枸杞多糖對(duì)2，4-二氯苯氧乙酸染毒大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的保護(hù)作用

王曉嵐， 賈磊娜， 柴 茹， 王恒泉， 羅玉珍， 張鵬舉， 彭珍燕， 楊惠芳， 周 健

（1.寧夏醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生與管理學(xué)院職業(yè)衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生系，銀川 750004； 2.寧夏環(huán)境因素與慢性病控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，銀川 750004）

2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-dichlorophenoxyacetic acid，2，4-D）既可以作為植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)果蔬具有保鮮作用[1]，又廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)和林業(yè)，用于控制牧場(chǎng)、谷類(lèi)作物、陸生和水生植物的闊葉雜草以及家庭居住環(huán)境和公共道路上雜草的生長(zhǎng)[2]。因其具有成本低、有效性高、選擇性好等特點(diǎn)，因此適用范圍廣，職業(yè)和非職業(yè)暴露機(jī)會(huì)逐漸增大。2，4-D 具有神經(jīng)毒性作用，但對(duì)其作用機(jī)制研究尚少。枸杞多糖（lycium barbarum polysaccharide，LBP）是從枸杞中提取的一種生物活性物質(zhì)，具有增強(qiáng)免疫、抗氧化以及神經(jīng)保護(hù)等多種生物學(xué)效應(yīng)[3]。本研究通過(guò)2，4-D 體內(nèi)染毒實(shí)驗(yàn)，探討2，4-D 對(duì)染毒大鼠的神經(jīng)毒性作用及LBP 的神經(jīng)元保護(hù)作用，為2，4-D 的合理使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 主要試劑與儀器

2，4-D 標(biāo)準(zhǔn)品（純度為 99%，美國(guó) Sigma 公司），LBP（純度為80%，上海源葉生物科技有限公司）。TUNEL 熒光法檢測(cè)試劑盒（中國(guó)沈陽(yáng)萬(wàn)類(lèi)生物科技有限公司），Bax 抗體（美國(guó)Gene－Tex 公司），Bcl-2 抗體（美國(guó) GeneTex 公司），谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）測(cè)試盒（南京凱基生物科技發(fā)展有限公司），丙二醛（malonaldehyde，MDA）測(cè)定試劑盒（南京建成生物公司），超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒（南京建成生物公司），曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱和高架十字迷宮（北京碩林苑科技有限公司），倒置相差顯微鏡（日本Olympus 公司）。

1.2 動(dòng)物分組與染毒

SPF 級(jí)初斷乳SD 大鼠48 只，雌雄各半，體質(zhì)量為50~90 g，由寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證編碼：10752309201900022，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理審查編號(hào)：IACUC-NYLAC-2019-008）。適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周后，隨機(jī)分為4 組（每組12 只，分籠飼養(yǎng)，每籠 3 只），分別為 Control 組（去離子水）、2，4-D 組（75 mg·kg-1）、LBP 組（50 mg·kg-1）、2，4-D（75 mg·kg-1）+LBP（50 mg·kg-1）組，實(shí)驗(yàn)期間大鼠自由攝食、飲水，飼養(yǎng)環(huán)境溫度為18~22 ℃，濕度為40%~70%，自然晝夜節(jié)律光照。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.3.1 一般行為觀察 觀察各組大鼠的行為，包括形態(tài)變化（精神狀態(tài)，皮毛、黏膜及耳廓色澤，休息時(shí)的姿勢(shì)等情況），異常行為表現(xiàn)（如動(dòng)物的反抗觸摸、叫聲、驚跳、逃跑、洗臉、直立、撓抓等情緒性成分行為發(fā)生情況），隔天記錄1 次。

1.3.2 動(dòng)物體質(zhì)量及腦臟器系數(shù)測(cè)定 隔天稱(chēng)量并記錄大鼠體質(zhì)量1 次，直至實(shí)驗(yàn)終止；每天早晚各添加飼料和水1 次。體質(zhì)量增長(zhǎng)量（g）=實(shí)驗(yàn)后體質(zhì)量-實(shí)驗(yàn)前體質(zhì)量。大腦臟器系數(shù)=腦質(zhì)量（g）/體質(zhì)量（100 g）。

