谷物農(nóng)藥殘留檢測方法

佛山市禪城區(qū)糧油檢測中心 陳暉

谷物農(nóng)藥殘留檢測主要是對稻米、面粉、玉米、高粱、大豆、青稞、花生、蔬菜等及面粉制品、大米制品和大豆制品等供人和動(dòng)物食用的谷物中農(nóng)藥含有量進(jìn)行檢測。近年，隨著科技的發(fā)展，特別是檢測儀器質(zhì)量的提高，谷物農(nóng)藥殘留檢測向選擇性強(qiáng)、分辨率高、檢測限低、操作簡單等方向發(fā)展。下面介紹幾種常見的農(nóng)藥檢測技術(shù)。

一、波譜法

該方法是利用有機(jī)磷農(nóng)藥中的官能團(tuán)或水解、還原產(chǎn)物與特殊的顯色劑在一定條件下發(fā)生酸化、酯化、磺酸化等化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的特定波的顏色反應(yīng)來進(jìn)行定量或定性的測定。這種檢測方法操作簡單，適用范圍較窄，主要用于有機(jī)磷農(nóng)藥的檢定。

二、色譜法

色譜法主要包括薄層色譜法（TLC）、氣相色譜法（GC）和高效液相色譜法（HPLC）3 種。它主要適用于揮發(fā)性差、極性和熱穩(wěn)定性差的農(nóng)藥檢定。

（一）薄層色譜法

薄層色譜法又稱薄層層析法，是以涂布在支持板上的支持物為固定相，以合適的溶劑為流動(dòng)相，對樣品進(jìn)行分離、鑒定和定量的一種層析分離技術(shù)，能將類固醇、脂肪酸、核苷酸、氨基酸、生物堿及其他物質(zhì)進(jìn)行有效的層析。比如在磨碎的谷物中加入一定量的溶劑提取有機(jī)磷農(nóng)藥，經(jīng)純化濃縮后，在薄層硅膠上分離，用有機(jī)磷農(nóng)藥的Rf 進(jìn)行定性測定或用儀器進(jìn)行定量測定。該方法是一種比較成熟的檢測方法，也是一種快速的檢測方法，既是分離手段，又是定性、定量的檢測分析方法。

（二）氣相色譜法

氣相色譜法是利用物質(zhì)的吸附力、親和力、溶解度和阻滯作用等不同物理性質(zhì)，對谷物中的混合物進(jìn)行分離、分析的方法。該方法是把盛在管柱中的吸附劑或惰性固體涂上固定相，不斷通過管柱內(nèi)的氣體流動(dòng)，將樣品從一端加入，經(jīng)過反復(fù)多次的移動(dòng)樣品，通過分離、分析，固定相對樣品，從末端流出的濃度形成色譜圖。具體操作是把提取、純化和濃縮后的有機(jī)磷農(nóng)藥注入氣相色譜柱，對氣相色譜柱進(jìn)行升溫，使農(nóng)藥分離，經(jīng)過不同檢測儀器掃描出氣相色譜圖，通過時(shí)間來定性，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對照來定量。一次可測定多組分，靈敏度高，操作簡單，失誤率較低。

（三）高效液相色譜法

高效液相色譜法是在液相色譜柱層析的基礎(chǔ)上，引入氣相色譜柱理論發(fā)展起來的。該方法主要適合不太容易氣化、不耐熱和藥性極強(qiáng)的農(nóng)藥或代謝物，通過提取、純化及柱后發(fā)生的反應(yīng)和質(zhì)譜等聯(lián)用，可實(shí)現(xiàn)分析自動(dòng)化。該方法在農(nóng)藥殘留分析方面應(yīng)用越來越廣，與氣相色譜法相比，靈敏度高，檢測速度快，分離效果好，加上近年一些高端儀器的問世，極大地提高了檢測靈敏度。

三、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）

色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法主要用色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)，既利用氣相色譜的高分離性能，又利用質(zhì)譜準(zhǔn)確測定化合物中含有的有機(jī)磷。可以對農(nóng)藥殘留物、代謝物和降解物進(jìn)行定性和定量的檢測，還可以對多種殘留物進(jìn)行分析。

四、毛細(xì)管電泳

毛細(xì)管電泳是以毛細(xì)管為分離通道，利用高壓電場的驅(qū)動(dòng)力進(jìn)行新型液相分離技術(shù)。實(shí)際上是電泳、色譜相交叉的內(nèi)容，主要用于檢測啤酒、牛奶、水果、蔬菜中的農(nóng)藥殘留。

五、免疫分析技術(shù)

免疫分析技術(shù)是利用抗原與抗原之間的特異性、可逆性相結(jié)合的基礎(chǔ)檢測方法?；驹硎菍⒖乖蚩贵w吸附在固定載體表面，保持免疫活性，再加入酶標(biāo)抗原或抗體，并保留其免疫活性。在具體測定時(shí)，使受檢標(biāo)體和酶標(biāo)抗體或抗原表面起反應(yīng)，形成酶標(biāo)記免疫復(fù)合物，然后洗滌，洗去酶標(biāo)抗原或抗體，在不能洗去的復(fù)合物中加入酶的底物，被催化生成有色物質(zhì)，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的物質(zhì)直接相關(guān)，所以可以根據(jù)產(chǎn)物的深淺來對標(biāo)本中的抗原或抗體進(jìn)行定性或定量分析。免疫分析技術(shù)廣泛用于有機(jī)氯農(nóng)藥、有機(jī)磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯、除草劑、真菌毒素等，主要用于農(nóng)藥殘留分析、酶免疫分析等。目前，在國外，酶聯(lián)免疫分析在農(nóng)藥檢測方面應(yīng)用較多，日漸普及。

六、酶抑制法

酶抑制法主要是應(yīng)用乙酰膽堿酯酶技術(shù)，對測定有機(jī)磷較為敏感，準(zhǔn)確度較高，對別的農(nóng)藥測定敏感度不太明顯，需要加氧化劑或預(yù)處理，可以提高其他農(nóng)藥檢測的靈敏度。目前正在研究用丁酰膽堿酯酶和動(dòng)植性酶酯代替乙酰膽堿酯酶。該技術(shù)相對成熟，是對有機(jī)磷農(nóng)藥快速檢測的方法。

七、生物傳感器

生物傳感器是一種利用生物物質(zhì)敏感并將其濃度轉(zhuǎn)化為電信號的儀器。它由固定的生物敏感材料識別元件、適當(dāng)?shù)睦砘瘬Q能器及信號放大裝置構(gòu)成。最開始研制出葡萄糖傳感器，將葡萄氧化酶在聚丙烯酰胺膠體中固化，再將膠體固定在隔膜氧電極上，便制造出葡萄糖傳感器。它涉及生物活性材料與物理化學(xué)換能器的交叉學(xué)科知識，是生物技術(shù)的一種先進(jìn)的檢測和監(jiān)控方法，可以大大縮短檢測時(shí)間，在快速檢測方面有著很大的發(fā)展前景。