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    丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶臨床應(yīng)用與檢測方法比對(duì)

    2021-11-26 20:02:11田豐
    魅力中國 2021年17期
    關(guān)鍵詞:檢測

    田豐

    (天津易啟醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司,天津 300300)

    丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶又名谷丙轉(zhuǎn)氨酶是一種參與人體蛋白質(zhì)新陳代謝的酶(相當(dāng)于工業(yè)生產(chǎn)中的催化劑),起加快體內(nèi)蛋白質(zhì)氨基酸在體內(nèi)轉(zhuǎn)化的作用,它廣泛存在于人體各種組織、器官、肌肉、骨骼中,以肝細(xì)胞的胞漿中含量最多。肝細(xì)胞漿內(nèi)濃度高于血清中1000-3000 倍。當(dāng)此時(shí)人體內(nèi)各器官組織及其器官停止活動(dòng)或發(fā)生病變時(shí),就可能會(huì)把其中的一種丙氨酸乙酰氨基蛋白轉(zhuǎn)移肽激酶成分釋放出來到人體血液中,使人體血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的含量明顯增加。當(dāng)各種不同原因可能導(dǎo)致患者肝臟出現(xiàn)炎癥或粘膜病變時(shí),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶可能會(huì)從患者肝臟的細(xì)胞膜中釋放出來到患者血液中,使患者血清中的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶濃度增高。當(dāng)人的肝上皮細(xì)胞千分之一以上有慢性炎癥時(shí),血清血中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的含量就可能會(huì)隨之增高一倍以上。因此,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶被世界衛(wèi)生組織專家推薦為診斷肝功能病變損害最敏感的重要檢測診斷指標(biāo),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶濃度升高指標(biāo)是診斷肝臟功能病變的重要檢測指標(biāo)之一。

    引起人體丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶偏高的一些常見疾病因素包括:慢性乙型肝炎、丙型肝炎、脂肪肝、酒精性乙肝、肝硬化、肝癌等等,但是也并非一定只有這些疾病因素可以直接導(dǎo)致人體丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶異常,還有一些容易被大家廣泛忽視的也是引起人體丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶偏高的主要原因,它們分別可能是:過度運(yùn)動(dòng)、飲食、勞累、飲酒、用藥等。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶主要存在于肝細(xì)胞中,它的正常值是0-40 單位之間,男9-51U/L,女8-41U/L(各醫(yī)院或者、檢測試劑盒的檢測方法不同,參考值不完全相同)。

    丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶濃度升需要根據(jù)臨床相關(guān)醫(yī)學(xué)檢查、結(jié)合臨床病史、癥狀、體征等因素來進(jìn)行綜合分析判斷。對(duì)于一個(gè)健康人來說,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶總體水平在正常范圍內(nèi)升高或輕度降低,并不一定意味著他的肝臟可能出了什么問題,因?yàn)楸彼岚被D(zhuǎn)移酶本身非常敏感,健康人在一天之內(nèi)的不同階段時(shí)間進(jìn)行檢查,丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平都非常有可能使產(chǎn)生較大波動(dòng)。早晨若沒有運(yùn)動(dòng)可能丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶會(huì)有偏低于正常情況,一旦早晨有運(yùn)動(dòng),丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平就可能會(huì)開始有升高的變化,甚至可能超過達(dá)到正常值時(shí)的水平,如果長一段時(shí)間內(nèi)水平偏低或一直保持偏高,這個(gè)時(shí)候就一定需要及時(shí)去正規(guī)醫(yī)院進(jìn)行檢查,確定自己是否已經(jīng)感染乙型肝炎。因此在這些臨床治療工作中,醫(yī)生們往往更多的時(shí)候是通過參考這些患者的自身既往的疾病史、家族史及其他相關(guān)的臨床檢查檢驗(yàn)結(jié)果,最終綜合論證分析病因才能最終給出患者是否確實(shí)患病,以及所謂身患何種疾病及其病因的正確診斷,有時(shí)甚至可能需要醫(yī)生結(jié)合多項(xiàng)臨床指標(biāo)分析才能最終確診所謂身患何種疾病。

    目前臨床上常用檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的試劑盒根據(jù)檢測原理可分為酶法、速率法、干化學(xué)法、IFCC 法、賴氏法等。常見的試劑盒有丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒(酶法)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒(速率法)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測試條(干化學(xué)法)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(IFCC法)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(賴氏法)等。但是試劑盒之間也會(huì)存在技術(shù)差異,因此為了更好地判定試劑盒的檢測能力,以及檢測結(jié)果與臨床診斷的相關(guān)程度。選取任意兩個(gè)已上市銷售的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒(速率法)(以下簡稱試劑A)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(IFCC法)(以下簡稱試劑B)。

