• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水質(zhì)改良滅菌劑D7對(duì)四種對(duì)蝦致病菌的作用

    2021-11-27 22:18:57高佳朋郭冉于志文何立彬夏輝朱昱錚
    河北漁業(yè) 2021年11期
    關(guān)鍵詞:抑菌作用對(duì)蝦致病菌

    高佳朋 郭冉 于志文 何立彬 夏輝 朱昱錚

    摘 要:為研究水質(zhì)改良滅菌劑D7對(duì)常見(jiàn)對(duì)蝦致病菌的抑制及殺滅效果,通過(guò)抑菌圈實(shí)驗(yàn)及生態(tài)毒理學(xué)方法研究D7對(duì)哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)等4種常見(jiàn)對(duì)蝦致病菌的抑制效果、最佳作用時(shí)間及不同溫度對(duì)D7殺菌作用的影響。結(jié)果顯示,在35 ℃條件下,哈維氏弧菌對(duì)D7高度敏感,溶藻弧菌、副溶血弧菌對(duì)D7中度敏感,無(wú)乳鏈球菌對(duì)D7低度敏感;D7對(duì)4種菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度均為50.00 mg/L;D7對(duì)副溶血弧菌的最佳作用時(shí)間為4 h,對(duì)哈維氏弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌的最佳作用時(shí)間為8 h;在18、28、35 ℃條件下,D7對(duì)4種對(duì)蝦致病菌的殺滅效果無(wú)顯著差異(P>0.05)??梢?jiàn)在本試驗(yàn)條件下,D7對(duì)4種常見(jiàn)對(duì)蝦致病菌具有一定的殺滅抑制效果,最佳作用時(shí)間為8 h,且殺菌效果不隨溫度的改變而變化。

    關(guān)鍵詞:水質(zhì)改良滅菌劑;D7;對(duì)蝦;致病菌;抑菌作用

    D7是一款新型的高效消毒液,由美國(guó)專業(yè)消毒劑生產(chǎn)商Decon7 Systems與美國(guó)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)室桑迪亞合作研制。研究表明D7對(duì)部分有毒有害化學(xué)品有中和、抑制效果,對(duì)病毒、部分細(xì)菌有抑制及殺滅效果[1]。此前D7廣泛應(yīng)用于食品車間消毒、畜牧車間消毒等,但并未在水產(chǎn)相關(guān)領(lǐng)域使用。D7殺菌的主要有效作用成分包含過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫是一種化學(xué)性質(zhì)極為活潑的強(qiáng)氧化劑,在環(huán)境中容易分解為氧氣和水,殘留較小,對(duì)環(huán)境影響較小,是一種較為清潔的消毒劑。近年來(lái)的研究表明,過(guò)氧化氫可與其他成分如季銨鹽、金屬離子、表面活性劑、無(wú)機(jī)碘化物、等離子體等產(chǎn)生協(xié)同殺菌作用,與單獨(dú)過(guò)氧化氫為殺菌成分的殺菌劑相比效果更佳[2-4]。

    近年來(lái),伴隨對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的不斷擴(kuò)大,其面臨的環(huán)境問(wèn)題也日益突出,養(yǎng)殖規(guī)??焖僭鲩L(zhǎng),水體富營(yíng)養(yǎng)化加劇,致使養(yǎng)殖水體中有害藻菌滋生,有害細(xì)菌引發(fā)的對(duì)蝦細(xì)菌性疾病更是成為導(dǎo)致養(yǎng)殖失敗的主要病害之一[5]。在對(duì)蝦養(yǎng)殖中常見(jiàn)的對(duì)蝦弧菌病、腸炎病、爛鰓病、肝胰腺壞死病等疫病均是由細(xì)菌滋生感染導(dǎo)致的,而在眾多的致病菌中,又以弧菌、鏈球菌、愛(ài)德華氏菌等幾類病菌最為常見(jiàn)和難以根治[6]。

    本研究以哈維氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌等4種常見(jiàn)的對(duì)蝦致病菌為研究對(duì)象,探究水質(zhì)改良劑D7對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖有害病菌的抑制及殺滅效果,提供水質(zhì)改良劑D7在水產(chǎn)相關(guān)領(lǐng)域應(yīng)用的數(shù)據(jù)支撐,為今后水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性疾病的防治提供新的思路和方法。

    1 材料和方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    試驗(yàn)所用水質(zhì)改良劑D7購(gòu)自D7生物科技有限公司,由美國(guó)專業(yè)消毒劑生產(chǎn)商Decon7 Systems制造生產(chǎn)。D7產(chǎn)品有效成分包括:第一部分(以下稱為“P1”)烷基二甲基芐基氯化銨和表面活性劑的混合物、第二部分(以下稱為“P2”)過(guò)氧化氫(濃度7.98%)和第三部分(以下稱為“P3”)催化劑/增效劑。

    試驗(yàn)所用菌種哈維氏弧菌(Vibrio harveyi,MCCC1A13958)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus,MCCC1A07296)由中國(guó)海洋微生物菌種保藏管理中心提供;副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,ATCC17802)、無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae,ATCC17802)由ATCC菌種保藏中心提供。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 D7原液及使用液的配制 配置D7原液時(shí)先將D7試劑的P2、P3充分混勻,靜置反應(yīng)5 min后,加入P1,使用玻璃棒緩慢攪拌均勻,避免快速攪拌產(chǎn)生大量泡沫,配好后的D7原液可常溫保存8 h有效,需現(xiàn)用現(xiàn)配。原液配制好后可按所需比例稀釋得到D7使用液,本試驗(yàn)中加1 mL D7原液至1 L蒸餾水中,制成D7使用液。

