• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3緩解瀉劑結(jié)腸及其作用機(jī)制分析

    2021-11-29 11:24:02李鑫萍王琳琳趙建新張灝陳衛(wèi)王剛
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2021年22期
    關(guān)鍵詞:瀉劑莫沙雙歧

    李鑫萍,王琳琳,趙建新,張灝,陳衛(wèi),王剛

    (江南大學(xué) 食品學(xué)院,江蘇 無(wú)錫,214122)

    瀉劑結(jié)腸是由于長(zhǎng)期應(yīng)用刺激性瀉劑,損害結(jié)腸神經(jīng)系統(tǒng),導(dǎo)致腸神經(jīng)退行性變化[1-3],出現(xiàn)胃腸動(dòng)力障礙,對(duì)瀉劑反應(yīng)性下降,使病人對(duì)瀉劑產(chǎn)生依賴性或者瀉劑成癮的一種狀況,常見(jiàn)于飽受便秘困擾的中老年人。在我國(guó),隨著生活節(jié)奏加快、膳食結(jié)構(gòu)的改變及精神壓力激增,便秘的發(fā)病率逐年上升并趨于低齡化,嚴(yán)重威脅人類的生活質(zhì)量[4]。諸如番瀉葉、大黃、蘆薈等一系列刺激性瀉藥由于見(jiàn)效快、成本低飽受便秘患者青睞,患者為緩解便秘,長(zhǎng)期使用刺激類瀉劑,隨著病程的進(jìn)展,瀉劑的服用量與瀉下效果成反比,最終失去導(dǎo)瀉作用,形成“瀉劑結(jié)腸”,嚴(yán)重者甚至可發(fā)展為結(jié)腸黑變病甚至是結(jié)腸癌。但目前消費(fèi)者對(duì)于這類瀉藥的副作用了解甚少,且國(guó)內(nèi)對(duì)于瀉劑結(jié)腸的報(bào)道較少,很少引起消費(fèi)者尤其是便秘人群的關(guān)注。因此,刺激性瀉藥仍是很多家庭出現(xiàn)便秘癥狀時(shí)的首要選擇,長(zhǎng)此以往,瀉劑結(jié)腸患者將越來(lái)越多,而目前對(duì)于瀉劑結(jié)腸的治療并無(wú)有效手段,嚴(yán)重患者需進(jìn)行結(jié)腸切除術(shù)來(lái)緩解癥狀。

    目前,益生菌作為輔助治療手段在消化系統(tǒng)乃至神經(jīng)退行性疾病方面發(fā)揮著重要作用[5-6],雙歧桿菌作為緩解便秘的有效輔助治療手段,具有良好的通便效果[7-9],且在治療神經(jīng)退行性疾病方面具有巨大的潛力。因此,益生菌在緩解瀉劑結(jié)腸患者便秘的同時(shí),有望修復(fù)瀉劑結(jié)腸患者受損的腸神經(jīng),將從根本上緩解瀉劑結(jié)腸。而目前的研究中,兩歧雙歧桿菌是緩解便秘常用的有效菌種,但其對(duì)于瀉劑結(jié)腸的具體作用還未有探究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)長(zhǎng)期服用番瀉葉提取物導(dǎo)致的瀉劑結(jié)腸小鼠模型,研究?jī)善珉p歧桿菌FGSYC45M3對(duì)瀉劑結(jié)腸的緩解作用,以期為瀉劑結(jié)腸治療補(bǔ)充有效的益生菌診療方案。

    1 材料與方法

    1.1 試劑與儀器

    番瀉葉提取物,西安旭煌生物技術(shù)有限公司;枸櫞酸莫沙必利膠囊,上海新黃河制藥有限公司;活性炭粉、免疫熒光試劑盒,生工生物工程(上海)股份有限公司;阿拉伯樹(shù)膠粉、乙酸、丙酸、丁酸,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑公司;小鼠膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)ELISA試劑盒、小鼠乙酰膽堿酯酶(acetylcholinesterase,AChE)ELISA試劑盒,上海酶聯(lián)生物科技有限公司;Anti-S100 beta抗體,Abcam(中國(guó));PCR擴(kuò)增引物以及合成序列,上海桑尼生物有限公司;反轉(zhuǎn)錄試劑盒、HiScript III RTSuperMix for qPCR試劑盒,南京諾唯贊生物科技有限公司。

    1.2 菌株培養(yǎng)活化

    本實(shí)驗(yàn)用菌兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3(Bifidobactirumbifidum)來(lái)源于江南大學(xué)生物技術(shù)中心菌種保藏庫(kù)。

    取-80 ℃冷凍保藏的菌液,用一次性接種環(huán)蘸取少量菌液在MRS固體培養(yǎng)基上劃線分離,37 ℃厭氧培養(yǎng)48 h,挑取單菌落接種于液體MRS培養(yǎng)基中,37 ℃培養(yǎng)20 h,以2%接種量傳代2次進(jìn)行活化并擴(kuò)大培養(yǎng)24 h,以轉(zhuǎn)速6 000 r/min,4 ℃下離心15 min收集菌泥,無(wú)菌生理鹽水洗滌2次后用10%脫脂乳重懸至6×109CFU/mL,分裝于保菌管-80 ℃凍存。

