牛支原體病的診斷及防治分析

(廣西賃祥市憑祥鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西 憑祥 532600)

0 引言

牛支原體病是養(yǎng)牛場中較為常見的一種傳染性疾病，該病在各地養(yǎng)牛場中均有發(fā)現(xiàn)，而且在養(yǎng)牛場中絕大多數(shù)患有呼吸道疾病的病牛，由支原體所引起的占有很大比例，給養(yǎng)牛業(yè)造成嚴(yán)重的危害。牛支原體病目前沒有特效的藥物和疫苗可預(yù)防和治療，支原體容易變異導(dǎo)致耐藥菌株的不斷出現(xiàn)，給養(yǎng)殖場防控該病造成嚴(yán)重的困難。

1 病原簡介

牛支原體病的病原為支原體，其屬于柔膜體綱，支原體目，支原體科，支原體屬[1]。支原體沒有細(xì)胞壁，其形態(tài)較為多樣，而且體型較小，能夠通過過濾器。其能夠在體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)基上生長繁殖，是目前為止能夠在無生命培養(yǎng)基上生長繁殖的最小的原核細(xì)胞微生物。牛支原體可以在固體或液體培養(yǎng)基中生長，生長速度較為緩慢，通常需要經(jīng)過5～7 d才可見固體培養(yǎng)基上呈現(xiàn)出“油煎蛋”樣的菌落，菌落中間稍厚，邊緣較薄，而且邊緣整齊。應(yīng)用革蘭氏染色呈陰性，在視野中可見到有不同形狀的菌體，呈圓形、桿狀、不規(guī)則形。牛支原體通常在黏膜的表面寄生，尤其是存在于鼻腔和乳腺部位。其對(duì)環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)，在不受陽光直射的地方可以存活較長時(shí)間，達(dá)到數(shù)周甚至數(shù)月。在牛奶中可以存活數(shù)月。但其對(duì)高溫較為敏感，當(dāng)溫度較高時(shí)，存活力減弱，通常在20℃時(shí)存活不超過2周，當(dāng)環(huán)境溫度升高至70℃時(shí)，通常在1 min之內(nèi)就會(huì)失活。

2 流行病學(xué)

該病的傳染源為已經(jīng)發(fā)病的牛和慢性感染帶菌的牛，以及被這些牛的分泌物和排泄物所污染的物質(zhì)。當(dāng)健康牛接觸到這些被病原所污染的物質(zhì)時(shí)，就容易引起感染。該病的傳播可通過直接接觸、呼吸道以及垂直傳播。如果給母牛授精的精液中含有該病的病原，則可以通過配種而導(dǎo)致該病的傳播。該病主要感染牛，其中肉牛和奶牛均具有易感性，尤其是肉牛的易感性更高。1周齡以內(nèi)的犢牛易感性最高，而且感染該病后病情最為危急，具有非常高的死亡率。當(dāng)養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)環(huán)境發(fā)生改變或者在長途運(yùn)輸牛群時(shí)，均可能誘發(fā)該病。而且該病發(fā)生后可以引起免疫抑制，容易造成繼發(fā)感染，導(dǎo)致多種病原混合感染，影響診斷和治療。

3 臨床癥狀

牛發(fā)病后表現(xiàn)出咳嗽和氣喘，而且病牛精神萎靡不振，食欲下降，體溫升高。體溫可達(dá)42℃左右。病牛通常在夜間或清晨表現(xiàn)出更嚴(yán)重的咳嗽。而且流出膿性或者清亮的鼻液。發(fā)病嚴(yán)重的病牛，通常出現(xiàn)反芻停止和食欲廢絕。隨著病程的發(fā)展，病牛被毛失去光澤，逐漸消瘦，伴有不同程度的腹瀉。排出的糞便呈現(xiàn)水樣或者帶有血樣。有些病牛還會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)炎癥狀，表現(xiàn)為關(guān)節(jié)的膿腫和跛行。有時(shí)病牛還可見有明顯的結(jié)膜炎癥狀，可見病牛的結(jié)膜出現(xiàn)紅腫而且眼周潮濕，從眼睛內(nèi)分泌出一些漿液性或者黏膿性的分泌物。發(fā)病嚴(yán)重的病牛會(huì)出現(xiàn)死亡，通常犢牛的發(fā)病率更高，其發(fā)病后癥狀也較為嚴(yán)重，而且具有較高死亡率，死亡率可以達(dá)到甚至超過50%。