    1.2.2 培養(yǎng)基及中和劑的配制 根據(jù)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[7],哈維氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌采用TCBS培養(yǎng)基培養(yǎng);無(wú)乳鏈球菌采用血瓊脂平板培養(yǎng)基培養(yǎng)。菌液擴(kuò)培菌使用LB培養(yǎng)基。

    TCBS培養(yǎng)基配制時(shí),將TCBS培養(yǎng)基粉劑加熱溶化,補(bǔ)水到所需的總體積。按照文獻(xiàn)[8]方法進(jìn)行配制、分裝、滅菌操作。滅菌完成后,將培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時(shí)倒入平板當(dāng)中,待平板凝固后,放置于冰箱中待用[9]。

    LB培養(yǎng)基配制時(shí),按照培養(yǎng)基的配方比例在1 L的蒸餾水中加入10 g蛋白胨、10 g氯化鈉、5 g酵母膏、3 g磷酸氫二鉀、2 g蔗糖,調(diào)整培養(yǎng)基pH值為7。配制好后的培養(yǎng)基分裝滅菌步驟與TCBS培養(yǎng)基相同。

    血瓊脂平板購(gòu)自北京路橋生物技術(shù)有限責(zé)任公司,主要成分為蛋白胨、淀粉、氯化鈉、牛羊血、瓊脂等原料。

    中和劑使用PBS中和劑,由2 g/L硫代硫酸鈉+3 g/L卵磷脂+10 g/L氯化鈉+20 g/L吐溫80組成。

    1.2.3 菌種培養(yǎng) 因購(gòu)買的菌種為菌種平板,首先對(duì)4種菌種進(jìn)行二次擴(kuò)培,取副溶血弧菌敏感菌株,在TCBS培養(yǎng)基上進(jìn)行劃線分離,培養(yǎng)12 h得到單菌落。查閱相關(guān)文獻(xiàn)后[10],以LB液體培養(yǎng)基代替3%氯化鈉蛋白胨水,接種環(huán)挑取單菌落,接種到LB液體培養(yǎng)基上,在37 ℃,200 r/min的恒溫?fù)u床培養(yǎng)5 h,制備菌液后,用平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)法[11]測(cè)定出相應(yīng)細(xì)菌濃度,以便計(jì)算后續(xù)NaCl添加量;取5 mL菌液于離心管中,5 000 r/min離心2 min,棄上清,沉淀中加入5 mL 0.85% NaCl,使細(xì)菌懸浮,重復(fù)上述離心懸浮操作2次,得到最終菌懸液。將上述菌懸液與0.5的麥?zhǔn)媳葷峁苓M(jìn)行比對(duì),用0.85% NaCl進(jìn)行濃度調(diào)整得到麥?zhǔn)蠞舛?.5的NaCl菌液,吸出該菌液1 400 μL,倒入210 mL LB培養(yǎng)基中,用于最小抑菌濃度(MIC)測(cè)定、最小殺菌濃度(MBC)的測(cè)定和抑菌圈試驗(yàn)。

    1.2.4 抑菌圈試驗(yàn)

    1.2.4.1 稀釋菌液 取搖菌管,用移液槍吸取10 mL LB液體培養(yǎng)基,加哈維氏弧菌菌液100 μL,至搖菌管中,搖勻。副溶血弧菌、無(wú)乳鏈球菌、溶藻弧菌均同上處理。

    1.2.4.2 制作含藥紙片 取出若干滅菌好的紙片,用移液槍吸取D7原液10 μL至紙片上,晾干備用。

    1.2.4.3 涂板 取100 μL稀釋好的菌液于TCBS瓊脂板(無(wú)乳鏈球菌為血瓊脂平板),用涂布棒涂勻。

    1.2.4.4 貼放紙片 將含藥紙片有藥液的一面貼放于涂滿菌的瓊脂板上,于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)16~24 h,取出觀察結(jié)果。試驗(yàn)重復(fù)3次,分別記為1#-3#。

    1.2.4.5 抑菌效果評(píng)定 水質(zhì)改良劑D7抑菌效果評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)為:若抑菌圈直徑大于20 mm,為高度敏感;若抑菌圈直徑在10~20 mm,為中度敏感;若抑菌圈直徑小于10 mm,為低度敏感。

    1.2.5 最小抑菌濃度試驗(yàn) 取13支滅菌后的試管并依次編號(hào)(1-13號(hào)),將準(zhǔn)備好的LB液體培養(yǎng)基逐個(gè)加入試管中,1號(hào)試管加8 mL,其余每支試管加入5 mL培養(yǎng)基。1號(hào)試管加入配制好的D7使用液2 mL,混勻;從1號(hào)管取5 mL混合液加入2號(hào)管,搖勻;如此依次倍比稀釋至11號(hào)管;最后從11號(hào)試管吸取5 mL棄去。此時(shí)1—12號(hào)管D7濃度分別為200.00、100.00、50.00、25.00、12.50、6.25、3.125、1.563、0.781、0.391、0.195、0 mg/L,12號(hào)管為不含D7的生長(zhǎng)對(duì)照。所有試管中加入中和劑5 mL,1—12號(hào)管中分別加入菌液2 mL,13號(hào)試管中加入2 mL? LB培養(yǎng)基并混勻,1-11號(hào)管以T1-T11表示,12號(hào)管為對(duì)照組,13號(hào)管為空白組。以37 ℃ 200 r/min搖床培養(yǎng)18~24 h,肉眼觀察菌體生長(zhǎng)情況,溶液最后變澄清的為最小抑菌濃度。