    1.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

    7周齡的SPF級(jí)雄性C57BL/6 J小鼠24只,購(gòu)于江蘇集萃藥康生物科技股份有限公司,動(dòng)物倫理審查編號(hào):JN.No20190330c0780620。飼養(yǎng)環(huán)境溫度(23±2)℃,相對(duì)濕度(50±10)%,12 h光照12 h黑夜更替。小鼠隨機(jī)分為4組:對(duì)照組、模型組、藥物對(duì)照莫沙必利組(莫沙必利組)和兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3組(FGSYC45M3),每組6只。適應(yīng)飼養(yǎng)1周 后開(kāi)始灌胃,前12周空白組每天灌胃0.2 mL無(wú)菌水,其他組灌胃0.2 mL番瀉葉提取物(9 g/L), 每天濃度加倍,直至50%小鼠出現(xiàn)腹瀉癥狀后保持劑量灌胃,至80%小鼠恢復(fù)正常后繼續(xù)加倍灌胃,至50%小鼠腹瀉,持續(xù)以上3個(gè)循環(huán),并停藥1周,造模結(jié)束(該過(guò)程時(shí)間為13周)。14周開(kāi)始進(jìn)行為期3周的治療,空白組與模型組每天灌胃0.2 mL脫脂乳(100 g/L),藥物對(duì)照莫沙必利組灌胃0.2 mL脫脂乳重懸的莫沙必利懸液(200 g/L),兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3組灌胃0.2 mL脫脂乳(100 g/L)重懸的菌液(6×109CFU/mL)。

    1.4 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定

    1.4.1 瀉劑結(jié)腸小鼠腸道轉(zhuǎn)運(yùn)功能相關(guān)指標(biāo)測(cè)定

    治療結(jié)束后第2天,每只小鼠灌胃0.2 mL墨汁,記錄從灌胃開(kāi)始至排出首粒黑便時(shí)間。

    墨汁按照文獻(xiàn)[10]的方法配制:將100g阿拉伯膠與800 mL水混合均勻,加熱煮沸至溶液透明,再加入活性炭50 g,煮沸3次。待溶液冷卻后,用水稀釋定容至1 000 mL,4 ℃保存。

    將每只小鼠放入墊有吸水紙的籠盒中收集糞便,稱重后凍干,按照公式(1)計(jì)算糞便含水量:

    又聽(tīng)到了吸鼻子和咳嗽的聲音,離他不到二十尺遠(yuǎn)的兩塊巖石之間,他隱約看到一只灰狼的頭。那雙尖耳朵并不像別的狼那樣豎得筆挺;它的眼睛昏暗無(wú)光,布滿血絲;腦袋好像無(wú)力地、苦惱地耷拉著。這個(gè)畜生不斷地在太陽(yáng)光里霎眼。正當(dāng)他瞧著它的時(shí)候,它又發(fā)出了吸鼻子和咳嗽的聲音。

    (1)

    小鼠處死采集組織前,每只小鼠灌胃0.2 mL墨汁,30 min后處死小鼠,打開(kāi)腹腔,剪取胃至盲腸腸段,測(cè)量幽門至盲腸上端為 “小腸總長(zhǎng)度”,幽門至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)距離”,按照公式(2)計(jì)算小腸推進(jìn)率:

    (2)

    1.4.2 小鼠結(jié)腸組織S100 beta免疫熒光染色

    小鼠石蠟切片的制作參照文獻(xiàn)[11]的方法,按照免疫熒光試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行S100 beta熒光染色,評(píng)價(jià)結(jié)腸組織中神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量。使用Pannoramic MIDI 數(shù)字切片掃描儀掃描切片拍照,每個(gè)樣品使用軟件Caseview放大40倍隨機(jī)截取6個(gè)視野,使用軟件ImageJ統(tǒng)計(jì)樣品的陽(yáng)性表達(dá)面積。

    1.4.3 小鼠結(jié)腸組織GDNF,AChE水平測(cè)定

    用預(yù)冷的磷酸緩沖鹽溶液沖洗結(jié)腸組織,去除附著的糞便以及殘留血液,剔除周圍脂肪組織,稱重后剪碎,將剪碎的組織按照質(zhì)量比1∶9在組織破碎儀上進(jìn)行破碎,以轉(zhuǎn)速6 000 r/min離心5 min,取上清液,按照說(shuō)明書(shū)提供的方法進(jìn)行測(cè)定,通過(guò)軟件Graphpad分析結(jié)果。

    1.4.4 小鼠結(jié)腸組織c-kit、AQP4、AQP8基因轉(zhuǎn)錄水平測(cè)定

    采用qRT-PCR法測(cè)定小鼠結(jié)腸組織中相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平。取小鼠結(jié)腸組織,按照說(shuō)明書(shū)提供的Trizol法提取結(jié)腸總RNA,按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說(shuō)明書(shū)將小鼠結(jié)腸總RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。通過(guò)PrimerBank查找小鼠c-kit、AQP4、AQP8和GAPDH基因的引物序列,由上海桑尼生物科技有限公司合成引物,引物序列如表1所示。

    表1 基因引物序列

    以cDNA為模板,GAPDH基因?yàn)閮?nèi)參,按照iScript III RTSuperMix for qPCR試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行qRT-PCR實(shí)驗(yàn),通過(guò)CFX96Manager軟件分析結(jié)果,Graphpad作圖分析。

