神經(jīng)病理性疼痛動(dòng)物模型的研究概況

鄧晚秋，阮穎文，郭凱文，胡琪

(武漢科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院，武漢 430065)

神經(jīng)病理性疼痛(neuropathic pain，NPP)是臨床上最常見(jiàn)、最頑固、最難治的一種由軀體感覺(jué)神經(jīng)系統(tǒng)損傷或疾病直接導(dǎo)致的慢性疼痛，自發(fā)性疼痛及痛覺(jué)超敏是主要的臨床病理特征。人類(lèi)與動(dòng)物模型在神經(jīng)源性疼痛發(fā)生時(shí)的痛覺(jué)表現(xiàn)及病理變化上具有相似性。疼痛動(dòng)物模型作為人類(lèi)疼痛的輔助研究工具，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究。對(duì)人類(lèi)免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)相關(guān)NPP動(dòng)物模型的研究發(fā)現(xiàn)，gp120通過(guò)誘發(fā)關(guān)鍵信號(hào)蛋白Wnt5a引起小鼠HIV相關(guān)周?chē)窠?jīng)性病變(HIV-assiciated sensory neuropathy，HIV-SN)急慢性疼痛[1]；在顱腦損傷模型中發(fā)現(xiàn)腺苷三磷酸二鈉氯化鎂可促進(jìn)抗炎因子的表達(dá)，降低腦組織含水量，以起到緩解NPP的作用[2]；此外，NPP動(dòng)物模型還廣泛應(yīng)用于糖尿病性神經(jīng)痛、皰疹后神經(jīng)痛以及脊髓損傷后中樞性疼痛等的研究。NPP動(dòng)物模型研究的不斷發(fā)展有助于理解疾病發(fā)生發(fā)展機(jī)制以及藥物作用特點(diǎn)，由于NPP病因復(fù)雜且發(fā)病機(jī)制目前尚未完全明確，且患者臨床表現(xiàn)的個(gè)體差異較大、傳統(tǒng)藥物療效不佳，NPP仍是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的重點(diǎn)?，F(xiàn)對(duì)NPP研究中常見(jiàn)動(dòng)物模型的制備方法、特點(diǎn)及動(dòng)物模型選擇的相關(guān)影響因素予以綜述，以期為研究NPP發(fā)病機(jī)制和篩選干預(yù)策略的動(dòng)物模型提供參考。

1 中樞神經(jīng)疼痛模型

國(guó)際疼痛學(xué)會(huì)將中樞性疼痛定義為由中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變或功能失調(diào)所引起的疼痛。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，調(diào)神抑痛針刺法有助于改善腦卒中后中樞性疼痛患者的癥狀，并在炎癥反應(yīng)消退及運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)方面起積極作用[3-4]。

1.1腦部損傷模型 腦部損傷型NPP模型相對(duì)較少，Wassermen和Koeberle[5]首次構(gòu)建了中樞性腦卒中后疼痛丘腦痛動(dòng)物模型。楊菲[6]通過(guò)經(jīng)大鼠背側(cè)丘腦腹后外側(cè)核立體定位注射Ⅳ型膠原酶構(gòu)建腦出血性腦卒中后疼痛模型發(fā)現(xiàn)，丘腦內(nèi)出血部位與疼痛發(fā)生具有相關(guān)性。丘腦卒中后疼痛大鼠模型的構(gòu)建有助于丘腦綜合征的神經(jīng)病理學(xué)和生理學(xué)的研究以及中樞性腦卒中后疼痛治療方法的開(kāi)發(fā)。通過(guò)線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈阻斷模型發(fā)現(xiàn)，腺苷三磷酸二鈉氯化鎂可通過(guò)一系列炎癥機(jī)制減輕腦水腫，進(jìn)而緩解NPP[2]。構(gòu)建腦部損傷型動(dòng)物模型對(duì)于理解顱腦損傷的發(fā)生機(jī)制與探索相應(yīng)的功能恢復(fù)手段具有重要意義。

