農(nóng)藥殘留快速檢測方法在農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管中的應(yīng)用

李升華

（平果市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測站，廣西平果 531499）

食品安全事關(guān)人們健康和社會的穩(wěn)定[1]。目前，我國的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題仍以農(nóng)藥、生物毒素、重金屬殘留為主，其中，農(nóng)藥殘留因其廣泛性、多樣性備受關(guān)注。農(nóng)藥種類非常繁多，主要有有機(jī)磷、氨基甲酸酯、有機(jī)氯和菊酯類等。農(nóng)藥使用不當(dāng)易造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)，而食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的農(nóng)產(chǎn)品對人體健康危害巨大，會造成急性中毒或慢性中毒，降低人體免疫力，可致癌、致畸和致突變，甚至造成個(gè)體死亡，對人們的生命健康以及經(jīng)濟(jì)社會發(fā)展產(chǎn)生不利影響，嚴(yán)重污染環(huán)境，也影響農(nóng)產(chǎn)品的經(jīng)濟(jì)貿(mào)易。與專業(yè)的檢測機(jī)構(gòu)相比，農(nóng)藥殘留的快速檢測方法操作更為簡單、快速且投入的成本較低，可實(shí)現(xiàn)對農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)和銷售等環(huán)節(jié)的實(shí)時(shí)檢測，易在基層普及，成為日常監(jiān)管的重要技術(shù)支撐,也是監(jiān)督執(zhí)法的重要科學(xué)依據(jù)，確保農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全保障。

1 快速檢測的特點(diǎn)

1.1 快速檢測的概述

農(nóng)藥殘留的快速檢測，能夠在短期內(nèi)快速檢驗(yàn)出結(jié)果。在一般情況下，包括制備抽查樣品時(shí)間在內(nèi)，能在2 h內(nèi)完成結(jié)果的出具，就可當(dāng)作實(shí)驗(yàn)室的快檢方法。如果將這種方法應(yīng)用于現(xiàn)場，并且在30 min鐘內(nèi)得出結(jié)果，則可作為現(xiàn)場的快檢方法。

1.2 快速檢測的特點(diǎn)

①受實(shí)驗(yàn)室數(shù)量、設(shè)施影響小。實(shí)驗(yàn)室建設(shè)投入成本高，承檢樣品有限。快速檢測設(shè)備便攜，樣品前處理簡化，試材、試劑消耗量少，對檢測環(huán)境要求不高，現(xiàn)場操作方便。②可在短時(shí)間內(nèi)對大量樣品進(jìn)行測試、定性篩查。③檢測靈活，檢測周期短。快速檢測可實(shí)時(shí)實(shí)地對農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)中及售前、售中進(jìn)行靈活檢測，及時(shí)出具結(jié)果，在產(chǎn)品上市及食用前把關(guān)。④對操作人員技術(shù)水平要求低，快速檢測所用的設(shè)備操作及樣品前處理比較簡單。⑤節(jié)約成本。大部分農(nóng)產(chǎn)品以生鮮銷售且價(jià)格低廉，快速檢測儀器以及檢測試劑的單價(jià)較低，且維護(hù)和運(yùn)行比較方便，因此，能在日常檢測中進(jìn)行大力推廣。⑥用于大型活動的食品安全保障與應(yīng)急事件處理。⑦作為日常檢查主要的監(jiān)管手段。

2 農(nóng)藥殘留快速檢測的方法

2.1 農(nóng)藥殘留的測試手段

從定性和定量的角度來劃分農(nóng)藥殘留的測試手段可以分為定性檢測、限量檢測、半定量檢測以及定量檢測。定性檢測和限量檢測通常適用于現(xiàn)場檢測，通過半定量檢測后得出的結(jié)果，往往需要送入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行再次檢測。而定量檢測一般在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。定性檢測表述為陰性或陽性；限量檢測表述為合格或不合格；半定量與定量檢測表述為可標(biāo)出具體數(shù)值，對限量值來判定是否合格。