4 病理變化

對(duì)病牛進(jìn)行剖檢，可見在其氣管和鼻腔內(nèi)存在大量黏性的分泌物。病牛的肺臟病變比較明顯，通常會(huì)呈現(xiàn)出“蝦肉樣變”。肺臟常常和胸膜粘連，發(fā)病較輕的病例，在肺的心葉和尖葉等部位有紅色肉變，同時(shí)可見有化膿灶。嚴(yán)重時(shí)肺部出現(xiàn)干酪樣壞死，甚至有潰爛。導(dǎo)致病牛發(fā)生壞死性肺炎或凝固性壞死性肺炎。而且肺內(nèi)有少量積液。心包也會(huì)出現(xiàn)呈黃色的積液，具有嚴(yán)重的腐敗味。有時(shí)還表現(xiàn)出心臟的肥大。肝臟以及脾臟腫脹，尤其是脾臟可以腫大到正常脾臟的數(shù)倍。對(duì)于有關(guān)節(jié)炎病變的病牛，將其關(guān)節(jié)切開可見明顯腫脹，而且關(guān)節(jié)腔內(nèi)含有膿汁和積液，關(guān)節(jié)的軟骨、韌帶變性，呈現(xiàn)出一種壞死狀，且關(guān)節(jié)腔內(nèi)還有大量干酪樣壞死物[2]。

5 診斷方法

該病通過對(duì)臨床癥狀的觀察和病理變化的檢查可以作出初步診斷。確診需要應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室技術(shù)，在實(shí)驗(yàn)室對(duì)該病的診斷主要有三種方法，即病原的分離鑒定、血清學(xué)檢測方法和分子生物學(xué)檢測方法。

5.1 病原的分離鑒定

無菌將從病死牛的肺臟、肝臟中挑取樣本，接種于固體培養(yǎng)基表面。將其置于含有5% CO2的培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)。通過48～96 h的培養(yǎng)，可見在培養(yǎng)基的表面生長出“油煎蛋”樣的菌落。挑取單個(gè)菌落應(yīng)用革蘭氏染色或姬姆薩染色后進(jìn)行鏡檢觀察?？梢娫谝曇爸写嬖谟卸喾N形狀的病原體，呈圓形、桿狀、逗號(hào)狀、螺旋狀以及其他不規(guī)則狀的病原體，通過結(jié)合菌落生長的特點(diǎn)，可以確診本病。

5.2 血清學(xué)檢測方法

血清學(xué)檢測方法，通常是應(yīng)用血凝抑制試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。在臨床上，常用間接ELISA作為該病檢測的主要方法。應(yīng)用該方法具有較好的靈敏性，而且應(yīng)用較為方便。通常用該方法來評(píng)價(jià)牛場有無受到支原體的感染。該病也常通過采集病牛的新鮮血液進(jìn)行全血凝集試驗(yàn)，如果血液發(fā)生凝集，則可確診該病。

5.3 分子生物學(xué)方法

在分子生物學(xué)方法中，應(yīng)用較為廣泛的是PCR方法。但在應(yīng)用此方法時(shí)，需要將牛支原體和無乳支原體區(qū)別，要用RT-PCR結(jié)合雜交探針進(jìn)行檢測，才能夠區(qū)別檢測到的病原為牛支原體病的病原。目前應(yīng)用較多的還有環(huán)介導(dǎo)等溫核酸擴(kuò)增檢測方法，即l amp方法。應(yīng)用此方法能夠?yàn)榕Ｖгw提供快速的診斷，而且靈敏度和特異性均較高。

