基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析疏肝健脾解毒方抗乳腺癌潛在靶點和作用機(jī)制

★萬杰鑫 趙斌 胡慧明 吳雙雙 官揚（.南昌市第三醫(yī)院 南昌 330009；.江西中醫(yī)藥大學(xué) 南昌 330004）

乳腺癌在我國女性中發(fā)病率逐漸升高，并逐漸呈現(xiàn)年輕化，其已成為女性腫瘤發(fā)病率增長最快的一種腫瘤，嚴(yán)重危害女性健康［1-2］。乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展是多種危險因素共同作用引起的［3］，化療和手術(shù)是治療乳腺癌的主要手段，但化療導(dǎo)致嚴(yán)重的毒副作用，且手術(shù)給患者帶來較大創(chuàng)傷。近年來，中醫(yī)藥預(yù)防和輔助西醫(yī)治療乳腺癌方面體現(xiàn)出良好的優(yōu)勢。

中醫(yī)認(rèn)為肝郁證是乳腺癌癌前病變中醫(yī)的重要病證。李琳霈等［4］認(rèn)為肝郁脾虛、瘀毒內(nèi)結(jié)是引起乳腺癌癌前病變的重要病機(jī)之一。中藥疏肝健脾解毒方在疏肝理氣、軟堅散結(jié)、活血化瘀、消腫止痛等方面有較好的療效，具有預(yù)防和治療乳腺癌作用［5］。有研究證實疏肝健脾解毒方可能通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，達(dá)到抑制人乳腺癌細(xì)胞MCF-7的增殖，且可有效降低乳腺癌癌前病變肝郁證大鼠模型血清中性激素水平［6-7］。白術(shù)、茯苓、郁金、柴胡健脾疏肝、行氣解郁；蒲公英、白花蛇舌草、半枝蓮清熱解毒、消腫散結(jié)，該方扶正抗癌，標(biāo)本同治。

白花蛇舌草性寒、味微苦；半枝蓮性寒、味辛微苦。二者皆屬清熱解毒類中藥, 具有清熱利濕、涼血解毒、軟堅散結(jié)等功效。研究表明二者在制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、增強(qiáng)機(jī)體免疫、降低端粒酶活性等方面起到協(xié)同作用［8］。郁金為姜科姜黃屬植物溫郁金（Chrcuma wenyujinY.H.chenet C.ling）、姜黃（Curcuma lougaL）、廣西莪術(shù)（Curcumak wangsiensisS.G.Lee et C.F.Liang）、或蓬莪術(shù)（CurcumaphaeoeaulisVal.）的干燥塊根, 藥用歷史悠久。其藥性寒, 味辛, 苦, 歸心、肝、膽經(jīng), 具有活血行氣鎮(zhèn)痛、消心解郁、利膽退黃、涼血止血之功效。臨床診療表明郁金的提取物能夠有效抑制多種腫瘤細(xì)胞的生長、減少腫瘤細(xì)胞數(shù)目、縮小腫瘤細(xì)胞體積［9］。中藥柴胡是狹葉柴胡（BupleurumscorzonerifoliumWilld.）或傘形科植物柴胡（Bupleurum chineseDC）的干燥根，味辛、苦，性微寒，有抗炎、抗菌、抗腫瘤等功效［10］，多項研究表明柴胡可逆轉(zhuǎn)腫瘤多藥耐藥，其聯(lián)合化療藥物治療乳腺癌可降低化療藥物的副反應(yīng)，對乳腺癌患者的預(yù)后起到一定的改善效果［11-13］。茯苓［Poria cocos（Schw.） Wolf］為我國傳統(tǒng)的藥用真菌, 是多孔菌科臥孔菌屬真菌茯苓的干燥菌核, 其主要成分為茯苓糖，胡康等［14］報道了茯苓提取物通過抑制SATB1來降低MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞的體外遷移能力，進(jìn)而控制乳腺癌的發(fā)展。白術(shù)（Atractylodes macrocephalaKoidz.） 為健脾益氣類中藥，具有調(diào)節(jié)胃腸功能、抗衰老、抗炎、抗腫瘤、提高免疫力、保肝以及改善和治療糖尿病的作用。LEE等［15］研究發(fā)現(xiàn)白術(shù)能夠提高腫瘤患者的免疫力，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞的生長繁殖從而達(dá)到抗腫瘤的作用。蒲公英為菊科植物蒲公英（Taraxacum mongolicumHand.-Maz.）、堿地蒲公英（Taraxacum borealisinenseKitam.） 或同屬數(shù)種植物的干燥全草；其味苦、甘, 性寒, 歸肝、胃經(jīng), 具有清熱解毒、消腫散結(jié)、利尿通淋的功效, 可用于乳癰、肺癰、腸癰、熱淋澀痛、濕熱黃疸、清肝明目［16］。研究表明蒲公英萜醇可通過線粒體途徑誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡，進(jìn)而對乳腺癌細(xì)胞起抑制作用［17］。

