食品補(bǔ)充檢驗(yàn)方法 蔬菜水果中滅蠅胺殘留量的檢測(cè) 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

項(xiàng)林敏 邢銀英 陳建 毛理鵬

摘要：本方法在標(biāo)準(zhǔn)方法《蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法》（NY/T 1725-2009）的基礎(chǔ)上，簡(jiǎn)化步驟，通過提取與凈化，建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜水果中的滅蠅胺分析方法。結(jié)果表明，采用簡(jiǎn)化后的前處理方法測(cè)定蔬菜水果中的滅蠅胺，加標(biāo)回收率為86.2～102.1%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～6.7%，其回收率和精密度都能達(dá)到分析檢測(cè)要求。運(yùn)用該方法對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行分析，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果可靠，可為蔬菜水果中滅蠅胺的批量快速檢測(cè)方法研究提供數(shù)據(jù)參考。

一、背景

滅蠅胺為1，3，5 -三嗪類昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑低毒殺蟲劑，有非常強(qiáng)的選擇性，對(duì)雙翅目幼蟲有特殊活性。其作用機(jī)理是使雙翅目昆蟲幼蟲和蛹在形態(tài)上發(fā)生畸變，成蟲羽化不全或受抑制。該藥極性強(qiáng)具有觸殺和胃毒作用，并有強(qiáng)內(nèi)吸傳導(dǎo)性，持效期較長(zhǎng)，但作用速度較慢。滅蠅胺用于防治黃瓜、茄子、四季豆、葉菜類等農(nóng)業(yè)害蟲。滅蠅胺要達(dá)到殺蟲的效果，必須經(jīng)過作物的吸收，然后才能作用于害蟲， 因此殘留周期較長(zhǎng)，需要足夠的間隔期才能有效降解。而不少種植戶為了賣相好，存在沒有嚴(yán)格按規(guī)定采摘期進(jìn)行采摘的情況，從而導(dǎo)致超標(biāo)。少量的農(nóng)藥殘留不會(huì)引起人體急性中毒，但長(zhǎng)期食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的食品，對(duì)人體健康有一定影響。

查看近6年的國(guó)家食品安全抽撿實(shí)施細(xì)則，發(fā)現(xiàn)除2017年沒有檢測(cè)滅蠅胺項(xiàng)目外，2016-2021年均有不同類別蔬菜檢測(cè)此項(xiàng)目，但細(xì)則中要求采用的檢測(cè)方法均為NY/T 1725-2009《蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法》。

這幾年，農(nóng)藥殘留一直是食品安全的熱門話題，與人們的生活息息相關(guān)，老百姓都很關(guān)心哪些蔬菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)嚴(yán)重，哪些可以放心吃，哪些要少吃。為了讓老百姓買得放心，吃得安心，近幾年各地市場(chǎng)監(jiān)管局加大了農(nóng)產(chǎn)品的抽檢力度，但報(bào)道豇豆中滅蠅胺超標(biāo)的現(xiàn)象屢有發(fā)生。2021年上半年浙江省蔬菜監(jiān)督抽檢分析報(bào)告顯示：2021年上半年浙江省組織實(shí)施蔬菜監(jiān)督抽檢12763批次產(chǎn)品，檢出不合格416批次，不合格率3.26%，其中豆類蔬菜抽檢948批次，不合格113批次，不合格率為11.92%，相較 2020年上升5.74%。其主要涉及不合格細(xì)類是豇豆（109批次）和菜豆（4批次），豇豆農(nóng)藥殘留超標(biāo)的情況較為嚴(yán)重。2021年上半年，監(jiān)督抽檢蔬菜涉及不合格項(xiàng)目28個(gè)，其中農(nóng)藥殘留超標(biāo)項(xiàng)目24個(gè)，禁用農(nóng)藥項(xiàng)目2個(gè)，重金屬殘留超標(biāo)項(xiàng)目2個(gè)，總計(jì)不合格598項(xiàng)次，主要不合格項(xiàng)目為腐霉利150項(xiàng)次，占全部不合格項(xiàng)次的25.08%，居第一;滅蠅胺54項(xiàng)次，占全部不合格項(xiàng)次的9.03%，居第四。分析報(bào)告還顯示，豇豆不合格項(xiàng)目有滅蠅胺、倍硫磷、克百威等12項(xiàng)農(nóng)藥殘留超標(biāo)，其中滅蠅胺監(jiān)督抽檢707項(xiàng)次，不合格54項(xiàng)次，不合格率7.64%，居首位?？梢婔箿缦壈忿r(nóng)藥殘留超標(biāo)現(xiàn)象嚴(yán)重。

