• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    水質(zhì)改良滅菌劑D7對(duì)四種對(duì)蝦致病菌的作用

    2021-11-27 22:18:57高佳朋郭冉于志文何立彬夏輝朱昱錚
    河北漁業(yè) 2021年11期
    關(guān)鍵詞:抑菌作用對(duì)蝦致病菌

    高佳朋 郭冉 于志文 何立彬 夏輝 朱昱錚

    摘 要:為研究水質(zhì)改良滅菌劑D7對(duì)常見(jiàn)對(duì)蝦致病菌的抑制及殺滅效果,通過(guò)抑菌圈實(shí)驗(yàn)及生態(tài)毒理學(xué)方法研究D7對(duì)哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)等4種常見(jiàn)對(duì)蝦致病菌的抑制效果、最佳作用時(shí)間及不同溫度對(duì)D7殺菌作用的影響。結(jié)果顯示,在35 ℃條件下,哈維氏弧菌對(duì)D7高度敏感,溶藻弧菌、副溶血弧菌對(duì)D7中度敏感,無(wú)乳鏈球菌對(duì)D7低度敏感;D7對(duì)4種菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度均為50.00 mg/L;D7對(duì)副溶血弧菌的最佳作用時(shí)間為4 h,對(duì)哈維氏弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌的最佳作用時(shí)間為8 h;在18、28、35 ℃條件下,D7對(duì)4種對(duì)蝦致病菌的殺滅效果無(wú)顯著差異(P>0.05)??梢?jiàn)在本試驗(yàn)條件下,D7對(duì)4種常見(jiàn)對(duì)蝦致病菌具有一定的殺滅抑制效果,最佳作用時(shí)間為8 h,且殺菌效果不隨溫度的改變而變化。

    關(guān)鍵詞:水質(zhì)改良滅菌劑;D7;對(duì)蝦;致病菌;抑菌作用

    D7是一款新型的高效消毒液,由美國(guó)專業(yè)消毒劑生產(chǎn)商Decon7 Systems與美國(guó)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)室桑迪亞合作研制。研究表明D7對(duì)部分有毒有害化學(xué)品有中和、抑制效果,對(duì)病毒、部分細(xì)菌有抑制及殺滅效果[1]。此前D7廣泛應(yīng)用于食品車間消毒、畜牧車間消毒等,但并未在水產(chǎn)相關(guān)領(lǐng)域使用。D7殺菌的主要有效作用成分包含過(guò)氧化氫,過(guò)氧化氫是一種化學(xué)性質(zhì)極為活潑的強(qiáng)氧化劑,在環(huán)境中容易分解為氧氣和水,殘留較小,對(duì)環(huán)境影響較小,是一種較為清潔的消毒劑。近年來(lái)的研究表明,過(guò)氧化氫可與其他成分如季銨鹽、金屬離子、表面活性劑、無(wú)機(jī)碘化物、等離子體等產(chǎn)生協(xié)同殺菌作用,與單獨(dú)過(guò)氧化氫為殺菌成分的殺菌劑相比效果更佳[2-4]。

    近年來(lái),伴隨對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)的不斷擴(kuò)大,其面臨的環(huán)境問(wèn)題也日益突出,養(yǎng)殖規(guī)??焖僭鲩L(zhǎng),水體富營(yíng)養(yǎng)化加劇,致使養(yǎng)殖水體中有害藻菌滋生,有害細(xì)菌引發(fā)的對(duì)蝦細(xì)菌性疾病更是成為導(dǎo)致養(yǎng)殖失敗的主要病害之一[5]。在對(duì)蝦養(yǎng)殖中常見(jiàn)的對(duì)蝦弧菌病、腸炎病、爛鰓病、肝胰腺壞死病等疫病均是由細(xì)菌滋生感染導(dǎo)致的,而在眾多的致病菌中,又以弧菌、鏈球菌、愛(ài)德華氏菌等幾類病菌最為常見(jiàn)和難以根治[6]。

    本研究以哈維氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌等4種常見(jiàn)的對(duì)蝦致病菌為研究對(duì)象,探究水質(zhì)改良劑D7對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖有害病菌的抑制及殺滅效果,提供水質(zhì)改良劑D7在水產(chǎn)相關(guān)領(lǐng)域應(yīng)用的數(shù)據(jù)支撐,為今后水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌性疾病的防治提供新的思路和方法。

    1 材料和方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    試驗(yàn)所用水質(zhì)改良劑D7購(gòu)自D7生物科技有限公司,由美國(guó)專業(yè)消毒劑生產(chǎn)商Decon7 Systems制造生產(chǎn)。D7產(chǎn)品有效成分包括:第一部分(以下稱為“P1”)烷基二甲基芐基氯化銨和表面活性劑的混合物、第二部分(以下稱為“P2”)過(guò)氧化氫(濃度7.98%)和第三部分(以下稱為“P3”)催化劑/增效劑。

    試驗(yàn)所用菌種哈維氏弧菌(Vibrio harveyi,MCCC1A13958)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus,MCCC1A07296)由中國(guó)海洋微生物菌種保藏管理中心提供;副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,ATCC17802)、無(wú)乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae,ATCC17802)由ATCC菌種保藏中心提供。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 D7原液及使用液的配制 配置D7原液時(shí)先將D7試劑的P2、P3充分混勻,靜置反應(yīng)5 min后,加入P1,使用玻璃棒緩慢攪拌均勻,避免快速攪拌產(chǎn)生大量泡沫,配好后的D7原液可常溫保存8 h有效,需現(xiàn)用現(xiàn)配。原液配制好后可按所需比例稀釋得到D7使用液,本試驗(yàn)中加1 mL D7原液至1 L蒸餾水中,制成D7使用液。

