核酸檢測(cè)技術(shù)在基層血站血液篩查中的應(yīng)用

謝蘭倩

（欽州市中心血站，廣西 欽州，535000）

在臨床治療期間，血液需求量較大，因此保證血液安全對(duì)疾病治療與降低病原體傳染具有重要意義?；鶎友緸獒t(yī)療機(jī)構(gòu)提供血液，而其血液篩查能力會(huì)直接影響用血安全問題，需要高度重視對(duì)血液的篩查[1]。目前我國(guó)血液篩查方法包括核酸檢測(cè)與血清學(xué)檢查，其中酶聯(lián)免疫吸附法是血清學(xué)監(jiān)測(cè)的主要方法[2]。而核酸檢測(cè)技術(shù)能夠直接檢測(cè)病原體基因組，最大限度的縮短病原體指標(biāo)檢測(cè)窗口期，能夠提高血液檢測(cè)工作效率，降低病原體傳播[3]。自核酸檢測(cè)在我站開始推廣，從2017 年5月開始核酸檢測(cè)覆蓋獻(xiàn)血標(biāo)本，為了解我市的獻(xiàn)血者NAT 陽性結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇112302 例2017 年5 月-2020 年12 月欽州市中心血站無償獻(xiàn)血標(biāo)本進(jìn)行研究，納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》中獻(xiàn)血要求及標(biāo)準(zhǔn)；②接受酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)，無任何反應(yīng)。

1.2 方法

標(biāo)本采集：每位獻(xiàn)血者留取2 管5ml 血液標(biāo)本，采用EDTA-K2 抗凝劑，第一管為常規(guī)真空管，用于ELISA、ALT、血型等的檢測(cè)，第二管采用帶分離膠真空抗凝管，用于NAT 檢測(cè)。儀器與試劑ELISA 儀器與試劑：儀器：前處理標(biāo)本處理儀：TECANEVO150/8，后處理全自動(dòng)酶免分析儀FAME 24/30。ALT 儀器：邁瑞（BS-460） 試劑：HBV 檢測(cè)試劑盒（北京萬泰、珠海麗珠）；抗-HCV 試劑盒（英科新創(chuàng)、上?？迫A）；HIV 試劑盒（北京萬泰、法國(guó)BIO-RAD 公司）外部質(zhì)控品為北京康切斯坦生物有限公司提供。ALT 試劑：深圳邁瑞生物醫(yī)療有限公司。核酸儀器與試劑核酸儀器：蘇州華益美血液核酸篩查系統(tǒng)AB-T-200和HAMLTONBONADUZ AG 科華血液核酸篩查系統(tǒng)。NAT 試劑：HBV、HCV、HIV（1+2）核酸檢測(cè)試劑盒（蘇州華益美）；HVB、HCV、HIV（1+2）（上?？迫A）。

檢測(cè)方法：使用兩種不同廠家的試劑對(duì)HBV、抗-HCV、抗-HIVAg/Ab、抗TP 進(jìn)行ELISA 檢測(cè)，陰性結(jié)果采用核酸篩查系統(tǒng)進(jìn)一步進(jìn)行核酸檢測(cè)，NAT 反應(yīng)性的標(biāo)本為陽性。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)全部標(biāo)本進(jìn)行ELISA 檢測(cè)，對(duì)陰性的獻(xiàn)血者進(jìn)行HBV、HCV 和HIV3 項(xiàng)進(jìn)行NAT 檢測(cè)，對(duì)結(jié)果呈陽性的獻(xiàn)血者進(jìn)行資料分析[4]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本文數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料用χ ±s 表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 比較兩組患者

ELISA 總共檢測(cè)人份數(shù)：112302 例，不合格人份數(shù)：3087例，總合格人數(shù)：109208 例，不合格占總?cè)藬?shù)：2.75%。

其中HIV 不合格人數(shù)：68 例，HBV 不合格人數(shù)：929 例，HCV 不合格人數(shù)：152 例，TP 不合格人數(shù)：472 例，ALT 不合格人數(shù)：1303 例。