二、問題

目前，果蔬中農(nóng)藥多殘留分析方法主要有液相色譜法（LC）和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）。而液相法NY/T 1725-2009，前處理步驟繁瑣，溶劑消耗較大，耗時(shí)較久，經(jīng)過兩次旋蒸，一次過小柱，一次氮吹，長(zhǎng)時(shí)間的前處理導(dǎo)致回收率不佳，且流動(dòng)相為高比例的乙腈對(duì)儀器影響較大，很容易因雜峰造成檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)，光譜圖特異性不明顯。而在液質(zhì)方面，雖然在最新發(fā)布實(shí)施的GB 2763-2021中蔬菜水果滅蠅胺檢測(cè)方法推薦為GB/T 20769-2008《水果和蔬菜中450中農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》，該方法推薦使用 Atlantis T3 C18 反相色譜柱，在實(shí)際應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，有些化合物在反相色譜中并沒有得到保留，反而因基質(zhì)干擾，溶劑效應(yīng)嚴(yán)重，導(dǎo)致峰型不好，定量困難，這類化合物在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中標(biāo)明為定性鑒別的農(nóng)藥及相關(guān)化合物，而滅蠅胺就在這類化合物之中，故沒有合適的方法來定量檢測(cè)滅蠅胺。

三、對(duì)策

基于上述問題，有必要建立一種建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定蔬菜水果中的滅蠅胺分析方法，作為補(bǔ)充檢驗(yàn)方法，在較低檢出限的情況下快速批量檢測(cè)樣品，能夠方便檢測(cè)機(jī)構(gòu)選擇合適自己的方法進(jìn)行檢測(cè)，提高檢測(cè)效率。新的液質(zhì)方法見下文：

1、儀器與試劑

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀Agilent 6470QQQ配有ESI源，美國(guó)安捷倫公司;超聲波清洗器;高速冷凍離心機(jī);;漩渦振蕩儀;電子天平;塑料離心管;乙腈;甲酸、乙酸、乙酸銨;0.2μm有機(jī)濾膜?；|(zhì)分散固相萃取劑：50mgPSA、150mgMgSO4、10mgGCB。實(shí)驗(yàn)樣品為菜場(chǎng)隨機(jī)購(gòu)買。滅蠅胺標(biāo)樣購(gòu)自上海安譜。

2、提取方法：稱取10g樣品（精確至0.01g）試樣于50mL離心管中，加入1%乙酸-乙腈溶液20mL，均質(zhì)0.5 min，搖勻，4000 r/min 離心5min。取上清液1.0mL，加適量基質(zhì)分散固相萃取劑凈化，劇烈振搖1min，4000 r/min離心5 min，取上清液用0.2μm 濾膜過濾，用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測(cè)定。

3、標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：稱取10g空白樣品通過前處理步驟制備空白基質(zhì)溶液，將標(biāo)準(zhǔn)中間液稀釋至適合濃度曲線。

4、測(cè)定：色譜柱：Eclipse Plus C18 RRHD（1.8μm，3.0×50 mm）;流動(dòng)相：A-甲醇、B-水（含5 mmol/L乙酸銨+0.1%甲酸）;梯度洗脫程序見表1，流速為0.2 mL/min，進(jìn)樣體積2 μL，柱溫30℃，定量/定性離子對(duì)：167/85、167/125。

13、結(jié)論：該檢驗(yàn)方法加標(biāo)回收率為86.2～102.1%，標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～6.7%，其回收率和精密度都能達(dá)到分析檢測(cè)要求。運(yùn)用該方法對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行分析，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果可靠，可為蔬菜水果中滅蠅胺的批量快速檢測(cè)方法研究提供數(shù)據(jù)參考。

四、建議

1、適時(shí)發(fā)布滅蠅胺補(bǔ)充檢驗(yàn)方法，提高檢測(cè)效率

NY/T 1725-2009《蔬菜中滅蠅胺殘留量的測(cè)定 高效液相色譜法》，該方法前處理步驟復(fù)雜，耗時(shí)久，回收率不穩(wěn)定，不適合批量檢測(cè)工作，建議盡快出臺(tái)滅蠅胺的液質(zhì)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法，并在GB 2763和國(guó)家食品安全抽檢實(shí)施細(xì)則中增加該檢驗(yàn)方法，方便檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)自行選擇合適的方法檢測(cè)，提高效率。

2、規(guī)范制度，提高農(nóng)藥使用水平

農(nóng)藥殘留超標(biāo)現(xiàn)象依然較為嚴(yán)重，不少農(nóng)戶缺乏足用藥安全間隔期的意識(shí)，不考慮藥害后果，建議我省市場(chǎng)監(jiān)管局、農(nóng)業(yè)執(zhí)法部門雙管齊下，嚴(yán)格執(zhí)行用藥規(guī)定，規(guī)范用藥制度是提高蔬菜食品安全的重中之重。

3、提高監(jiān)督抽檢的靶向性

對(duì)不合格率較高產(chǎn)品（豇豆）和項(xiàng)目（滅蠅胺）加大監(jiān)管力度并提高抽樣頻次，適時(shí)開展專項(xiàng)整治行動(dòng)，通過優(yōu)化抽檢方案，靶向制定檢驗(yàn)項(xiàng)目，擴(kuò)大抽樣業(yè)態(tài)，堅(jiān)持以問題為導(dǎo)向，突出重點(diǎn)環(huán)節(jié)、重點(diǎn)區(qū)域，精準(zhǔn)施策，努力促進(jìn)食品安全狀況的根本好轉(zhuǎn)。