牛白血病的診斷和防治方法及措施

王麗紅

（吉林省梅河口市山城鎮(zhèn)綜合服務(wù)中心 135022）

牛白血病是由白血病病毒引發(fā)的一種慢性腫瘤病，早在19世紀(jì)就有發(fā)病記錄，全球多國(guó)均有發(fā)病報(bào)道。根據(jù)牛白血病臨床癥狀主要分為成年型、犢牛型、胸腺型和皮膚型，但不同類型病牛治愈率均較低，且潛伏期長(zhǎng)，平均潛伏期為4 年，病牛出現(xiàn)消瘦、生長(zhǎng)緩慢、吞咽困難、淋巴結(jié)腫大等癥狀后才會(huì)被養(yǎng)殖戶發(fā)現(xiàn)，此時(shí)病毒可能已呈大面積擴(kuò)散，由于牛白血病無特效藥物，會(huì)給牛場(chǎng)帶來巨大的養(yǎng)殖損失，因此必須給予高度重視和科學(xué)預(yù)防。

1 發(fā)病機(jī)理

牛白血病是一種病毒性傳染病，其致病原為牛白血病病毒，當(dāng)病毒侵入牛體后首先會(huì)影響機(jī)體外周循環(huán)。牛只體表（如頜下、腹股部位）多處淋巴結(jié)發(fā)生炎癥病變，隨著淋巴細(xì)胞惡性增生和浸潤(rùn)，病牛血液和淋巴系統(tǒng)也受到嚴(yán)重破壞，骨髓組織和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)都會(huì)發(fā)生不同程度的病變，病牛出現(xiàn)消瘦、貧血等虛弱癥狀，隨著腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)蔓延至病牛的胃、腸消化系統(tǒng)，病牛食道無法正常擴(kuò)張，進(jìn)而影響采食和吞咽，病牛往往在食欲廢絕后發(fā)生死亡。牛白血病病毒對(duì)環(huán)境的耐受性較差，尤其是對(duì)高溫具有極強(qiáng)的敏感性，56℃30min 會(huì)失去毒力，60℃會(huì)喪失感染力，但牛白血病病毒傳播途徑廣，若防疫不當(dāng)容易引發(fā)大規(guī)模流行。

2 流行病學(xué)

2.1 易感動(dòng)物

不同年齡的牛均能感染白血病病毒，但4～8 歲成年牛發(fā)病率高，感染后病毒能在末梢血液的淋巴細(xì)胞內(nèi)長(zhǎng)期存活，因此，感染牛只終身帶毒，并能感染不同品種的牛只。同時(shí)，綿羊、山羊也會(huì)感染，且易感性高于豬、兔、黑猩猩等哺乳動(dòng)物。

2.2 傳染源

病牛和隱性攜帶白血病病毒的牛均可傳播病原。

2.3 傳播途徑

直接接觸傳播：不規(guī)范輸血、自然交配、人工授精、胎盤垂直傳播病毒（若母牛妊娠6 月齡以上感染，新生犢牛感染率可達(dá)20%）、母乳（初乳或常乳）傳播，但該病毒不感染人類，和人類患白血病不具有相關(guān)性。

間接接觸傳播：呼吸道傳播，接觸病牛分泌物、污染物。

非接觸式傳播：牛虻、蚊虻等吸血昆蟲吸吮感染動(dòng)物血液，再次吸血時(shí)可以將病毒傳播給易感動(dòng)物，尤其是熱帶和高溫高濕環(huán)境，吸血昆蟲數(shù)量多，牛場(chǎng)一旦發(fā)病，陽性率超60%[1]。

3 臨床癥狀

3.1 成年型

該類型常見于4～8 歲牛只，成年牛感染后癥狀不突出，當(dāng)出現(xiàn)腫瘤癥狀后才會(huì)有明顯的臨床癥狀。病牛體重下降、發(fā)育不良、食欲銳減、眼結(jié)膜蒼白、食欲銳減、前胃臌氣、胃腸消化功能紊亂，成年牛只感染后血液中的白血病抗體含量增加，導(dǎo)致淋巴細(xì)胞數(shù)量增多，逐步發(fā)展成為異常淋巴細(xì)胞，病牛頸淺或體表淋巴結(jié)腫大，隨后內(nèi)臟淋巴結(jié)也出現(xiàn)腫脹。奶牛患白血病后也會(huì)降低泌乳性能。

3.2 犢牛型

該類型常見于6 月齡以下的犢牛，犢牛由于體質(zhì)較弱，感染后會(huì)出現(xiàn)體溫升高，食欲下降，貧血，腹瀉，呼吸和心音亢進(jìn)，無法正常起立，體表淋巴結(jié)腫脹，觸摸能滑動(dòng)，質(zhì)地堅(jiān)硬，咽喉淋巴結(jié)明顯腫大還會(huì)引發(fā)犢牛呼吸困難，犢?；及籽『蟠蠖嘣? 個(gè)月內(nèi)死亡。