中藥的治療作用涉及多成分、多靶點的綜合調(diào)節(jié)作用，疏肝健脾解毒方預(yù)防和治療乳腺癌的作用機(jī)制研究多集中在臨床研究或細(xì)胞學(xué)層面，但缺乏多層次多層面抗乳腺癌的作用機(jī)制研究。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)從多成分、多靶點和多通路等多個方面研究中藥復(fù)方作用機(jī)制，為中藥研究提供了新思路［18］。本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法分析疏肝健脾解毒方抗乳腺癌的作用機(jī)制，為深入開展疏肝健脾解毒方預(yù)防和治療乳腺癌的基礎(chǔ)實驗研究及臨床治療提供依據(jù)。見圖1。

圖1 技術(shù)路線圖

1 材料與方法

1.1 疏肝健脾解毒方化學(xué)成分的收集疏肝健脾解毒方有郁金、柴胡、茯苓、白術(shù)、白花蛇舌草、半枝蓮、蒲公英。依托中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺（http://lsp.nwu.edu.cn /tcmsp.php）、中草藥綜合數(shù)據(jù)庫TDT（http://tcm.cmu.edu.tw）檢索疏肝健脾解毒方的主藥成分。以口服生物利用度（OB）， 類藥性（DL）為限制條件進(jìn)行活性成分篩選［19-20］，以 OB≥30 %且 DL≥0.18 為篩選閾值得到疏肝健脾解毒方的活性成分。

1.2 乳腺癌差異基因的收集設(shè)定“breast cancer normal”為關(guān)鍵詞，物種來源限定“Homo sapiens”，通過美國國立生物技術(shù)信息中心（National Center of Biotechnology Information，NCBI）基因表達(dá)數(shù)據(jù)庫 （http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/）獲得乳腺癌差異基因。

1.3 疏肝健脾解毒方活性成分-作用靶點網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建利用TCMSP數(shù)據(jù)庫（http://tcmspw.com/tcmsp.php）預(yù)測疏肝健脾解毒方活性成分的作用靶點，通過Perl語言（https://www.perl.org/）對所獲得的預(yù)測靶點蛋白名進(jìn)行轉(zhuǎn)換成相對應(yīng)的基因名，并剔除重復(fù)靶點。并通過 Cytoscape 3.7.2 軟件（http://www.Cytoscape.org/）構(gòu)建疏肝健脾解毒方活性成分-作用靶點網(wǎng)絡(luò)。

1.4 疏肝健脾解毒方-活性成分-關(guān)鍵靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建依據(jù)“1.2”“1.3”所得結(jié)果，應(yīng)用Cytoscape 3.7.2中的關(guān)聯(lián)（Merge）功能，將2個結(jié)果合并成疏肝健脾解毒方-活性成分-關(guān)鍵靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)圖，成分作用靶點圖和疾病靶點圖交集部分即是活性成分抗乳腺癌的關(guān)鍵靶點，通過Network Analyzer工具計算網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)，以探索疏肝健脾解毒方抗乳腺癌的作用機(jī)制。以180≤NW≤500，OB≥30 %，DL≥0.18為 篩選條件，篩選疏肝健脾解毒方中的791種成分，并與有靶點蛋白的活性成分進(jìn)行交叉對比，篩選出重合物質(zhì)進(jìn)行分子對接，進(jìn)一步驗證活性成分與關(guān)鍵靶點的結(jié)合效果。