    1.2.6 最小殺菌濃度試驗(yàn) 按照上述的D7最小抑菌濃度為基礎(chǔ),重復(fù)上述試驗(yàn)步驟,稀釋后以對(duì)照組為基準(zhǔn)調(diào)零,測(cè)定菌液吸光度(OD值),計(jì)算細(xì)菌濃度。以肉眼觀察最為澄清且OD值接近于0的為最小殺菌濃度[12]。按照上述步驟測(cè)定1—12號(hào)管后,分別取12支管菌液在無(wú)菌的TCBS瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線接種(無(wú)乳鏈球菌接種于無(wú)菌的血瓊脂平板),以37 ℃恒溫培養(yǎng)20~24 h,以平板上無(wú)菌體生長(zhǎng)的D7濃度值標(biāo)定為最小殺菌濃度,以對(duì)比驗(yàn)證之前的最小殺菌濃度結(jié)果。培養(yǎng)試驗(yàn)分別重復(fù)3次。

    1.2.7 D7的抑菌最佳作用時(shí)間 以上述步驟得出的最小殺菌濃度進(jìn)行4種對(duì)蝦致病菌的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。首先將3種弧菌在TCBS培養(yǎng)基上進(jìn)行劃線分離,無(wú)乳鏈球菌在血瓊脂平板上進(jìn)行劃線分離,培養(yǎng)12 h得到單菌落,將配制好的LB培養(yǎng)基200 mL分別倒入4個(gè)錐形瓶中,挑取單菌在錐形瓶中培養(yǎng),在37 ℃,200 r/min的恒溫?fù)u床培養(yǎng)5 h,平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)法[13],測(cè)定菌濃度達(dá)2.0×106 CFU/mL以上;培養(yǎng)完成后分別加入最小抑菌濃度和最小殺菌濃度的水質(zhì)改良滅菌劑D7,測(cè)定1 h、2 h、4 h、8 h、16 h、24 h的吸光度(OD值),計(jì)算細(xì)菌濃度。

    1.2.8 D7在不同溫度下的抑菌效果試驗(yàn) 參考不同養(yǎng)殖對(duì)象的適宜溫度,探究不同溫度下,D7對(duì)主要致病菌的殺滅效果。選取北方常見(jiàn)養(yǎng)殖對(duì)象大菱鲆、凡納濱對(duì)蝦的最適生長(zhǎng)溫度(18 ℃、28 ℃)以及4種致病菌的最適生長(zhǎng)溫度(35 ℃)進(jìn)行試驗(yàn),試驗(yàn)步驟參照1.2.7試驗(yàn),最后測(cè)定8 h的吸光度(OD值)。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)使用IBM SPSS Statistics 26分析軟件,采用單因素方差分析(one-way ANOVA),試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。單因素方差分析(P<0.05)顯著性差異時(shí),再采用Duncans進(jìn)行多重比較分析。

    2 試驗(yàn)結(jié)果

    2.1 D7對(duì)4種對(duì)蝦致病菌抑制作用的對(duì)比

    在細(xì)菌培養(yǎng)的最適溫度35 ℃條件下,D7原液對(duì)四種對(duì)蝦致病菌有不同程度的抑制作用,見(jiàn)表1。其中,哈維氏弧菌對(duì)D7高度敏感,溶藻弧菌、副溶血弧菌對(duì)D7中度敏感,無(wú)乳鏈球菌對(duì)D7低度敏感。

    2.2 最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)的確定

    根據(jù)最小抑菌濃度試驗(yàn)顯示,當(dāng)培養(yǎng)基中D7濃度達(dá)到50.00 mg/L時(shí),4種對(duì)蝦致病菌的生長(zhǎng)均明顯受到抑制;由表2可知,在35 ℃條件下,四種對(duì)蝦致病菌的濃度均在第4組后無(wú)顯著變化,且與對(duì)照組無(wú)顯著差異,即D7對(duì)哈維氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度均為50.00 mg/L。

    2.3 D7的抑菌最佳作用時(shí)間

    50.00 mg/L濃度D7對(duì)4種對(duì)蝦致病菌的有效作用時(shí)間見(jiàn)表3,副溶血弧菌濃度4 h后無(wú)顯著變化,故D7對(duì)副溶血弧菌的最佳作用時(shí)間為4 h;哈維氏弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌三種菌的濃度在8 h后無(wú)顯著性變化,所以D7對(duì)這3種菌的最佳作用時(shí)間為8 h。綜上所述,在使用D7(50.00 mg/L)8 h后對(duì)所有試驗(yàn)菌均有顯著性作用,所以D7對(duì)4種對(duì)蝦致病菌的最佳作用時(shí)間為8 h。