    1.2.2 培養(yǎng)基及中和劑的配制 根據(jù)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[7],哈維氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌采用TCBS培養(yǎng)基培養(yǎng);無(wú)乳鏈球菌采用血瓊脂平板培養(yǎng)基培養(yǎng)。菌液擴(kuò)培菌使用LB培養(yǎng)基。

    TCBS培養(yǎng)基配制時(shí),將TCBS培養(yǎng)基粉劑加熱溶化,補(bǔ)水到所需的總體積。按照文獻(xiàn)[8]方法進(jìn)行配制、分裝、滅菌操作。滅菌完成后,將培養(yǎng)基冷卻至50 ℃左右時(shí)倒入平板當(dāng)中,待平板凝固后,放置于冰箱中待用[9]。

    LB培養(yǎng)基配制時(shí),按照培養(yǎng)基的配方比例在1 L的蒸餾水中加入10 g蛋白胨、10 g氯化鈉、5 g酵母膏、3 g磷酸氫二鉀、2 g蔗糖,調(diào)整培養(yǎng)基pH值為7。配制好后的培養(yǎng)基分裝滅菌步驟與TCBS培養(yǎng)基相同。

    血瓊脂平板購(gòu)自北京路橋生物技術(shù)有限責(zé)任公司,主要成分為蛋白胨、淀粉、氯化鈉、牛羊血、瓊脂等原料。

    中和劑使用PBS中和劑,由2 g/L硫代硫酸鈉+3 g/L卵磷脂+10 g/L氯化鈉+20 g/L吐溫80組成。

    1.2.3 菌種培養(yǎng) 因購(gòu)買的菌種為菌種平板,首先對(duì)4種菌種進(jìn)行二次擴(kuò)培,取副溶血弧菌敏感菌株,在TCBS培養(yǎng)基上進(jìn)行劃線分離,培養(yǎng)12 h得到單菌落。查閱相關(guān)文獻(xiàn)后[10],以LB液體培養(yǎng)基代替3%氯化鈉蛋白胨水,接種環(huán)挑取單菌落,接種到LB液體培養(yǎng)基上,在37 ℃,200 r/min的恒溫?fù)u床培養(yǎng)5 h,制備菌液后,用平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)法[11]測(cè)定出相應(yīng)細(xì)菌濃度,以便計(jì)算后續(xù)NaCl添加量;取5 mL菌液于離心管中,5 000 r/min離心2 min,棄上清,沉淀中加入5 mL 0.85% NaCl,使細(xì)菌懸浮,重復(fù)上述離心懸浮操作2次,得到最終菌懸液。將上述菌懸液與0.5的麥?zhǔn)媳葷峁苓M(jìn)行比對(duì),用0.85% NaCl進(jìn)行濃度調(diào)整得到麥?zhǔn)蠞舛?.5的NaCl菌液,吸出該菌液1 400 μL,倒入210 mL LB培養(yǎng)基中,用于最小抑菌濃度(MIC)測(cè)定、最小殺菌濃度(MBC)的測(cè)定和抑菌圈試驗(yàn)。

    1.2.4 抑菌圈試驗(yàn)

    1.2.4.1 稀釋菌液 取搖菌管,用移液槍吸取10 mL LB液體培養(yǎng)基,加哈維氏弧菌菌液100 μL,至搖菌管中,搖勻。副溶血弧菌、無(wú)乳鏈球菌、溶藻弧菌均同上處理。

    1.2.4.2 制作含藥紙片 取出若干滅菌好的紙片,用移液槍吸取D7原液10 μL至紙片上,晾干備用。

    1.2.4.3 涂板 取100 μL稀釋好的菌液于TCBS瓊脂板(無(wú)乳鏈球菌為血瓊脂平板),用涂布棒涂勻。

    1.2.4.4 貼放紙片 將含藥紙片有藥液的一面貼放于涂滿菌的瓊脂板上,于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)16~24 h,取出觀察結(jié)果。試驗(yàn)重復(fù)3次,分別記為1#-3#。

    1.2.4.5 抑菌效果評(píng)定 水質(zhì)改良劑D7抑菌效果評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)為:若抑菌圈直徑大于20 mm,為高度敏感;若抑菌圈直徑在10~20 mm,為中度敏感;若抑菌圈直徑小于10 mm,為低度敏感。

    1.2.5 最小抑菌濃度試驗(yàn) 取13支滅菌后的試管并依次編號(hào)(1-13號(hào)),將準(zhǔn)備好的LB液體培養(yǎng)基逐個(gè)加入試管中,1號(hào)試管加8 mL,其余每支試管加入5 mL培養(yǎng)基。1號(hào)試管加入配制好的D7使用液2 mL,混勻;從1號(hào)管取5 mL混合液加入2號(hào)管,搖勻;如此依次倍比稀釋至11號(hào)管;最后從11號(hào)試管吸取5 mL棄去。此時(shí)1—12號(hào)管D7濃度分別為200.00、100.00、50.00、25.00、12.50、6.25、3.125、1.563、0.781、0.391、0.195、0 mg/L,12號(hào)管為不含D7的生長(zhǎng)對(duì)照。所有試管中加入中和劑5 mL,1—12號(hào)管中分別加入菌液2 mL,13號(hào)試管中加入2 mL? LB培養(yǎng)基并混勻,1-11號(hào)管以T1-T11表示,12號(hào)管為對(duì)照組,13號(hào)管為空白組。以37 ℃ 200 r/min搖床培養(yǎng)18~24 h,肉眼觀察菌體生長(zhǎng)情況,溶液最后變澄清的為最小抑菌濃度。