2.2 農(nóng)藥殘留速測技術(shù)方法

農(nóng)藥殘留速測按檢測技術(shù)方法分為酶抑制法、免疫分析法、化學(xué)速測法和生物測定法等，而前2種最常用。①酶抑制法是目前應(yīng)用廣泛、成熟的農(nóng)藥殘留的快速檢測手段，這種手段的化學(xué)原理是利用有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶的功能進(jìn)行抑制，而這種抑制率與農(nóng)藥的化學(xué)濃度成正比。酶抑制法主要有速測卡法（紙片法）、比色法（分光光度法）。速測卡的檢測原理是膽堿酯酶可將靛酚乙酸銅進(jìn)行催化，使其水解為乙酸和靛酚有機(jī)磷，此時(shí)乙酸銅化合物的顏色由紅色變?yōu)樗{(lán)色，這類有機(jī)物對膽堿酶酯具有抑制作用，在催化和水解的過程中顏色會發(fā)生改變，通過顏色變化情況判斷出樣品是否含有過量的農(nóng)藥殘留。②免疫分析法主要是根據(jù)抗原和抗體的結(jié)合反應(yīng)進(jìn)行各種物質(zhì)的檢測與分析的方法。酶免疫分析/酶聯(lián)免疫吸附分析（EIA/ELISA）常用來檢測農(nóng)藥殘留。免疫分析法在檢測單個(gè)農(nóng)藥殘留時(shí)具有快速、方便、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，但由于抗原抗體具有特異性，很難同時(shí)檢測數(shù)十種甚至更多的農(nóng)藥殘留情況。③化學(xué)快速測試法主要是利用有機(jī)磷農(nóng)藥可以進(jìn)行氧化還原的特點(diǎn)。有機(jī)磷農(nóng)藥在金屬離子的催化作用下會水解成為醇和磷酸，然后與檢測液進(jìn)行化合反應(yīng)，檢測液會褪色甚至出現(xiàn)無色狀態(tài)。這種快速檢測方法的優(yōu)點(diǎn)在于利用有機(jī)磷農(nóng)藥化學(xué)反應(yīng)的穩(wěn)定性，直觀反應(yīng)測試結(jié)果。但這種方法的缺點(diǎn)在于有時(shí)反應(yīng)后的顏色變化不夠明顯，通過肉眼難于判斷，在使用中有時(shí)還會受到植物組織的干擾。④生物檢測法主要利用活體生物對農(nóng)藥殘留的敏感反應(yīng)進(jìn)行檢測，該方法操作簡單，但定性粗糙、準(zhǔn)確度低，對農(nóng)藥的適用范圍有限。

2.3 常用農(nóng)藥殘留快速檢測（酶抑制法）的操作流程

2.3.1 速測卡法

（1）果蔬表面測定法（粗篩法）。將果蔬表面的泥土擦拭干凈，在果蔬表面滴上2～3滴浸提液，取另一果蔬對其滴液處進(jìn)行輕微的摩擦，將果蔬上的液滴滴在速測卡上，靜置10 min等待預(yù)反應(yīng)，再將速測卡進(jìn)行對折，使之交疊3 min后打開，并將其與對照組的卡片進(jìn)行比較。

（2）果蔬整體測定法。選取幾種具有代表性的果蔬產(chǎn)品，將其表面的泥土擦拭干凈，也可以進(jìn)行削皮處理，削去大約1 g的果蔬表皮，并剪成1 cm2大小的碎片，在帶蓋瓶中加入5 g，并加入10 mL左右的浸提液，蓋上瓶蓋充分搖晃50次，放置2 min。再取2～3滴滴在速測卡上，后續(xù)操作與果蔬表面測定法相同。食用菌類可采取整株浸泡的方法。

2.3.2 比色法測定

①配制試劑。按照要求配制緩沖液、酶、顯色劑、底物，配制好試劑也可放進(jìn)冰箱冷藏3個(gè)月。②調(diào)試儀器。儀器開機(jī)10 min后預(yù)熱做空白對照，觀察每個(gè)通道顯示的光強(qiáng)度和光源是否正常。③測定樣品。樣品剪至1 cm2左右，稱取2 g樣品加入到10 mL緩沖液中振蕩1～2 min，放置10～15 min過濾備用。每個(gè)樣品提取液分別吸取2.5 mL至刻度試管中，另取一只試管加入2.5 mL緩沖液代替樣品作為空白對照。加入100 μL酶、100 μL顯色劑到各試管中，混勻反應(yīng)15 min，在37 ℃恒溫裝置反應(yīng)下檢測。

2.4 農(nóng)藥殘留快速檢測過程關(guān)鍵控制點(diǎn)