    2.4 D7在不同溫度下的抑菌效果試驗(yàn)

    在3種不同溫度下,D7(50.00 mg/L)對(duì)四種對(duì)蝦致病菌的抑菌效果無(wú)顯著性差異。見(jiàn)表4。

    3 討論

    通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果可知:在35 ℃條件下,哈維氏弧菌對(duì)D7的敏感程度為高度敏感;溶藻弧菌、副溶血弧菌對(duì)D7的敏感程度為中度敏感;無(wú)乳鏈球菌對(duì)D7的敏感程度為低度敏感。劉志軒等[14]、姚剛等[15]在研究中發(fā)現(xiàn),弧菌相較于其他對(duì)蝦致病菌對(duì)廣譜性殺菌劑的耐受程度較弱,這或許與這幾種弧菌的適應(yīng)機(jī)制和存活策略存在差異而導(dǎo)致藥物的有效性不同相關(guān),其中的相關(guān)作用原理還有待今后的進(jìn)一步研究。而無(wú)乳鏈球菌對(duì)D7的敏感程度較低,這可能與無(wú)乳鏈球菌的耐藥性較強(qiáng)有關(guān)。細(xì)菌生物膜指的是存在于細(xì)菌表面,使細(xì)菌可以依附于其他物質(zhì)或者使細(xì)菌之間可以相互粘連的特殊細(xì)菌結(jié)構(gòu)[16],細(xì)菌生物被膜結(jié)構(gòu)物質(zhì)中含有藻酸鹽多糖,能夠保護(hù)細(xì)菌不受其他理化因子的影響,有研究表明細(xì)菌生物被膜與細(xì)菌耐藥性存在密切的聯(lián)系,細(xì)菌的耐藥性和免疫逃逸性均與該生物結(jié)構(gòu)有關(guān)[17]。丁浩[18]研究發(fā)現(xiàn),無(wú)乳鏈球菌對(duì)藥物敏感度較低,可能與無(wú)乳鏈球菌生物被膜有關(guān)。相關(guān)研究也表明,近年來(lái)由于水產(chǎn)行業(yè)抗生素類藥物的濫用,使無(wú)乳鏈球菌的耐藥性逐漸上升[19-20]。梁靜真等[21]研究指出,無(wú)乳鏈球菌對(duì)紅霉素和四環(huán)素仍較為敏感,但對(duì)硫酸新霉素和磺胺二甲嘧啶已產(chǎn)生了耐藥性,因此,使用非抗生素類藥物殺滅無(wú)乳鏈球菌對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖的影響具有長(zhǎng)遠(yuǎn)意義。

    D7對(duì)哈維氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度均為50.00 mg/L;D7對(duì)副溶血弧菌的最佳作用時(shí)間為4 h,D7對(duì)哈維氏弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌的最佳作用時(shí)間為8 h。在實(shí)際生產(chǎn)中,應(yīng)綜合考慮養(yǎng)殖水體中有害菌殺滅程度最大化及時(shí)間成本。在本試驗(yàn)條件下,水質(zhì)改良滅菌劑D7對(duì)4種常見(jiàn)對(duì)蝦致病菌具有一定的殺滅抑制效果,最佳作用時(shí)間為8 h;在正常養(yǎng)殖環(huán)境溫度下,不同溫度對(duì)D7滅菌效果無(wú)顯著影響。D7的殺菌有效成分有過(guò)氧化氫、苯扎氯銨等,兩成分間具有一定的協(xié)同作用。李子霞等[22]研究了過(guò)氧化氫分別與戊二醛、聚六亞甲基雙胍、苯扎溴銨組成的復(fù)方消毒劑對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的作用,結(jié)果顯示,三組混合殺菌劑在20 min內(nèi)對(duì)試驗(yàn)對(duì)象具有良好的殺滅效果,與單方過(guò)氧化氫的殺菌效果相比較,明顯較優(yōu)。蔡慧玲等[23]研究表明,以過(guò)氧化氫、苯扎氯銨和起泡劑三元包裝的混合即用型消毒液,其原液作用20 min對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、溶藻弧菌和脊髓灰質(zhì)炎病毒Ⅰ型疫苗株的殺滅效果均符合規(guī)范的消毒要求,這些研究與本試驗(yàn)得到的結(jié)果相一致,表明D7因主要成分間的協(xié)同作用而有較好的殺菌效果。

    通過(guò)對(duì)水質(zhì)改良滅菌劑D7的殺菌效果的研究表明,該水質(zhì)改良滅菌劑在較低濃度下可快速殺滅細(xì)菌繁殖體等,使用方便,性能穩(wěn)定,配方符合環(huán)保要求,且便于儲(chǔ)存和運(yùn)輸,具有一定的發(fā)展前景。目前水質(zhì)改良滅菌劑D7在對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的具體使用場(chǎng)景和方法,還有待進(jìn)一步探索和研究。

    參考文獻(xiàn):

    [1]

    WANG R, NORASAK-NOR K, DAYNA H, et al.Effectiveness of Sanitizer D7TM against Escherichia coli O157:H7 and Salmonella biofilms[EB/OL].(2017-3-23)[2021-10-11].https://www.ars.usda.gov/research/publications/publication/?seqNo115=337624.

    [2] De SCHRYVER P,DEFOIRDT T,SORGELOOS P.Early mortality syndrome outbreaks: A microbial management issue in shrimp farming?[J].PLoS Pathogens,2014,10(4):1-2.

    [3] WANG D G.Rapid detection of Mycobacterium tuberculosis complex by loop-mediated isothermal amplification combined with chemosensor[J].Advanced Materials Research,2013,749:449-452.

    [4] 高曉華.水產(chǎn)用聚維酮碘的安全性評(píng)價(jià)及其殺菌效果研究[D].上海:上海海洋大學(xué),2013.

    [5] 梁艷,郭冉,邢澤宇,等.關(guān)于唐山地區(qū)南美白對(duì)蝦淡水養(yǎng)殖中弧菌的探討[J].河北漁業(yè),2018(4):27-28.