    1.4.5 小鼠糞便中短鏈脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)的測(cè)定

    收集到的小鼠糞便凍干后參照文獻(xiàn)[12]的方法進(jìn)行浸泡、酸化,用無(wú)水乙醚萃取后使用GC-MS測(cè)定糞便中的SCFAs含量。使用軟件Xcalibur分析結(jié)果。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3提高瀉劑結(jié)腸小鼠結(jié)腸轉(zhuǎn)運(yùn)能力并提高糞便含水量

    瀉劑結(jié)腸是由于患者長(zhǎng)期服用刺激性瀉藥導(dǎo)致的腸神經(jīng)系統(tǒng)受損,結(jié)腸傳輸障礙,臨床表現(xiàn)為頑固型便秘[1]。因此我們結(jié)合首粒黑便時(shí)間和小腸推進(jìn)率來(lái)反應(yīng)腸道轉(zhuǎn)運(yùn)能力,并輔以糞便含水量表征小鼠造模情況,并評(píng)價(jià)兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3的緩解效果。

    小鼠首粒黑便時(shí)間反映的是整個(gè)消化道的轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間,而小腸推進(jìn)率反應(yīng)的是小腸的轉(zhuǎn)運(yùn)能力。由圖1可知,造模后小鼠小腸推進(jìn)率無(wú)明顯差異,而首粒黑便時(shí)間顯著延長(zhǎng),即全腸道轉(zhuǎn)運(yùn)能力明顯下降,可知模型組小鼠存在明顯的結(jié)腸轉(zhuǎn)運(yùn)障礙,且糞便含水量明顯下降,小鼠造模成功。灌胃FGSYC45M3進(jìn)行治療后,小鼠首粒黑便時(shí)間顯著縮短,糞便含水量提高,且無(wú)論從首粒黑便時(shí)間還是糞便含水量,兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3的效果均優(yōu)于藥物對(duì)照莫沙必利,說(shuō)明FGSYC45M3治療可以顯著提高瀉劑結(jié)腸小鼠的結(jié)腸轉(zhuǎn)運(yùn)能力,提高糞便含水量,緩解瀉劑結(jié)腸。

    a-首粒黑便時(shí)間;b-小腸推進(jìn)率;c-糞便含水量

    2.2 兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3對(duì)腸神經(jīng)系統(tǒng)的影響

    瀉劑結(jié)腸與普通便秘的區(qū)別在于患者具有長(zhǎng)期服用瀉劑史或使用瀉劑成癮,導(dǎo)致腸神經(jīng)損傷。有研究發(fā)現(xiàn),瀉劑結(jié)腸存在明顯的腸神經(jīng)系統(tǒng)損傷,包括腸神經(jīng)元變性以及慢波起搏消失[1,13]。腸神經(jīng)系統(tǒng)主要由腸神經(jīng)元和腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞組成。其中神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量是腸神經(jīng)元的4倍。這些膠質(zhì)細(xì)胞包繞在神經(jīng)元之外,為神經(jīng)元提供營(yíng)養(yǎng)和保護(hù),并調(diào)節(jié)神經(jīng)信號(hào)傳遞和腸道穩(wěn)態(tài)[14]。S100 beta是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的特征性表達(dá)蛋白[15],可通過(guò)免疫熒光測(cè)定小鼠結(jié)腸中特征蛋白S100 beta的表達(dá)來(lái)評(píng)價(jià)瀉劑結(jié)腸小鼠結(jié)腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量。由圖2可知,番瀉葉提取物的長(zhǎng)期作用導(dǎo)致瀉劑結(jié)腸小鼠結(jié)腸組織中膠質(zhì)細(xì)胞減少,說(shuō)明長(zhǎng)期的番瀉葉刺激大腸致神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞凋亡,無(wú)法支持神經(jīng)系統(tǒng)正常功能從而影響腸道轉(zhuǎn)運(yùn),兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3可恢復(fù)瀉劑結(jié)腸小鼠結(jié)腸中膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量,而藥物對(duì)照莫沙必利雖有恢復(fù)膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量的趨勢(shì),但差異并不顯著。研究發(fā)現(xiàn),微生物群可以驅(qū)動(dòng)腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的更新,對(duì)于維持生理?xiàng)l件下的胃腸道功能至關(guān)重要[14],而莫沙必利是通過(guò)5-HT4受體作用緩解瀉劑結(jié)腸[2],或許對(duì)于神經(jīng)數(shù)量的影響并不直接,推測(cè)兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3或其代謝產(chǎn)物能夠刺激膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞的分化,重建腸神經(jīng)膠質(zhì)網(wǎng)絡(luò),從而緩解瀉劑結(jié)腸。