1.5 乳腺癌靶點PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析將乳腺癌靶點導(dǎo)入Cytoscape中的插件“BisoGenet”，分析其靶點蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用（proteinprotein interaction，PPI）。利用節(jié)點的度中心性（degree centrality，DC）和介數(shù)中心性（betweenness centrality，BC）能夠識別關(guān)鍵蛋白［21］，對PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行度中心性（DC）、介數(shù)中心性（BC）拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)分析。

1.6 GO與KEGG通路 富 集分 析利 用R語 言對藥物靶點基因進(jìn)行Gene Ontology（GO）和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG）Pathway富集分析。以P<0.05為篩選標(biāo)準(zhǔn)確定藥物靶點基因參與的生物學(xué)過程和通路，尋找可能的作用通路。選擇 GO 功能中的生物過程、分子功能和細(xì)胞成分共參數(shù)對基因進(jìn)行富集分析。采用 omicshare平臺（http://www.omicshare.com/）對 KEGG 通路富集分析結(jié)果以高級柱狀圖進(jìn)行可視化。

2 結(jié)果

2.1 疏肝健脾解毒方活性成分的篩選通過在 TCMSP 及TDT平臺檢索，并將2個數(shù)據(jù)庫篩選結(jié)果合并，共獲得疏肝健脾解毒方共有791種成分，其中郁金222種，柴胡349種，茯苓34種，白術(shù)55種，白花蛇舌草37種，半枝蓮94種，蒲公英0個。將化學(xué)成分的口服利用度（OB）和類藥性（DL）的閾值分別設(shè)置為OB≥30 %，DL≥0.18獲取方中主藥的成分，獲得82種主要活性成分。見表1-2。其中郁金10個、柴胡14個、茯苓15個、白術(shù)7個、白花蛇舌草7個、半枝蓮26個、蒲公英0個，預(yù)測靶點共239個?；钚猿煞种笑?谷甾醇為郁金、白花蛇舌草、半枝蓮共有的成分；谷甾醇為半枝蓮、郁金共有的成分；黃芩苷為柴胡、半枝蓮共有成分；豆甾醇是柴胡、白花蛇舌草、半枝蓮共有的成分；槲皮苷是柴胡、白花蛇舌草、半枝蓮共有的成分。從表1-2可見郁金中化合物莪術(shù)內(nèi)酯，（Zedoarolide B）在82個候選化合物中具有最高的OB值（135.56 %），半枝蓮中Stigmasta-5，22-dien-3-ol-acetate在82個候選化合物中具有最高的DL值（0.86），根據(jù)DL和OB值篩選前10化合物的結(jié)構(gòu)。見圖2-3。

表1 疏肝健脾解毒方中DL值前10的化合物基本信息

表2 疏肝健脾解毒方中OB值前10的化合物基本信息

2.2 乳腺癌差異基因獲取及篩選通過在基因表達(dá)數(shù)據(jù)庫（GEO）中檢索基因芯片信息平臺GPL14550，利用R語言（https://www.r-project.org/）篩選差異基因，篩選標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05和|logFC|>1，并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)共得到689個乳腺癌差異表達(dá)基因，其中上調(diào)基因316個，下調(diào)基因373個。見圖4。取前40個差異最明顯的基因構(gòu)建分層聚類圖。見圖5。圖5中每列代表樣本，其中類型為“C”（conNum）為對照組，類型為“T”（treatNum）為實驗組。每行代表差異基因，顏色由綠到紅代表基因的表達(dá)情況，即由低表達(dá)到高表達(dá)。