1.3.3 曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)[4]檢測(cè)2，4-D 染毒大鼠運(yùn)動(dòng)能力和探索能力的變化。末次染毒后24 h 內(nèi)進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)在暗光、無(wú)噪聲的環(huán)境下進(jìn)行，將大鼠置于曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱，采用雙盲法觀察5 min。每只動(dòng)物測(cè)試完畢后清理糞便，將實(shí)驗(yàn)箱內(nèi)部用75%的乙醇溶液擦拭干凈后，晾干，進(jìn)行下一次實(shí)驗(yàn)。

1.3.4 高架十字迷宮[5]末次染毒結(jié)束后將大鼠從中央格面向閉合臂放入迷宮，記錄5 min 內(nèi)的活動(dòng)情況。觀察指標(biāo)包括：開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)（必須有兩只前爪進(jìn)入臂內(nèi)）、開(kāi)放臂停留時(shí)間、閉合臂進(jìn)入次數(shù)、閉合臂停留時(shí)間。計(jì)算開(kāi)放臂停留時(shí)間比例、開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)比例、高架十字迷宮中總進(jìn)入次數(shù)。實(shí)驗(yàn)完成后將大鼠取出，將兩臂清理干凈，噴灑75%乙醇除去氣味。

1.3.5 大鼠血清中 SOD、GSH-Px 和 MDA 的測(cè)定 用10%水合氯醛（300 mg·kg-1）腹腔注射麻醉，開(kāi)胸暴露心臟，心尖取血6~10 mL，迅速低溫離心分離血清（4 ℃，3000 r·min-1，10 min），儲(chǔ)存于-20 ℃冰箱，根據(jù)試劑盒分別測(cè)定血清中SOD、GSH-Px 和 MDA 的含量。

1.3.6 HE 染色觀察海馬組織病理形態(tài)變化 大鼠取血后，每組隨機(jī)選取6 只大鼠，經(jīng)左心室快速灌注37 ℃生理鹽水150~200 mL，繼而先快后慢灌注4%多聚甲醛溶液（用PBS 配制，pH=7.4）200~300 mL，持續(xù)25~40 min，直至大鼠上肢、頸項(xiàng)和下肢僵硬后，斷頭取腦，置于4%多聚甲醛溶液中繼續(xù)固定48 h 以上。大鼠腦組織固定后，經(jīng)脫水、二甲苯透明、浸蠟和包埋，制成4 μm 厚的石蠟切片；75 ℃烘烤1 h 后HE 染色。光鏡下觀察切片，10×10 倍光鏡下定位海馬，10×40 倍光鏡下觀察海馬CA3 區(qū)錐體細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。每張切片取連續(xù)兩個(gè)視野，并保證錐體細(xì)胞層的弧度弦置于目鏡的直徑上，取兩視野的平均值為該切片錐體細(xì)胞數(shù)，3 張切片的平均值為該樣本的錐體細(xì)胞數(shù)。

1.3.7 TUNEL 染色觀察大鼠海馬神經(jīng)元凋亡 取材、包埋切片、脫蠟過(guò)程同HE 染色步驟。先滴加0.1%Triton X–100（0.1%檸檬酸鈉鹽配制）50 μL，室溫放置8 min。接著PBS 漂洗3 次，每次漂洗5 min。滴加 3 % H2O250 μL 進(jìn)行封閉，室溫放置10 min 后繼續(xù) PBS 漂洗 3 次，每次漂洗 5 min。Enzyme Solution 及 Label Solution 按 1∶9 配制（即用即配，冰上操作）。擦干標(biāo)本周?chē)?，滴加TUNEL反應(yīng)液50 μL。隨后保濕、避光、室溫孵育60 min后繼續(xù)PBS 漂洗 3 次，每次漂洗 5 min。進(jìn)行DAPI 復(fù)染核，室溫 5 min。PBS 漂洗 3 次，每次漂洗5 min?？篃晒馑p封片劑封片。鏡檢后拍照。

1.3.8 免疫組化法檢測(cè)Bcl-2 和Bax 凋亡蛋白的表達(dá) 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)各組大鼠海馬CA3區(qū)凋亡蛋白 Bax 和 Bcl-2 表達(dá)水平：取上述腦組織石蠟切片，梯度乙醇脫蠟，高壓抗原修復(fù)，Bax/Bcl-2 一抗孵育、結(jié)合二抗、DAB 顯色，梯度乙醇脫水、封片。400 倍光鏡下觀察陽(yáng)性細(xì)胞并計(jì)算平均吸光度值。結(jié)果判定：細(xì)胞膜或者是胞漿中呈棕黃色染色者為陽(yáng)性細(xì)胞。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用方差齊性檢驗(yàn)和單因素方差分析（One-Way ANOVA）。組間兩兩比較，方差齊時(shí)采用SNK-q法，方差不齊時(shí)采用非參數(shù)檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 一般行為觀察