1.2脊髓損傷(spina cord injury，SCI)模型 SCI易致高位截癱和神經(jīng)元變性壞死等嚴(yán)重后果[7]，現(xiàn)已較少應(yīng)用。目前常見(jiàn)SCI-NPP模型有重物墜落或挫傷NPP模型、脊髓壓迫損傷模型、光化學(xué)SCI模型等。

1.2.1常見(jiàn)SCI模型 Allen[8]于1911年開(kāi)創(chuàng)了SCI的標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)研究，利用重物墜落法制作重物墜落或挫傷NPP模型，具有可操作性強(qiáng)、成本較低的優(yōu)點(diǎn)，并可保持硬脊膜完整，模擬人類(lèi)SCI變化規(guī)律及病理生理相關(guān)改變，故可應(yīng)用于SCI后中樞性神經(jīng)痛機(jī)制的相關(guān)研究。但常導(dǎo)致肢端嚴(yán)重壞疽和截癱，因此很多研究者對(duì)此方法進(jìn)行改良，Marcol等[9]利用氣槍原理精確調(diào)節(jié)高壓下氣流，使脊髓白質(zhì)產(chǎn)生部分損傷，這種方法創(chuàng)傷小，不需要切除椎骨。劉楊等[7]自制改良落體法打擊裝置，在咬除部分T12～L4棘突和椎板、暴露硬脊膜的基礎(chǔ)上，以玻璃導(dǎo)管引導(dǎo)撞針以及特定沖擊速度的前提下造成不同程度的大鼠脊髓挫傷。以上兩種方法目標(biāo)準(zhǔn)確、受力均勻、可選擇打擊參數(shù)，所制作的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ涂蓮V泛應(yīng)用于SCI-NPP的研究。采用改良Allen氏重物墜落法研究發(fā)現(xiàn)，褪黑素可以減輕SCI大鼠的炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激反應(yīng)[10]。

脊髓壓迫損傷模型應(yīng)用較為廣泛，其原理是通過(guò)壓力損傷脊髓組織及其血供誘導(dǎo)SCI，其中以鉗夾和球囊壓迫最為常見(jiàn)。鉗夾壓迫損傷模型將暴露的脊髓通過(guò)特制鉗夾垂直夾持造成SCI。通過(guò)調(diào)整鉗夾力、鉗夾時(shí)間以及在動(dòng)脈夾內(nèi)側(cè)壁放置墊片等方法改良傳統(tǒng)的鉗夾壓迫法，使操作簡(jiǎn)便并具有穩(wěn)定的可重復(fù)性[11-12]。球囊壓迫損傷模型[13]通過(guò)向椎管和硬膜外椎板下的球囊充氣，造成脊髓壓迫損傷，壓力大小和壓迫時(shí)間長(zhǎng)短決定了SCI的程度。脊髓壓迫損傷模型可用于模擬臨床椎管內(nèi)腫瘤、出血及增生等占位性病變和動(dòng)脈狹窄類(lèi)疾病所致NPP的治療研究。

Watson等[14]最早將光化學(xué)法用于大鼠腦梗死模型，建立了光化學(xué)SCI模型。該造模方法是將光敏染料(玫瑰紅)注入目標(biāo)椎體節(jié)段的靜脈，以離子激光照射激發(fā)光敏染料，從而使脊髓脈管閉塞和局部軟組織損傷，導(dǎo)致脊髓缺血，可用于模擬缺血性SCI所致的NPP研究。光化學(xué)法具有可重復(fù)性高、對(duì)動(dòng)物損傷小、操作簡(jiǎn)便和可控性良好等優(yōu)點(diǎn)，故應(yīng)用日漸廣泛。SCI模型造模成功后，通過(guò)大鼠的BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)評(píng)分和聯(lián)合行為評(píng)分評(píng)價(jià)SCI后模型的運(yùn)動(dòng)功能相關(guān)障礙，以輔助相關(guān)研究。

