現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)在食品、藥品微生物檢測中的應(yīng)用分析

陳小利，王鑫偉

（鄂東醫(yī)療集團(tuán)黃石市婦幼保健院，湖北黃石 435000）

食藥行業(yè)是社會(huì)保障體系中不可缺少的行業(yè)，但是食藥安全事已經(jīng)成為影響人們健康的關(guān)鍵因素。提升食藥檢測質(zhì)量，確保食藥產(chǎn)品安全性非常重要，在食藥檢測技術(shù)中現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)優(yōu)勢(shì)突出，其檢測靈敏度高，檢測效果非常理想，該檢測技術(shù)趨于成熟，在食藥微生物檢測中應(yīng)用廣泛。因此，研究現(xiàn)代生物分子檢測技術(shù)的具體應(yīng)用有助于提升食藥檢測質(zhì)量。

1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)屬于生物體外DNA復(fù)制的一種特殊形式，該技術(shù)主要用于放大以及擴(kuò)增DNA片段，從而獲取相應(yīng)的測序結(jié)果，在擴(kuò)增極微量DNA序列時(shí)效果突出[1]。

1.1 技術(shù)優(yōu)勢(shì)

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)的應(yīng)用效果十分突出，在檢測一些致病微生物細(xì)菌時(shí)其發(fā)揮著重要作用，檢測的精準(zhǔn)性較高。這項(xiàng)技術(shù)可以檢測微生物基因以及微生物染色體并得出具體的基因序列，在確定生物的基因型有良好應(yīng)用，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)在食藥微生物檢測中應(yīng)用廣泛，其可以了解食藥成分中微生物的主要特點(diǎn)和分布形式。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)能夠較為迅速地將食藥中的致病微生物細(xì)菌信息檢測出來，而且不會(huì)影響食藥中其他菌類，對(duì)致病微生物細(xì)菌能夠快速地進(jìn)行測定，無需消耗更多時(shí)間，其效率更加理想。

1.2 技術(shù)缺陷

現(xiàn)階段，食藥種類加多，其中的致病菌致病性也在發(fā)生變化，傳統(tǒng)手段檢測的精確度較低，采用這種檢測技術(shù)能夠使外界條件帶來的影響減弱，待測DNA分子片段的數(shù)量能在短時(shí)間內(nèi)增加，其缺點(diǎn)在于需要在高溫度環(huán)境下進(jìn)行檢測，如果溫度偏差較大，該技術(shù)的靈敏度會(huì)降低，而且這種技術(shù)需要投入更多的資金，中小型的檢測企業(yè)無法滿足資金這一要求，所以短期內(nèi)想要將該技術(shù)進(jìn)行大范圍的推廣難度較大。

1.3 技術(shù)原理

從生物學(xué)角度來看，如果樣本中存在病原細(xì)菌體，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)能夠精準(zhǔn)地發(fā)現(xiàn)病原體[2]，例如黃色葡萄球菌，這種群落的隱藏性較高，采用傳統(tǒng)技術(shù)不易檢測，而采用該技術(shù)則能夠?qū)⒕簷z測出來，有效地保障了食藥安全?，F(xiàn)階段聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)的應(yīng)用相對(duì)廣泛，檢測行業(yè)也在積極演技該技術(shù)，并在臨床檢測方面有了新的突破，進(jìn)一步為食藥檢測服務(wù)。

2 基因芯片技術(shù)

在檢測技術(shù)中基因芯片技術(shù)整合了多種先進(jìn)技術(shù)，其具備生命科學(xué)檢測方法與信息科學(xué)校測技術(shù)的優(yōu)勢(shì)，應(yīng)用了化學(xué)、物理學(xué)以及計(jì)算機(jī)科學(xué)等多種前沿的技術(shù)，這種高新技術(shù)具有極強(qiáng)的交叉性。

2.1 技術(shù)優(yōu)勢(shì)

基因芯片技術(shù)在食藥檢測中能研究和解析生物基因，對(duì)研究生物蛋白質(zhì)的特點(diǎn)有重要作用。該技術(shù)能夠幫助人們了解生物的基本特征，對(duì)于食藥行業(yè)的發(fā)展作用突出?；蛐酒休^長的發(fā)展歷史，藥物的運(yùn)行機(jī)理在于直接或間接將細(xì)胞中部分結(jié)構(gòu)的基因表達(dá)方法改變，采用此技術(shù)能夠進(jìn)行大規(guī)模解析生物基因，在檢測過程中能夠有效縮短動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要消耗的時(shí)間成本，其能夠提升臨床試驗(yàn)的效率，為醫(yī)藥研發(fā)人員提供有效的技術(shù)支撐，該技術(shù)的研發(fā)效率相對(duì)較高，能夠防止更多安全事故風(fēng)險(xiǎn)出現(xiàn)。現(xiàn)階段，很多檢測企業(yè)都在積極將這項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于食藥檢測中，并對(duì)基因芯片技術(shù)進(jìn)行了更多深入研究，在檢測質(zhì)量方面獲得了較大進(jìn)步，并逐步走向世界市場。