圖2 疏肝健脾解毒方中DL值前10的化合物

圖3 疏肝健脾解毒方中OB值前10的化合物

圖4 差異基因的火山圖

2.3 “活性成分-靶點”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建依據(jù)TCMSP平臺，檢索疏肝健脾解毒方的51個主要活性成分的靶點，共239個。借助Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建“活性成分-靶點”網(wǎng)絡(luò)。見圖6。度值大小與疏肝健脾解毒方活性成分作用于該靶點的可能性大小呈正比。圖6中共有288個節(jié)點，1 150條邊，中間粉色橢圓代表活性成分，活性靶點為藍(lán)色平行四邊形狀，分布于四周。

2.4 “藥物-活性成分-關(guān)鍵靶點-疾病”網(wǎng)絡(luò)通過Cytoscape 3.7.2軟件中的Merge功能將成分-靶點網(wǎng)絡(luò)和疾病靶點相互作用網(wǎng)絡(luò)合并，得到與乳腺癌相關(guān)的疏肝健脾解毒方活性成分的潛在靶點，見表3，構(gòu)建疏肝健脾解毒方-活性成分-關(guān)鍵靶點-疾病網(wǎng)絡(luò)圖。見圖7。該網(wǎng)絡(luò)總共包含38個節(jié)點，45條邊。橙色節(jié)點代表乳腺癌藥物靶點基因，有21個；綠色節(jié)點代表白花蛇舌草，有1個；黃色節(jié)點代表白術(shù)，有1個；藍(lán)色節(jié)點代表半枝蓮，有9個；紫色節(jié)點代表柴胡，有2個；粉色節(jié)點代表郁金，有1個；紅色節(jié)點為3種中藥組成（其中MOL000098、MOL000449為白花蛇舌草、半枝蓮、柴胡共有的成分；MOL000358為白花蛇舌草、半枝蓮、郁金的共有成分），有3個。主要的網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)如下：網(wǎng)絡(luò)直徑（Network diameter）為6，平均相鄰數(shù)目（Avg.number of neighbors）為2.368。圖7結(jié)果進(jìn)一步表明，白花蛇舌草的2-甲氧基-3-甲基-9,10-蒽醌作用于β-2腎上腺素能受體；白術(shù)的3β-乙酰氧基蒼術(shù)堿作用于β-2腎上腺素能受體；半枝蓮的5-羥基-7,8-二甲氧基-2-（4-甲氧基苯基）色酮、7-羥基-5,8-二甲氧基-2-苯基-色酮、白楊素-5-甲醚、漢黃芩素、三裂鼠尾草素、薺苧黃酮作用于β-2腎上腺素能受體，黃芩素、木犀草素作用于基質(zhì)金屬蛋白酶-9，（2R）-5,7-二羥基-2-（4-羥基苯基）鉻-4-酮作用于糖皮質(zhì)激素受體，漢黃芩素作用于轉(zhuǎn)錄因子AP-1、間質(zhì)膠原酶，黃芩素作用于原癌基因c-Fos，木犀草素作用于轉(zhuǎn)錄因子AP-1、間質(zhì)膠原酶、桿狀病毒IAP重復(fù)蛋白-5、肝細(xì)胞生長因子受體；柴胡的山奈酚作用于轉(zhuǎn)錄因子AP-1、間質(zhì)膠原酶、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1-α/β、醛縮酮還原酶、抗白細(xì)胞蛋白酶，蓽澄茄素作用于β-2腎上腺素能受體；郁金的柚皮素作用于過氧化氫酶。

圖5 差異表達(dá)的基因熱圖

以180≤NW≤500，OB≥30 %，DL≥0.18為篩選條件，篩選疏肝健脾解毒方中的791種成分，并與表3中所含蛋白進(jìn)行交叉對比，篩選出重合物質(zhì)共15種。將該15種物質(zhì)分別與相應(yīng)基因（度值>1）進(jìn)行分子對接，見表4?？偡执笥?的認(rèn)為該物質(zhì)可能起作用，故得出結(jié)論：beta-sitosterol（β-谷甾醇），Stigmasterol（豆甾醇），Cubebin（蓽澄茄素），3β-acetoxyatractylone（3β-乙酰氧基蒼術(shù)堿）可能作用于ADRB2基因；beta-sitosterol（β-谷甾醇）可能作用于JUN基因；luteolin（木犀草素），quercetin（槲皮素）可能作用于MMP9基因；betasitosterol（β-谷甾醇）可能作用于PRKCA基因；quercetin（槲皮素），kaempferol（山奈酚）可能作用于STAT1基因；quercetin（槲皮素）可能作用于BIRC5基因。

