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    丙氨酸氨基轉移酶臨床應用與檢測方法比對

    2021-11-26 20:02:11田豐
    魅力中國 2021年17期
    關鍵詞:檢測

    田豐

    (天津易啟醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司,天津 300300)

    丙氨酸氨基轉移酶又名谷丙轉氨酶是一種參與人體蛋白質新陳代謝的酶(相當于工業(yè)生產中的催化劑),起加快體內蛋白質氨基酸在體內轉化的作用,它廣泛存在于人體各種組織、器官、肌肉、骨骼中,以肝細胞的胞漿中含量最多。肝細胞漿內濃度高于血清中1000-3000 倍。當此時人體內各器官組織及其器官停止活動或發(fā)生病變時,就可能會把其中的一種丙氨酸乙酰氨基蛋白轉移肽激酶成分釋放出來到人體血液中,使人體血清中丙氨酸氨基轉移酶的含量明顯增加。當各種不同原因可能導致患者肝臟出現炎癥或粘膜病變時,丙氨酸氨基轉移酶可能會從患者肝臟的細胞膜中釋放出來到患者血液中,使患者血清中的丙氨酸氨基轉移酶濃度增高。當人的肝上皮細胞千分之一以上有慢性炎癥時,血清血中丙氨酸氨基轉移酶的含量就可能會隨之增高一倍以上。因此,丙氨酸氨基轉移酶被世界衛(wèi)生組織專家推薦為診斷肝功能病變損害最敏感的重要檢測診斷指標,丙氨酸氨基轉移酶濃度升高指標是診斷肝臟功能病變的重要檢測指標之一。

    引起人體丙氨酸氨基轉移酶偏高的一些常見疾病因素包括:慢性乙型肝炎、丙型肝炎、脂肪肝、酒精性乙肝、肝硬化、肝癌等等,但是也并非一定只有這些疾病因素可以直接導致人體丙氨酸氨基轉移酶異常,還有一些容易被大家廣泛忽視的也是引起人體丙氨酸氨基轉移酶偏高的主要原因,它們分別可能是:過度運動、飲食、勞累、飲酒、用藥等。丙氨酸氨基轉移酶主要存在于肝細胞中,它的正常值是0-40 單位之間,男9-51U/L,女8-41U/L(各醫(yī)院或者、檢測試劑盒的檢測方法不同,參考值不完全相同)。

    丙氨酸氨基轉移酶濃度升需要根據臨床相關醫(yī)學檢查、結合臨床病史、癥狀、體征等因素來進行綜合分析判斷。對于一個健康人來說,丙氨酸氨基轉移酶總體水平在正常范圍內升高或輕度降低,并不一定意味著他的肝臟可能出了什么問題,因為丙氨酸氨基轉移酶本身非常敏感,健康人在一天之內的不同階段時間進行檢查,丙氨酸氨基轉移酶水平都非常有可能使產生較大波動。早晨若沒有運動可能丙氨酸氨基轉移酶會有偏低于正常情況,一旦早晨有運動,丙氨酸氨基轉移酶水平就可能會開始有升高的變化,甚至可能超過達到正常值時的水平,如果長一段時間內水平偏低或一直保持偏高,這個時候就一定需要及時去正規(guī)醫(yī)院進行檢查,確定自己是否已經感染乙型肝炎。因此在這些臨床治療工作中,醫(yī)生們往往更多的時候是通過參考這些患者的自身既往的疾病史、家族史及其他相關的臨床檢查檢驗結果,最終綜合論證分析病因才能最終給出患者是否確實患病,以及所謂身患何種疾病及其病因的正確診斷,有時甚至可能需要醫(yī)生結合多項臨床指標分析才能最終確診所謂身患何種疾病。