2.2 技術(shù)原理

該技術(shù)的原理是通過標(biāo)記DNA探針對(duì)生物DNA序列進(jìn)行雜交，然后結(jié)合生物核苷酸序列特定規(guī)律開展核苷酸測序，結(jié)合測序的內(nèi)容是對(duì)研究樣品進(jìn)行檢測[3]?；蛐酒夹g(shù)的優(yōu)勢(shì)較為突出，如自動(dòng)化、微型化、并行性和多樣性等，其在多個(gè)領(lǐng)域中都有著廣泛使應(yīng)用，在食藥微生物檢測匯總，其能夠遴選、檢測微生物群落的數(shù)量。

3 現(xiàn)代免疫技術(shù)

在現(xiàn)代食藥微生物檢測中，現(xiàn)代免疫技術(shù)應(yīng)用廣泛，這些技術(shù)的優(yōu)勢(shì)在于價(jià)格實(shí)惠，中小型檢測企業(yè)可以使用，操作方法較為簡單，無需復(fù)雜的操作，其實(shí)用性相對(duì)較強(qiáng)。

3.1 技術(shù)優(yōu)勢(shì)

目前現(xiàn)代免疫技術(shù)在食品安全檢測方面的優(yōu)勢(shì)突出，與以往的食藥檢測技術(shù)相比，采用這檢測技術(shù)的精確性更高，現(xiàn)代免疫技術(shù)能夠?qū)⒍喾N常見病原細(xì)菌有效檢測出來，并能夠?qū)⒋竽c桿菌、沙門氏菌和李斯特氏菌等病原細(xì)菌逐個(gè)排除，該項(xiàng)技術(shù)較為成熟，酶免疫測驗(yàn)、熒光性免疫測驗(yàn)、免疫磁性分離和放射性免疫測驗(yàn)等都為這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用提供了較多技術(shù)支撐。

3.2 技術(shù)原理

該項(xiàng)技術(shù)是許多業(yè)內(nèi)研究者分析致病微生物細(xì)菌的重要方法，例如檢測李斯特菌或常見的大腸桿菌等，該技術(shù)與PCR技術(shù)一同應(yīng)用能夠獲得新型酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)[4]，然后選擇排除法將檢測過程其他雜質(zhì)清理，篩選出檢測樣本，從而進(jìn)一步為檢測工藝提供更多參照，在檢測時(shí)無需花費(fèi)較多的檢測時(shí)間，檢測的周期相對(duì)較短。

4 變性梯度凝膠電泳技術(shù)

在研究微生物群落結(jié)構(gòu)時(shí)變性梯度凝膠電泳技術(shù)有重要應(yīng)用，該技術(shù)的精準(zhǔn)性要高于DNA片段測序方法，對(duì)探究生物體具體情況有重要應(yīng)用。

4.1 技術(shù)優(yōu)勢(shì)

變性梯度凝膠電泳技術(shù)能夠?qū)⒍喾N微生物檢測出來，其檢測的準(zhǔn)確性較高，該技術(shù)不需要經(jīng)樣本標(biāo)記直接進(jìn)行檢測即可，檢測時(shí)能夠確保突變分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行檢測。該技術(shù)在當(dāng)前已知微生物中都有良好的檢測效果，在檢測未擴(kuò)增DNA時(shí)有更為突出的效果，如果DNA出現(xiàn)突變，也能夠精確檢測，例如DNA甲基化，也可以采用該技術(shù)進(jìn)行檢測，其檢測的精度較高，檢測效果十分理想。這種技術(shù)在食源性致病細(xì)菌檢測上應(yīng)用較多，能夠準(zhǔn)確地測定食藥產(chǎn)品中微生物的特征，采用該技術(shù)能夠?qū)κ乘幃a(chǎn)品中微生物菌落結(jié)構(gòu)進(jìn)行測定與分析，提升食藥產(chǎn)品的安全性。

4.2 技術(shù)原理

現(xiàn)階段，該技術(shù)在微生物分子生態(tài)學(xué)中的應(yīng)用較多。變形梯度凝膠電泳技術(shù)在檢測時(shí)需要將生物DNA放入到變性劑中，然后對(duì)DNA片段進(jìn)行連接，此時(shí)新產(chǎn)生的片段會(huì)導(dǎo)致變性劑濃度變化，而其濃度變化會(huì)影響生物DNA的連接性，因此出現(xiàn)不同電泳遷移率，進(jìn)而將堿基存在差異的DNA片段分離出來。該技術(shù)無法檢測微生物群落中生物的代謝活性及生物的具體數(shù)量。此外，集合DNA測序技術(shù)能夠更好地提升檢測質(zhì)量，變性梯度凝膠電泳技術(shù)對(duì)各類真菌差異性檢測的區(qū)別效果較高[5]，而DNA測序技術(shù)能測定群落數(shù)量，二者能夠幫助人們了解更多檢測內(nèi)容。

5 結(jié)語

現(xiàn)代檢測技術(shù)對(duì)食藥微生物群落檢測精度的提升有重要的意義，檢測企業(yè)需要結(jié)合檢測標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用現(xiàn)代檢測技術(shù)進(jìn)行食藥檢測，在實(shí)際檢測中探究新的檢測方法，提升檢測的精度，確保在食藥檢測過程中將微生物群落特點(diǎn)精確地檢測出來，切實(shí)提升食藥檢測的精度，使檢測結(jié)果能夠反映出食藥的安全性。檢測企業(yè)需要不斷在實(shí)踐中對(duì)現(xiàn)代檢測技術(shù)進(jìn)行優(yōu)化和創(chuàng)新，提升檢測質(zhì)量和精度，保障實(shí)驗(yàn)檢測的質(zhì)量。