TCT+HPV+SCC-Ag聯(lián)合檢測在宮頸癌早期篩查中的應(yīng)用價(jià)值

黃 麗

湖北省監(jiān)利市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，湖北監(jiān)利 433300

在婦科惡性腫瘤中，宮頸癌發(fā)病率僅次于乳腺癌[1]。目前，宮頸癌確診仍依靠病理活檢，早期篩查則主要以液基薄層細(xì)胞學(xué)（thin-cytologic test，TCT）為主，但TCT 結(jié)果受操作者主觀因素影響，造成過度診斷或低估宮頸上皮病變結(jié)果[2]。人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染被認(rèn)為是宮頸癌的重要誘因，HPV 感染將顯著增加宮頸癌變機(jī)率，因而HPV 檢測已被指南推薦為宮頸癌早期篩查工具[3]。另外，鱗狀細(xì)胞癌抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCAg）是臨床常用的宮頸癌特異性腫瘤標(biāo)記物，既往多用于臨床分期、 盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移診斷及療效評估[4]。血清SCC-Ag 能定量分析宮頸癌風(fēng)險(xiǎn)，且克服TCT受主觀因素影響的不足。推測TCT、HPV 及SCC-Ag聯(lián)合檢測可能達(dá)到互補(bǔ)效果，提高宮頸癌早期篩查的準(zhǔn)確性。基于此，本研究聯(lián)合檢測TCT、HPV 及SCC-Ag 水平，探討三者聯(lián)合檢測在宮頸癌早期篩查中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年5月至2020年5月湖北省監(jiān)利市第五人民醫(yī)院收治的114 例接受TCT、HPV 及SCC-Ag檢測的患者作為研究對象。根據(jù)宮頸病理檢測結(jié)果分為宮頸癌組（38 例）、宮頸良性腫瘤組（38 例）及健康對照組（38 例）。宮頸癌組中，年齡（48.22±10.07）歲，體重指數(shù)（20.97±1.86）kg/m2。宮頸良性腫瘤組中，年齡（47.75±9.54）歲；體重指數(shù)（21.04±2.11）kg/m2。健康對照組中，年齡（50.34±11.29）歲；體重指數(shù)（21.42±1.93）kg/m2。三組的一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。所有患者均知悉本研究內(nèi)容，且簽署知情同意書，本研究經(jīng)湖北省監(jiān)利市第五人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批同意。納入標(biāo)準(zhǔn)：①宮頸癌患者均經(jīng)臨床病理活檢確診，子宮肌瘤、子宮腺肌瘤良性腫瘤符合共識意見推薦診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②研究對象病歷資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有卵巢癌、乳腺癌等其他原發(fā)性惡性腫瘤者； ②入院前已接受放化療、生物治療者；③合并有嚴(yán)重感染性疾病或自身免疫性疾病者。

1.2 檢測方法

1.2.1 TCT 檢查前3 d 內(nèi)禁止陰道內(nèi)沖洗、 敷藥及性生活，將宮口擦拭干凈后，沿宮頸管置入TCT 專用刷，同方向旋轉(zhuǎn)5 次，停留2 min 后取出，冷凍保存送檢。使用SJ-TMDI100 型TCT 液細(xì)胞制片與分析系統(tǒng)（桂食藥監(jiān)械準(zhǔn)字20092220033 號）進(jìn)行制片和標(biāo)本細(xì)胞學(xué)檢測。根據(jù)TBS（the Bethesda system）分類診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]，以TCT 檢測發(fā)現(xiàn)不典型鱗狀或腺體上皮細(xì)胞、低度或高度鱗狀上皮內(nèi)病變、鱗狀細(xì)胞癌及腺癌為檢測結(jié)果陽性。

1.2.2 HPV 檢測標(biāo)本獲取方法同TCT，將標(biāo)本震蕩混勻，3000 r/min 離心10 min，離心半徑10 cm，取沉淀物進(jìn)行DNA 提取純化處理，再對DNA 模板進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增和導(dǎo)流雜交基因分型，試劑盒由上海羽朵生物科技有限公司提供，操作按試劑盒說明進(jìn)行。完成16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66 及68 共14 個(gè)高危型HPV 和6、11、40、42 及43 共5 個(gè)低危型HPV 分型檢測。以出現(xiàn)藍(lán)紫色圓點(diǎn)為檢測結(jié)果陽性[7]。

1.2.3 SCC-Ag 取清晨空腹肘靜脈血5 ml，3000 r/min離心10 min，離心半徑10 cm，取上清液送檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清SCC-Ag 水平，試劑盒由南京森貝伽生物科技有限公司提供，操作按試劑盒說明進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)及評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

①比較宮頸癌組、宮頸良性腫瘤組及健康對照組三組TCT 陽性率、HPV 陽性率及血清SCC-Ag 水平。②分析TCT、HPV 及SCC-Ag 單項(xiàng)和聯(lián)合檢測診斷宮頸癌的價(jià)值。根據(jù)平行診斷原則，對TCT、HPV 及血清SCC-Ag 值進(jìn)行聯(lián)合診斷，即TCT 陽性、TPV 陽性及血清SCC-Ag＞2.705 ng/ml 三項(xiàng)滿足任意一項(xiàng)即可判斷結(jié)果為陽性[8]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用t 檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，多組間比較采用χ2檢驗(yàn)，多組間兩兩比較采用Bonferroni 方法校正，診斷價(jià)值采用受試者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線進(jìn)行分析，以曲線下面積（area under the curve，AUC）＞0.75 為應(yīng)用價(jià)值高，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組TCT 陽性率、HPV 陽性率及SCC-Ag 的比較