    1.2.6 最小殺菌濃度試驗(yàn) 按照上述的D7最小抑菌濃度為基礎(chǔ),重復(fù)上述試驗(yàn)步驟,稀釋后以對(duì)照組為基準(zhǔn)調(diào)零,測(cè)定菌液吸光度(OD值),計(jì)算細(xì)菌濃度。以肉眼觀察最為澄清且OD值接近于0的為最小殺菌濃度[12]。按照上述步驟測(cè)定1—12號(hào)管后,分別取12支管菌液在無(wú)菌的TCBS瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線接種(無(wú)乳鏈球菌接種于無(wú)菌的血瓊脂平板),以37 ℃恒溫培養(yǎng)20~24 h,以平板上無(wú)菌體生長(zhǎng)的D7濃度值標(biāo)定為最小殺菌濃度,以對(duì)比驗(yàn)證之前的最小殺菌濃度結(jié)果。培養(yǎng)試驗(yàn)分別重復(fù)3次。

    1.2.7 D7的抑菌最佳作用時(shí)間 以上述步驟得出的最小殺菌濃度進(jìn)行4種對(duì)蝦致病菌的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。首先將3種弧菌在TCBS培養(yǎng)基上進(jìn)行劃線分離,無(wú)乳鏈球菌在血瓊脂平板上進(jìn)行劃線分離,培養(yǎng)12 h得到單菌落,將配制好的LB培養(yǎng)基200 mL分別倒入4個(gè)錐形瓶中,挑取單菌在錐形瓶中培養(yǎng),在37 ℃,200 r/min的恒溫?fù)u床培養(yǎng)5 h,平板培養(yǎng)計(jì)數(shù)法[13],測(cè)定菌濃度達(dá)2.0×106 CFU/mL以上;培養(yǎng)完成后分別加入最小抑菌濃度和最小殺菌濃度的水質(zhì)改良滅菌劑D7,測(cè)定1 h、2 h、4 h、8 h、16 h、24 h的吸光度(OD值),計(jì)算細(xì)菌濃度。

    1.2.8 D7在不同溫度下的抑菌效果試驗(yàn) 參考不同養(yǎng)殖對(duì)象的適宜溫度,探究不同溫度下,D7對(duì)主要致病菌的殺滅效果。選取北方常見(jiàn)養(yǎng)殖對(duì)象大菱鲆、凡納濱對(duì)蝦的最適生長(zhǎng)溫度(18 ℃、28 ℃)以及4種致病菌的最適生長(zhǎng)溫度(35 ℃)進(jìn)行試驗(yàn),試驗(yàn)步驟參照1.2.7試驗(yàn),最后測(cè)定8 h的吸光度(OD值)。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)使用IBM SPSS Statistics 26分析軟件,采用單因素方差分析(one-way ANOVA),試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。單因素方差分析(P<0.05)顯著性差異時(shí),再采用Duncans進(jìn)行多重比較分析。

    2 試驗(yàn)結(jié)果

    2.1 D7對(duì)4種對(duì)蝦致病菌抑制作用的對(duì)比

    在細(xì)菌培養(yǎng)的最適溫度35 ℃條件下,D7原液對(duì)四種對(duì)蝦致病菌有不同程度的抑制作用,見(jiàn)表1。其中,哈維氏弧菌對(duì)D7高度敏感,溶藻弧菌、副溶血弧菌對(duì)D7中度敏感,無(wú)乳鏈球菌對(duì)D7低度敏感。

    2.2 最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)的確定

    根據(jù)最小抑菌濃度試驗(yàn)顯示,當(dāng)培養(yǎng)基中D7濃度達(dá)到50.00 mg/L時(shí),4種對(duì)蝦致病菌的生長(zhǎng)均明顯受到抑制;由表2可知,在35 ℃條件下,四種對(duì)蝦致病菌的濃度均在第4組后無(wú)顯著變化,且與對(duì)照組無(wú)顯著差異,即D7對(duì)哈維氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度均為50.00 mg/L。

    2.3 D7的抑菌最佳作用時(shí)間

    50.00 mg/L濃度D7對(duì)4種對(duì)蝦致病菌的有效作用時(shí)間見(jiàn)表3,副溶血弧菌濃度4 h后無(wú)顯著變化,故D7對(duì)副溶血弧菌的最佳作用時(shí)間為4 h;哈維氏弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌三種菌的濃度在8 h后無(wú)顯著性變化,所以D7對(duì)這3種菌的最佳作用時(shí)間為8 h。綜上所述,在使用D7(50.00 mg/L)8 h后對(duì)所有試驗(yàn)菌均有顯著性作用,所以D7對(duì)4種對(duì)蝦致病菌的最佳作用時(shí)間為8 h。