圖6 疏肝健脾解毒組方-靶點網(wǎng)絡(luò)

表3 與乳腺癌相關(guān)的疏肝健脾解毒方活性成分的潛在靶點

表4 分子對接結(jié)果

圖7 疏肝健脾解毒方-乳腺癌靶點網(wǎng)絡(luò)

2.5 PPI網(wǎng) 絡(luò)構(gòu)建利 用Cytoscape 3.7.2的 插 件BisoGenet，得到乳腺癌相關(guān)靶點蛋白質(zhì)1914個， 33614條邊，見圖8A；對其進(jìn)行度中心性（DC）拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)分析，限定Degree最小值為61，得到乳腺癌相關(guān)靶點蛋白質(zhì)296個，8310條邊，見圖8B；再進(jìn)行介數(shù)中心性（BC） 拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)分析，限定Degree最小值為600，得到乳腺癌相關(guān)靶點蛋白質(zhì)22個，149條邊。見圖8C。

PPI網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)圖進(jìn)一步顯示，疏肝健脾解毒方有可能作用于異核核糖核蛋白U、E3泛素蛋白連接酶、Myc-原癌基因蛋白、組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶、過渡內(nèi)質(zhì)網(wǎng)ATP酶、COP9信號體復(fù)合物亞基5、DNA復(fù)制許可因子、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)伴侶BiP、多泛素-C、核苷胺、細(xì)胞腫瘤抗原p53、組蛋白脫乙酰酶1、乳腺癌I型易感蛋白、雌激素受體、熱休克蛋白90α、細(xì)胞周期蛋白依賴激酶2、生長因子受體結(jié)合蛋白2、14-3-3蛋白ζ/δ、連環(huán)蛋白β-1、熱休克蛋白90β、高親和力神經(jīng)生長因子受體、表皮生長因子受體。

圖8 乳腺癌靶點PPI網(wǎng)絡(luò)

2.6 潛在靶點基因GO生物功能及KEGG通路富集分析對疏肝健脾解毒方的組方活性成分-潛在靶點網(wǎng)絡(luò)中的21個靶點進(jìn)行GO生物功能富集分析，結(jié)果選取前20個。靶點基因富集結(jié)果顯示：主要有20條生物學(xué)過程（BP），20個分子功能相關(guān)過程（MF），6個細(xì)胞組分（CC）表達(dá)過程。見圖9-11。GO富集分析進(jìn)一步顯示：疏肝健脾解毒方治療乳腺癌的核心基因的GO功能主要涉及對活性氧的反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)、細(xì)胞對氧化應(yīng)激的反應(yīng)、含膠原的細(xì)胞外基質(zhì)、DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活活性-RNA聚合酶II特異性、核心啟動子結(jié)合、絲氨酸型內(nèi)肽酶活性等。

KEGG通路富集分析顯示，疏肝健脾解毒方活性成分-潛在靶點網(wǎng)絡(luò)中的21個靶點主要富集在47條信號通路，根據(jù)P<0.05篩選出前20條。見圖12。其中放松信號通路、L-17信號通路、乙型肝炎信號通路、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎信號通路、糖尿病并發(fā)癥中的年齡-年齡信號通路、腫瘤壞死因子信號通路、安非他明成癮信號通路、結(jié)直腸癌信號通路、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染信號通路、癌癥中的轉(zhuǎn)錄失調(diào)信號通路、阿米巴原蟲病信號通路、癌癥蛋白多糖信號通路、膀胱癌信號通路、流體剪切應(yīng)力和動脈粥樣硬化信號通路、MAPK信號通路、幽門螺桿菌感染的上皮細(xì)胞信號通路、利什曼病信號通路、ErbB信號通路、粘附斑激酶信號通路、PD-L1的表達(dá)與PD-1的檢測通路可能為疏肝健脾解毒方抗乳腺癌的關(guān)鍵信號通路，提示疏肝健脾解毒組方可能通過以上各通路協(xié)調(diào)發(fā)揮作用。