宮頸癌組的TCT 陽性率、HPV 陽性率、SCC-Ag均高于宮頸良性腫瘤組和健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 三組TCT 陽性率、HPV 陽性率及SCC-Ag 的比較

2.2 TCT、HPV 及SCC-Ag 單項(xiàng)診斷宮頸癌價(jià)值分析

ROC 分析結(jié)果顯示，TCT、HPV 及SCC-Ag 對診斷宮頸癌具有一定應(yīng)用價(jià)值（P＜0.05）（圖1、表2）。

表2 單項(xiàng)檢測指標(biāo)診斷宮頸癌ROC 分析結(jié)果

圖1 單項(xiàng)指標(biāo)診斷宮頸癌的ROC 分析

2.3 TCT、HPV 及SCC-Ag 聯(lián)合檢測診斷宮頸癌價(jià)值分析

ROC 結(jié)果顯示，TCT+HPV+SCC-Ag 對診斷宮頸癌具有較高應(yīng)用價(jià)值（AUC＞0.75，P＜0.05）（圖2、表3）。

圖2 聯(lián)合檢測對診斷宮頸癌價(jià)值的ROC 分析

表3 聯(lián)合檢測診斷宮頸癌ROC 分析結(jié)果

3 討論

宮頸癌早期篩查目的在于早期診斷，對于癌前病變和早期患者給予阻斷性治療，以改善預(yù)后。近年來，宮頸癌早期篩查手段得到顯著改進(jìn)，已深入腫瘤超微結(jié)構(gòu)和分子水平領(lǐng)域。HPV、TCT 等在臨床的應(yīng)用，使宮頸癌早期診斷和檢出率得到提高。本研究結(jié)果顯示，宮頸癌組的TCT 陽性率和HPV 陽性率均高于宮頸良性腫瘤組和健康對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示HPV、TCT 可能有助于宮頸癌的早期篩查。但各種檢查方法均具有其實(shí)用性和應(yīng)用特點(diǎn)[9]，因而單一方法在宮頸癌篩查中仍具有局限性。

TCT 作為細(xì)胞學(xué)檢測新方案，避免了傳統(tǒng)制片可能發(fā)生的細(xì)胞重疊、染色不佳問題，有助于提高檢出率。TCT 利用全自動細(xì)胞制片和分析系統(tǒng)，可使細(xì)胞標(biāo)本保持原有形態(tài)，并均勻分布，這對實(shí)驗(yàn)觀察至關(guān)重要。Cramer 等[10]也認(rèn)為TCT 能祛除黏液、炎癥等因素對樣本質(zhì)量的影響，提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，降低誤診率。本研究結(jié)果顯示，TCT 診斷宮頸癌敏感度僅為0.711，這可能是因TCT 結(jié)果讀取依靠細(xì)胞形態(tài)診斷，這使檢測結(jié)果受主觀操作者和標(biāo)本取材因素的影響增加，從而導(dǎo)致結(jié)果判讀出現(xiàn)誤差。戴永剛等[11]還認(rèn)為各醫(yī)療機(jī)構(gòu)缺乏有效病理醫(yī)師?？婆嘤?xùn)，部分試劑盒缺乏監(jiān)管而導(dǎo)致其質(zhì)量不佳，也是造成TCT 敏感度降低的原因之一。

HPV 感染被公認(rèn)為是宮頸癌的高危因素，也是宮頸癌的主要誘因[12]。本研究結(jié)果顯示，HPV 陽性診斷宮頸癌敏感度為0.684，特異度為0.816，這可能是因雖然HPV 檢測結(jié)果陽性，但部分患者可通過自身免疫功能清除病毒，有研究還顯示2/3 以上HPV 陽性者可在2年內(nèi)自動轉(zhuǎn)陰[13]。此外，HPV 檢測時(shí)可能出現(xiàn)部分亞基因缺失而出現(xiàn)假陰性結(jié)果，導(dǎo)致漏診。因而，單一HPV 對早期篩查宮頸癌仍存在缺陷。

SCC-Ag 是絲氨酸蛋白酶抑制物，可用于宮頸癌療效評價(jià)和預(yù)后判斷[14-15]。本研究結(jié)果顯示，宮頸癌組與良性腫瘤組SCC-Ag 水平均高于對照組，且宮頸癌組的SCC-Ag 水平高于良性腫瘤組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），提示SCC-Ag 在良惡性腫瘤患者中均可表現(xiàn)為異常增加，而宮頸癌升高更為顯著，提示SCCAg 可能參與宮頸良惡性腫瘤病理過程，其水平異常升高可能是良性腫瘤惡變的早期信號，趙德英等[16]也認(rèn)為SCC-Ag 與宮頸癌惡性程度相關(guān)，在宮頸癌早期即出現(xiàn)顯著升高，這對今后臨床篩查具有重要意義。本研究比較TCT、HPV 及血清SCC-Ag 單項(xiàng)和聯(lián)合檢測在診斷宮頸癌中的價(jià)值，結(jié)果顯示三項(xiàng)聯(lián)合檢測的AUC 值達(dá)0.901，且具有較高的敏感度和特異度，提示其對于宮頸癌臨床篩查方案的制定具有指導(dǎo)價(jià)值。

綜上所述，TCT、HPV 及血清SCC-Ag 聯(lián)合檢測有助于提高宮頸癌診斷價(jià)值，可用于宮頸癌早期篩查。