1.2.2其他常用于NPP研究的SCI模型 脊髓牽拉損傷模型是通過(guò)外力牽拉脊髓，造成脊髓位置變化，可較好地從臨床角度下模仿SCI的受傷條件和致傷機(jī)制，但存在個(gè)體差異性較大、無(wú)法量化牽拉比率等缺陷，限制了其應(yīng)用。脊髓缺血再灌流損傷模型[15]可用于臨床脊髓缺血再灌注的病理生理學(xué)變化機(jī)制和相關(guān)藥物治療方面的輔助研究。郭曉輝等[16]通過(guò)建立大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型研究發(fā)現(xiàn)，川芎嗪對(duì)大鼠神經(jīng)細(xì)胞自噬有調(diào)節(jié)作用，并對(duì)神經(jīng)細(xì)胞有保護(hù)作用。丁煌等[17]通過(guò)制作大鼠脊髓缺血再灌注損傷模型探討冰片、黃芪甲苷和三七總皂苷配伍對(duì)腦缺血再灌注后血腦屏障通透性的影響，結(jié)果顯示，3種藥物對(duì)腦缺血再灌注后血腦屏障通透性的增加均有一定程度的抑制作用，均可減輕腦水腫，減少腦組織損傷，且三者聯(lián)用時(shí)效應(yīng)增強(qiáng)。SCI模型還包括興奮毒性SCI模型，通過(guò)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓內(nèi)、鞘內(nèi)或腹腔內(nèi)注射興奮性毒性物質(zhì)(如使君子氨酸[18])構(gòu)建模型，研究結(jié)果表明該動(dòng)物模型自發(fā)痛和誘發(fā)痛所導(dǎo)致的相關(guān)行為在形態(tài)學(xué)上有一定關(guān)聯(lián)。

目前文獻(xiàn)報(bào)道的中樞疼痛模型大多以SCI為基礎(chǔ)，外傷性或缺血性SCI常發(fā)生自發(fā)性或誘發(fā)性的疼痛。理想的SCI模型應(yīng)具有可操作性、臨床相似性、可重復(fù)性、可調(diào)控性和經(jīng)濟(jì)實(shí)用性的特點(diǎn)。

2 周?chē)窠?jīng)損傷模型

周?chē)窠?jīng)損傷模型主要通過(guò)損傷和壓迫脊神經(jīng)和坐骨神經(jīng)等構(gòu)建，可較大程度地產(chǎn)生持續(xù)性疼痛，因此得到廣泛應(yīng)用。周?chē)窠?jīng)損傷導(dǎo)致其神經(jīng)支配區(qū)域出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙、感覺(jué)障礙、反射障礙和自主神經(jīng)功能障礙，同時(shí)還可誘發(fā)痛覺(jué)過(guò)敏、異常性疼痛和痛覺(jué)過(guò)敏等NPP。在臨床上，外傷、疾病因素以及自身免疫因素可導(dǎo)致周?chē)窠?jīng)損傷，其是臨床治療和康復(fù)治療急需解決的問(wèn)題。目前較常見(jiàn)的周?chē)窠?jīng)損傷模型主要有結(jié)扎損傷模型、神經(jīng)瘤模型、冷凍松解損傷模型及背根節(jié)慢性壓迫模型等。

