血清正五聚蛋白3在類風濕關(guān)節(jié)炎診斷中的價值

葛 賢，周定華，丁志祥，陳偉峰

南京中醫(yī)藥大學附屬常州市中醫(yī)醫(yī)院：1.檢驗科；2.風濕科；3.骨科，江蘇常州 213003

類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種以侵蝕性關(guān)節(jié)炎為主要表現(xiàn)的全身性自身免疫性疾病。該病以女性多發(fā)，表現(xiàn)為以雙手和腕關(guān)節(jié)等小關(guān)節(jié)受累為主的對稱性、持續(xù)性多關(guān)節(jié)炎。RA病理表現(xiàn)為關(guān)節(jié)滑膜的慢性炎癥、血管翳形成，并出現(xiàn)關(guān)節(jié)的軟骨和骨組織破壞，最終可導致關(guān)節(jié)畸形和功能喪失[1]。目前RA的診斷主要依賴于臨床癥狀和實驗室檢查綜合判斷，1987年美國風濕病學會的分類標準特異度較高，但靈敏度太低，僅為39.1%，《2018中國類風濕關(guān)節(jié)炎診療指南》[2]推薦意見第1條指出，RA的早期診斷對治療和預后影響重大，臨床醫(yī)師需結(jié)合患者的臨床表現(xiàn)、實驗室和影像學檢查進行診斷。因此，尋找新的標志物用于RA的早期診斷迫在眉睫。

正五聚蛋白3(PTX3)屬于長鏈正五聚蛋白，可由多種細胞，如巨噬細胞、樹突狀細胞、活化的內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等產(chǎn)生。PTX3作為炎性反應的參與者，可調(diào)節(jié)血管生成，參與細胞外基質(zhì)的形成，在風濕性疾病發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用[3]。文獻[4-5]研究顯示，RA患者血清PTX3水平顯著升高，有望成為RA新的診斷標志物，但這兩項研究均未探討PTX3在RA、臨床常見關(guān)節(jié)炎中的鑒別診斷價值。因此，本研究通過測定30例RA患者、30例骨關(guān)節(jié)炎(OA)患者和30例健康體檢者血清PTX3水平，初步探討血清PTX3在RA診斷及鑒別診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1-12月本院收治的RA患者30例作為觀察組，其中男7例、女23例，平均年齡(42.45±10.23)歲。所有RA患者診斷均符合美國風濕病學會或歐洲風濕病聯(lián)盟2010 RA分類標準。排除標準：(1)嚴重腦、肺、腎等臟器疾病患者；(2)腫瘤患者；(3)近期急、慢性感染患者。采用疾病活動指數(shù)(DAS28)對RA患者的疾病活動度進行評價。另選取同期30例OA患者作為疾病對照組，其中男8例、女22例，平均年齡(43.27±14.22)歲；同期30例健康體檢者作為健康對照組，其中男8例、女22例，平均年齡(42.58±11.18)歲。各組間年齡、性別等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，所有研究對象及家屬均簽署知情同意書。

1.2方法 抽取所有入選對象清晨空腹靜脈血4 mL，分離血清，-80 ℃凍存待檢。血清PTX3水平采用ELISA商品化試劑盒(蘇州躍亞生物科技有限公司)，以標準品水平為橫坐標，吸光度為縱坐標，計算出標準曲線回歸方程，將樣本的吸光度代入方程，計算樣本的PTX3水平，具體操作按試劑盒說明書進行。

2 結(jié) 果

2.13組血清PTX3水平比較 觀察組、疾病對照組、健康對照組血清PTX3水平分別為(2.20±1.06)、(1.09±0.51)、(0.88±0.40)ng/mL。3組間血清PTX3水平的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，觀察組血清PTX3水平顯著高于疾病對照組和健康對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，疾病對照組血清PTX3水平高于健康對照組，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

2.2血清PTX3診斷RA的ROC曲線分析 根據(jù)觀察組、疾病對照組和健康對照組PTX3水平繪制ROC曲線，選擇約登指數(shù)最大值處對應的PTX3水平為最佳臨界值。血清PTX3鑒別診斷RA的曲線下面積(AUC)為0.857(95%CI：0.761～0.953)，最佳臨界值為1.465 ng/mL，此時靈敏度為80.0%，特異度為80.0%。見圖1。