    2.4 D7在不同溫度下的抑菌效果試驗(yàn)

    在3種不同溫度下,D7(50.00 mg/L)對(duì)四種對(duì)蝦致病菌的抑菌效果無(wú)顯著性差異。見(jiàn)表4。

    3 討論

    通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果可知:在35 ℃條件下,哈維氏弧菌對(duì)D7的敏感程度為高度敏感;溶藻弧菌、副溶血弧菌對(duì)D7的敏感程度為中度敏感;無(wú)乳鏈球菌對(duì)D7的敏感程度為低度敏感。劉志軒等[14]、姚剛等[15]在研究中發(fā)現(xiàn),弧菌相較于其他對(duì)蝦致病菌對(duì)廣譜性殺菌劑的耐受程度較弱,這或許與這幾種弧菌的適應(yīng)機(jī)制和存活策略存在差異而導(dǎo)致藥物的有效性不同相關(guān),其中的相關(guān)作用原理還有待今后的進(jìn)一步研究。而無(wú)乳鏈球菌對(duì)D7的敏感程度較低,這可能與無(wú)乳鏈球菌的耐藥性較強(qiáng)有關(guān)。細(xì)菌生物膜指的是存在于細(xì)菌表面,使細(xì)菌可以依附于其他物質(zhì)或者使細(xì)菌之間可以相互粘連的特殊細(xì)菌結(jié)構(gòu)[16],細(xì)菌生物被膜結(jié)構(gòu)物質(zhì)中含有藻酸鹽多糖,能夠保護(hù)細(xì)菌不受其他理化因子的影響,有研究表明細(xì)菌生物被膜與細(xì)菌耐藥性存在密切的聯(lián)系,細(xì)菌的耐藥性和免疫逃逸性均與該生物結(jié)構(gòu)有關(guān)[17]。丁浩[18]研究發(fā)現(xiàn),無(wú)乳鏈球菌對(duì)藥物敏感度較低,可能與無(wú)乳鏈球菌生物被膜有關(guān)。相關(guān)研究也表明,近年來(lái)由于水產(chǎn)行業(yè)抗生素類藥物的濫用,使無(wú)乳鏈球菌的耐藥性逐漸上升[19-20]。梁靜真等[21]研究指出,無(wú)乳鏈球菌對(duì)紅霉素和四環(huán)素仍較為敏感,但對(duì)硫酸新霉素和磺胺二甲嘧啶已產(chǎn)生了耐藥性,因此,使用非抗生素類藥物殺滅無(wú)乳鏈球菌對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖的影響具有長(zhǎng)遠(yuǎn)意義。

    D7對(duì)哈維氏弧菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度均為50.00 mg/L;D7對(duì)副溶血弧菌的最佳作用時(shí)間為4 h,D7對(duì)哈維氏弧菌、溶藻弧菌、無(wú)乳鏈球菌的最佳作用時(shí)間為8 h。在實(shí)際生產(chǎn)中,應(yīng)綜合考慮養(yǎng)殖水體中有害菌殺滅程度最大化及時(shí)間成本。在本試驗(yàn)條件下,水質(zhì)改良滅菌劑D7對(duì)4種常見(jiàn)對(duì)蝦致病菌具有一定的殺滅抑制效果,最佳作用時(shí)間為8 h;在正常養(yǎng)殖環(huán)境溫度下,不同溫度對(duì)D7滅菌效果無(wú)顯著影響。D7的殺菌有效成分有過(guò)氧化氫、苯扎氯銨等,兩成分間具有一定的協(xié)同作用。李子霞等[22]研究了過(guò)氧化氫分別與戊二醛、聚六亞甲基雙胍、苯扎溴銨組成的復(fù)方消毒劑對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的作用,結(jié)果顯示,三組混合殺菌劑在20 min內(nèi)對(duì)試驗(yàn)對(duì)象具有良好的殺滅效果,與單方過(guò)氧化氫的殺菌效果相比較,明顯較優(yōu)。蔡慧玲等[23]研究表明,以過(guò)氧化氫、苯扎氯銨和起泡劑三元包裝的混合即用型消毒液,其原液作用20 min對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、溶藻弧菌和脊髓灰質(zhì)炎病毒Ⅰ型疫苗株的殺滅效果均符合規(guī)范的消毒要求,這些研究與本試驗(yàn)得到的結(jié)果相一致,表明D7因主要成分間的協(xié)同作用而有較好的殺菌效果。

    通過(guò)對(duì)水質(zhì)改良滅菌劑D7的殺菌效果的研究表明,該水質(zhì)改良滅菌劑在較低濃度下可快速殺滅細(xì)菌繁殖體等,使用方便,性能穩(wěn)定,配方符合環(huán)保要求,且便于儲(chǔ)存和運(yùn)輸,具有一定的發(fā)展前景。目前水質(zhì)改良滅菌劑D7在對(duì)蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中的具體使用場(chǎng)景和方法,還有待進(jìn)一步探索和研究。

    參考文獻(xiàn):

    [1]

    WANG R, NORASAK-NOR K, DAYNA H, et al.Effectiveness of Sanitizer D7TM against Escherichia coli O157:H7 and Salmonella biofilms[EB/OL].(2017-3-23)[2021-10-11].https://www.ars.usda.gov/research/publications/publication/?seqNo115=337624.

    [2] De SCHRYVER P,DEFOIRDT T,SORGELOOS P.Early mortality syndrome outbreaks: A microbial management issue in shrimp farming?[J].PLoS Pathogens,2014,10(4):1-2.

    [3] WANG D G.Rapid detection of Mycobacterium tuberculosis complex by loop-mediated isothermal amplification combined with chemosensor[J].Advanced Materials Research,2013,749:449-452.

    [4] 高曉華.水產(chǎn)用聚維酮碘的安全性評(píng)價(jià)及其殺菌效果研究[D].上海:上海海洋大學(xué),2013.

    [5] 梁艷,郭冉,邢澤宇,等.關(guān)于唐山地區(qū)南美白對(duì)蝦淡水養(yǎng)殖中弧菌的探討[J].河北漁業(yè),2018(4):27-28.