2.1結(jié)扎損傷模型 Bennett和Xie[19]報(bào)道了一種由外周單一神經(jīng)損傷導(dǎo)致的動(dòng)物疼痛模型，通過(guò)將成年大鼠坐骨神經(jīng)主干周?chē)鷮捤山Y(jié)扎，造成周?chē)詥紊窠?jīng)病變，該實(shí)驗(yàn)大鼠術(shù)后產(chǎn)生痛覺(jué)過(guò)敏、痛覺(jué)超敏和自發(fā)性疼痛(或感覺(jué)障礙)，形成坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷(chronic constriction injury of sciatic nerve，CCI)模型。CCI模型接近人類(lèi)NPP疾病，根據(jù)結(jié)扎力度可較好地模仿臨床上不同程度的腫瘤壓迫、神經(jīng)壓迫、重金屬中毒等原因所致的NPP。Kimura等[20]通過(guò)建立CCI模型研究發(fā)現(xiàn)，豐富的環(huán)境可改善大鼠疼痛行為。劉宇等[21]的研究顯示，塞來(lái)昔布可能通過(guò)下調(diào)磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B通路減輕CCI大鼠模型的疼痛。CCI模型采用寬松結(jié)扎術(shù)，難以保持結(jié)扎力度的同質(zhì)性，故重復(fù)性不佳，易造成實(shí)驗(yàn)誤差，因此該造模方法有待進(jìn)一步改良。

結(jié)扎部分坐骨神經(jīng) (partial sciatic nerve ligation，PSNL) 模型由Seltzer[22]首次報(bào)道，該模型對(duì)部分坐骨神經(jīng)進(jìn)行鈍性分離并深度結(jié)扎，術(shù)后數(shù)小時(shí)至數(shù)月內(nèi)，大鼠出現(xiàn)同側(cè)后肢的保護(hù)及舔足行為，提示出現(xiàn)自發(fā)性疼痛，von Frey測(cè)試顯示大鼠產(chǎn)生痛覺(jué)異常及機(jī)械性痛覺(jué)過(guò)敏現(xiàn)象，同時(shí)出現(xiàn)熱痛覺(jué)過(guò)敏，甚至“鏡像”疼痛等現(xiàn)象。PSNL模型可有效避免個(gè)體差異，但操作復(fù)雜、手術(shù)創(chuàng)傷較大，不利于大批量操作。PSNL模型和CCI模型均能產(chǎn)生持續(xù)有效的慢性疼痛，CCI模型對(duì)疼痛更敏感，而PSNL模型的疼痛持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)。

坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷模型[23]是通過(guò)分別雙重結(jié)扎坐骨神經(jīng)的分支脛神經(jīng)和腓總神經(jīng)、切斷雙重結(jié)扎的中央處建立，術(shù)中腓腸神經(jīng)保持完整，術(shù)后24 h大鼠腓腸神經(jīng)支配側(cè)出現(xiàn)疼痛過(guò)敏和超敏等現(xiàn)象，術(shù)后2周上述異常反應(yīng)達(dá)高峰，可持續(xù)6個(gè)月以上，此模型動(dòng)物表現(xiàn)出的疼痛癥狀與臨床NPP患者有相同點(diǎn)，該模型具有操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、個(gè)體差異小等優(yōu)點(diǎn)。Boccella等[24]將此模型應(yīng)用于研究NPP發(fā)生機(jī)制及探討相應(yīng)的治療方法。陳曦等[25]通過(guò)建立坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷大鼠模型發(fā)現(xiàn)，A型肉毒毒素可調(diào)控Nav1.3鈉通道蛋白表達(dá)，影響功能性河豚毒素敏感型鈉電流，從而發(fā)揮改善NPP的作用。