    GDNF在體內(nèi)廣泛分布,大量文獻(xiàn)證明,GDNF具有神經(jīng)支持和保護(hù)作用,并能促進(jìn)神經(jīng)元修復(fù)與再生,可以保護(hù)和修復(fù)多巴胺能神經(jīng)元,有研究發(fā)現(xiàn),GDNF處理可以增加腸道神經(jīng)元數(shù)量并為神經(jīng)元提供營(yíng)養(yǎng)支持,提高腸道運(yùn)動(dòng)能力[16-17]。本研究中,瀉劑結(jié)腸小鼠結(jié)腸中GDNF含量明顯減少(圖3),結(jié)合圖2結(jié)果,我們認(rèn)為長(zhǎng)期的瀉藥刺激導(dǎo)致膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量減少,GDNF分泌量減少導(dǎo)致神經(jīng)受損。兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3處理可顯著提高瀉劑結(jié)腸小鼠結(jié)腸中GDNF的含量,且作用效果與藥物莫沙必利一致,考慮藥物莫沙必利可以刺激產(chǎn)生GDNF,而兩歧雙歧桿菌能夠增加結(jié)腸膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量,通過(guò)膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)的Toll樣受體和G蛋白偶聯(lián)受體識(shí)別腸道菌群及其產(chǎn)物提高GDNF分泌量,從而修復(fù)受損神經(jīng),加快神經(jīng)組織更新,恢復(fù)正常的腸神經(jīng)功能,從而緩解瀉劑結(jié)腸。

    a-各組小鼠結(jié)腸免疫熒光染色;b-小鼠結(jié)腸免疫熒光陽(yáng)性表達(dá)面積

    圖3 小鼠結(jié)腸中GDNF含量

    AChE是由黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元分泌的一種神經(jīng)傳導(dǎo)關(guān)鍵酶,參與神經(jīng)信號(hào)在生物體內(nèi)的正常傳遞,其在神經(jīng)突觸中降解神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿已得到充分的研究[18],也有研究發(fā)現(xiàn),AChE在腸道發(fā)育中起關(guān)鍵作用,能促進(jìn)神經(jīng)元發(fā)育和神經(jīng)再生。PICKETT等[19]發(fā)現(xiàn)阻斷AChE具有神經(jīng)毒性,敲低AChE的表達(dá)導(dǎo)致非洲爪蟾和斑馬魚(yú)腸道發(fā)育異常,說(shuō)明AChE的功能是腸道發(fā)育所必須的。SPERLING等[20]的研究發(fā)現(xiàn)AChE可以通過(guò)與層黏連蛋白結(jié)合促進(jìn)神經(jīng)突生長(zhǎng)。在本研究中,瀉劑結(jié)腸小鼠結(jié)腸中AChE含量顯著減少(圖4),提示黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元分泌不足,膽堿能神經(jīng)元信號(hào)傳遞異常,影響神經(jīng)發(fā)育,兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3處理恢復(fù)了AChE含量,這與前人的研究結(jié)果是一致的[21],且對(duì)于AChE的提高效果優(yōu)于對(duì)照藥物莫沙必利,推測(cè)FGSYC45M3或其代謝物參與某種途徑影響了AChE的分泌,促進(jìn)神經(jīng)發(fā)育和再生,從而緩解瀉劑結(jié)腸。

    圖4 小鼠結(jié)腸中AChE含量

    Cajal間質(zhì)細(xì)胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是胃腸道運(yùn)動(dòng)的起搏細(xì)胞,提供促進(jìn)腸道蠕動(dòng)的慢波,而慢波是腸平滑肌蠕動(dòng)的限速步驟,調(diào)控腸道動(dòng)力,因此,對(duì)于ICC的研究仍作為評(píng)價(jià)腸道轉(zhuǎn)運(yùn)功能的熱點(diǎn)[22]。c-kit受體是ICC特有的表面識(shí)別受體,通過(guò)對(duì)c-kit基因表達(dá)定量,可以反應(yīng)腸道中ICC的數(shù)量。張燕等[1]的研究發(fā)現(xiàn),長(zhǎng)期使用瀉劑嚴(yán)重影響ICC的形態(tài)數(shù)量和功能,進(jìn)而影響腸道傳輸功能。這與我們的結(jié)論是一致的,由圖5可知,瀉劑結(jié)腸小鼠c-kit轉(zhuǎn)錄水平明顯降低,說(shuō)明長(zhǎng)期的番瀉葉刺激導(dǎo)致ICC細(xì)胞數(shù)量減少,影響腸道慢波傳遞,使腸道失去動(dòng)力,且結(jié)合上文的神經(jīng)相關(guān)指標(biāo),瀉劑結(jié)腸小鼠神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)存在異常,更加重了腸道轉(zhuǎn)運(yùn)受阻。藥物莫沙必利雖有恢復(fù)趨勢(shì)但效果并不顯著,而灌胃FGSYC45M3可以恢復(fù)ICC數(shù)量,改善腸道轉(zhuǎn)運(yùn)功能,但是具體的作用途徑還有待探究。

    圖5 小鼠結(jié)腸c-kit基因表達(dá)量

    2.3 兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3對(duì)瀉劑結(jié)腸小鼠水份吸收的影響