    目前臨床上常用檢測丙氨酸氨基轉移酶的試劑盒根據檢測原理可分為酶法、速率法、干化學法、IFCC 法、賴氏法等。常見的試劑盒有丙氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒(酶法)、丙氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒(速率法)、丙氨酸氨基轉移酶測試條(干化學法)、丙氨酸氨基轉移酶測定試劑盒(IFCC法)、丙氨酸氨基轉移酶測定試劑盒(賴氏法)等。但是試劑盒之間也會存在技術差異,因此為了更好地判定試劑盒的檢測能力,以及檢測結果與臨床診斷的相關程度。選取任意兩個已上市銷售的丙氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒(速率法)(以下簡稱試劑A)、丙氨酸氨基轉移酶測定試劑盒(IFCC法)(以下簡稱試劑B)。

    此次試驗選取臨床檢測剩余血清樣本約110 例,包括檢測水平正常樣本及異常樣本。樣本的采集和處理符合標準實驗室操作,非嚴重溶血、混濁的樣本,樣本收集時間或病例(性別、年齡、臨床診斷)信息明確。樣本類型是血清,收集樣本時遵照普遍預防措施。將所有樣本作為潛在的可傳播疾病的樣本處理,遵照樣本收集設備隨附的使用和處理說明,始終塞住試管塞。分離的樣本可在2-8℃下儲存7 天,或在-20℃下冷凍儲存達30 天。避免重復冷凍和解凍。如諾樣本涉及運輸,則運輸按照醫(yī)院運輸流程進行,本次試驗樣本的采集、保存及運輸均需要符合所用試劑說明書中對樣本的要求。

    為進一步保證檢測數據的真實性,本次試驗采用盲法。由負責收集樣本的人員,將樣本去標識化后進行編號,樣本新分配編號的原則建議根據樣本納入的先后順序,給予一個4 位數的樣本新分配編號,1001,1002,…,1110。并在相應表格中保留原始樣本號和樣本新分配編號的對應關系,以便試驗結束后對試驗數據分析核對。編號完畢再由一位負責檢測的人員進檢測。負責檢測的人員需有兩位,此兩位人員將分別使用試劑A 和試劑B 對同一份樣本分別于同一時間進行檢測,且此兩位檢測人員對于樣本信息是也是盲的,這樣做可以最大限度地減少人為因素給此次試驗檢測過程以及結果的分析帶來的主觀影響。

    檢測完成后由樣本收集的人員負責匯總檢測數據,以試劑A 作為受試試劑,試劑B 作為對比試劑。剔除超出線性范圍的檢測結果,對有效的檢測數據進行定量分析。統計兩種試劑測定結果間的相關性并對兩種試劑測定結果進行偏倚分析(絕對偏倚、相對偏倚和醫(yī)學決定水平偏倚)。同時用SPSS 軟件分析兩種試劑測定結果的線性回歸方程,并分析回歸系數及常數的95%置信區(qū)間。

    本次試驗入選并檢測的110 例血清樣本中共包含19 例干擾樣本,包含6 例黃疸異常樣本、6 例溶血樣本、7 例脂血樣本。本次試驗入選并檢測的110 例血清樣本的檢測結果中有3 例樣本超出檢測限,其中1035、1057 號樣本試劑A 和試劑B 檢測結果均超過其各自線性范圍上限、1056號樣本試劑A 和試劑B 檢測結果低于其線性范圍下限,因此根據上文對于試驗數據的要求,此三例樣本的檢測數據將不納入定量統計,對剩余107例有效樣本檢測結果根據上述的分析要求進行以下分析。

    有效樣本數量為107 例,試劑A 為受試試劑,覆蓋的檢測范圍為10-779U/L。設試劑B 測定結果為X,試劑A 測定結果為Y,經計算,循環(huán)次數N 為107 次,r 值為0.9994,P 值為0.000(P〈0.001),根據統計學原理,可得此兩組數據高度相關。