L5/L6脊神經(jīng)結(jié)扎模型由Ho Kim和Mo Chung[26]首次報(bào)道，通過(guò)暴露并結(jié)扎L5和L6神經(jīng)根造模，造模成功后可出現(xiàn)痛覺(jué)異常和痛覺(jué)過(guò)敏等現(xiàn)象，并可持續(xù)4個(gè)月以上。脊神經(jīng)結(jié)扎模型損傷定量和脊髓節(jié)段定位明確，有助于研究受損和未受損的神經(jīng)纖維在疼痛發(fā)生中的作用；此外，該模型具有可重復(fù)性高的特點(diǎn)，有利于研究脊髓疼痛產(chǎn)生的部位。有學(xué)者通過(guò)脊神經(jīng)結(jié)扎法建立NPP模型發(fā)現(xiàn)，A1型星形膠質(zhì)細(xì)胞可能參與NPP的發(fā)生發(fā)展[27]，且電針通過(guò)調(diào)節(jié)脊髓背角中相關(guān)突觸蛋白的表達(dá)參與興奮性突觸重構(gòu)，從而起到鎮(zhèn)痛作用[28]。與CCI模型相比,脊神經(jīng)結(jié)扎模型手術(shù)操作相對(duì)復(fù)雜、動(dòng)物損傷較大、術(shù)后感染率高[29]。由于結(jié)扎損傷模型種類(lèi)繁多，選擇模型時(shí)應(yīng)考慮與人類(lèi)NPP疾病的相似性、實(shí)驗(yàn)室條件、實(shí)驗(yàn)可操作性及模型重復(fù)性等因素，以減少實(shí)驗(yàn)誤差。

2.2其他周?chē)窠?jīng)損傷模型 其他用于NPP研究的周?chē)窠?jīng)損傷模型還包括背根節(jié)慢性壓迫模型、神經(jīng)瘤模型和冷凍松解損傷模型等。神經(jīng)瘤模型[30]造模時(shí)需將大鼠的坐骨神經(jīng)干暴露并結(jié)扎，在結(jié)扎遠(yuǎn)端完全切開(kāi)神經(jīng)干，因切斷的軸突會(huì)形成神經(jīng)瘤而得名，在臨床上與截肢后的相關(guān)幻肢痛有一定相似性，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通常在術(shù)后9～40 d出現(xiàn)舔、撓或咬足趾和自噬等自發(fā)痛行為[31]。冷凍松解損傷模型[32]是將冷凍松解術(shù)方法用于制作NPP模型，造模時(shí)坐骨神經(jīng)干被-60 ℃冰凍探頭接觸而損傷，此模型較適用于臨床上外周神經(jīng)暫時(shí)性損傷引起的相關(guān)神經(jīng)痛的研究。背根節(jié)慢性壓迫模型[33-34]是臨床研究常見(jiàn)的慢性腰腿痛的理想模型，建模時(shí)將一根細(xì)鋼柱植入大鼠一側(cè)腰椎間孔，以模擬腰椎間孔狹窄，術(shù)后第2天實(shí)驗(yàn)大鼠出現(xiàn)疼痛癥狀，但不出現(xiàn)傷側(cè)肢體自噬現(xiàn)象。背根節(jié)慢性壓迫模型保留了初級(jí)神經(jīng)纖維的傳入與傳出功能，但該模型制作難度大，且需要分離椎旁軟組織并暴露椎間孔，故易致感染[35]。因此，造模時(shí)應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的適用范圍，并結(jié)合人類(lèi)NPP相關(guān)疾病的特點(diǎn)建立有效的理想實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

3 疾病所致的NPP模型

3.1糖尿病性神經(jīng)痛(diabetic neuropathic pain，DNP)模型與皰疹后神經(jīng)痛(postherpetic neuralgia，PHN)模型 DNP模型通過(guò)向生長(zhǎng)狀況相似SD大鼠腹腔注射適量的鏈脲佐菌素制備[36-37]，該模型制作簡(jiǎn)便、成功率高且較穩(wěn)定，同時(shí)DNP相關(guān)的自發(fā)性疼痛、異常性疼痛和痛覺(jué)過(guò)敏等外周神經(jīng)病變確切。有研究通過(guò)構(gòu)建DNP模型探索大鼠認(rèn)知功能障礙與大鼠海馬內(nèi)源性硫化氫變化間關(guān)系，結(jié)果顯示，DNP大鼠認(rèn)知功能損傷嚴(yán)重程度與時(shí)間呈正相關(guān)，并與海馬神經(jīng)細(xì)胞的凋亡及內(nèi)源性硫化氫減少密切相關(guān)[38]。李國(guó)松等[39]采用Ⅰ型單純皰疹病毒制作PHN模型發(fā)現(xiàn)，在脛骨局部處用微量加樣器皮下接種注射可成功誘導(dǎo)小鼠PHN模型，且該模型更接近疾病發(fā)展規(guī)律。劉潤(rùn)澤等[40]通過(guò)接種Ⅰ型單純皰疹病毒誘導(dǎo)三叉神經(jīng)節(jié)潛伏感染和再激活動(dòng)物模型發(fā)現(xiàn)，三叉神經(jīng)節(jié)型單純皰疹病毒潛伏感染再激活可誘發(fā)三叉神經(jīng)痛閾降低，提示其可能是三叉神經(jīng)痛的病因。DNP及PHN嚴(yán)重影響糖尿病和皰疹患者的生活質(zhì)量，相關(guān)動(dòng)物模型的建立有利于探討NPP的發(fā)生機(jī)制，并可為新藥的開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)，為NPP的治療提供參考方案。