6 防治措施

6.1 預(yù)防措施

牛支原體病的預(yù)防首先要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，尤其是對(duì)犢牛的飼養(yǎng)管理。在天氣炎熱的季節(jié)要做好防暑降溫工作，在天氣寒冷的季節(jié)要進(jìn)行取暖防寒的工作，而且在確保溫度相對(duì)恒定的情況下，保持良好的通風(fēng)，避免牛舍空氣質(zhì)量過差，空氣受到污染等因素造成病原的傳播。牛舍內(nèi)要勤打掃、勤消毒，及時(shí)將舍內(nèi)的各種污染物清理出去，保持圈舍的清潔和干燥，尤其是圈舍內(nèi)的污水和糞便要及時(shí)清理。還要對(duì)牛舍的墊料經(jīng)常進(jìn)行更換，避免墊料發(fā)生霉變而導(dǎo)致的病原滋生。在清掃后要對(duì)圈舍進(jìn)行消毒，常用的消毒液要定期進(jìn)行更換，避免長期應(yīng)用同一種消毒液而導(dǎo)致病原對(duì)消毒液出現(xiàn)耐藥性，從而影響消毒效果。消毒時(shí)要做到徹底和全面，避免消毒不嚴(yán)而導(dǎo)致環(huán)境中病原長期存在。對(duì)進(jìn)入養(yǎng)殖場的人員、器械、物品和車輛等均要進(jìn)行嚴(yán)格的消毒，避免將病原帶入養(yǎng)殖場而造成牛群的感染發(fā)病。在養(yǎng)殖場常用的消毒液有2%來蘇兒，2%氫氧化鈉，均可以將該病的病原殺死。新生犢牛應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，在犢牛吸食初乳前要對(duì)母牛的乳房進(jìn)行消毒，并及時(shí)讓犢牛吸食到初乳，以提升其自身的免疫力。同時(shí)，在養(yǎng)殖過程中應(yīng)當(dāng)盡量避免出現(xiàn)各種應(yīng)激因素，防止?fàn)倥３霈F(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)。牛場最好采取自繁自養(yǎng)的原則進(jìn)行飼養(yǎng)，減少在場外引種，尤其是要避免在疫區(qū)進(jìn)行引種。即使需要引種，在引種前必須進(jìn)行嚴(yán)格的檢疫，而且在引種后運(yùn)輸過程中要盡量避免種牛受到應(yīng)激。可以采取縮短運(yùn)輸距離、避免擁擠、高溫、饑餓和干渴、噪音等造成的應(yīng)激。同時(shí)還要防止引種時(shí)牛過度飲食?？梢栽陲嬍持刑砑与娊赓|(zhì)和多種維生素，還可以加入一些抗應(yīng)激的藥物，提升牛對(duì)應(yīng)激的抵抗力。當(dāng)牛運(yùn)輸?shù)金B(yǎng)殖場后，需要經(jīng)過30 d以上的隔離，然后進(jìn)行全面檢查、免疫、消毒，確認(rèn)健康無病后才可混群飼養(yǎng)[3]。

6.2 治療措施

牛支原體病需要應(yīng)用抗菌藥物配合對(duì)癥治療的藥物進(jìn)行治療，才能起到良好的效果。在養(yǎng)殖場，常用的消炎藥物有青、鏈霉素、土霉素等。將青霉素和鏈霉素共同使用，可以起到良好的效果。青霉素的用量為4萬IU/(kg體重)，鏈霉素的用量為3.5萬IU/(kg體重)，將兩種藥物混合后進(jìn)行肌肉注射，連續(xù)用藥5～7 d。也可以應(yīng)用土霉素進(jìn)行治療，使用劑量為25 mg/(kg體重)，通過靜脈注射能夠起到良好的效果。在治療時(shí)如果與磺胺類藥物進(jìn)行配合使用，療效更好?？诜^孢菌素類藥物或者泰樂菌素進(jìn)行輔助治療，能夠加快病牛的痊愈速度。此外，還可以應(yīng)用中藥方劑對(duì)該病進(jìn)行治療。中藥治療的原則是清瘟解毒和止咳化痰，方劑中常用的藥物有黃連、黃芩、黃柏、金銀花、板藍(lán)根、知母、梔子、穿心蓮和大青葉等，將藥物煎汁后給病牛灌服，用藥3次/d，連續(xù)用藥3 d后可見良好的療效。