藥物對肝損傷的影響和干預(yù)研究概況

王睿 高秉紅 李平，3

1.蘭州大學(xué)第二醫(yī)院，甘肅 蘭州 730030；2.濟(jì)川藥業(yè)集團(tuán)有限公司，江蘇 泰興 225441；3.甘肅省消化系腫瘤重點實驗室，甘肅 蘭州 730030

隨著大數(shù)據(jù)和循證醫(yī)學(xué)的迅速發(fā)展，藥物對人體器官的干預(yù)影響更加明確［1-2］。研究表明，化學(xué)藥品、生物制品對肝損傷基因具有明顯的干預(yù)影響作用，保護(hù)肝損傷作用肯定。本文就化學(xué)藥品和生物制品對肝損傷的干預(yù)影響作一簡要綜述，并對其分子生物學(xué)和基因表達(dá)研究進(jìn)行初步評價。

1 化學(xué)藥品

左卡尼汀單獨使用以及聯(lián)合葡醛內(nèi)酯可通過降低ALT、AST 含量及 MDA 水平，升高 SOD 水平，而對相應(yīng)肝損傷有一定的保護(hù)作用，機(jī)制與左卡尼汀的抗氧化作用相關(guān)［3-4］；氫生理鹽水通過抗氧化以及抗炎作用減輕對乙酰氨基酚引起的肝損傷［5］；過氧化氫酶（CAT）抑制劑氨基三唑降低大鼠血漿中ALT、AST 及乳酸脫氫酶（LDH）水平、CAT 活性、H2O2水平及 MDA 含量，下調(diào)腫瘤壞死因子-α 水平、下調(diào)白介素-6 水平，從而減輕酒精造成的肝損傷［6］；甘草酸單銨明顯下調(diào)異煙肼誘導(dǎo)的肝損傷大鼠肝臟轉(zhuǎn)運體Ntcp 及Mrp2 表達(dá)，對Isoniazid 引起的肝損傷具備保護(hù)效用［7］；復(fù)方甘草酸單銨［8］抑制恩諾沙星聯(lián)合LPS 所致肝損傷雞TNF-α、IL-1、IL-6 炎性因子釋放，雙向調(diào)控 T 細(xì)胞亞群而起到保肝作用；二氯乙酸二異丙胺使結(jié)核藥物引起的肝損傷患者血清總膽固醇、高密度脂蛋白、三酰甘油、低密度脂蛋白水平顯著提高，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性降低，對抗結(jié)核藥物所致肝損傷有治療作用［9］；丁基苯酞刺激Nrf2 活化、調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激等，而改善糖尿病肝損傷［10］；烏司他丁阻礙CCl4所引起的肝損傷大鼠肝臟中致炎因子的釋放，從而減輕肝損傷［11］；沙利度胺通過其抗氧化、抗炎作用以及下調(diào) TNF－α mRNA、TGF－β1 的表達(dá)及作用對免疫性肝損傷具備保護(hù)作用［12］。

糖皮質(zhì)激素使重癥藥物性肝損傷血清中ALT、AST、TBil、DBil、ALP 水平顯著降低且早期小劑量、短療程使用糖皮質(zhì)激素，對重癥藥物肝損傷有很好的療效［13］。褪黑激素通過抗氧化應(yīng)激、抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及激活SIRT1 基因，減輕異煙肼合用利福平引起的肝損傷［14］。地塞米松通過阻礙T 細(xì)胞發(fā)揮作用，調(diào)控T 細(xì)胞亞群分化，對急性炎性肝損傷有改善作用［15］。外源性瘦素通過下調(diào)NF-κB 的表達(dá)［16］，盡量避免肝細(xì)胞的凋亡，對肝損傷有改善作用。此外還有研究報道，非生物人工肝［17］對重癥藥物性肝損傷有更好的輔助治療作用。