3.2HIV引發(fā)的NPP相關(guān)動(dòng)物模型 Shi等[41]經(jīng)鞘內(nèi)注射HIV表面gp120糖蛋白分子構(gòu)建小鼠疼痛模型，進(jìn)而對(duì)HIV感染引發(fā)的NPP進(jìn)行研究，證實(shí)gp120糖蛋白分子是引起小鼠HIV-SN急慢性疼痛的關(guān)鍵致痛因子，而Wnt5a是HIV/gp120誘發(fā)NPP的關(guān)鍵信號(hào)蛋白。另有研究證實(shí)，重復(fù)使用阿片類(lèi)鎮(zhèn)痛藥會(huì)導(dǎo)致HIV-SN慢性疼痛狀態(tài)加劇[42]，故認(rèn)為Wnt5a是HIV-SN所致急慢性疼痛的關(guān)鍵通路和治療靶點(diǎn)。而用于治療HIV感染的高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒療法常用藥物中的核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑可能通過(guò)誘導(dǎo)Wnt5a調(diào)節(jié)的神經(jīng)炎癥導(dǎo)致患者的慢性疼痛[1]。HIV-SN是HIV感染常見(jiàn)的一種慢性并發(fā)癥，其神經(jīng)病理學(xué)機(jī)制至今仍不明確，嚴(yán)重制約了HIV-SN所致NPP“對(duì)因”治療藥物的研發(fā)。以上動(dòng)物模型對(duì)于尋找HIV相關(guān)NPP產(chǎn)生的關(guān)鍵通路和治療靶點(diǎn)具有重要作用。

3.3化療藥物所致周?chē)窠?jīng)病變模型 部分化療藥物具有神經(jīng)毒性作用，在腫瘤治療過(guò)程中易誘發(fā)周?chē)鶱PP。目前已有研究使用抗腫瘤化療藥長(zhǎng)春新堿、順鉑[43]等進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尾靜脈或腹腔注射制備周?chē)窠?jīng)病變模型。付寶軍等[44]利用長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)化療痛模型發(fā)現(xiàn)，丹參酮ⅡA對(duì)維持期痛覺(jué)過(guò)敏有抑制作用，其機(jī)制可能與抑制脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞活化，進(jìn)而減少炎癥細(xì)胞因子腫瘤壞死因子-α以及白細(xì)胞介素-6的表達(dá)相關(guān)。紫杉醇常用于構(gòu)建周?chē)窠?jīng)病變模型。對(duì)紫杉醇誘導(dǎo)的周?chē)窠?jīng)病變模型的研究發(fā)現(xiàn)，低頻電針能顯著下調(diào)大鼠背根神經(jīng)節(jié)中由紫杉醇導(dǎo)致的瞬時(shí)感受器電位香草酸受體1型的過(guò)表達(dá)，且該作用極可能參與紫杉醇誘發(fā)的大鼠周?chē)窠?jīng)痛的機(jī)制[45]。在紫杉醇和奧沙利鉑制作NPP模型的代謝組學(xué)實(shí)驗(yàn)中顯示，磷酸戊糖途徑、谷氨酸和谷氨酰胺途徑在上述兩種藥物所致NPP中起決定性作用[46]?；熕幬锼律窠?jīng)痛持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，甚至治療結(jié)束后仍然存在，因此通過(guò)研究使用化療藥物制備的動(dòng)物模型，有助于提出針對(duì)臨床化療藥物所致神經(jīng)痛的治療策略。

