)。而在針對乳及乳制品中致病菌檢測的內(nèi)容中，免疫學(xué)技術(shù)可分為多種不同技術(shù)手段，針對不同情況下的乳及乳制品致病菌檢測。

例如，酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)。其基本檢測原理是通過向待檢測材料中添加酶與抗原或抗體用過交聯(lián)劑結(jié)合為酶標(biāo)抗原或抗體，待檢測材料中相應(yīng)的抗原抗體會(huì)與酶標(biāo)抗原抗體產(chǎn)生特異反應(yīng)。并形成具有活性的免疫復(fù)合物，向待檢測材料中添加相應(yīng)底物使其與待檢測材料中的免疫復(fù)合物產(chǎn)生變色反應(yīng)，顏色的深淺代表了帶檢測材料中免疫復(fù)合物含量的多少，也就是帶檢測材料中存在致病菌的多少。酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)具有較高的特異性與靈敏性，且操作簡單，可檢測對象范圍廣，是當(dāng)前我國最常使用的乳及乳制品中致病菌的檢測方法，能夠同時(shí)進(jìn)行大量樣品的檢測，且檢測時(shí)間短，一般運(yùn)用于大型的抽樣檢測檢查中[2]。

除此之外，還包括免疫磁珠技術(shù)，免疫磁珠技術(shù)的全稱為免疫磁珠分離技術(shù)，這個(gè)技術(shù)在使用的過程當(dāng)中，主要是利用免疫磁珠表面的特性，等到被檢樣品跟磁珠產(chǎn)生特性結(jié)合之后，并且經(jīng)歷過磁場的作用，復(fù)合物就會(huì)出現(xiàn)滯留的情況，這樣就能夠?qū)崿F(xiàn)抗原抗體磁珠跟其它成分的有機(jī)分離，最終病菌也會(huì)被分離出去，在乳制品的常見食源性致病菌檢測過程當(dāng)中，免疫磁珠技術(shù)可以有效精準(zhǔn)地檢測沙門氏菌以及大腸桿菌等等，酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)主要使用的是不同的PCR技術(shù)來進(jìn)行。循環(huán)檢測精準(zhǔn)地檢測出幼兒奶粉當(dāng)中的一些致菌桿菌，而免疫膠體金技術(shù)則是依據(jù)被酶催化之后樣品的顏色來判斷是否出現(xiàn)了志賀氏菌、沙門氏菌以及李斯特菌等這些比較常見的食源性致病菌，酶聯(lián)熒光技術(shù)的主要原理是通過抗體或者是抗原跟交聯(lián)劑進(jìn)行有機(jī)結(jié)合之后可以生成一個(gè)酶標(biāo)抗體或者是抗原。同時(shí)和固相載體上的抗原產(chǎn)生一個(gè)反應(yīng)之后，能夠有效地實(shí)現(xiàn)免疫復(fù)合物，而且，酶聯(lián)熒光技術(shù)既具備免疫熒光法，又具備放射免疫法的優(yōu)勢，將這二者進(jìn)行高度融合。所以說它的特性以及靈敏度是非常高的，檢測速度也非?？?，可以在短期內(nèi)檢測大量的樣品。

3 培養(yǎng)法檢測技術(shù)

培養(yǎng)法檢測技術(shù)是過去我國最常使用的食源性致病菌檢測技術(shù)，該技術(shù)通過提取待檢測材料中的樣品，在培養(yǎng)皿中進(jìn)行培養(yǎng)，在培養(yǎng)完成后提取培養(yǎng)皿中物質(zhì)進(jìn)行檢測分析是否含有食源性致病菌。該檢測技術(shù)在當(dāng)前已經(jīng)不常使用，因?yàn)闄z測過程耗時(shí)較長，即使將培養(yǎng)皿置于穩(wěn)定環(huán)境中培養(yǎng)，依舊有許多不可控因素會(huì)影響培養(yǎng)結(jié)果。且在培養(yǎng)過程中，需要借助多種技術(shù)協(xié)助進(jìn)行，整體檢測難度極大，且食源性致病菌中存在一部分無法人工培育的內(nèi)容，這是培養(yǎng)法檢測技術(shù)的漏洞，且由于不同培養(yǎng)皿中所包含的營養(yǎng)物質(zhì)不能滿足所有食源性致病菌的生長，多數(shù)情況下，培養(yǎng)法檢測技術(shù)只能夠針對某一種食源性致病菌進(jìn)行檢測。整體耗時(shí)長，且檢測目標(biāo)單一，不適用于大量樣本的檢測工作，當(dāng)前我國已基本完成檢測技術(shù)更新，培養(yǎng)法檢測技術(shù)不再運(yùn)用于乳及乳制品中致病菌的檢測工作中，通常只在針對性較強(qiáng)的檢測工作中使用[3]。

4 結(jié)語

結(jié)合全文可知，當(dāng)前我國居民對乳及乳制品的需求量較20世紀(jì)有質(zhì)的增長，而不斷出現(xiàn)的乳品安全問題使得我國消費(fèi)者權(quán)益受到了巨大損害。國家就乳品行業(yè)的質(zhì)量檢測與監(jiān)督提出了更高的要求，而乳品致病菌的檢測方法也逐漸完善，給予了消費(fèi)者更多的食品安全保障。而科學(xué)地運(yùn)用檢測方法是保障消費(fèi)者視頻安全的首要條件，進(jìn)一步完善乳品致病菌檢測能夠有效促進(jìn)我國乳品行業(yè)發(fā)展，減少劣質(zhì)乳品對我國社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的危害。