非洲豬瘟疫苗的研究進(jìn)展

汪玨楚，楊卓霖，程水金，周 慧

(西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

0 引言

2018年，非洲豬瘟在我國(guó)首次出現(xiàn)。迄今為止，全國(guó)范圍內(nèi)許多地區(qū)都出現(xiàn)過流行。該病導(dǎo)致家豬高熱，內(nèi)臟器官嚴(yán)重出血，共濟(jì)失調(diào)和精神沉郁，具有極高的致死率。非洲豬瘟病毒是引起非洲豬瘟的病原體，是非洲豬瘟病毒科非洲豬瘟病毒屬的唯一成員[1]。目前，世界各國(guó)研究者嘗試采用各種類別的疫苗對(duì)豬進(jìn)行免疫，但仍未研制出有效的疫苗。本文將從非洲豬瘟的病原以及各類疫苗的研究進(jìn)展作一綜述，為非洲豬瘟疫苗的成功研制提供思路。

1 非洲豬瘟的病原

非洲豬瘟的病原是非洲豬瘟病毒。非洲豬瘟病毒是一種大型且復(fù)雜的雙鏈DNA蟲媒病毒。根據(jù)不同的病毒株型，基因組大小為170～190 kbp，包含151～167個(gè)開放閱讀框，編碼了160多種蛋白質(zhì)[2]。這些蛋白質(zhì)除了用于在細(xì)胞中復(fù)制外，還可以用于逃避宿主的防御。其中pp62，p72，p54，p30和CD2v在非洲豬瘟病毒的附著、進(jìn)入和復(fù)制中發(fā)揮重要作用。非洲豬瘟病毒顆粒由核仁、核殼、內(nèi)部包膜、衣殼和外部包膜組成，整體呈二十面體形態(tài)。非洲豬瘟病毒顆粒的基因組十分龐大，基于病毒血凝素CD2樣蛋白(CD2v)和C型凝集素，該病毒被分為8種血清型；基于編碼主要衣殼蛋白p72的B646L序列，該病毒被分為24個(gè)基因型。

2 非洲豬瘟疫苗研究進(jìn)展

2.1 滅活疫苗

有研究使用低濃度的二甲基亞乙基亞胺(BEI)在低溫條件下滅活病毒，同時(shí)使用強(qiáng)效佐劑，通過皮內(nèi)和肌內(nèi)2種不同的給藥途徑對(duì)豬同時(shí)進(jìn)行雙重接種[3]。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用這些方式仍不能產(chǎn)生對(duì)非洲豬瘟的致命攻擊的有效保護(hù)。免疫失敗的原因一方面可能是由于滅活疫苗在誘導(dǎo)特定的細(xì)胞毒性CD8+T細(xì)胞方面效果較差，另一方面可能是病毒顆粒的多層結(jié)構(gòu)中蛋白質(zhì)的復(fù)雜性。故滅活疫苗不是可行的ASF疫苗選擇。

2.2 減毒活疫苗

減毒活疫苗可以從自然發(fā)生的低毒力ASFV分離株獲得，也可以通過刪除編碼毒力因子的基因這種方式來減弱強(qiáng)毒分離株。減毒活疫苗的使用可以引起宿主在感染過程中遇到的所有病毒抗原的免疫應(yīng)答，因此更加有效。但減毒活疫苗僅對(duì)相同基因型的同源菌株產(chǎn)生保護(hù)作用，對(duì)異源病毒保護(hù)效果極差。此外，其安全性還有待于進(jìn)一步探究。有研究證明，這些減毒疫苗的注射可能會(huì)造成一些不良反應(yīng)，如關(guān)節(jié)炎或者出現(xiàn)壞死灶[4]。

2.3 亞單位疫苗

針對(duì)非洲豬瘟病毒的亞單位疫苗可以有效緩解減毒活疫苗的安全性問題，降低副作用。目前已經(jīng)鑒定和研究出了許多具有免疫原性的ASFV蛋白如p30，p54，p72，pp62和CD2v等，這些蛋白參與亞單位疫苗的構(gòu)建可以誘導(dǎo)中和抗體，產(chǎn)生保護(hù)作用[5]。但大多試驗(yàn)表明，對(duì)ASFV強(qiáng)毒株的保護(hù)具有低效性。此外由于非洲豬瘟病毒能編碼多種保護(hù)性抗原，使得針對(duì)ASFV的有效亞單位疫苗的設(shè)計(jì)變得更加復(fù)雜。

2.4 病毒載體疫苗

目前，有研究將ASFV抗原基因重組至活病毒載體內(nèi)，以期在豬體內(nèi)產(chǎn)生保護(hù)作用。經(jīng)大量研究發(fā)現(xiàn)，使用復(fù)制缺陷型腺病毒載體、痘病毒載體以及偽狂犬病病毒都能夠誘導(dǎo)免疫豬產(chǎn)生ASFV特異性抗體和細(xì)胞免疫反應(yīng)，但還需要進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來確定是否具有保護(hù)作用[6]。

2.5 核酸疫苗

近年來越來越多的證據(jù)表明，在非洲豬瘟病毒感染過程中，細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答對(duì)宿主的保護(hù)起關(guān)鍵作用。而核酸疫苗相較于亞單位疫苗來說，可以更好地發(fā)揮細(xì)胞反應(yīng)。有研究使用編碼p54/p30融合蛋白的質(zhì)粒DNA對(duì)豬進(jìn)行疫苗接種，發(fā)現(xiàn)沒有產(chǎn)生保護(hù)作用。但在編碼3種與泛素融合的ASFV抗原的核酸疫苗以及用含有與泛素融合的其他幾種病毒ORF的DNA文庫(kù)對(duì)豬進(jìn)行免疫的過程中卻產(chǎn)生了保護(hù)反應(yīng)。因此進(jìn)一步研究ASFV發(fā)病機(jī)理中ASFV特異性免疫反應(yīng)的機(jī)制變得尤為重要。

3 展望

非洲豬瘟是我國(guó)政府規(guī)定的一類疫病。自非洲豬瘟傳入我國(guó)后，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大打擊和損失。目前大量研究證明，滅活疫苗不能對(duì)非洲豬瘟產(chǎn)生保護(hù)作用。而減毒活疫苗雖然被證明對(duì)非洲豬瘟病毒具有效果確實(shí)的保護(hù)性，但其安全性還需要進(jìn)一步被驗(yàn)證。此外，亞單位疫苗、核酸疫苗和病毒載體疫苗也具有廣闊的研究前景。因此，我們還需要加強(qiáng)對(duì)非洲豬瘟病毒的生物學(xué)特性、免疫逃避機(jī)制以及具有保護(hù)潛力抗原的研究，以期為非洲豬瘟疫苗的研發(fā)提供新的思路與幫助。