2.4.1 樣品前處理

與農(nóng)藥殘留的紙片法以及分光光度法的檢測原理相似，在測試過程中的干擾物質(zhì)也基本一致。胡蘿卜、大蒜、芹菜、香菇以及西紅柿等汁液中所含有植物次生物質(zhì)對酶具有很大的影響，使檢測結(jié)果易呈現(xiàn)假陽性。對這些樣品進(jìn)行處理，需要將整株蔬菜進(jìn)行完全浸泡，避免色素干擾[2]。有些果蔬產(chǎn)品，例如茄子和蘋果等在切開之后易發(fā)生氧化反應(yīng)，使緩沖液的顏色變深，造成待測液透過率低,影響檢測結(jié)果的可靠性，這類樣品要迅速加入提取劑避免其氧化，檢測時(shí)速度要快。

2.4.2 速測卡法結(jié)果判定

要保證檢測樣品的速測卡與空白對照組的對照卡所預(yù)留的放置時(shí)間一致。將紅色藥片以及白色藥片重疊反應(yīng)的時(shí)間控制在3 min之內(nèi)，進(jìn)行觀測的時(shí)間小于1 min。將對照組的卡片進(jìn)行比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果，不變藍(lán)為陽性結(jié)果，說明農(nóng)藥殘留量較高，顯淺藍(lán)色為弱陽性結(jié)果，說明農(nóng)藥殘留量相對較低。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對照卡片相同，為陰性結(jié)果。對陽性結(jié)果的樣品，可用其他分析方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

如果檢測樣品中AchE的抑制率不足50%，可視為檢測樣品中的農(nóng)藥殘留量不高，毒性不強(qiáng)，樣品可視為合格；如果檢測樣品中AchE的抑制率大于或等于50%，至少2次以上重復(fù)則表明產(chǎn)品不合格。如果檢測樣品中AchE的抑制率在40%～50%，則屬于疑似的農(nóng)藥殘留超標(biāo)樣品，需要進(jìn)行再次檢測[3]。檢測中出現(xiàn)負(fù)值、個(gè)別通道無數(shù)值問題，一般是因?yàn)閷?shí)際檢測吸光值大于對照檢測吸光值而導(dǎo)致系統(tǒng)錯(cuò)誤，或是人為操作失誤造成的，需要檢查，排除影響因子后重新檢測。

3 基層農(nóng)藥殘留快速檢測狀況

目前，農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、市場監(jiān)管系統(tǒng)中，不僅滿足了日常監(jiān)管、執(zhí)法要求，也保障了重大活動、節(jié)日的食品安全。大部分縣（市、區(qū)）的檢測體系較為完善，配備有農(nóng)藥殘留快速檢測箱、快速檢測車輛等檢測設(shè)備[4]。以平果市為例，近年來，隨著人們對食品安全質(zhì)量的要求越來越高，平果市已經(jīng)初步建成了覆蓋全市的食品安全質(zhì)量檢測體系，著力保障廣大市民的消費(fèi)安全。平果市（縣）鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）兩級每年對全市果蔬生產(chǎn)基地、批發(fā)市場、超市等進(jìn)行檢測超1萬例，合格率均在99.9%以上，確保全市的農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全。

4 快速檢測在基層監(jiān)管應(yīng)用中存在的問題

4.1 檢驗(yàn)范圍過窄

農(nóng)藥殘留檢測最常用的酶抑制率法通常用于檢測有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留，但在檢測有機(jī)氯類、擬除蟲菊酯類、三唑類等農(nóng)藥殘留時(shí)精度較低，易造成“誤檢”現(xiàn)象，如檢測結(jié)果出現(xiàn)陽性，還需經(jīng)氣相色譜法驗(yàn)證。

4.2 試劑質(zhì)量參差不齊

在農(nóng)藥殘留快速檢測實(shí)踐中，基層工作者發(fā)現(xiàn)存在有些試劑質(zhì)量、有效性不達(dá)標(biāo)的現(xiàn)象，在檢測中易出現(xiàn)檢測藥劑失效，結(jié)果不準(zhǔn)的現(xiàn)象。

4.3 農(nóng)藥殘留快速檢測方法有待更新

目前，農(nóng)藥殘留快速檢測方法使用國家標(biāo)準(zhǔn)《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法《蔬菜上有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘毒快速檢測方法》（NY/T 448—2001）。由于近年來科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，對于農(nóng)藥殘留的快速檢測技術(shù)也有了重大突破，各種檢測設(shè)備以及檢測試劑的檢測力度有了很大的提高。2021年已經(jīng)將農(nóng)藥殘留的限量標(biāo)準(zhǔn)做出了修訂并已發(fā)布，增加了近3 000項(xiàng)的農(nóng)藥殘留限量，最大農(nóng)藥殘留限量的上限已擴(kuò)大至10 000多項(xiàng)殘留。因此，上述的2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)不再適用于當(dāng)下的情況，適應(yīng)不了最新限量標(biāo)準(zhǔn)GB 2763—2021的要求，跟不上快速檢測產(chǎn)品的發(fā)展步伐，急需修訂更新標(biāo)準(zhǔn)。