注：A為PTX3區(qū)分觀察組與疾病對照組的ROC曲線；B為PTX3區(qū)分觀察組與健康對照組的ROC曲線。

2.3PTX3水平與RA疾病活動度的關(guān)系 根據(jù)RA患者血清PTX3水平與DAS28繪制散點圖。RA患者血清PTX3水平與DAS28呈正相關(guān)(r=0.484，P=0.007)。見圖2。

圖2 RA患者血清PTX3水平與DAS28的相關(guān)性分析

3 討 論

PTX3可通過調(diào)節(jié)巨噬細胞的活性，參與補體的激活，抑制中性粒細胞產(chǎn)生的炎性反應并參與調(diào)節(jié)T細胞的功能，在固有免疫、炎癥、維持血管完整性及自身免疫性疾病中發(fā)揮重要作用[6]。PTX3的合成受到多種參與炎癥過程分子的刺激。炎癥介質(zhì)產(chǎn)生于炎癥部位，也可以在遠離原始炎癥損傷的部位釋放[5]。由于PTX3可由血管壁細胞產(chǎn)生和釋放，因此，PTX3有可能成為一種敏感而獨立的炎癥標志物[3]。

本研究結(jié)果顯示，觀察組血清PTX3水平顯著高于健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，與國內(nèi)外研究一致[4-5,7]，提示PTX3可能參與了RA的發(fā)病機制。有研究發(fā)現(xiàn)，PTX3可參與多種炎癥通路反應，同時也受到白細胞介素(IL)-6、腫瘤壞死因子(TNF)等多種炎癥因子的調(diào)節(jié)[8]。因此，筆者推測RA患者血清PTX3水平升高主要與RA炎癥過程中細胞活化及炎癥因子水平增高有關(guān)。近期研究發(fā)現(xiàn)，PTX3可通過促進炎癥小體的過度激活和細胞凋亡，在RA的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用[9]。同時，PTX3還可通過抑制成纖維細胞生長因子2誘導的破骨細胞形成，參與RA的骨組織破壞[10]。

目前關(guān)于PTX3診斷RA的研究缺乏疾病對照組[5]，因此本研究選取了OA患者作為疾病對照組。本研究中ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清PTX3鑒別診斷RA的AUC為0.857(95%CI：0.761～0.953)，PTX3的最佳臨界值為1.465 ng/mL，此時的靈敏度為80.0%，特異度為80.0%，提示血清PTX3可作為鑒別RA和OA的一個較好的標志物。SHARMA等[4]研究發(fā)現(xiàn)，RA患者血清和滑膜組織液中PTX3水平增高，并與C反應蛋白(CRP)水平增高一致，PTX3和CRP聯(lián)合檢測有望成為RA較好的診斷標志物，并可用于監(jiān)測RA患者的病情。

骨組織破壞是RA關(guān)節(jié)病理改變的重要特征，早期診斷并評估患者可能發(fā)生骨組織破壞的風險，及時采用合適的治療方案，有助于減輕或緩解關(guān)節(jié)炎癥，有效地控制骨組織破壞的進展。有研究表明，血漿PTX3水平與女性RA患者影像學關(guān)節(jié)損傷進展密切相關(guān)[11]。本研究結(jié)果顯示，RA患者血清PTX3水平與DAS28呈正相關(guān)，提示PTX3可作為評估RA患者疾病活動度的標志物，與相關(guān)研究結(jié)果一致[4-5]。BALBALOGLU等[12]研究發(fā)現(xiàn)，RA患者血清PTX3水平雖高于健康人，但PTX3水平與DAS28并不相關(guān)。因此，血清PTX3水平與RA疾病活動度是否具有相關(guān)性有待進一步研究。

綜上所述，PTX3水平在RA患者血清中顯著升高，可能參與了RA的發(fā)病機制，并有望成為RA的診斷標志物。但本研究樣本量較小且未進行動態(tài)觀察，今后需要進一步擴大樣本量，動態(tài)觀察RA患者治療前后PTX3的水平變化，以評價其在疾病診斷及預后中的價值。