    [6] 蔡完其,孫佩芳,劉至治.中華鱉愛(ài)德華氏菌病病原和組織病理研究[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),1997,21(4):428-433.

    [7] 中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求:GB 4789.28-2013[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2013:11.

    [8] 吳芳媛,馮秋芳,林黎.食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基配制、滅菌及貯藏研究[J].食品安全導(dǎo)刊,2020(36):83.

    [9] 周霞霞,邱晶磊,楊廣,等.傳統(tǒng)培養(yǎng)法與熒光PCR法檢測(cè)弧菌的方法評(píng)價(jià)[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2021,12(4):1550-1556.

    [10] 趙廣英,申科敏,勵(lì)建榮.副溶血性弧菌增菌培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的改進(jìn)[J].水產(chǎn)科學(xué), 2010,29(3):137-140.

    [11] 陳坤才,余超,李迎月,等.水產(chǎn)品副溶血性弧菌污染監(jiān)測(cè)結(jié)果的比較分析[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2013,4(2):509-514.

    [12] 劉婷,曹進(jìn),丁宏.花椒籽提取物對(duì)副溶血弧菌抑菌作用的研究[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2017,8(2):634-638.

    [13] 時(shí)振東,杜洪生,蘇延友.生姜、花椒及黃傘提取物抑菌效果評(píng)價(jià)[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2009,25(1):73-75.

    [14] 劉志軒,王印庚,張正,等.幾種消毒劑對(duì)凡納濱對(duì)蝦致病性弧菌的殺滅作用[J].漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展,2018,39(3):112-119.

    [15] 姚剛,覃映雪,鄒文政,等.致病性溶藻弧菌生物膜形成特性研究[J].水產(chǎn)科學(xué),2012,31(2):73-78.

    [16] COSTERTOA J W.Introduction to biofilm[J].Int Antimicrob Agents,1999,11(3-4):217-221.

    [17] RAMOS C, LICHT T R,STERNBERG C,et al.Monitoring bacterial growth activity in biofilms from laboratory flow chambers, plant rhizosphere, and animal intestine[J].METH ENZYMOLOGY,2001,337:21-42.

    [18] 丁浩.羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌病防治藥物的篩選[D].上海:上海海洋大學(xué),2018.

    [19] 黃艷華,馬沙,韓書(shū)煜,等.2011~2016年廣西羅非魚(yú)源無(wú)乳鏈球菌的耐藥譜型分析[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2018,49(5):1023-1031.

    [20] 張行,李新圃,楊峰,等.無(wú)乳鏈球菌研究進(jìn)展[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),2020,40(4):864-872.

    [21] 梁靜真,黃立春,韋慕蘭,等.廣西羅非魚(yú)源無(wú)乳鏈球菌耐藥性及其四環(huán)素耐藥基因檢測(cè)[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2018,49(10):2077-2086.

    [22] 李子霞,辛換換,徐鳳,等.三種復(fù)方過(guò)氧化氫消毒劑殺菌效果的比較[J].中國(guó)消毒學(xué)雜志,2010,27(5):535-536+539.

    [23] 蔡慧玲,裴景超,胡佳,等.一種新型復(fù)方過(guò)氧化氫消毒劑的消毒效果和毒性觀察[J].中國(guó)消毒學(xué)雜志,2020,37(3):161-163.

    The effect of water quality improvement sterilizing agent D7 on four pathogenic bacteria of shrimp

    GAO Jiapeng,GUO Ran,YU Zhiwen,HE Libin,XIA Hui,ZHU Yuzheng

    (Marine College,Hebei Agricultural University,Qinhuangdao,Hebei 066003)

    Abstract:In order to study the inhibitory and killing effects of water quality improvement sterilizing agent D7 on common pathogenic bacteria of shrimp, the inhibitory effect of D7 on the 4 common shrimp pathogens Vibrio harveyi,Vibrio parahaemolyticus,Vibrio alginolyticus and Streptococcus agalactiae, the best action time and the bactericidal effect of D7 under different temperature were studied through inhibition zone experiment and ecotoxicology method. The results showed that at 35 ℃, Vibrio harveyi was highly sensitive to D7, Vibrio alginolyticus and Vibrio parahaemolyticus were moderately sensitive to D7, and Streptococcus agalactiae was low sensitive to D7. The minimum inhibitory concentration and the minimum bactericidal concentration to the 4 species of bacteria were all 50.00 mg/L.The best effect time of D7 on Vibrio parahaemolyticus was 4 h, and the best effect time on Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus and Streptococcus agalactiae was 8 h.There was no significant difference of killing effects of D7 to the 4 species of bacteria under the temperature of 18, 28, and 35 ℃(P>0.05). It can be concluded that under the conditions of this experiment, D7 had a certain killing and inhibitory effect on the 4 common shrimp pathogens, the best action time was 8 h, and the sterilization effect did not change with the change of temperature.