2 生物制品

2.1 氨基酸類生物制品 有研究證明，小牛血去蛋白提取物通過抗氧化、干預(yù)細(xì)胞凋亡通路中的差異表達(dá)基因，對四氯化碳和乙醇所引起的肝損傷具備保護(hù)效用［18］；富硒花生分離蛋白和硒代蛋氨酸抑制酒精激活的乙醇脫氫酶和細(xì)胞色素同工酶，調(diào)節(jié)Nrf-2，增加GCLC 表達(dá)量、增加HO-1 的表達(dá)量，減輕酒精引起的損傷［19］；36 個氨基酸多肽片段和16 個氨基酸多肽片段均可使四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化小鼠血清ALT、AST 含量降低，纖維化指標(biāo)HA、IV-C 水平降低，肝纖維化相關(guān)基因表達(dá)水平降低以及小鼠肝細(xì)胞內(nèi)活性氧含量下降，兩個多肽片段對小鼠肝纖維化均具備保護(hù)效用，該作用可能與減少氧化應(yīng)激、影響基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP-2）、金屬蛋白酶組織抑制劑（TIMP-1）和結(jié)締組織生長因子（CTGF）表達(dá)有關(guān)（源Ⅰ型膠原Col1a1、Ⅲ型膠原Col3a1）［20-21］；金屬硫蛋白可通過調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激程度、抑制肝細(xì)胞凋亡而達(dá)到其保護(hù)砷［21］中毒性肝損傷的目的［22-23］，此外，金屬硫蛋白還可劑量依賴性降低鎳［22］致肝損傷小鼠血清 AST、ALT、GGT 及總膽汁酸，增強(qiáng)GSH-Px 和SOD 生物活性，減少MDA 和肝組織GSH 含量，對鎳致小鼠肝損傷有保護(hù)效果。肝再生增強(qiáng)因子可使調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞數(shù)量增加，肝組織中Foxp3 mRNA 表達(dá)水平升高，下調(diào)IL-6 mRNA 表達(dá)，下調(diào)TNF-α mRNA 表達(dá)，所以ALR 對肝損傷有保護(hù)作用［24］；肝素通過使小鼠血漿 ALT、T-BIL、AST、細(xì)胞外組蛋白、TNF-α 和IL-6 水平下降，而減輕D-氨基半乳糖與脂多糖合用引起的肝損傷［25］。Salub-rinal 通過介導(dǎo)PERK/e IF2α 通路來減慢腦死亡大鼠肝細(xì)胞的凋亡進(jìn)程，達(dá)到保護(hù)肝損傷的目的［26］。激活素A 結(jié)合蛋白卵泡抑素明顯減少ALT 和AST 的量，且敲低Smad3 基因?qū)Ω螕p傷的修復(fù)有輔助效果，對刀豆蛋白所致肝損傷有保護(hù)作用［27］。

2.2 干細(xì)胞類生物制品 MSCs 下調(diào)Bax 的表達(dá)，升高bcl-2 基因mRNA 水平，升高VEGF A 基因的mRNA水平，降低α-平滑肌肌動蛋白細(xì)胞數(shù)量，升高Ki-67細(xì)胞數(shù)量，由此緩解環(huán)磷酰胺［28］引起的大鼠藥物性肝損傷。此外，有研究證實 UCMSCs 分化后，HNF-4α 基因表達(dá)明顯上調(diào)，LBK1 蛋白、AMPK 蛋白表達(dá)量減少，且UCMSCs 分化得來的細(xì)胞［29］具備部分肝細(xì)胞作用；還有研究表明HGF 基因修飾［30］的MSC 對慢性肝損傷也有很好的治療效果。

c-met 基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）［31］、Bcl-2 基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞［32］和Akt1 基因修飾的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞［33］對肝損傷有治療作用，這與BMSCs 能夠在肝損大鼠肝臟歸巢，且與表現(xiàn)出保護(hù)作用有關(guān)。研究證明，穩(wěn)定表達(dá)sh RNA 的mi MSC 細(xì)胞系［34］阻礙乙型肝炎病毒的轉(zhuǎn)錄，對乙型肝炎肝損傷有很好的保護(hù)效果。此外HGF/KGF 基因［35］修飾的間充質(zhì)干細(xì)胞使四氯化碳所致肝損傷動物的AST、ALT和TBIL 含量顯著下降，對大鼠肝損傷的有治療作用。白介素-17 介導(dǎo)肝損傷過程，而自體骨髓源干細(xì)胞通過阻礙IL-17 作用加快四氯化碳所致肝損傷修復(fù)過程［36］。