4.4 結(jié)果缺乏法律效力

檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)只有經(jīng)過計(jì)量認(rèn)證、資質(zhì)認(rèn)定合格后才可以向社會出具具有法律效力的檢驗(yàn)報(bào)告。目前基層檢測室應(yīng)用較多的是速測設(shè)備，用于農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地、市場、企業(yè)主體自檢的依據(jù)，但不能作為準(zhǔn)出和準(zhǔn)入的依據(jù)，不具備法律效力。

4.5 檢測人才專業(yè)水平不高

農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測工作需要具備一定的專業(yè)知識，培訓(xùn)合格后才能上崗。目前，基層從事農(nóng)產(chǎn)品快速檢測工作者多數(shù)由農(nóng)科專業(yè)人員兼職，普遍存在學(xué)歷低、技術(shù)薄弱、經(jīng)驗(yàn)不足等問題，對農(nóng)藥殘留快速檢測操作方法不熟練，易導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果精準(zhǔn)度不高，判定不準(zhǔn)。

5 對農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)應(yīng)用的建議

5.1 健全基層快速檢測體系

承擔(dān)快速檢測主體要持續(xù)增加資金投入建設(shè)、確保有相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室，保證儀器設(shè)備更新、試劑采購、人員培訓(xùn)等基本的經(jīng)費(fèi)落實(shí)。加強(qiáng)隊(duì)伍建設(shè)，配備相應(yīng)的專業(yè)技術(shù)人員，并重視專業(yè)技能培訓(xùn)，不斷提高他們的檢測能力。優(yōu)化檢測信息平臺，通過網(wǎng)絡(luò)服務(wù)器對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行儲存、匯總分析和上報(bào)，實(shí)現(xiàn)監(jiān)測數(shù)據(jù)信息網(wǎng)絡(luò)化、智能化管理[5]。

5.2 制定新的標(biāo)準(zhǔn)和加強(qiáng)技術(shù)研究

目前，農(nóng)藥殘留快速檢測基本可以滿足日常監(jiān)管的風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測和問題樣品的篩查，但快速檢測方法的適用性、合法合規(guī)性等方面均有較大的缺陷，直接限制了相關(guān)方法的使用和日常監(jiān)測評價(jià)中的運(yùn)用，行業(yè)和地方應(yīng)盡快出臺標(biāo)準(zhǔn)或規(guī)范用于指導(dǎo)相關(guān)工作。加大科研項(xiàng)目立項(xiàng)和經(jīng)費(fèi)的投入，加強(qiáng)有機(jī)氯、擬除蟲菊酯、三唑類農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)的研究，擴(kuò)展農(nóng)藥殘留快速檢測范圍?？焖贆z測設(shè)備研究機(jī)構(gòu)和生產(chǎn)企業(yè)要吸收國外先進(jìn)技術(shù)，研究生產(chǎn)符合中國國情的快速化、小型化、自動化檢測設(shè)備。

5.3 整合有效資源，實(shí)現(xiàn)資源共享

以市（縣）級監(jiān)督管理部門為核心，整合轄區(qū)檢測資源，以檢測專業(yè)技術(shù)人員為依托，合理劃分部門職責(zé)，避免重復(fù)投入和重復(fù)工作，建立檢測的聯(lián)合工作機(jī)制；加強(qiáng)檢測部門間橫向協(xié)調(diào)，建立檢測部門與監(jiān)管部門的縱向溝通，實(shí)現(xiàn)各部門檢測數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)傳輸和資源共享，形成技術(shù)支持與科學(xué)監(jiān)管網(wǎng)絡(luò)的有效結(jié)合。

6 結(jié)語

推行快速、簡便、有效和實(shí)時(shí)的農(nóng)藥殘留快速檢測，不僅具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值，也有重要的政治價(jià)值。相關(guān)部門要加強(qiáng)重視、加大投資、完善基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)，加強(qiáng)對檢測人員的培訓(xùn)并落實(shí)監(jiān)管責(zé)任，不斷優(yōu)化農(nóng)藥殘留留檢測體系建設(shè)，穩(wěn)步推進(jìn)和完善農(nóng)藥殘留檢測工作機(jī)制，確保從源頭上保證農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全。