    用SPSS 軟件分析,兩種試劑測定結果的線性回歸方程,并分析回歸系數及常數的95%置信區(qū)間。試劑A 測得樣本濃度范圍為10-779U/L,試劑A 和試劑B 的測定值的Pearson 相關系數R 為0.9994(P〈0.001)。以試劑B 測定結果為X,試劑A 測定結果為Y 變量擬合線性回歸方程,y=1.0068x-1.0766,其回歸系數為1.0068,回歸系數的95%可信區(qū)間為0.978~1.035,常數的95%可信區(qū)間為-5.843~ 3.688,線性回歸方程具有統計學意義(F 值4923.776,P〈0.001),說明試劑A 和試劑B 檢測結果相關性良好。

    對試劑A 與試劑B 每個樣本測定值之差與相應兩系統檢測的均值作散點圖。觀察并分析各點的絕對偏倚分布情況。同時對試劑A 與試劑B 每個樣本測定值之比值與相應兩系統測試均值作散點圖。觀察并分析各點的相對偏倚分布情況。以1.96SD 作為離群點的分界值,進行統計分析。發(fā)現有7 例樣本的檢測結果為離群值樣本。其樣本信息分別為:樣本1,性別男,年齡51 歲,臨床診斷為末端回腸狹窄,試劑A 的檢測結果是19U/L,試劑B 的檢測結果是10U/L;樣本2,性別女,年齡37 歲,臨床診斷為高血壓、呼吸道感染、重度骨質疏松、系統性紅斑狼瘡,試劑A 的檢測結果是20U/L,試劑B 的檢測結果是9U/L;樣本3,性別男,年齡68 歲,臨床診斷為冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、高血壓、高脂血癥、前列腺增生、脂肪肝,試劑A 的檢測結果是18U/L,試劑B 的檢測結果是9U/L;樣本4,性別男,年齡64 歲,臨床診斷為慢性腎功能衰竭、尿毒癥期、腎性高血壓、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、腎性貧血、腎性骨病、腎透析狀態(tài),試劑A 的檢測結果是17U/L,試劑B 的檢測結果是9U/L;樣本5,性別女,年齡74 歲,臨床診斷為高血壓、高脂血癥、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病、重度骨質疏松、癤腫病、嚴重骨關節(jié)炎、神經衰弱,試劑A 的檢測結果是18U/L,試劑B 的檢測結果是10U/L;樣本6,性別女,年齡54 歲,臨床診斷為高血壓、高脂血癥、陣發(fā)性夜間性血紅蛋白尿癥、再生障礙性貧血,試劑A 的檢測結果是20U/L,試劑B 的檢測結果是10U/L;樣本6,性別男,年齡89 歲,臨床診斷為下咽癌、食管癌、淋巴結轉移癌、便秘,試劑A 的檢測結果是17U/L,試劑B 的檢測結果是10U/L

    此樣本涉及的臨床診斷如高血壓、高血脂、脂肪肝、系統性紅斑狼瘡可能會對丙氨酸氨基轉移酶的測值產生一定影響,同時因為檢測系統的差異也會對檢測結果產生不同程度的影響,因此出現離群現象,但如上文所述,其檢測結果在臨床上對于疾病的輔助診斷影響較小,如需判定疾病的種類還需要綜合其他的臨床檢測結果以及病人的病史進行判定。

    同時對于丙氨酸氨基轉移酶臨床關注濃度為60U/L 和300U/L,在此醫(yī)學決定水平處的偏倚分析如下:在60U/L 醫(yī)學決定水平處,本次試驗計算出的絕對偏倚為-0.67U/L,相對偏倚為-1.12%;在300U/L醫(yī)學決定水平處,本次試驗計算出的絕對偏倚為0.93U/L,相對偏倚為0.31%,均在可接受偏倚范圍內。

    根據此次任意選取的兩種已上市的常見的丙氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒作為檢測試劑,對110 例樣本同時進行試驗分析得出,不同的試劑盒對于同一份樣本的檢測結果之間存在差異,但此差異的出現可能是因為檢測系統及樣本本身造成的,此類情況在臨床上是可以接受的。

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