3 小結(jié)

從相關(guān)文獻(xiàn)回顧可以看出，化學(xué)藥品、生物制品對肝損傷的治療作用大多是通過降低肝臟指數(shù)、減輕肝組織病理損害、抗氧化等實現(xiàn)的，對肝損傷基因的干預(yù)大多是通過干預(yù)肝損傷細(xì)胞凋亡基因、肝損傷炎癥相關(guān)基因，即下調(diào)肝損傷細(xì)胞凋亡相關(guān)基因而抑制肝損傷細(xì)胞凋亡，下調(diào)肝損傷炎癥相關(guān)因子基因的表達(dá)，減少炎癥介質(zhì)的釋放，從而減輕肝損傷。同時也發(fā)現(xiàn)，這兩類藥物對肝損傷基因具有明顯的干預(yù)作用，尤其是生物制品，研究前景廣闊。

隨著基因組學(xué)的發(fā)展，基因技術(shù)在肝損傷保護(hù)方面也展現(xiàn)了獨特的影響作用。Smad3 shRNA 表達(dá)質(zhì)?？墒筍mad3 基因沉默，使四氯化碳誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠肝組織中Smad3 mRNA 及蛋白表達(dá)水平均明顯下降，肝臟病理損傷減輕，ALT、AST、IL-1β 及 IL-6 含量減少，Macrophages 及Neutrophil 含量明顯降低，肝細(xì)胞凋亡明顯下降，這表明Smad3 shRNA 具有治療肝損傷的能力［37］。研究顯示基因敲除［38-39］可減輕肝損傷的程度，IL-17A［38］基因敲除（KO）的脂多糖肝損小鼠血漿中的ALT 和AST 水平以及炎癥因子水平明顯下降，炎癥細(xì)胞含量明顯降低，肝臟中與過氧化氫代謝有關(guān)的基因的mRNA 水平明顯上調(diào)，肝臟的氧化應(yīng)激水平下調(diào)，凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯減少，即白介素-17A 基因敲除緩解脂多糖引起肝損傷與其促過氧化氫代謝有關(guān)；CD36 基因敲除，通過抑制CD36 在刀豆蛋白所致免疫性肝損傷和對乙酰氨基酚所致藥物性肝損傷小鼠的促進(jìn)炎癥應(yīng)答作用而發(fā)揮保肝效果［39］。5’-磷酸腺苷使AST 生物活性減弱、ALT 及LDH 生物活性減弱，明顯降低肝細(xì)胞壞死的數(shù)量，降低MDA 數(shù)量，升高GSH數(shù)量；使肝臟的炎癥因子基因表達(dá)明顯下調(diào)，肝臟的ATP含量明顯增加，同時UCP2 基因和PPARa 的基因表達(dá)明顯下調(diào)，可見5’-AMP 對急性肝損傷具備保護(hù)作用［40］。

另外，值得一提的是近年來菌類抗肝損傷的研究也顯示了其確切的抗肝損傷效果。研究表明，鼠李糖乳桿菌（LGG）液對黃曲霉毒素B1（AFB1）具有顯著的降解作用，是因其能顯著改善大鼠肝功能和肝組織抗氧化指標(biāo)異常，有效避免因黃曲霉素B1 造成的肝損傷［41］。富納米硒沼澤紅假單胞菌通過使血清ALT、AST、AKP、LDH 含量以及肝組織 MDA 含量下降，SOD、CAT、谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）活性增強(qiáng)，減輕四氯化碳造成的肝損害［42］。

展望未來，隨著分子生物學(xué)、基因組學(xué)和蛋白組學(xué)的深入研究，在大數(shù)據(jù)、云計算及智能網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的支撐下，除以上化學(xué)藥品、生物制品保護(hù)肝損傷藥物外，可以預(yù)見的是將會有更多的諸如中藥、天然藥物中的抗肝損傷活性成分被發(fā)現(xiàn)并轉(zhuǎn)化為新藥產(chǎn)品［43］，服務(wù)于臨床。同時也會有更加智能化、人性化的分子生物學(xué)技術(shù)應(yīng)用于抗肝損傷的干預(yù)治療。