    [6] 蔡完其,孫佩芳,劉至治.中華鱉愛(ài)德華氏菌病病原和組織病理研究[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),1997,21(4):428-433.

    [7] 中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).食品微生物學(xué)檢驗(yàn)培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求:GB 4789.28-2013[S].北京:中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社,2013:11.

    [8] 吳芳媛,馮秋芳,林黎.食品微生物檢驗(yàn)常用培養(yǎng)基配制、滅菌及貯藏研究[J].食品安全導(dǎo)刊,2020(36):83.

    [9] 周霞霞,邱晶磊,楊廣,等.傳統(tǒng)培養(yǎng)法與熒光PCR法檢測(cè)弧菌的方法評(píng)價(jià)[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2021,12(4):1550-1556.

    [10] 趙廣英,申科敏,勵(lì)建榮.副溶血性弧菌增菌培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件的改進(jìn)[J].水產(chǎn)科學(xué), 2010,29(3):137-140.

    [11] 陳坤才,余超,李迎月,等.水產(chǎn)品副溶血性弧菌污染監(jiān)測(cè)結(jié)果的比較分析[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2013,4(2):509-514.

    [12] 劉婷,曹進(jìn),丁宏.花椒籽提取物對(duì)副溶血弧菌抑菌作用的研究[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào),2017,8(2):634-638.

    [13] 時(shí)振東,杜洪生,蘇延友.生姜、花椒及黃傘提取物抑菌效果評(píng)價(jià)[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2009,25(1):73-75.

    [14] 劉志軒,王印庚,張正,等.幾種消毒劑對(duì)凡納濱對(duì)蝦致病性弧菌的殺滅作用[J].漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展,2018,39(3):112-119.

    [15] 姚剛,覃映雪,鄒文政,等.致病性溶藻弧菌生物膜形成特性研究[J].水產(chǎn)科學(xué),2012,31(2):73-78.

    [16] COSTERTOA J W.Introduction to biofilm[J].Int Antimicrob Agents,1999,11(3-4):217-221.

    [17] RAMOS C, LICHT T R,STERNBERG C,et al.Monitoring bacterial growth activity in biofilms from laboratory flow chambers, plant rhizosphere, and animal intestine[J].METH ENZYMOLOGY,2001,337:21-42.

    [18] 丁浩.羅非魚(yú)無(wú)乳鏈球菌病防治藥物的篩選[D].上海:上海海洋大學(xué),2018.

    [19] 黃艷華,馬沙,韓書(shū)煜,等.2011~2016年廣西羅非魚(yú)源無(wú)乳鏈球菌的耐藥譜型分析[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2018,49(5):1023-1031.

    [20] 張行,李新圃,楊峰,等.無(wú)乳鏈球菌研究進(jìn)展[J].中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào),2020,40(4):864-872.

    [21] 梁靜真,黃立春,韋慕蘭,等.廣西羅非魚(yú)源無(wú)乳鏈球菌耐藥性及其四環(huán)素耐藥基因檢測(cè)[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2018,49(10):2077-2086.

    [22] 李子霞,辛換換,徐鳳,等.三種復(fù)方過(guò)氧化氫消毒劑殺菌效果的比較[J].中國(guó)消毒學(xué)雜志,2010,27(5):535-536+539.

    [23] 蔡慧玲,裴景超,胡佳,等.一種新型復(fù)方過(guò)氧化氫消毒劑的消毒效果和毒性觀察[J].中國(guó)消毒學(xué)雜志,2020,37(3):161-163.

    The effect of water quality improvement sterilizing agent D7 on four pathogenic bacteria of shrimp

    GAO Jiapeng,GUO Ran,YU Zhiwen,HE Libin,XIA Hui,ZHU Yuzheng

    (Marine College,Hebei Agricultural University,Qinhuangdao,Hebei 066003)

    Abstract:In order to study the inhibitory and killing effects of water quality improvement sterilizing agent D7 on common pathogenic bacteria of shrimp, the inhibitory effect of D7 on the 4 common shrimp pathogens Vibrio harveyi,Vibrio parahaemolyticus,Vibrio alginolyticus and Streptococcus agalactiae, the best action time and the bactericidal effect of D7 under different temperature were studied through inhibition zone experiment and ecotoxicology method. The results showed that at 35 ℃, Vibrio harveyi was highly sensitive to D7, Vibrio alginolyticus and Vibrio parahaemolyticus were moderately sensitive to D7, and Streptococcus agalactiae was low sensitive to D7. The minimum inhibitory concentration and the minimum bactericidal concentration to the 4 species of bacteria were all 50.00 mg/L.The best effect time of D7 on Vibrio parahaemolyticus was 4 h, and the best effect time on Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus and Streptococcus agalactiae was 8 h.There was no significant difference of killing effects of D7 to the 4 species of bacteria under the temperature of 18, 28, and 35 ℃(P>0.05). It can be concluded that under the conditions of this experiment, D7 had a certain killing and inhibitory effect on the 4 common shrimp pathogens, the best action time was 8 h, and the sterilization effect did not change with the change of temperature.