    水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是胃腸道中水分跨細(xì)胞運(yùn)輸?shù)闹饕緩剑瑓⑴c腸道水液平衡。有研究發(fā)現(xiàn),AQP4基因敲除小鼠的糞便含水量增加,而AQPs在便秘患者中高表達(dá),使便秘患者糞便脫水干結(jié),不易排出[23]。有學(xué)者認(rèn)為,番瀉苷短期刺激會(huì)下調(diào)結(jié)腸中AQPs的表達(dá)導(dǎo)致腹瀉,而長(zhǎng)期刺激會(huì)使AQPs表達(dá)增加[24],這可能是便秘患者對(duì)于番瀉葉逐漸耐受的原因之一。由圖6可知,瀉劑結(jié)腸小鼠AQP4和AQP8基因轉(zhuǎn)錄水平均高于對(duì)照組,腸道吸水能力變強(qiáng),使其糞便含水量對(duì)應(yīng)變低,這也與圖1我們得到的結(jié)果一致,兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3處理能夠降低瀉劑結(jié)腸小鼠中AQP4和AQP8的表達(dá)量,雖然對(duì)于AQP8的效果不及藥物莫沙必利,但是對(duì)于AQP4的作用可以達(dá)到莫沙必利的效果,且整體對(duì)于AQP4和AQP8的降低均具有顯著差異,說(shuō)明對(duì)于水分吸收方面,兩歧雙歧FGSYC45M3和莫沙必利一樣可以減少結(jié)腸水分吸收,提高糞便含水量,刺激結(jié)腸蠕動(dòng),使糞便更易排除,從而緩解瀉劑結(jié)腸患者的便秘癥狀。

    a- AQP4;b- AQP8

    2.4 兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3對(duì)糞便中SCFAs含量的影響

    SCFAs是由腸道微生物組發(fā)酵中產(chǎn)生的,參與調(diào)節(jié)腸道屏障和免疫功能。有研究發(fā)現(xiàn),糞便中乙酸、丙酸和丁酸的量與腸道轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間顯著相關(guān),且SCFAs的水平變化是由于腸道菌群變化引起的[25-26]。

    SCFAs中尤其丁酸是結(jié)腸細(xì)胞首選的能量底物,且丁酸可以恢復(fù)GDNF的量,顯著增加膽堿能神經(jīng)元的比例,增加結(jié)腸環(huán)形肌的收縮反應(yīng)[25-26]。在本研究中,瀉劑結(jié)腸小鼠糞便中SCFAs尤其是丁酸的水平下調(diào),或許是瀉劑結(jié)腸腸道動(dòng)力失調(diào)的原因之一。灌胃FGSYC45M3 可以顯著提高糞便中SCFAs的水平(圖7),且效果明顯優(yōu)于藥物莫沙必利。結(jié)合以上結(jié)果,考慮是FGSYC45M3的定植改變了腸道環(huán)境,使腸道菌群產(chǎn)SCFAs增多,從而提高腸道轉(zhuǎn)能力,緩解瀉劑結(jié)腸。

    a-糞便中乙酸含量;b-糞便中丙酸含量;c-糞便中丁酸含量;d-糞便中總酸(乙酸+丙酸+丁酸)含量

    3 結(jié)論

    本研究使用的兩歧雙歧桿菌FGSYC45M3能夠有效增加瀉劑結(jié)腸小鼠腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和ICC細(xì)胞數(shù)量,提高GDNF分泌量,重建受損的腸神經(jīng);增加糞便中SCFAs的含量,增強(qiáng)腸道轉(zhuǎn)運(yùn)功能;降低瀉劑結(jié)腸小鼠AQP4和AQP8基因的表達(dá),提高糞便含水量,且讓人驚喜的是,該菌的綜合作用效果優(yōu)于藥物莫沙必利,能在緩解瀉劑結(jié)腸便秘的基礎(chǔ)上,重建腸神經(jīng)功能?;诒狙芯拷Y(jié)果,兩歧雙歧FGSYC45M3可以更好的應(yīng)用于臨床,治療由于長(zhǎng)期服用番瀉葉導(dǎo)致的瀉劑結(jié)腸。

