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    快速檢測技術(shù)在食品微生物檢測中的運(yùn)用

    2021-11-26 20:02:11孟超
    魅力中國 2021年17期
    關(guān)鍵詞:檢測

    孟超

    (青島市華測檢測技術(shù)有限公司,山東 青島 266101)

    引言

    食品安全一直都是社會(huì)焦點(diǎn)問題,影響著人們的身體健康,決定了社會(huì)發(fā)展水平。隨著我國市場經(jīng)濟(jì)不斷發(fā)展進(jìn)步,一些不良商家為了謀取利益,不顧食品安全,食品安全問題頻發(fā),食品安全成為了社會(huì)熱點(diǎn)問題、社會(huì)敏感問題。為了確保廣大群眾的食品安全,在黨和政府的積極引導(dǎo)下,社會(huì)各個(gè)領(lǐng)域積極開展了食品安全監(jiān)督管控工作,所以科學(xué)推進(jìn)食品安全技術(shù)檢測工作意義重大。微生物檢測技術(shù)作為一種具備科學(xué)性、高效性的技術(shù)手段,可以有效、快速檢測出食物中潛在的安全問題,高效運(yùn)用微生物檢測技術(shù)的意義重大。近些年,微生物檢測技術(shù)越來越多的運(yùn)用到了食品檢測工作中,可以有效降低食品微生物污染概率,保障食品安全。

    一、微生物檢測技術(shù)種類

    (一)食源性病菌免疫學(xué)快速檢測技術(shù)

    食源性病菌免疫學(xué)快速檢測技術(shù)主要分為熒光抗體檢測技術(shù)和免疫酶技術(shù)兩種手段。針對熒光抗體檢測技術(shù)來說,主要以抗原與抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)理論,借助熒光素標(biāo)記手段,實(shí)施直接反應(yīng)監(jiān)測和間接反應(yīng)監(jiān)測。直接反應(yīng)檢測是將帶有熒光素標(biāo)記的血清添加到待測樣品當(dāng)中,在洗滌之后用顯微鏡觀察的一種手段。間接反應(yīng)檢測法是已知細(xì)菌特征之后,將帶有熒光標(biāo)記的抗體加入到待檢測樣品當(dāng)中,從而實(shí)現(xiàn)對食品微生物進(jìn)行檢測的一種手段。借助熒光抗體檢測技術(shù)進(jìn)行食品微生物檢測工作,雖然操作較為方便,但是熒光抗體檢測技術(shù)很容易受到其他熒光的干擾,造成顯微鏡價(jià)格成本較高。針對免疫酶技術(shù)來說,主要是借助酶來標(biāo)記抗原和抗體。在實(shí)施食品檢測的過程中,將食品與酶混合,并且觀察反應(yīng)產(chǎn)物,結(jié)合產(chǎn)物顏色變化、顏色深淺對食品當(dāng)中的微生物種類和內(nèi)容進(jìn)行分析。免疫酶技術(shù)在實(shí)施過程中,具備快捷性、精準(zhǔn)性、高效性等諸多優(yōu)點(diǎn),在食物檢測工作當(dāng)中的運(yùn)用較為普遍。

    (二)食源性病原菌分子生物學(xué)快速檢測技術(shù)