利用Cytoscape 3.7.2將活性成分、靶點、關(guān)鍵信號通路進(jìn)行可視化分析，得到與乳腺癌相關(guān)的疏肝健脾解毒組方活性成分-潛在靶點-信號通路網(wǎng)絡(luò)。見圖13。

圖9 潛在靶點基因的BP分析

圖10 潛在靶點基因的MF分析

圖11 潛在靶點基因的CC分析

圖12 KEGG通路富集分析柱狀圖

圖13 與乳腺癌相關(guān)的疏肝健脾解毒組方活性成分-潛在靶點-信號通路網(wǎng)絡(luò)

3 討論

乳腺癌是女性中最常見的癌癥，是導(dǎo)致女性第二大癌癥死亡的疾病，占所有女性惡性腫瘤的比例達(dá)8 %~12 %［22］。乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展是多種危險因素共同作用引起的，呈現(xiàn)多樣性。我國中醫(yī)認(rèn)為產(chǎn)生乳腺癌的內(nèi)因為正氣不足, 氣血虧虛，外因為外毒侵襲，情志內(nèi)傷致肝脾郁結(jié), 最終氣血瘀滯, 痰瘀互結(jié)于乳房而致?。?3］。中藥疏肝健脾解毒方具有疏肝解郁、活血化瘀、清熱解毒之功效，起到預(yù)防和治療乳腺癌作用。本研究通過構(gòu)與乳腺癌相關(guān)的PPI 網(wǎng)絡(luò)、疏肝健脾解毒組方活性成分-預(yù)測靶點網(wǎng)絡(luò)，從而構(gòu)建與預(yù)防和治療乳腺癌相關(guān)的組方活性成分-潛在靶點網(wǎng)絡(luò)，進(jìn)一步分析疏肝健脾解毒組方預(yù)防和治療乳腺癌的作用機(jī)制。

與抗乳腺癌相關(guān)的疏肝健脾解毒組方活性成分-潛在靶點網(wǎng)絡(luò)包括21個靶點，分別是STAT1、SLPI、PRKCA、PLAT、NR3C1、MYC、MMP9、MMP3、MMP1、MET、MAOA、JUN、FOS、CXCL2、COL3A1、COL1A1、CAT、BIRC5、AKR1C3、ADRB2、ADRA2A。其中，度值大于1的 關(guān)鍵 靶 點 為ADRB2、JUN、MMP1、MMP9、PRKCA、FOS、STAT1、BIRC5。推測疏肝健脾解毒組方預(yù)防和治療乳腺癌的作用機(jī)制很可能與這些靶點有關(guān)。

在靶點基因的 KEGG 通路富集分析中，篩選得到 47條信號通路，其中主要的信號通路為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，包括放松信號通路、IL-17信號通路、MAPK信號通路、ErbB信號通路、PD-L1的表達(dá)與PD-1的檢測通路；腫瘤相關(guān)信號通路包括腫瘤壞死因子信號通路、結(jié)直腸癌信號通路、癌癥中的轉(zhuǎn)錄失調(diào)信號通路、癌癥蛋白多糖信號通路、膀胱癌信號通路等。因此，推斷疏肝健脾解毒組方預(yù)防和治療乳腺癌的機(jī)制很可能與這些信號通路有關(guān)。

綜上所述，本研究通過結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法從多成分、多靶點和多通路的角度探索疏肝健脾解毒組方預(yù)防和治療乳腺癌的機(jī)制，為下一步進(jìn)行的作用機(jī)制相關(guān)實驗研究提供了基礎(chǔ)，疏肝健脾解毒組方具體的作用機(jī)制仍有待未來進(jìn)一步實驗驗證與研究。