    猜你喜歡
    瀉劑莫沙雙歧
    長(zhǎng)期便秘怎么辦
    治便秘,用藥不當(dāng)毀腸子
    藏藥六味能消散配大黃緩瀉劑治療膽囊炎106例
    觀察雷貝拉唑、莫沙必利和鋁鎂加聯(lián)合治療反流性食管炎的臨床療效
    莫沙必利聯(lián)合埃索美拉唑?qū)Ψ戳餍允彻苎椎寞熜в^察
    “瀉劑結(jié)腸”的研究進(jìn)展
    鋁碳酸鎂片聯(lián)合埃索美拉唑、莫沙必利治療胃食管反流病63例
    雙歧桿菌三聯(lián)活菌聯(lián)合多潘立酮治療新生兒喂養(yǎng)不耐受40例
    針灸聯(lián)合莫沙必利分散片治療化療引起的上腹部脹滿52例
    產(chǎn)細(xì)菌素雙歧桿菌的篩選及其分泌條件研究
    美女高潮喷水抽搐中文字幕| 亚洲国产精品合色在线| 日韩有码中文字幕| 久久久国产成人免费| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产成人av激情在线播放| 国产伦在线观看视频一区| 国产熟女xx| 一个人看视频在线观看www免费 | 麻豆国产97在线/欧美| av国产免费在线观看| 国产精品av视频在线免费观看| 精华霜和精华液先用哪个| 此物有八面人人有两片| 伊人久久精品亚洲午夜| 高清毛片免费观看视频网站| 99热只有精品国产| 欧美bdsm另类| 草草在线视频免费看| 有码 亚洲区| 一区二区三区免费毛片| 高清毛片免费观看视频网站| 母亲3免费完整高清在线观看| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产欧美日韩精品一区二区| 午夜视频国产福利| 国产探花极品一区二区| av天堂中文字幕网| 久久香蕉精品热| ponron亚洲| 欧美av亚洲av综合av国产av| 91麻豆精品激情在线观看国产| a级毛片a级免费在线| 18禁在线播放成人免费| 男人的好看免费观看在线视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 黄色片一级片一级黄色片| 欧美国产日韩亚洲一区| 真实男女啪啪啪动态图| 一级毛片女人18水好多| 亚洲第一电影网av| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产精品永久免费网站| 国产精品野战在线观看| 国产探花极品一区二区| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲精品亚洲一区二区| 欧美bdsm另类| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 日韩高清综合在线| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产综合懂色| xxx96com| 在线国产一区二区在线| 中文资源天堂在线| 国产精品99久久99久久久不卡| 午夜两性在线视频| 午夜影院日韩av| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 麻豆国产97在线/欧美| 免费观看人在逋| a在线观看视频网站| x7x7x7水蜜桃| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲中文日韩欧美视频| 婷婷精品国产亚洲av| 久久人人精品亚洲av| 99国产综合亚洲精品| 国产97色在线日韩免费| 成年版毛片免费区| 长腿黑丝高跟| 国产精品亚洲av一区麻豆| 99国产精品一区二区三区| 国产成人系列免费观看| 嫩草影院入口| 国产精品电影一区二区三区| 久久人人精品亚洲av| 51午夜福利影视在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 少妇熟女aⅴ在线视频| 欧美bdsm另类| 久久性视频一级片| 少妇的逼水好多| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产精品一及| 麻豆成人av在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 极品教师在线免费播放| 99久久精品热视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美乱妇无乱码| 色尼玛亚洲综合影院| 激情在线观看视频在线高清| 大型黄色视频在线免费观看| 在线视频色国产色| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 亚洲成人精品中文字幕电影| 深夜精品福利| 狠狠狠狠99中文字幕| 麻豆成人午夜福利视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 18美女黄网站色大片免费观看| 99久久精品国产亚洲精品| 久久久精品大字幕| 亚洲av五月六月丁香网| av天堂在线播放| 哪里可以看免费的av片| 69av精品久久久久久| 美女 人体艺术 gogo| 欧美日韩一级在线毛片| 国产成人欧美在线观看| 亚洲在线观看片| 亚洲最大成人中文| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 在线观看66精品国产| 亚洲一区二区三区不卡视频| av天堂中文字幕网| 精品久久久久久,| 九色成人免费人妻av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| av片东京热男人的天堂| 国产av麻豆久久久久久久| 1000部很黄的大片| 99久国产av精品| 老司机在亚洲福利影院| 天堂动漫精品| 女警被强在线播放| 国产探花极品一区二区| 欧美黑人欧美精品刺激| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产乱人伦免费视频| 亚洲av美国av| 国产精品亚洲av一区麻豆| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲,欧美精品.| bbb黄色大片| 国产亚洲精品一区二区www| 久久人人精品亚洲av| 夜夜爽天天搞| 一区二区三区国产精品乱码| 黄色女人牲交| 日韩有码中文字幕| 亚洲av五月六月丁香网| 久久久久久大精品| 午夜久久久久精精品| 1000部很黄的大片| 免费人成视频x8x8入口观看| 一级毛片高清免费大全| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 男人和女人高潮做爰伦理| netflix在线观看网站| 国产真人三级小视频在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产高清激情床上av| 给我免费播放毛片高清在线观看| 99国产精品一区二区三区| 一进一出好大好爽视频| 欧美丝袜亚洲另类 | 国产激情偷乱视频一区二区| 男女下面进入的视频免费午夜| 给我免费播放毛片高清在线观看| 99国产精品一区二区三区| 国产欧美日韩一区二区三| av女优亚洲男人天堂| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产高清激情床上av| 麻豆成人午夜福利视频| 国语自产精品视频在线第100页| 国产高清视频在线观看网站| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产视频一区二区在线看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 久久久国产成人精品二区| 又紧又爽又黄一区二区| 18禁在线播放成人免费| 免费观看精品视频网站| 99久久精品热视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 1000部很黄的大片| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 日日夜夜操网爽| 欧美在线黄色| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 国产精品,欧美在线| bbb黄色大片| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 一个人免费在线观看的高清视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产精品女同一区二区软件 | 精品午夜福利视频在线观看一区| 欧美一区二区精品小视频在线| 搡老妇女老女人老熟妇| 一级毛片高清免费大全| 美女黄网站色视频| 精品日产1卡2卡| 国产午夜福利久久久久久| 香蕉丝袜av| 中文在线观看免费www的网站| 亚洲 国产 在线| 欧美在线一区亚洲| 亚洲国产欧美网| 久久99热这里只有精品18| 国产美女午夜福利| 欧美三级亚洲精品| 日韩av在线大香蕉| 午夜视频国产福利| 五月玫瑰六月丁香| 婷婷丁香在线五月| 91久久精品电影网| 午夜老司机福利剧场| 亚洲国产欧美网| 国产精品一及| 亚洲av不卡在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产高清有码在线观看视频| 成人精品一区二区免费| 亚洲,欧美精品.