    1.基因探針技術(shù)?;蛱结樇夹g(shù)主要是被同位素標(biāo)記的已知序列的寡聚核苷酸,將其與目的基進(jìn)行雜交,借助雜交信號(hào),便可以探測出食物中的微生物情況。基因探針技術(shù)具備及時(shí)性、特異性等諸多優(yōu)點(diǎn)。但是基因探針技術(shù)實(shí)施過程中,同位素標(biāo)記的放射性也是不容忽視的,很容易造成食品安全檢測人員身體健康問題。2.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)。多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)一般是借助體外酶促反應(yīng)合成特異DNA 片段,從而實(shí)施快速檢測的一種技術(shù)手段。DNA 片段可以在短期內(nèi)快速擴(kuò)散,這樣便可以用肉眼觀察,多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)的檢驗(yàn)效率相對較高,并且操作非常方便,在食品安全檢測工作當(dāng)中運(yùn)用頻率較高。3.生物芯片技術(shù)。生物芯片技術(shù)在實(shí)際運(yùn)用時(shí),需要在一定條件之下使用核酸分子與樣品當(dāng)中的核酸片段進(jìn)行雜交,借助檢測雜交信號(hào)的手段,實(shí)現(xiàn)食物安全檢測。生物芯片技術(shù)手段有效克服了傳統(tǒng)核酸印記雜交的缺點(diǎn),但是因?yàn)樯镄酒夹g(shù)的成本較高,并且作為一種創(chuàng)新性技術(shù)在食品安全檢測當(dāng)中并沒有全面推廣,導(dǎo)致生物芯片技術(shù)普及度較小。

    二、快速檢測技術(shù)在食品微生物檢測中的運(yùn)用

    (一)免疫學(xué)技術(shù)

    在食品安全檢測過程中,免疫學(xué)技術(shù)是一種非常先進(jìn)的檢測技術(shù),可以根據(jù)抗原以及抗體的特殊反應(yīng),從而檢測到食品中含有的細(xì)菌等,是一種非常常見的生物檢測方法。①免疫磁珠法,這種檢測方法主要是在磁珠表面固定抗原或抗體,然后通過樣品中的抗體或抗原與磁珠上的抗體或抗原的特異性反應(yīng)進(jìn)行檢測。這種檢測方法有非常大的優(yōu)勢,不僅容易操作,而且成本也非常低,在實(shí)際檢測過程中可以重復(fù)使用,具有標(biāo)靶特異性。②酶聯(lián)免疫吸附技術(shù),這種免疫技術(shù)融合了放射性技術(shù)、熒光技術(shù),在食品檢測過程中,該技術(shù)主要是利用酶的特異性催化作用和抗原-抗體的特異性反應(yīng)對食品中的微生物含量進(jìn)行分析,有效反映出微生物在食品中的分布情況。酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)比傳統(tǒng)的檢測技術(shù)更高效,靈敏度也非常高。③免疫層析技術(shù),其原理是應(yīng)用抗原-抗體免疫學(xué)反應(yīng)和層析反應(yīng),以達(dá)到快速、準(zhǔn)確檢測待測物的目的。對食品中的微生物進(jìn)行檢測,檢測時(shí)間非常短,靈敏度較高,是一種方便快速的檢測方法。

    (二)基于生物學(xué)的快速檢測技術(shù)

    基于生物學(xué)的快速檢測技術(shù)有兩大種,即核酸分子雜交技術(shù)以及基因芯片檢測技術(shù)。其中的核酸分子雜交技術(shù)就是借助設(shè)備DNA 探針,然后嚴(yán)格遵循檢測原理,應(yīng)用DNA 標(biāo)記的設(shè)備在食品微生物檢測中雜交其核酸樣品,其樣品已經(jīng)經(jīng)過變性,所以為合格的樣品。此外,可以借助PNA 探針來替換其DNA 探針,也同樣使其靶標(biāo)序列內(nèi)的探針互補(bǔ),從而形成標(biāo)記的雙鏈。標(biāo)記物的信號(hào)情況能夠通過檢測儀器來確定,同時(shí)檢測儀器也能快速地檢測出食品中富含的微生物種類以及數(shù)量?;蛐酒瑱z測技術(shù)適用于檢測特異微生物,即檢測步驟為在準(zhǔn)備好的干凈芯片上點(diǎn)樣提取寡核苷酸,然后使其生成聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),再擴(kuò)增微生物DNA,接著就能進(jìn)一步形成標(biāo)記性熒光探針,物質(zhì)雜交后,掃描儀反映其熒光情況,然后就能快速檢測其食品微生物,尤其是其食品中潛在的致病病原,除此之外還能檢測其遺傳指標(biāo)?;蛐酒瑱z測技術(shù)的優(yōu)勢點(diǎn)有操作便捷、靈敏度高等。除此之外,還有自動(dòng)檢測法、生物傳感器等方式。