    此次試驗(yàn)選取臨床檢測剩余血清樣本約110 例,包括檢測水平正常樣本及異常樣本。樣本的采集和處理符合標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室操作,非嚴(yán)重溶血、混濁的樣本,樣本收集時(shí)間或病例(性別、年齡、臨床診斷)信息明確。樣本類型是血清,收集樣本時(shí)遵照普遍預(yù)防措施。將所有樣本作為潛在的可傳播疾病的樣本處理,遵照樣本收集設(shè)備隨附的使用和處理說明,始終塞住試管塞。分離的樣本可在2-8℃下儲(chǔ)存7 天,或在-20℃下冷凍儲(chǔ)存達(dá)30 天。避免重復(fù)冷凍和解凍。如諾樣本涉及運(yùn)輸,則運(yùn)輸按照醫(yī)院運(yùn)輸流程進(jìn)行,本次試驗(yàn)樣本的采集、保存及運(yùn)輸均需要符合所用試劑說明書中對(duì)樣本的要求。

    為進(jìn)一步保證檢測數(shù)據(jù)的真實(shí)性,本次試驗(yàn)采用盲法。由負(fù)責(zé)收集樣本的人員,將樣本去標(biāo)識(shí)化后進(jìn)行編號(hào),樣本新分配編號(hào)的原則建議根據(jù)樣本納入的先后順序,給予一個(gè)4 位數(shù)的樣本新分配編號(hào),1001,1002,…,1110。并在相應(yīng)表格中保留原始樣本號(hào)和樣本新分配編號(hào)的對(duì)應(yīng)關(guān)系,以便試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析核對(duì)。編號(hào)完畢再由一位負(fù)責(zé)檢測的人員進(jìn)檢測。負(fù)責(zé)檢測的人員需有兩位,此兩位人員將分別使用試劑A 和試劑B 對(duì)同一份樣本分別于同一時(shí)間進(jìn)行檢測,且此兩位檢測人員對(duì)于樣本信息是也是盲的,這樣做可以最大限度地減少人為因素給此次試驗(yàn)檢測過程以及結(jié)果的分析帶來的主觀影響。

    檢測完成后由樣本收集的人員負(fù)責(zé)匯總檢測數(shù)據(jù),以試劑A 作為受試試劑,試劑B 作為對(duì)比試劑。剔除超出線性范圍的檢測結(jié)果,對(duì)有效的檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行定量分析。統(tǒng)計(jì)兩種試劑測定結(jié)果間的相關(guān)性并對(duì)兩種試劑測定結(jié)果進(jìn)行偏倚分析(絕對(duì)偏倚、相對(duì)偏倚和醫(yī)學(xué)決定水平偏倚)。同時(shí)用SPSS 軟件分析兩種試劑測定結(jié)果的線性回歸方程,并分析回歸系數(shù)及常數(shù)的95%置信區(qū)間。

    本次試驗(yàn)入選并檢測的110 例血清樣本中共包含19 例干擾樣本,包含6 例黃疸異常樣本、6 例溶血樣本、7 例脂血樣本。本次試驗(yàn)入選并檢測的110 例血清樣本的檢測結(jié)果中有3 例樣本超出檢測限,其中1035、1057 號(hào)樣本試劑A 和試劑B 檢測結(jié)果均超過其各自線性范圍上限、1056號(hào)樣本試劑A 和試劑B 檢測結(jié)果低于其線性范圍下限,因此根據(jù)上文對(duì)于試驗(yàn)數(shù)據(jù)的要求,此三例樣本的檢測數(shù)據(jù)將不納入定量統(tǒng)計(jì),對(duì)剩余107例有效樣本檢測結(jié)果根據(jù)上述的分析要求進(jìn)行以下分析。

    有效樣本數(shù)量為107 例,試劑A 為受試試劑,覆蓋的檢測范圍為10-779U/L。設(shè)試劑B 測定結(jié)果為X,試劑A 測定結(jié)果為Y,經(jīng)計(jì)算,循環(huán)次數(shù)N 為107 次,r 值為0.9994,P 值為0.000(P〈0.001),根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)原理,可得此兩組數(shù)據(jù)高度相關(guān)。