| 首页视频小说图片口味搜索| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 亚洲国产精品成人综合色| 午夜精品一区二区三区免费看| 亚洲美女黄片视频| 亚洲av第一区精品v没综合| 无人区码免费观看不卡| 黑人欧美特级aaaaaa片| 内射极品少妇av片p| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲av美国av| 久久久国产成人免费| a级一级毛片免费在线观看| ponron亚洲| 90打野战视频偷拍视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产精品99久久久久久久久| 少妇人妻一区二区三区视频| 性色av乱码一区二区三区2| 在线看三级毛片| 国产精品99久久久久久久久| 久久精品国产自在天天线| 老鸭窝网址在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 色综合亚洲欧美另类图片| 午夜激情福利司机影院| 日本黄大片高清| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 真人做人爱边吃奶动态| 亚洲av免费在线观看| 午夜福利成人在线免费观看| 国产av在哪里看| 国产亚洲精品久久久com| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 亚洲无线在线观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 搡老岳熟女国产| 在线观看免费午夜福利视频| 国产极品精品免费视频能看的| 岛国在线免费视频观看| 国产成+人综合+亚洲专区| 天堂动漫精品| 男女那种视频在线观看| 久久精品国产清高在天天线| 久久草成人影院| 欧美一区二区精品小视频在线| 成人无遮挡网站| 一本综合久久免费| 成年女人永久免费观看视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 香蕉av资源在线| 最新在线观看一区二区三区| 久久久久久九九精品二区国产| 色播亚洲综合网| 国产亚洲精品一区二区www| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 午夜影院日韩av| 在线观看日韩欧美| 身体一侧抽搐| 国产亚洲精品久久久com| 老司机在亚洲福利影院| 99国产精品一区二区蜜桃av| 天天一区二区日本电影三级| 俄罗斯特黄特色一大片| 免费av观看视频| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 黄色丝袜av网址大全| 美女大奶头视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 欧美激情在线99| 在线播放无遮挡| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国内精品久久久久精免费| www.色视频.com| 婷婷丁香在线五月| 精华霜和精华液先用哪个| 国产中年淑女户外野战色| 999久久久精品免费观看国产| 中亚洲国语对白在线视频| 欧美乱色亚洲激情| 九九热线精品视视频播放| 日韩大尺度精品在线看网址| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 国产色爽女视频免费观看| 一区福利在线观看| 欧美成人免费av一区二区三区| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产欧美日韩一区二区精品| 999久久久精品免费观看国产| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 日本熟妇午夜| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲午夜理论影院| 精品久久久久久久毛片微露脸| 怎么达到女性高潮| 国产国拍精品亚洲av在线观看 | 草草在线视频免费看| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 日本五十路高清| 黄色片一级片一级黄色片| 悠悠久久av| 欧美乱妇无乱码| 在线天堂最新版资源| 一个人观看的视频www高清免费观看| 伊人久久精品亚洲午夜| 岛国在线免费视频观看| 欧美不卡视频在线免费观看| 天天躁日日操中文字幕| 国产黄片美女视频| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲av二区三区四区| 久久久久久久精品吃奶| 亚洲国产精品合色在线| 成人午夜高清在线视频| 手机成人av网站| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 欧美一区二区亚洲| 国产精品亚洲美女久久久| 听说在线观看完整版免费高清| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 亚洲18禁久久av| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 午夜视频国产福利| or卡值多少钱| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲av一区综合| 看黄色毛片网站| 麻豆国产97在线/欧美| 精品国内亚洲2022精品成人| 长腿黑丝高跟| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产精品三级大全| 色综合婷婷激情| 国产精品爽爽va在线观看网站| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲国产欧美人成| 少妇的逼水好多| 午夜福利免费观看在线| 久久久久免费精品人妻一区二区| 一个人免费在线观看电影| 国产成+人综合+亚洲专区| 免费看美女性在线毛片视频| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久久久久久精品吃奶| 激情在线观看视频在线高清| 中亚洲国语对白在线视频| 免费av不卡在线播放| 久久精品91无色码中文字幕| 在线天堂最新版资源| 一本久久中文字幕| 日韩中文字幕欧美一区二区| 久9热在线精品视频| 两个人的视频大全免费| 美女 人体艺术 gogo| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 欧美3d第一页| 午夜福利欧美成人| 国产av一区在线观看免费| 高清日韩中文字幕在线| 欧美一级a爱片免费观看看| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 免费观看精品视频网站| 综合色av麻豆| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 免费人成视频x8x8入口观看| 在线天堂最新版资源| 青草久久国产| 国产高清视频在线播放一区| 在线看三级毛片| 久久人人精品亚洲av| 狂野欧美激情性xxxx| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 成人亚洲精品av一区二区| 