    (三)代謝學(xué)技術(shù)

    在微生物檢測過程中,代謝檢測技術(shù)主要是利用食品中微生物代謝物的特異性物理或化學(xué)反應(yīng)進(jìn)行檢測。代謝檢測主要有電阻抗法、微量生化法以及生物發(fā)光法。首先,ATP生物發(fā)光法,ATP是活體中常見的不穩(wěn)定物質(zhì),ATP 生物發(fā)光法主要是通過對食品中的ATP 濃度進(jìn)行檢測,從而掌握活菌的數(shù)量。在ATP 生物發(fā)光檢測過程中一般通過熒光來對食品中的微生物進(jìn)行檢測,這種檢測方法經(jīng)常用于現(xiàn)場檢測,其操作比較簡單,在食品檢測現(xiàn)場有非常廣泛的應(yīng)用。當(dāng)前ATP 生物發(fā)光法主要用于檢測食品中乳酸菌以及啤酒中的菌落數(shù)量,檢測效果比較明顯,適應(yīng)性非常強(qiáng)。其次,電阻抗法,這種檢測技術(shù)主要對食品中含有的一些有害微生物進(jìn)行檢測,在實(shí)際檢測中對黃金葡萄球菌以及大腸桿菌的檢測效果比較明顯。培養(yǎng)基中的微生物通過代謝分解培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì),使其成為具有電活性的離子。這種離子具有一定的導(dǎo)電性,導(dǎo)致培養(yǎng)基的電阻發(fā)生變化,通過對培養(yǎng)基電阻抗的檢測,從而判斷出細(xì)菌的種類以及細(xì)菌的數(shù)量。最后,微量生物法,這種方法在商品化微量生物鑒定中的應(yīng)用比較多。

    (四)微生物傳感器技術(shù)的應(yīng)用路徑

    微生物傳感器技術(shù)是微生物技術(shù)與電子計(jì)算機(jī)技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物,是一種對微生物敏感并能夠?qū)z測到的反應(yīng)信息轉(zhuǎn)化為數(shù)字信號(hào)的技術(shù),目前主要應(yīng)用于高端食品檢測實(shí)踐中。微生物傳感器技術(shù)針對性較強(qiáng),主要面向病原菌、腐敗菌等微生物,而這些微生物也正是引發(fā)食物腐敗的主要因素,因此普遍被認(rèn)為在判定食物腐敗情況方面發(fā)揮著積極作用。微生物傳感器技術(shù)與其他微生物檢測技術(shù)相比,具有儀器操作流程簡單的技術(shù)優(yōu)勢,能夠準(zhǔn)確剖析出食品樣品當(dāng)中的微生物類別以及含量,但與此同時(shí),微生物傳感器技術(shù)僅在高端食品新鮮程度和農(nóng)藥殘留等特定領(lǐng)域發(fā)揮作用,其發(fā)展推廣力度不足,在普通大宗食品檢測領(lǐng)域尚未開展分析實(shí)踐。

    結(jié)語

    總而言之,食品安全質(zhì)量直接影響廣大群眾的健康與生命財(cái)產(chǎn)安全。微生物檢測技術(shù)可以有效提升食品安全檢測質(zhì)量,切實(shí)滿足我國食品安全檢測工作發(fā)展需求。在實(shí)際開展微生物檢測時(shí),必須要嚴(yán)格按照我國食品檢測工作相關(guān)要求,遵循我國相關(guān)法律法規(guī),選擇具備科學(xué)性、高效性、精準(zhǔn)性、快速性的微生物檢測技術(shù)。積極實(shí)施微生物檢測創(chuàng)新技術(shù)研發(fā),為我國食品安全檢測工作提供基礎(chǔ)支持,切實(shí)保障我國食品安全檢測領(lǐng)域的發(fā)展,促進(jìn)社會(huì)和諧與進(jìn)步。

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