MMP-2、TIMP-2在足月胎膜早破發(fā)病中的作用

梁學(xué)美

泰安市中心醫(yī)院產(chǎn)科，山東泰安271000

臨產(chǎn)前的胎膜破裂稱為胎膜早破,胎膜早破的發(fā)生與營(yíng)養(yǎng)、羊膜腔壓力增高、創(chuàng)傷、感染以及妊娠期糖尿病等并發(fā)癥有關(guān)系[1-2]。胎膜早破是產(chǎn)科最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一，可能會(huì)引起絨毛膜感染、臍帶脫垂、胎兒窘迫、羊水栓塞甚至威脅到母嬰的生命安全[3]。近年來(lái)，人們普遍認(rèn)為，胎膜的結(jié)構(gòu)病變可能與胎膜早破有一定的關(guān)系，相關(guān)研究也顯示，MMPs/TIMP與胎膜早破關(guān)系密切[4]。該研究方便選取2019年3月—2020年3月在該院住院剖宮產(chǎn)產(chǎn)婦足月胎膜早破40例為研究組，足月未胎膜早破者40例為對(duì)照組，用免疫組化法分別檢測(cè)胎膜中基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-2（TIMP-2）分布,并進(jìn)一步明確其在足月胎膜早破中的作用，從而達(dá)到預(yù)防與治療胎膜早破的目的?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院住院產(chǎn)婦分成兩組，研究組為胎膜早破足月剖宮產(chǎn)的產(chǎn)婦40例，對(duì)照組為未胎膜早破足月剖宮產(chǎn)的產(chǎn)婦40例。所有患者自然受孕，單胎，宮頸擴(kuò)張＜3 cm，胎膜早破＜12 h。對(duì)照組年齡25～39歲，平均(30.5±3.20)歲；孕周37～41周，平均(38.85±1.93)周。研究組年齡23～40歲，平均(29.05±4.07)歲；孕周37～41.5周，平均(39.12±1.05)周。兩組孕周、年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。該研究已通過(guò)泰安市中心醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，已取得孕婦及家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 在該院住院產(chǎn)婦按照以上標(biāo)準(zhǔn)分為兩組，研究組為胎膜早破足月剖宮產(chǎn)的產(chǎn)婦40例，對(duì)照組為未胎膜早破足月剖宮產(chǎn)的產(chǎn)婦40例，兩組產(chǎn)婦剖宮產(chǎn)術(shù)中取其近宮頸處大小約2 cm×2 cm胎膜一塊，分別經(jīng)過(guò)0.9%生理鹽水沖洗、10%多聚甲醛固定、石蠟包埋。

1.2.2 檢測(cè) 按照常規(guī)免疫組化操作，陽(yáng)性對(duì)照為TIMP-2陽(yáng)性的纖維母細(xì)胞切片及MMP-2陽(yáng)性乳腺癌切片，磷酸鹽緩沖液作為陰性對(duì)照，通過(guò)病理圖象分析儀，仔細(xì)觀察兩組胎膜組織的染色強(qiáng)度。

1.3 觀察指標(biāo)

用光鏡觀察兩組胎膜組織陽(yáng)性細(xì)胞的百分率及染色：一個(gè)切片選取5個(gè)段面，在400×光鏡下，切片中陽(yáng)性物質(zhì)的相對(duì)含量通過(guò)5個(gè)斷面中的陽(yáng)性物質(zhì)的平均值表示，半定量分析參考Fromowitz綜合記分法。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞的百分率及顯色深淺評(píng)分，陽(yáng)性細(xì)胞的百分率：0為無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞；1為陽(yáng)性細(xì)胞<25%；2為25%～50%；3為>50%；顯色：0為未顯色或顯色不清楚；1為淺黃色；2為棕黃色；3為深褐色。兩項(xiàng)之和累積：0～1分表示陰性(-)；2～3分表示弱陽(yáng)性(+)；4～5分表示中度陽(yáng)性(++)；6分為表示強(qiáng)陽(yáng)性(+++)，陽(yáng)性率為每組（+)~(+++）陽(yáng)性總例數(shù)與每組總例數(shù)比值的百分比，從而檢測(cè)胎膜中MMP-2及TIMP-2的分布及陽(yáng)性率的表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用頻數(shù)或率（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料采用秩和檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組產(chǎn)婦胎膜組織中MMP-2陽(yáng)性率比較

MMP-2在研究組的陽(yáng)性表達(dá)率85.0%,高于對(duì)照組的65.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.267，P=0.039），通過(guò)Mann-Whitney檢驗(yàn)Z=-3.258，漸進(jìn)顯著性（0.001）。見(jiàn)表1。

表1 兩組產(chǎn)婦胎膜組織中MMP-2陽(yáng)性率比較

2.2 兩組產(chǎn)婦胎膜組織中TIMP-2陽(yáng)性率比較

TIMP-2在研究組中陽(yáng)性表達(dá)率52.5%,低于對(duì)照組的70.0%，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.581，P=0.108），通過(guò)Mann-Whitney檢驗(yàn)Z=-1.693，漸進(jìn)顯著性（0.090）。見(jiàn)表2。