3.3 胸腺型

該類型常見于2 歲以下牛只，病牛食欲銳減，體表溫度升高，心跳和呼吸急促，肉眼可見病牛頸靜脈搏動(dòng)，病牛的頜凹和胸垂部均會(huì)有不同程度的浮腫，可視黏膜貧血，眼球明顯突出，部分病牛伴有腹瀉，一般發(fā)病后60～90d 內(nèi)死亡。

3.4 皮膚型

該類型常見于1～5 歲牛只，病牛體表溫度升高，食欲不振，皮膚會(huì)出現(xiàn)大小不等的圓形或結(jié)節(jié)狀病變，類似蕁麻疹，用藥治療后病癥消退，但容易復(fù)發(fā)，病變最開始見于頸部，然后向軀干、全身皮膚和陰部蔓延，皮膚癥狀持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，皮膚由于反復(fù)病變會(huì)引起皮膚表層增厚，皮膚粗糙。

4 病理變化

病牛體表淋巴結(jié)和腹腔淋巴結(jié)均出現(xiàn)腫脹，且體積是正常淋巴結(jié)的數(shù)倍，淋巴結(jié)表面有呈灰色被膜，淋巴結(jié)柔軟，切面突出；病牛心臟腫脹，心房和心隔間有增生，心肌肥厚，呈灰白色。病情嚴(yán)重的病牛真胃壁明顯增厚，質(zhì)地堅(jiān)硬，病牛脊髓有腫瘤結(jié)節(jié)壓迫變形，甚至出現(xiàn)萎縮病變，病牛股骨、肋骨等骨髓顏色呈灰白色，病牛脾臟、肝臟、腎臟也呈現(xiàn)不同程度腫脹，這些病變組織內(nèi)有大量淋巴細(xì)胞增收，還可能出現(xiàn)堵塞毛細(xì)血管癥狀。

5 診斷方法

5.1 鑒別診斷

與網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤進(jìn)行鑒別診斷：發(fā)生網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤的細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)更不成熟的分化，這些細(xì)胞的大小和分化后的性狀與網(wǎng)狀細(xì)胞相近，但細(xì)胞內(nèi)充滿胞漿，細(xì)胞核性狀也如同泡狀，由于細(xì)胞外周發(fā)生淡染導(dǎo)致細(xì)胞外形模糊，細(xì)胞可能會(huì)出現(xiàn)三角形或腎性等性狀，還可能會(huì)出現(xiàn)其他形態(tài)，這種細(xì)胞形態(tài)和牛白血病細(xì)胞形態(tài)不同，可通過電子顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行鑒別診斷。

5.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

牛感染白血病病毒后，體內(nèi)抗體終身不消失，可通過瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)來檢測(cè)，這也是世界衛(wèi)生組織推薦使用的實(shí)驗(yàn)室診斷方法；除此之外，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)也是世界衛(wèi)生組織規(guī)定的國(guó)際動(dòng)物貿(mào)易牛白血病檢疫方法之一，而熒光定量PCR方法也是一種比較常用的輔助確證方法。

瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)：病牛血清中含有可溶性抗原，在和對(duì)應(yīng)抗體相遇后，在電解質(zhì)參與下發(fā)生抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，繼而生成白色沉淀，由于這種沉淀物顆粒較大，不易擴(kuò)散，可形成肉眼可見的白色沉淀帶，這種發(fā)生抗原抗體反應(yīng)的即為陽性樣本。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)：收集牛只血清樣本，通過牛白血病病毒Gp51 抗體ELISA 檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，這種試劑盒均為商品化，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果可讀，對(duì)技術(shù)人員要求不高，且能檢出個(gè)體血清或混合血清樣品中該病毒的各類抗體（如包膜蛋白抗體、衣殼蛋白抗體）。研究發(fā)現(xiàn)，瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的符合率高達(dá)78%，且瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)對(duì)大群篩查更有優(yōu)勢(shì)，但檢測(cè)敏感性不如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)[2]。

熒光定量PCR 實(shí)驗(yàn)：基于GenBank 數(shù)據(jù)庫搜索牛白血病基因序列，篩選出高度保守區(qū)域，并從中確定具有特異結(jié)構(gòu)的基因序列，設(shè)計(jì)探針引物（上游和下游標(biāo)記分別FAM 熒光和MGB 標(biāo)記），然后通過實(shí)時(shí)熒光PCR 反應(yīng)確定Ct 值和濃度之間的線性關(guān)系，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線后再擴(kuò)增牛白血病特異性片段，該片段長(zhǎng)度共79bp。研究發(fā)現(xiàn)，熒光定量PCR 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)牛白血病前病毒DNA 的特異性高，僅3 個(gè)拷貝數(shù)即能檢測(cè)出陽性樣本，可替代套式PCR 檢測(cè)，且牛只早期感染牛白血病時(shí)，酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)或其他血清學(xué)實(shí)驗(yàn)可能由于體內(nèi)抗原或抗體含量低檢測(cè)為陰性，而牛白血病前病毒DNA 的熒光定量PCR檢測(cè)反復(fù)可以彌補(bǔ)這種不足，可作為確診實(shí)驗(yàn)進(jìn)行推廣應(yīng)用[3]。