    Key words:water quality improvement sterilizing agent; D7;shrimp; pathogenic bacteria; antibacterial effect

    (收稿日期:2021-08-20;修回日期:2021-10-12)

    猜你喜歡
    抑菌作用對(duì)蝦致病菌
    對(duì)蝦養(yǎng)殖弱勢(shì)群體的管理
    對(duì)蝦吃料慢的原因分析和處理
    對(duì)蝦免疫增強(qiáng)劑研究進(jìn)展
    對(duì)蝦常見(jiàn)環(huán)境性疾病的防治
    SSEL結(jié)合多重PCR同時(shí)快速檢測(cè)生菜中4種食源性致病菌
    食品中致病菌快速檢測(cè)方法的探討
    黃牛毛蘚水提液對(duì)冬棗輪紋病致病菌抑制效應(yīng)的初步研究
    金銀花葉總黃酮抑菌作用研究
    科技視界(2015年30期)2015-10-22 10:54:16
    雙齒圍沙蠶浸膏生物活性的研究
    百靈安神片微生物限度檢查方法驗(yàn)證
    成人特级av手机在线观看| 91在线观看av| 午夜视频精品福利| 丰满人妻一区二区三区视频av | 中文字幕人妻丝袜一区二区| 桃红色精品国产亚洲av| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 一本综合久久免费| 大型黄色视频在线免费观看| 麻豆国产97在线/欧美| 天天躁日日操中文字幕| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 久久精品人妻少妇| a级毛片a级免费在线| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产熟女xx| 男人舔奶头视频| 国产一区二区激情短视频| 精品欧美国产一区二区三| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 欧美日韩精品网址| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 偷拍熟女少妇极品色| 国产麻豆成人av免费视频| 脱女人内裤的视频| 精品电影一区二区在线| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 国产成人欧美在线观看| 国产免费男女视频| 亚洲国产看品久久| 欧美3d第一页| 曰老女人黄片| 国产精品一及| 精品欧美国产一区二区三| 在线播放国产精品三级| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 精品国产三级普通话版| 国产成人影院久久av| 日本在线视频免费播放| 成年女人看的毛片在线观看| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 久久国产精品人妻蜜桃| 久久精品91蜜桃| 免费电影在线观看免费观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 国产 一区 欧美 日韩| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 国产一区二区在线观看日韩 | 男插女下体视频免费在线播放| 伦理电影免费视频| 身体一侧抽搐| 90打野战视频偷拍视频| 亚洲一区高清亚洲精品| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 一级a爱片免费观看的视频| 我要搜黄色片| 精品久久久久久成人av| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 丰满人妻一区二区三区视频av | e午夜精品久久久久久久| 看黄色毛片网站| 好男人电影高清在线观看| 国产一区二区激情短视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 波多野结衣巨乳人妻| 999久久久国产精品视频| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 日韩免费av在线播放| АⅤ资源中文在线天堂| 熟女人妻精品中文字幕| 国产探花在线观看一区二区| 国产欧美日韩精品一区二区| 69av精品久久久久久| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 中文字幕久久专区| 一级毛片精品| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 99国产极品粉嫩在线观看| 成在线人永久免费视频| 特大巨黑吊av在线直播| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲专区中文字幕在线| 国产91精品成人一区二区三区| 99精品欧美一区二区三区四区| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 69av精品久久久久久| 成人av在线播放网站| 午夜成年电影在线免费观看| 女警被强在线播放| 91久久精品国产一区二区成人 | 欧美成人性av电影在线观看| 99久久国产精品久久久| 日本黄色片子视频| 窝窝影院91人妻| 一级毛片女人18水好多| 久久久久免费精品人妻一区二区| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 91字幕亚洲| 宅男免费午夜| 91在线精品国自产拍蜜月 | 男女之事视频高清在线观看| 成人无遮挡网站| av女优亚洲男人天堂 | 午夜免费成人在线视频| 国产精品久久久人人做人人爽| 天堂√8在线中文| av视频在线观看入口| 男人和女人高潮做爰伦理| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产激情偷乱视频一区二区| 又黄又爽又免费观看的视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲熟妇熟女久久| 亚洲五月天丁香| 亚洲欧美激情综合另类| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产免费男女视频| 色在线成人网| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲人与动物交配视频| 国产精品国产高清国产av| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲五月天丁香| 精品久久蜜臀av无| 亚洲在线观看片| 国内精品一区二区在线观看| 国产极品精品免费视频能看的| 婷婷精品国产亚洲av在线| 美女黄网站色视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| av女优亚洲男人天堂 | 宅男免费午夜| 我要搜黄色片| 又大又爽又粗| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久久久久久久久黄片| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 无人区码免费观看不卡| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 国产探花在线观看一区二区| 日韩大尺度精品在线看网址| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 精品电影一区二区在线| 丰满人妻一区二区三区视频av | ponron亚洲| 丰满人妻一区二区三区视频av | 十八禁网站免费在线| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 成年免费大片在线观看| 国产精品 欧美亚洲| 国产成人av激情在线播放| netflix在线观看网站| 国产午夜精品论理片| 亚洲专区中文字幕在线| 最近最新免费中文字幕在线| 亚洲午夜理论影院| 91麻豆精品激情在线观看国产| 麻豆国产av国片精品| 国产成+人综合+亚洲专区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲av熟女| 一边摸一边抽搐一进一小说| 母亲3免费完整高清在线观看| 亚洲欧美激情综合另类| 亚洲av成人精品一区久久| 欧美日韩综合久久久久久 | 18禁观看日本| 亚洲美女视频黄频| 69av精品久久久久久| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久精品国产综合久久久| 