    Key words:water quality improvement sterilizing agent; D7;shrimp; pathogenic bacteria; antibacterial effect

    (收稿日期:2021-08-20;修回日期:2021-10-12)

    猜你喜歡
    抑菌作用對(duì)蝦致病菌
    對(duì)蝦養(yǎng)殖弱勢(shì)群體的管理
    對(duì)蝦吃料慢的原因分析和處理
    對(duì)蝦免疫增強(qiáng)劑研究進(jìn)展
    對(duì)蝦常見(jiàn)環(huán)境性疾病的防治
    SSEL結(jié)合多重PCR同時(shí)快速檢測(cè)生菜中4種食源性致病菌
    食品中致病菌快速檢測(cè)方法的探討
    黃牛毛蘚水提液對(duì)冬棗輪紋病致病菌抑制效應(yīng)的初步研究
    金銀花葉總黃酮抑菌作用研究
    科技視界(2015年30期)2015-10-22 10:54:16
    雙齒圍沙蠶浸膏生物活性的研究
    百靈安神片微生物限度檢查方法驗(yàn)證
    少妇熟女欧美另类| 欧美极品一区二区三区四区| 简卡轻食公司| 精品一区二区三区视频在线| 韩国av在线不卡| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产精品99久久久久久久久| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 免费观看性生交大片5| av卡一久久| 精品无人区乱码1区二区| 日本欧美国产在线视频| 国产v大片淫在线免费观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 亚洲欧美成人精品一区二区| av在线老鸭窝| 伊人久久精品亚洲午夜| 久久久久国产网址| 国产午夜福利久久久久久| av播播在线观看一区| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲综合精品二区| 日韩成人av中文字幕在线观看| 色播亚洲综合网| 日本欧美国产在线视频| 国产精华一区二区三区| 亚洲欧美日韩高清专用| 女人被狂操c到高潮| 嘟嘟电影网在线观看| 亚洲精品456在线播放app| 久久久国产成人精品二区| 99久国产av精品| 亚洲三级黄色毛片| 伦理电影大哥的女人| 国产精品综合久久久久久久免费| 久久精品91蜜桃| av女优亚洲男人天堂| av黄色大香蕉| 国产午夜精品论理片| 人妻夜夜爽99麻豆av| av免费在线看不卡| 国产精品嫩草影院av在线观看| 一级av片app| 男女那种视频在线观看| 99久国产av精品国产电影| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲人成网站在线观看播放| 人人妻人人看人人澡| 十八禁国产超污无遮挡网站| 婷婷色av中文字幕| 国产高清有码在线观看视频| 偷拍熟女少妇极品色| 97超视频在线观看视频| 色综合亚洲欧美另类图片| 日韩人妻高清精品专区| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 欧美激情久久久久久爽电影| 高清视频免费观看一区二区 | 成人鲁丝片一二三区免费| 国产精品电影一区二区三区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲四区av| 精品久久久久久久久久久久久| 日本熟妇午夜| 日韩av不卡免费在线播放| 亚洲国产欧美在线一区| 在现免费观看毛片| 久久人妻av系列| 在线观看66精品国产| 3wmmmm亚洲av在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 高清在线视频一区二区三区 | 精品国产三级普通话版| 亚洲精品影视一区二区三区av| 亚洲av电影不卡..在线观看| 一个人看的www免费观看视频| 成人三级黄色视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产男人的电影天堂91| 1024手机看黄色片| 国产在线男女| 亚洲精品,欧美精品| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲欧美日韩高清专用| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 久久精品人妻少妇| 欧美激情在线99| 亚洲人成网站在线播| 小说图片视频综合网站| 国产黄a三级三级三级人| 国产美女午夜福利| 日本熟妇午夜| 亚洲av免费在线观看| 精品一区二区三区视频在线| 国产午夜精品论理片| 精品久久久久久久久亚洲| 久久韩国三级中文字幕| 级片在线观看| 国产免费福利视频在线观看| 一级二级三级毛片免费看| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产毛片a区久久久久| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产精华一区二区三区| 国产午夜精品论理片| 久久精品国产自在天天线| 卡戴珊不雅视频在线播放| 直男gayav资源| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲av免费在线观看| 亚洲成人久久爱视频| kizo精华| 热99在线观看视频| 最近手机中文字幕大全| 欧美日本视频| 成人一区二区视频在线观看| 欧美日韩在线观看h| 一区二区三区四区激情视频| 精品人妻一区二区三区麻豆| 日本免费一区二区三区高清不卡| 18禁在线播放成人免费| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 永久网站在线| 久久综合国产亚洲精品| 欧美成人免费av一区二区三区| 看十八女毛片水多多多| 高清av免费在线| 欧美xxxx性猛交bbbb| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 国产精品久久视频播放| 国产午夜精品一二区理论片| 美女大奶头视频| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 久久精品久久久久久久性| 久久这里有精品视频免费| 2021天堂中文幕一二区在线观| 校园人妻丝袜中文字幕| 成人美女网站在线观看视频| 国产精品国产三级专区第一集| 偷拍熟女少妇极品色| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲国产高清在线一区二区三| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 免费看日本二区| 免费无遮挡裸体视频| 日韩制服骚丝袜av| 日韩亚洲欧美综合| 伦精品一区二区三区| 日韩制服骚丝袜av| 99热这里只有是精品在线观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久99热这里只有精品18| 国产亚洲精品久久久com| a级一级毛片免费在线观看| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 秋霞伦理黄片| 日韩中字成人| 1024手机看黄色片| 色5月婷婷丁香| eeuss影院久久| 亚洲四区av| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 亚洲综合色惰| 亚洲人与动物交配视频| 精品酒店卫生间| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲精品456在线播放app| 在线a可以看的网站| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 晚上一个人看的免费电影| 99视频精品全部免费 在线| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 大话2 男鬼变身卡| 日本免费a在线| 国产精品永久免费网站| 一区二区三区高清视频在线| 欧美成人a在线观看| 日韩欧美国产在线观看| 美女大奶头视频| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲欧美成人精品一区二区| 热99在线观看视频| 国产真实乱freesex| 特级一级黄色大片| 长腿黑丝高跟| 内地一区二区视频在线| 国产探花极品一区二区| 亚洲成色77777| 久久久亚洲精品成人影院| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 