表2 兩組產(chǎn)婦胎膜組織中TIMP-2陽(yáng)性率比較

2.3 TIMP-2及MMP-2在兩組胎膜中表達(dá)的相關(guān)性

TIMP-2和MMP-2在兩組產(chǎn)婦胎膜組織中表達(dá)的陽(yáng)性率呈負(fù)相關(guān)（RSquare=0.761,P＜0.05）。

3 討論

胎膜含有較多的膠原，膠原本身的結(jié)構(gòu)狀態(tài)決定胎膜的強(qiáng)度[5]，胎膜早破可能會(huì)引起臍帶脫垂、感染、胎兒窘迫等,因此嚴(yán)重威脅母兒的生命安全[6]。因此，用比較準(zhǔn)確的指標(biāo)對(duì)胎膜早破及時(shí)進(jìn)行預(yù)測(cè)，對(duì)孕婦的治療有很大地幫助，可以盡量減少母嬰并發(fā)癥的發(fā)生[7]。

基質(zhì)金屬蛋白酶共有26個(gè)成員,根據(jù)不同的底物和結(jié)構(gòu)特異性，分為基質(zhì)溶素、膠原酶、膜型基質(zhì)金屬蛋白酶、溶基質(zhì)素、明膠酶和其他六大類[8]。 除膜型直接以酶的形式發(fā)揮作用外，其他均以酶原形式分泌，被激活劑激活后才具有酶活性[9]?；|(zhì)金屬蛋白酶可以介導(dǎo)細(xì)胞外基質(zhì)的釋放，并激活可溶性因子,如細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子等[10]。MMP-2主要分布在羊膜上皮細(xì)胞上，具有降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的功能[11]。MMP-2可以降解Ⅰ型和Ⅲ型膠原,在胎膜早破孕婦較未胎膜早破的孕婦羊水中的濃度偏高[12]。胎膜未破時(shí)，血清中MMP-2在血清中含量較少，但在某些因素刺激下，可能增加MMP-2的水平，使胎膜中的ECM的降解增加，膠原分解也增加，導(dǎo)致發(fā)生胎膜早破[13-14]。胎膜早破患者胎盤中的高遷移率族蛋白B1(HMGB1)刺激HMGB1受體,導(dǎo)致MMP-2水平升高,進(jìn)一步調(diào)節(jié)胎膜中外基質(zhì)蛋白的分解代謝,MMP-2在胎膜早破患者胎膜、胎盤及血清中均出現(xiàn)升高現(xiàn)象[15]?；|(zhì)蛋白酶具有降解膠原的作用，胎膜組織中含量升高可引起局部胎膜的薄弱[16]。崔世紅等[17]研究中，對(duì)比胎膜早破病例及同孕期健康孕婦各30名,基質(zhì)金屬蛋白酶-2在胎膜早破組胎膜中的表達(dá)陽(yáng)性23例(77%),在正常對(duì)照組胎膜中的表達(dá)陽(yáng)性15例(50%)(P＜0.05)，從而得出胎膜中基質(zhì)金屬蛋白酶-2蛋白的高表達(dá)可能參與胎膜早破的發(fā)病過(guò)程。 在該次研究中，MMP-2在研究組的陽(yáng)性表達(dá)率85.0%,高于對(duì)照組的65.0%(P=0.039)，與前人的研究結(jié)果一致，隨著MMP-2水平增加，胎膜中的ECM的降解增加，膠原分解也增加，容易發(fā)生胎膜早破。

TIMP-2為MMP-2的特異性組織抑制劑，其合成與降解水平與胎膜早破有關(guān)[18]。張莉等[19]研究胎膜早破及正常剖宮產(chǎn)產(chǎn)婦各30例，結(jié)果MMP-2在胎膜早破組表達(dá)（100.00%）明顯高于正常剖宮產(chǎn)組(46.67%）(P＜0.05),TIMP-2在胎膜早破組表達(dá)（40.00%）低于正常剖宮產(chǎn)組(60.0%)(P=0.091),得出MMP-2和TIMP-2失調(diào)可能是誘發(fā)胎膜早破 的原因之一。在該次研究中，TIMP-2在研究組中陽(yáng)性表達(dá)率52.5%,低于對(duì)照組的70.0%,但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=2.581，P=0.108)，該文結(jié)果與以上研究基本一致，雖然TIMPS陽(yáng)性表達(dá)率優(yōu)于對(duì)照組，但不能否認(rèn)胎膜早破中TIMP-2所起的作用，可以在以后對(duì)TIMP-2與胎膜破裂的關(guān)系做進(jìn)一步探討。

從研究中可以看出,研究組中羊膜MMP-2的陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組,TIMP-2的陽(yáng)性表達(dá)率低于對(duì)照組，且它們的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（R Square=0.761,P＜0.05），當(dāng)胎膜組織中的MMP-2含量明顯增多，而TIMP-2含量減少,MMP-2/TIMP-2比例失去平衡時(shí)，導(dǎo)致胎膜中膠原出現(xiàn)大量降解，胎膜強(qiáng)度減小,使局部胎膜發(fā)生破裂?？梢?jiàn)足月胎膜早破的原因之一可能是MMP-2/TIMP-2比例失衡，MMP-2、TIMP-2在一定程度上共同參與足月胎膜早破的發(fā)生。