两个人的视频大全免费| 99久久精品热视频| 制服丝袜大香蕉在线| 久99久视频精品免费| 亚洲av成人精品一区久久| 亚洲国产高清在线一区二区三| 在线观看一区二区三区| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲人成电影免费在线| xxx96com| 久久精品91蜜桃| 久久精品国产清高在天天线| 国产精品 国内视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 特级一级黄色大片| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 美女cb高潮喷水在线观看 | 亚洲激情在线av| bbb黄色大片| 欧美日韩精品网址| 我要搜黄色片| 麻豆一二三区av精品| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 精品无人区乱码1区二区| 免费av不卡在线播放| 成年女人永久免费观看视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产黄片美女视频| 99在线人妻在线中文字幕| 久久久国产成人精品二区| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 精品电影一区二区在线| 日本 欧美在线| 麻豆一二三区av精品| 日本 av在线| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 视频区欧美日本亚洲| 久久伊人香网站| 亚洲专区中文字幕在线| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产精品亚洲美女久久久| 亚洲av美国av| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 午夜福利高清视频| 中亚洲国语对白在线视频| 日韩欧美在线乱码| 99在线人妻在线中文字幕| 美女扒开内裤让男人捅视频| 亚洲美女黄片视频| 久久这里只有精品19| 免费av不卡在线播放| 成在线人永久免费视频| 国产1区2区3区精品| 男女下面进入的视频免费午夜| 成人av在线播放网站| 国产乱人伦免费视频| 精品久久久久久久毛片微露脸| 天堂影院成人在线观看| 成人三级黄色视频| 在线看三级毛片| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 国产伦人伦偷精品视频| 中文字幕av在线有码专区| 国产免费av片在线观看野外av| 亚洲欧美激情综合另类| 日韩免费av在线播放| 免费看十八禁软件| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 久久久国产精品麻豆| av片东京热男人的天堂| 看片在线看免费视频| 久久久久性生活片| 午夜日韩欧美国产| 国产男靠女视频免费网站| 免费看美女性在线毛片视频| 最新在线观看一区二区三区| 亚洲午夜理论影院| 最好的美女福利视频网| 叶爱在线成人免费视频播放| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 最好的美女福利视频网| 搡老妇女老女人老熟妇| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲色图av天堂| 国产精品一及| 久久久国产成人免费| 国产亚洲精品av在线| 五月伊人婷婷丁香| 性色avwww在线观看| 久久久精品大字幕| 精品电影一区二区在线| 制服丝袜大香蕉在线| 国产精品 欧美亚洲| 国产一级毛片七仙女欲春2| 国产黄a三级三级三级人| 桃色一区二区三区在线观看| 日韩欧美 国产精品| xxx96com| 在线观看一区二区三区| 色综合欧美亚洲国产小说| 久久国产精品影院| 嫩草影院入口| 激情在线观看视频在线高清| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 成人高潮视频无遮挡免费网站| or卡值多少钱| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 久久精品影院6| 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产亚洲欧美98| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 香蕉国产在线看| 一级黄色大片毛片| 母亲3免费完整高清在线观看| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产激情欧美一区二区| 国产欧美日韩精品亚洲av| 在线播放国产精品三级| 色综合亚洲欧美另类图片| 老司机福利观看| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 免费观看的影片在线观看| 亚洲最大成人中文| 最近最新中文字幕大全免费视频| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 九色成人免费人妻av| 久久国产精品人妻蜜桃| 亚洲av美国av| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产精品,欧美在线| 午夜成年电影在线免费观看| 婷婷六月久久综合丁香| 欧美极品一区二区三区四区| 午夜影院日韩av| 亚洲成人久久爱视频| 老汉色∧v一级毛片| 久久久久国内视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 久久亚洲真实| 激情在线观看视频在线高清| 免费看美女性在线毛片视频| 91九色精品人成在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 可以在线观看毛片的网站| 亚洲18禁久久av| 亚洲天堂国产精品一区在线| 国产私拍福利视频在线观看| xxx96com| 免费高清视频大片| 制服人妻中文乱码| 亚洲精品色激情综合| 色尼玛亚洲综合影院| avwww免费| 成人亚洲精品av一区二区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 老司机午夜十八禁免费视频| 男人舔奶头视频| 国产美女午夜福利| 好男人电影高清在线观看| 可以在线观看的亚洲视频| 国产一区二区三区视频了| 久久性视频一级片| 两个人的视频大全免费| 1024手机看黄色片| 久久精品91蜜桃| 午夜福利视频1000在线观看| 欧美日韩黄片免| 两性夫妻黄色片| 午夜两性在线视频| 精品欧美国产一区二区三| 动漫黄色视频在线观看| 一本一本综合久久| 国产午夜福利久久久久久| 午夜福利视频1000在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 香蕉国产在线看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 久久九九热精品免费| 熟女电影av网| 后天国语完整版免费观看| 一区二区三区激情视频| 亚洲成av人片免费观看| 我的老师免费观看完整版| 国产欧美日韩一区二区精品| 91字幕亚洲| 无人区码免费观看不卡| 久久人人精品亚洲av| 久久久久性生活片| 成人三级黄色视频| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 99re在线观看精品视频| 高清在线国产一区| 男女床上黄色一级片免费看| 99久久精品一区二区三区| 国产精品九九99| 99国产精品99久久久久| 极品教师在线免费播放| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 日本免费a在线| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 成人午夜高清在线视频| 一级黄色大片毛片| tocl精华| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲男人的天堂狠狠| 国产精品av视频在线免费观看| www.