核酸檢測(cè)HBV-DNA：115 例，核酸檢測(cè)hcv：0 例，核酸檢測(cè)HIV：0 例。

3 討論

血液安全性與血站采集的血液標(biāo)本有直接的關(guān)系，而基層血站在采集血液期間，可通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，了解病毒抗體與病毒抗原產(chǎn)生直接的了解，但由于其檢測(cè)技術(shù)存在窗口期，使得檢測(cè)誤差較大[5]。近幾年，我國(guó)血液檢測(cè)技術(shù)發(fā)展逐漸加快，基層血站血液檢測(cè)工作中使用核酸檢測(cè)技術(shù)，對(duì)病毒核酸進(jìn)行檢測(cè)，縮短檢測(cè)“窗口期”，使得血液安全性有一定提高[6]。這一技術(shù)的主要優(yōu)勢(shì)在于高度自動(dòng)化、高敏感性，能夠?qū)⒀簶颖局泻繕O低的核酸檢測(cè)出來，病毒科在短時(shí)間內(nèi)檢查出來[7]。

長(zhǎng)期以來，我國(guó)都采用ELISA 方法進(jìn)行兩遍的血液篩查，使輸血傳播疾病的風(fēng)險(xiǎn)大幅度降低，ELISA 敏感度較高，存在較多的假陽性和假陰性，并且檢測(cè)的“窗口期”比較長(zhǎng)，存在漏檢的風(fēng)險(xiǎn)比較大[8]。本文通過將核酸檢測(cè)技術(shù)納入研究，結(jié)果顯示：HIV 不合格人數(shù)：68 例，HBV 不合格人數(shù)：929 例，HCV不合格人數(shù)：152 例，TP 不合格人數(shù)：472 例，ALT 不合格人數(shù)：1303 例。核酸檢測(cè)HBV-DNA：115 例，核酸檢測(cè)hcv：0 例，核酸檢測(cè)HIV：0 例。核酸檢測(cè)技術(shù)通過提取血液中核酸、檢驗(yàn)血液標(biāo)本中核酸的擴(kuò)增等流程，使得核酸兩得到擴(kuò)增，能夠快速檢測(cè)感染病毒的血液標(biāo)本[9]。通過分析漏診的原因，主要在于：1.由于基層血站剛開始開展核酸檢測(cè)技術(shù)，可能工作人員對(duì)相關(guān)注意事項(xiàng)不夠了解，隨著逐漸推廣核酸檢測(cè)技術(shù)，可有效降低由于人為因素導(dǎo)致的誤診情況[10]。2.由于地域因素及人群分布等原因的影響，會(huì)造成不同地區(qū)之間血液樣本較大的差別。3.由于血液樣本在運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室途中保存不當(dāng)會(huì)出現(xiàn)標(biāo)本檢測(cè)異常，但目前我院已經(jīng)采取全程溫控監(jiān)視[11]。4.儀器在保養(yǎng)、檢測(cè)上存在一定要求，部分人員可能不夠了解。因此臨床檢測(cè)期間需要加大對(duì)操作的要求，最大程度的提高陽性確診率，提高臨床輸血安全性[12]。ELISA 檢測(cè)在受到病毒變異、隱匿性感染等因素影響下，血液檢測(cè)過程中存在一定漏診率，為了確保用血安全，運(yùn)用核酸檢測(cè)技術(shù)與酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)互補(bǔ)，縮短窗口期，提升陽性率，為臨床用血與疾病治療提供了有利保障。

綜上所述，核酸檢測(cè)技術(shù)在基層血站中實(shí)施，能夠促進(jìn)多項(xiàng)檢測(cè)靈敏度，使得基層血站篩差血液傳播性疾病水平明顯提高，與血清學(xué)配合檢測(cè)，能夠使得臨床用血安全性有一定提高，并確保在檢測(cè)期間按個(gè)要求，保障基層血站血液質(zhì)量安全。