4 NPP動(dòng)物模型選擇的影響因素

臨床上，多種NPP的發(fā)生機(jī)制不同，建立不同的NPP動(dòng)物模型有助于獲得有針對(duì)性的NPP有效治療策略，并有助于對(duì)其造模機(jī)制、原理及方法進(jìn)行深入研究與分析。疼痛包括兩個(gè)層面，即痛的感覺(jué)分辨和痛的情緒反應(yīng)。感覺(jué)分辨指感受刺激的性質(zhì)、強(qiáng)度、位置等；情緒反應(yīng)是指痛的情緒、情感特性以及負(fù)性情緒，包括傷害性刺激所引發(fā)的厭惡、焦慮、恐懼等[47]。Seo等[48]研究發(fā)現(xiàn)，NPP實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常伴有海馬神經(jīng)元生發(fā)減少，而神經(jīng)元生發(fā)減少常與抑郁焦慮等負(fù)性情緒改變相關(guān)。雖然痛的感覺(jué)分辨和痛的情緒反應(yīng)不同，但多數(shù)學(xué)者認(rèn)為痛的情緒的產(chǎn)生與慢性NPP有關(guān)，因此痛感覺(jué)和痛情緒的臨床表現(xiàn)很難鑒別，給動(dòng)物模型的建立帶來(lái)了諸多困難[49-50]。有研究發(fā)現(xiàn)，抑郁樣行為或焦慮樣行為一般出現(xiàn)在疼痛4～8周后，說(shuō)明情緒障礙的出現(xiàn)與神經(jīng)病變的時(shí)間有關(guān)[51]，且抑郁樣情緒的出現(xiàn)晚于焦慮樣情緒[52]。另有研究發(fā)現(xiàn)，左側(cè)肢體NPP模型更易產(chǎn)生焦慮樣情緒，但目前其相關(guān)病理機(jī)制尚不清楚，其原因可能是雙側(cè)大腦控制情緒的功能具有不對(duì)稱性[53]。Norman等[54]的研究發(fā)現(xiàn)，右側(cè)肢體NPP模型較易產(chǎn)生抑郁樣行為。此外，老年大鼠的焦慮樣情緒較幼年及青中年大鼠更明顯，故選擇老年大鼠更有益于實(shí)驗(yàn)觀察[55]。因此，在選擇動(dòng)物模型時(shí)，應(yīng)考慮以上各種因素的綜合影響，以減少實(shí)驗(yàn)誤差，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

5 小 結(jié)

目前用于NPP研究的動(dòng)物模型多種多樣。但動(dòng)物與人體存在本質(zhì)區(qū)別，且構(gòu)建NPP動(dòng)物模型時(shí)往往存在研究因素單一及病程簡(jiǎn)單等局限性，而人類(lèi)NPP往往是多種影響因素共同作用的結(jié)果，因此全面反映NPP確切內(nèi)在機(jī)制的NPP動(dòng)物模型的制備還有待進(jìn)一步探索。此外，在制備N(xiāo)PP動(dòng)物模型時(shí)還應(yīng)綜合考慮實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的種類(lèi)、情緒、年齡等因素的影響。未來(lái)，NPP動(dòng)物模型的研究還有極大的發(fā)展空間，以制備出重復(fù)性更高、更加接近人類(lèi)NPP發(fā)生機(jī)制及臨床狀態(tài)的優(yōu)化NPP動(dòng)物模型。