日本 av在线| 精品久久久久久久久久久久久| 高清日韩中文字幕在线| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产精品日韩av在线免费观看| 中文字幕av在线有码专区| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 又黄又粗又硬又大视频| 嫩草影院入口| 国产极品精品免费视频能看的| 久9热在线精品视频| 麻豆成人av在线观看| 观看美女的网站| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产三级中文精品| 国产精品久久视频播放| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲av成人av| 高清在线国产一区| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 美女 人体艺术 gogo| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美在线一区亚洲| 中文资源天堂在线| 国产三级黄色录像| 制服人妻中文乱码| 精华霜和精华液先用哪个| x7x7x7水蜜桃| 国产高潮美女av| 国产精华一区二区三区| 99久久九九国产精品国产免费| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 男女床上黄色一级片免费看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 日韩欧美在线二视频| 午夜福利欧美成人| 真实男女啪啪啪动态图| 久久久国产精品麻豆| 欧美乱色亚洲激情| 国模一区二区三区四区视频| 三级国产精品欧美在线观看| 欧美色欧美亚洲另类二区| 亚洲精品成人久久久久久| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 美女黄网站色视频| 人人妻人人看人人澡| 免费大片18禁| 久久国产精品影院| 欧美日韩福利视频一区二区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 午夜免费观看网址| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 全区人妻精品视频| 国产成人aa在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲avbb在线观看| 日韩欧美三级三区| 色综合欧美亚洲国产小说| 少妇人妻一区二区三区视频| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 在线观看午夜福利视频| 成人av一区二区三区在线看| 国产成人欧美在线观看| 宅男免费午夜| 亚洲国产欧美网| 欧美激情在线99| 亚洲电影在线观看av| 三级毛片av免费| 日韩成人在线观看一区二区三区| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美 | 少妇熟女aⅴ在线视频| www.www免费av| 午夜福利高清视频| 国产单亲对白刺激| 18禁国产床啪视频网站| 18+在线观看网站| 欧美在线一区亚洲| 国产免费一级a男人的天堂| 国内精品久久久久久久电影| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 久久久精品欧美日韩精品| 99久久九九国产精品国产免费| 国产亚洲精品久久久com| 久久久久亚洲av毛片大全| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 久久久成人免费电影| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清| av福利片在线观看| 熟女人妻精品中文字幕| 国产真人三级小视频在线观看| 最新美女视频免费是黄的| 淫秽高清视频在线观看| 波野结衣二区三区在线 | 在线a可以看的网站| 日韩有码中文字幕| 色噜噜av男人的天堂激情| 亚洲在线观看片| 超碰av人人做人人爽久久 | 一夜夜www| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 老司机午夜十八禁免费视频| 热99在线观看视频| 麻豆一二三区av精品| 最近最新中文字幕大全免费视频| 日本黄大片高清| 又爽又黄无遮挡网站| 国产精品一及| 搡老熟女国产l中国老女人| 一边摸一边抽搐一进一小说| 成人国产一区最新在线观看| 日本在线视频免费播放| 国产精品日韩av在线免费观看| 熟女人妻精品中文字幕| 成人av一区二区三区在线看| 精品熟女少妇八av免费久了| 日韩欧美国产一区二区入口| 亚洲人成伊人成综合网2020| 午夜影院日韩av| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 全区人妻精品视频| 国产精品一及| 热99re8久久精品国产| 国产男靠女视频免费网站| 1024手机看黄色片| 国产免费一级a男人的天堂| 午夜激情福利司机影院| 在线a可以看的网站| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产精品1区2区在线观看.| 欧美在线一区亚洲| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 黄片大片在线免费观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 精品欧美国产一区二区三| 久久久久久人人人人人| 久久久色成人| 麻豆久久精品国产亚洲av| tocl精华| 日韩人妻高清精品专区| 国产麻豆成人av免费视频| 好男人电影高清在线观看| 女警被强在线播放| 91字幕亚洲| 久久久国产成人精品二区| 亚洲真实伦在线观看| 亚洲欧美精品综合久久99| 99久久精品热视频| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 国产精品亚洲av一区麻豆| 日本 av在线| 日韩欧美在线二视频| 精品国产美女av久久久久小说| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 99精品欧美一区二区三区四区| 日日夜夜操网爽| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 亚洲七黄色美女视频| 欧美日韩精品网址| 在线观看午夜福利视频| 女同久久另类99精品国产91| 毛片女人毛片| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产成人aa在线观看| 午夜免费成人在线视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲精品日韩av片在线观看 | 亚洲av五月六月丁香网| 久久久久国内视频| 两个人的视频大全免费| 美女 人体艺术 gogo| 美女大奶头视频| 高清在线国产一区| 天堂动漫精品| netflix在线观看网站| 亚洲av熟女| 小说图片视频综合网站| www.www免费av| 91久久精品电影网| 最新在线观看一区二区三区| 热99在线观看视频| 国产成人av激情在线播放| 丰满乱子伦码专区| 日本熟妇午夜| 俺也久久电影网| 欧美一区二区精品小视频在线| 国产69精品久久久久777片| 久久亚洲精品不卡| 99热这里只有是精品50| 国产精品精品国产色婷婷| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 久久香蕉国产精品| 91九色精品人成在线观看| av视频在线观看入口| 婷婷精品国产亚洲av| 真人一进一出gif抽搐免费| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产v大片淫在线免费观看| 精品国产美女av久久久久小说| 99精品在免费线老司机午夜| 国产精品女同一区二区软件 | 亚洲成a人片在线一区二区| 日本 av在线| 免费观看精品视频网站| 偷拍熟女少妇极品色| 在线a可以看的网站| 亚洲人成电影免费在线| 在线视频色国产色| 欧美大码av| 精品久久久久久久毛片微露脸|