精华液| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产精品 欧美亚洲| 91麻豆精品激情在线观看国产| 最近最新中文字幕大全电影3| 亚洲精品色激情综合| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲av电影在线进入| 在线观看舔阴道视频| 在线观看美女被高潮喷水网站 | 男人和女人高潮做爰伦理| 亚洲成人久久性| 亚洲成人久久爱视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产成人欧美在线观看| 国产高清激情床上av| 伦理电影免费视频| 99在线人妻在线中文字幕| 成人精品一区二区免费| 香蕉丝袜av| 亚洲最大成人中文| 亚洲精品久久国产高清桃花| 色哟哟哟哟哟哟| 成人性生交大片免费视频hd| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 久久这里只有精品中国| 久久人妻av系列| 变态另类丝袜制服| 欧美日韩国产亚洲二区| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲色图av天堂| 高清毛片免费观看视频网站| 黄色 视频免费看| 黄色片一级片一级黄色片| 人人妻人人澡欧美一区二区| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久精品国产清高在天天线| 美女被艹到高潮喷水动态| 午夜福利免费观看在线| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产精品久久视频播放| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 夜夜夜夜夜久久久久| 少妇丰满av| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 午夜福利在线在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 欧美日韩综合久久久久久 | 免费高清视频大片| 国产综合懂色| 亚洲美女视频黄频| 老司机午夜福利在线观看视频| 久久久久亚洲av毛片大全| 一级作爱视频免费观看| 国产精品久久久久久久电影 | 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美极品一区二区三区四区| 午夜影院日韩av| 精品无人区乱码1区二区| 国产乱人视频| 真人一进一出gif抽搐免费| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 精品无人区乱码1区二区| 啦啦啦免费观看视频1| 天堂影院成人在线观看| 色综合站精品国产| 国内精品一区二区在线观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美一区二区精品小视频在线| 在线看三级毛片| 在线观看一区二区三区| 精品国产乱子伦一区二区三区| 午夜福利免费观看在线| 白带黄色成豆腐渣| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲欧美日韩无卡精品| 美女扒开内裤让男人捅视频| 免费高清视频大片| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 老司机午夜福利在线观看视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 99热精品在线国产| 18禁美女被吸乳视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 可以在线观看的亚洲视频| 美女大奶头视频| 中文字幕最新亚洲高清| 露出奶头的视频| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 嫁个100分男人电影在线观看| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站 | 国产高清视频在线观看网站| 欧美乱码精品一区二区三区| 中国美女看黄片| 欧美一区二区精品小视频在线| 亚洲精品456在线播放app | 香蕉久久夜色| 十八禁人妻一区二区| 此物有八面人人有两片| 国产激情久久老熟女| 天堂动漫精品| 国产免费男女视频| 国产亚洲精品久久久com| 精品人妻1区二区| 99热这里只有精品一区 | 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久久国产精品麻豆| 白带黄色成豆腐渣| 亚洲人成电影免费在线| avwww免费| 日日夜夜操网爽| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 黄色成人免费大全| 美女 人体艺术 gogo| 亚洲美女视频黄频| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 成人午夜高清在线视频| 悠悠久久av| 婷婷丁香在线五月| 天堂√8在线中文| 国产精品乱码一区二三区的特点| 久久午夜亚洲精品久久| 国产精品久久久av美女十八| 久久久精品大字幕| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 三级国产精品欧美在线观看 | 欧美黑人欧美精品刺激| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 免费观看的影片在线观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 久久午夜综合久久蜜桃| 久久中文字幕人妻熟女| 欧美三级亚洲精品| 亚洲精品456在线播放app | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国产精品久久视频播放| 午夜免费成人在线视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 91av网站免费观看| 色哟哟哟哟哟哟| 亚洲欧美精品综合久久99| 老汉色av国产亚洲站长工具| 757午夜福利合集在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲国产看品久久| 国产高清三级在线| 黄频高清免费视频| 免费在线观看影片大全网站| 成熟少妇高潮喷水视频| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| h日本视频在线播放| 美女 人体艺术 gogo| 国产精品久久久久久精品电影| 国产亚洲精品综合一区在线观看| 性色avwww在线观看| 国产野战对白在线观看| 夜夜躁狠狠躁天天躁| av视频在线观看入口| 日韩免费av在线播放| 日本在线视频免费播放| 嫩草影院精品99| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 少妇的丰满在线观看| АⅤ资源中文在线天堂| 老司机在亚洲福利影院| 国内精品久久久久久久电影| 18禁国产床啪视频网站| 欧美乱色亚洲激情| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国内揄拍国产精品人妻在线| 在线国产一区二区在线| 一本久久中文字幕| 精品久久久久久,| 国产探花在线观看一区二区| 男女视频在线观看网站免费| www.自偷自拍.com| 九色国产91popny在线| 国产黄色小视频在线观看| 身体一侧抽搐| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 天天添夜夜摸| 国产一区二区三区视频了| 亚洲av电影不卡..在线观看| 九九热线精品视视频播放| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产成人欧美在线观看| 久久香蕉国产精品| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 美女高潮的动态| 99在线人妻在线中文字幕| 免费av不卡在线播放| 国产97色在线日韩免费| 国产av不卡久久| 一二三四在线观看免费中文在| 国产97色在线日韩免费| 日韩三级视频一区二区三区| 在线a可以看的网站| 免费在线观看成人毛片| 精品乱码久久久久久99久播| 亚洲国产精品合色在线| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产成年人精品一区二区| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| www.999成人在线观看| 激情在线观看视频在线高清| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| www.999成人在线观看| 黄色日韩在线| 国产成人欧美在线观看| 欧美一区二区国产精品久久精品| 国产精品久久久久久久电影 | h日本视频在线播放| 国产97色在线日韩免费| 床上黄色一级片| 国产亚洲av高清不卡| 老司机午夜福利在线观看视频| 视频区欧美日本亚洲| 99视频精品全部免费 在线 | 亚洲精品美女久久久久99蜜臀| 黄色日韩在线|