    用SPSS 軟件分析,兩種試劑測定結(jié)果的線性回歸方程,并分析回歸系數(shù)及常數(shù)的95%置信區(qū)間。試劑A 測得樣本濃度范圍為10-779U/L,試劑A 和試劑B 的測定值的Pearson 相關(guān)系數(shù)R 為0.9994(P〈0.001)。以試劑B 測定結(jié)果為X,試劑A 測定結(jié)果為Y 變量擬合線性回歸方程,y=1.0068x-1.0766,其回歸系數(shù)為1.0068,回歸系數(shù)的95%可信區(qū)間為0.978~1.035,常數(shù)的95%可信區(qū)間為-5.843~ 3.688,線性回歸方程具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F 值4923.776,P〈0.001),說明試劑A 和試劑B 檢測結(jié)果相關(guān)性良好。

    對(duì)試劑A 與試劑B 每個(gè)樣本測定值之差與相應(yīng)兩系統(tǒng)檢測的均值作散點(diǎn)圖。觀察并分析各點(diǎn)的絕對(duì)偏倚分布情況。同時(shí)對(duì)試劑A 與試劑B 每個(gè)樣本測定值之比值與相應(yīng)兩系統(tǒng)測試均值作散點(diǎn)圖。觀察并分析各點(diǎn)的相對(duì)偏倚分布情況。以1.96SD 作為離群點(diǎn)的分界值,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。發(fā)現(xiàn)有7 例樣本的檢測結(jié)果為離群值樣本。其樣本信息分別為:樣本1,性別男,年齡51 歲,臨床診斷為末端回腸狹窄,試劑A 的檢測結(jié)果是19U/L,試劑B 的檢測結(jié)果是10U/L;樣本2,性別女,年齡37 歲,臨床診斷為高血壓、呼吸道感染、重度骨質(zhì)疏松、系統(tǒng)性紅斑狼瘡,試劑A 的檢測結(jié)果是20U/L,試劑B 的檢測結(jié)果是9U/L;樣本3,性別男,年齡68 歲,臨床診斷為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、高血壓、高脂血癥、前列腺增生、脂肪肝,試劑A 的檢測結(jié)果是18U/L,試劑B 的檢測結(jié)果是9U/L;樣本4,性別男,年齡64 歲,臨床診斷為慢性腎功能衰竭、尿毒癥期、腎性高血壓、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、腎性貧血、腎性骨病、腎透析狀態(tài),試劑A 的檢測結(jié)果是17U/L,試劑B 的檢測結(jié)果是9U/L;樣本5,性別女,年齡74 歲,臨床診斷為高血壓、高脂血癥、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、重度骨質(zhì)疏松、癤腫病、嚴(yán)重骨關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)衰弱,試劑A 的檢測結(jié)果是18U/L,試劑B 的檢測結(jié)果是10U/L;樣本6,性別女,年齡54 歲,臨床診斷為高血壓、高脂血癥、陣發(fā)性夜間性血紅蛋白尿癥、再生障礙性貧血,試劑A 的檢測結(jié)果是20U/L,試劑B 的檢測結(jié)果是10U/L;樣本6,性別男,年齡89 歲,臨床診斷為下咽癌、食管癌、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌、便秘,試劑A 的檢測結(jié)果是17U/L,試劑B 的檢測結(jié)果是10U/L

    此樣本涉及的臨床診斷如高血壓、高血脂、脂肪肝、系統(tǒng)性紅斑狼瘡可能會(huì)對(duì)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的測值產(chǎn)生一定影響,同時(shí)因?yàn)闄z測系統(tǒng)的差異也會(huì)對(duì)檢測結(jié)果產(chǎn)生不同程度的影響,因此出現(xiàn)離群現(xiàn)象,但如上文所述,其檢測結(jié)果在臨床上對(duì)于疾病的輔助診斷影響較小,如需判定疾病的種類還需要綜合其他的臨床檢測結(jié)果以及病人的病史進(jìn)行判定。

    同時(shí)對(duì)于丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶臨床關(guān)注濃度為60U/L 和300U/L,在此醫(yī)學(xué)決定水平處的偏倚分析如下:在60U/L 醫(yī)學(xué)決定水平處,本次試驗(yàn)計(jì)算出的絕對(duì)偏倚為-0.67U/L,相對(duì)偏倚為-1.12%;在300U/L醫(yī)學(xué)決定水平處,本次試驗(yàn)計(jì)算出的絕對(duì)偏倚為0.93U/L,相對(duì)偏倚為0.31%,均在可接受偏倚范圍內(nèi)。

    根據(jù)此次任意選取的兩種已上市的常見的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒作為檢測試劑,對(duì)110 例樣本同時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)分析得出,不同的試劑盒對(duì)于同一份樣本的檢測結(jié)果之間存在差異,但此差異的出現(xiàn)可能是因?yàn)闄z測系統(tǒng)及樣本本身造成的,此類情況在臨床上是可以接受的。

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