6 防治措施

6.1 藥物治療

牛白血病無有特效藥物，若病牛還有經(jīng)濟(jì)價(jià)值可使用抗腫瘤藥物，但這些藥物在發(fā)病初期有一定效果。靜脈注射35ml鹽酸氮芥酊，每天1 次，連續(xù)注射4d，會(huì)緩解皮膚癥狀?；蜢o脈注射5%葡萄糖生理鹽水1L+1g 鹽酸阿糖胞苷，每周注射1次，連續(xù)注射3～4 次，可抑制腫瘤增長(zhǎng)速度。

6.2 定期檢疫

牛白血病的潛伏期長(zhǎng)，若不出現(xiàn)明顯的臨床癥狀很難判斷疾病，因此，牛場(chǎng)需要定期對(duì)牛群健康進(jìn)行檢測(cè)，這樣可以早發(fā)現(xiàn)、早治療，以免錯(cuò)過最佳的治療時(shí)機(jī)。由于牛白血病病變的典型特征是淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯增多，因此可以通過抽血查驗(yàn)血象變化就能檢測(cè)到牛只血液中白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞數(shù)量，當(dāng)白細(xì)胞數(shù)量增幅超70%且淋巴細(xì)胞增生異常就能判定為白血病。若牛群中發(fā)現(xiàn)有病牛，可以對(duì)全群牛采血-DNA 提取-PCR 擴(kuò)增來檢測(cè)，這種生物學(xué)檢測(cè)方法的特異性和準(zhǔn)確率較高，檢測(cè)呈陽性的需要對(duì)病牛及時(shí)隔離、消毒和淘汰。

6.3 驅(qū)蟲管理

牛白血病病毒可以通過吸血昆蟲和蚊蟲進(jìn)行機(jī)械傳播，因此，牛場(chǎng)環(huán)境衛(wèi)生直接決定了發(fā)病率。夏季炎熱多雨，吸血昆蟲大量繁殖，因此，要對(duì)牛群做好驅(qū)蟲管理。牛群可以口服伊維菌素+芬苯達(dá)唑，這樣可以有效驅(qū)除體外寄生蟲蜱蟲、螨蟲、虱子和體內(nèi)寄生蟲絳蟲、線蟲、吸蟲。

6.4 日常管理

為牛群營(yíng)造一個(gè)良好的飼養(yǎng)管理環(huán)境可以提高牛群抗病力，有效抵御細(xì)菌、病毒、寄生蟲等病原入侵。首先，每天維持適量運(yùn)動(dòng)，可以將牛群趕到運(yùn)動(dòng)場(chǎng)運(yùn)動(dòng)1～2h，運(yùn)動(dòng)場(chǎng)內(nèi)有充足、干凈的飲水。其次，規(guī)范引種，嚴(yán)禁從疫區(qū)購買種牛，人工授精前需要對(duì)精液品質(zhì)進(jìn)行白血病檢測(cè)。再次，加強(qiáng)飼喂管理，嚴(yán)禁飼喂病原污染飼料或霉變飼料，日常提供適量的青綠飼料，提高牛群營(yíng)養(yǎng)水平。

6.5 消毒管理

規(guī)范的消毒操作不僅能杜絕病原微生物滋生，還能切斷病原傳播途徑，降低感染概率[4]。由于大部分牛場(chǎng)為開放或半開放式設(shè)計(jì)，通風(fēng)換氣良好，需做好消毒管理。首先在牛場(chǎng)入口和接待室分別設(shè)立車輛消毒池和人員紫外消毒設(shè)置，生產(chǎn)區(qū)進(jìn)入前也要進(jìn)行嚴(yán)格消毒操作，不同牛舍之間有綠化帶或墻體隔離。其次，要定期用生石灰消毒，牛舍用化學(xué)消毒劑噴灑或噴霧消毒。

7 結(jié)語

綜上所述，牛白血病潛伏期長(zhǎng)、病程長(zhǎng)、危害性大，若日常缺乏血象檢測(cè)，只有出現(xiàn)明顯的臨床癥狀時(shí)才能判定，但此時(shí)病情較重，會(huì)嚴(yán)重打擊養(yǎng)牛戶養(yǎng)殖信心和經(jīng)濟(jì)效益。牛白血病病毒傳播途徑廣，除了血液、精液、胎盤、分泌物傳播外，還可以通過手術(shù)器械、吸血昆蟲等非接觸式感染，由于該病為慢性消耗類疾病，必須通過定期檢疫、驅(qū)蟲管理、強(qiáng)化飼養(yǎng)管理、消毒管理來降低感染概率。