性插视频无遮挡在线免费观看| 亚洲国产精品久久男人天堂| 欧美日韩综合久久久久久| 国内揄拍国产精品人妻在线| 在线观看美女被高潮喷水网站| 久久人人爽人人片av| 久久99热6这里只有精品| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 黄色欧美视频在线观看| 色综合色国产| 亚洲av中文av极速乱| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 日日干狠狠操夜夜爽| 精品一区二区三区视频在线| 男女那种视频在线观看| 一级黄色大片毛片| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 国产一区二区在线av高清观看| 老司机影院成人| 日韩视频在线欧美| 久久精品91蜜桃| 男女下面进入的视频免费午夜| 一区二区三区四区激情视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 在线免费观看的www视频| 国产亚洲一区二区精品| 插逼视频在线观看| 色播亚洲综合网| 欧美变态另类bdsm刘玥| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费在线观看成人毛片| 国产精品1区2区在线观看.| 精品午夜福利在线看| 特大巨黑吊av在线直播| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国内精品宾馆在线| 色网站视频免费| 国产高清国产精品国产三级 | 长腿黑丝高跟| 亚洲国产精品国产精品| 深夜a级毛片| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 欧美一区二区亚洲| 国产精品蜜桃在线观看| 人妻夜夜爽99麻豆av| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产激情偷乱视频一区二区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 欧美区成人在线视频| 观看美女的网站| 黄色欧美视频在线观看| 我的女老师完整版在线观看| 国产精品伦人一区二区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 69av精品久久久久久| 可以在线观看毛片的网站| 精品一区二区免费观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| av.在线天堂| 久久6这里有精品| 联通29元200g的流量卡| 亚洲av免费在线观看| 久久久久久久国产电影| 亚洲成人中文字幕在线播放| 美女高潮的动态| 中文字幕制服av| av.在线天堂| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 99久久精品一区二区三区| 亚洲国产精品专区欧美| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 99国产精品一区二区蜜桃av| 中文字幕av在线有码专区| 久久久久久久久久黄片| 高清毛片免费看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 国产亚洲精品久久久com| 免费无遮挡裸体视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 十八禁国产超污无遮挡网站| 国产成人免费观看mmmm| 久久久久久久国产电影| 黄片wwwwww| 在线免费观看不下载黄p国产| 国产av码专区亚洲av| 亚洲av熟女| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲av福利一区| 高清毛片免费看| 成人三级黄色视频| 婷婷色av中文字幕| 村上凉子中文字幕在线| 热99re8久久精品国产| 小说图片视频综合网站| 午夜福利在线观看吧| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 久久综合国产亚洲精品| 久久久久免费精品人妻一区二区| 舔av片在线| 天堂网av新在线| 日本wwww免费看| 超碰97精品在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产人妻一区二区三区在| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 一区二区三区四区激情视频| 久久久久国产网址| 久久6这里有精品| 秋霞伦理黄片| 男女边吃奶边做爰视频| 国产精品野战在线观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 成人欧美大片| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 只有这里有精品99| 国产片特级美女逼逼视频| 网址你懂的国产日韩在线| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 色综合站精品国产| 久久久久久久久中文| 国产亚洲91精品色在线| 国产淫语在线视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 在线播放国产精品三级| 99久久精品热视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲欧洲国产日韩| 久久精品久久久久久久性| 日韩一本色道免费dvd| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲成人av在线免费| 国产精品久久久久久av不卡| av福利片在线观看| 亚洲内射少妇av| 色播亚洲综合网| 99热网站在线观看| 男女视频在线观看网站免费| 中文字幕久久专区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 亚洲欧洲国产日韩| 久久久国产成人免费| 欧美人与善性xxx| 一边亲一边摸免费视频| 久久草成人影院| 我的老师免费观看完整版| 两个人视频免费观看高清| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 免费观看a级毛片全部| 日本一二三区视频观看| 看免费成人av毛片| 亚洲精品色激情综合| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 精品不卡国产一区二区三区| 18禁在线播放成人免费| videos熟女内射| 黄片无遮挡物在线观看| 国产在视频线精品| kizo精华| 国产一区亚洲一区在线观看| 国产精品蜜桃在线观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 少妇的逼好多水| 女人被狂操c到高潮| 最近中文字幕2019免费版| 欧美性猛交黑人性爽| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 欧美不卡视频在线免费观看| 国产高清视频在线观看网站| 免费黄色在线免费观看| 一个人看视频在线观看www免费| 爱豆传媒免费全集在线观看| 一区二区三区乱码不卡18| 中文字幕av在线有码专区| 最新中文字幕久久久久| 久久久久网色| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 中文在线观看免费www的网站| 日韩一本色道免费dvd| 毛片一级片免费看久久久久| 欧美97在线视频| 国产一区二区三区av在线| 午夜精品在线福利| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 丰满乱子伦码专区| 国产久久久一区二区三区| 一区二区三区高清视频在线| 岛国在线免费视频观看| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 中文天堂在线官网| 69人妻影院| 99热精品在线国产| 久久精品国产自在天天线| 国产精品熟女久久久久浪| 在线播放无遮挡| 国产精品一及| 国产一级毛片在线| 日本黄色视频三级网站网址| a级毛片免费高清观看在线播放| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 日韩一本色道免费dvd| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产成人精品一,二区| 国产精品久久久久久精品电影| 午夜久久久久精精品| 亚洲av免费在线观看| 99热精品在线国产| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 色吧在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲无线观看免费| 日日摸夜夜添夜夜爱| 白带黄色成豆腐渣| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产一级毛片七仙女欲春2| 人妻少妇偷人精品九色| 蜜臀久久99精品久久宅男| 麻豆av噜噜一区二区三区| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 国产精品久久久久久av不卡| av.在线天堂| 欧美色视频一区免费| 午夜福利高清视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲欧美精品综合久久99| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 精品人妻一区二区三区麻豆| 床上黄色一级片| 日韩欧美在线乱码| 免费观看性生交大片5| 一个人看的www免费观看视频| 国产在视频线精品| 日韩一本色道免费dvd| 99热这里只有是精品在线观看| av免费观看日本| 色尼玛亚洲综合影院| 日韩大片免费观看网站 | 欧美日韩精品成人综合77777| 精品久久久久久成人av| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲成av人片在线播放无| 狠狠狠狠99中文字幕| 在线a可以看的网站| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲精品aⅴ在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 久久精品国产亚洲av涩爱| 久久久久免费精品人妻一区二区| 热99在线观看视频| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产老妇女一区| 免费观看性生交大片5| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 日本午夜av视频| 毛片女人毛片| 99久久九九国产精品国产免费| 91久久精品国产一区二区三区| 99热这里只有是精品50| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲人与动物交配视频| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲五月天丁香| www.av在线官网国产| 激情 狠狠 欧美| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产一级毛片七仙女欲春2| 99热全是精品| 久久精品久久久久久噜噜老黄 | 亚洲国产精品专区欧美| 日韩一区二区视频免费看| 成人漫画全彩无遮挡| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲最大成人手机在线| 日日啪夜夜撸| 欧美成人午夜免费资源| 国产成人福利小说| 亚洲在久久综合| 一区二区三区乱码不卡18| 在线观看av片永久免费下载| 中文字幕制服av| 亚洲精品色激情综合| kizo精华| 午夜福利在线观看吧| 国产爱豆传媒在线观看| 国产单亲对白刺激| 亚洲精品乱久久久久久| 久久久久免费精品人妻一区二区| 日韩欧美精品免费久久| 在线观看av片永久免费下载| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久精品影院6| 搞女人的毛片| 一本久久精品| av在线观看视频网站免费| 中文字幕免费在线视频6| 日韩三级伦理在线观看| 91狼人影院| 精品久久久久久久末码| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久精品国产亚洲av天美| 久久精品影院6| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 亚洲av中文av极速乱| 亚洲美女搞黄在线观看| 高清av免费在线| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 哪个播放器可以免费观看大片| 最近最新中文字幕大全电影3| 中文字幕熟女人妻在线| 在线a可以看的网站| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久久久精品久久久久真实原创| 成人综合一区亚洲| 午夜亚洲福利在线播放| 寂寞人妻少妇视频99o| 成人鲁丝片一二三区免费| 免费电影在线观看免费观看| 欧美日本视频| 日韩高清综合在线| 人人妻人人澡欧美一区二区| 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲av成人av| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 午夜精品在线福利| 免费观看a级毛片全部| 午夜精品一区二区三区免费看| 免费看美女性在线毛片视频| 高清午夜精品一区二区三区| 麻豆av噜噜一区二区三区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 18+在线观看网站| 精品久久久久久久末码| 神马国产精品三级电影在线观看| 精品人妻一区二区三区麻豆| av在线天堂中文字幕| 老司机影院毛片| 免费在线观看成人毛片| 日韩大片免费观看网站 | 欧美性猛交黑人性爽| 欧美最新免费一区二区三区| 日韩 亚洲 欧美在线| 男人舔女人下体高潮全视频| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品女同一区二区软件| 人妻制服诱惑在线中文字幕| av国产久精品久网站免费入址| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产精品久久久久久精品电影小说 | 成年女人看的毛片在线观看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 欧美日韩国产亚洲二区| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 九草在线视频观看| 六月丁香七月| 精品熟女少妇av免费看| 简卡轻食公司| 国产av在哪里看| 如何舔出高潮| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国产熟女欧美一区二区| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 美女高潮的动态| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产91av在线免费观看| 亚洲国产欧美在线一区| 少妇高潮的动态图| 99热6这里只有精品| 国产精品,欧美在线| 国产探花极品一区二区| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲av男天堂| 久久精品国产亚洲av涩爱| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 一级黄片播放器| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 麻豆乱淫一区二区| 亚洲精品乱久久久久久| 黄色配什么色好看| 99热6这里只有精品| 亚洲av免费在线观看| 国产精品国产高清国产av| 99热6这里只有精品| 亚洲精品色激情综合| 女人久久www免费人成看片 | 精品久久久久久电影网 | 搡老妇女老女人老熟妇| 夫妻性生交免费视频一级片| 国产精品三级大全| 最近手机中文字幕大全| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 午夜爱爱视频在线播放| 只有这里有精品99| 国产v大片淫在线免费观看| 草草在线视频免费看| 免费观看在线日韩| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 久久久久久久亚洲中文字幕| 久久久久久久午夜电影| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 日本一二三区视频观看| 亚洲av中文av极速乱| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品一区二区三区四区久久| 久久久欧美国产精品| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲av日韩在线播放| 少妇熟女欧美另类|