實(shí)驗(yàn)前所有大鼠精神狀態(tài)良好，皮毛光滑，飲水?dāng)z食正常。隨著染毒時(shí)間延長(zhǎng)，2，4-D 組大鼠表現(xiàn)出毛色枯黃、神態(tài)倦怠、皮毛粗糙和易激惹狀態(tài)。

2.2 體質(zhì)量及腦臟器系數(shù)測(cè)定

各組大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)平緩，各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與 Control 組比較，2，4-D 組大鼠腦重和腦臟器系數(shù)降低（P<0.05）；與2，4-D組比較，LBP 組和 2，4-D+LBP 組大鼠腦質(zhì)量和腦臟器系數(shù)升高（P<0.05），見(jiàn)圖1。

圖1 各組大鼠體質(zhì)量、腦重及腦臟器系數(shù)比較（n=12，）

2.3 各組實(shí)驗(yàn)大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

與 Control 組比較，2，4-D 組大鼠中央格停留時(shí)間延長(zhǎng)，穿行格數(shù)、直立次數(shù)和修飾時(shí)間均減少（P 均<0.05）。與 2，4-D 組比較，LBP 組和 2，4-D+LBP 組中央格停留時(shí)間縮短，穿行格數(shù)、直立次數(shù)和修飾時(shí)間均增加（P 均<0.05），見(jiàn)圖2。

圖2 各組大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=12，）

2.4 各組實(shí)驗(yàn)大鼠高架十字迷宮結(jié)果

與 Control 組比較，2，4-D 組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)入開(kāi)放臂次數(shù)減少，開(kāi)放臂停留時(shí)間縮短，開(kāi)放臂停留時(shí)間百分比降低（P 均<0.05），開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)百分比無(wú)明顯變化（P>0.05）；與 2，4-D 組比較，LBP 組和 2，4-D+LBP 組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)入開(kāi)放臂次數(shù)增多，開(kāi)放臂停留時(shí)間延長(zhǎng)，開(kāi)放臂停留時(shí)間百分比升高（P 均<0.05），開(kāi)放臂進(jìn)入次數(shù)百分比無(wú)明顯變化（P>0.05），見(jiàn)圖3。

圖3 各組大鼠高架十字迷宮結(jié)果（n=12，）

2.5 HE 染色觀察各組大鼠海馬組織病理形態(tài)變化

與 Control 組比較，2，4-D 組大鼠海馬 CA3區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)減少，LBP 組大鼠海馬CA3 區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)增多（P 均<0.05）；與 2，4-D 組比較，2，4-D+LBP 組大鼠海馬CA3 區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)增多（P均<0.01），見(jiàn)表 1。

表1 各組大鼠海馬CA3 區(qū)錐體細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果（）

表1 各組大鼠海馬CA3 區(qū)錐體細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果（）

與對(duì)照組比較**P<0.01；與2，4-D 組比較##P<0.01。

組別 n 海馬CA3 區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)/個(gè)Control 6 113.57±7.72 2，4-D 6 102.01±4.99**LBP 6 142.11±6.24**##2，4-D+LBP 6 113.49±5.27##

Control 組在光鏡下觀察錐體細(xì)胞排列整齊，形態(tài)完整，細(xì)胞核均勻藍(lán)染，染色質(zhì)分布均勻，核仁明顯，細(xì)胞質(zhì)均勻、致密，未見(jiàn)異常改變；2，4-D 組大鼠海馬CA3 區(qū)錐體細(xì)胞間隙增寬，排列不整齊，細(xì)胞與周?chē)M織聯(lián)系疏松，錐體細(xì)胞有腫脹，部分胞核固縮呈三角形或不規(guī)則形，胞漿空泡狀。LBP 組光鏡下的細(xì)胞形態(tài)同對(duì)照組，錐體細(xì)胞形態(tài)完整、細(xì)胞與周?chē)M織聯(lián)系緊密、細(xì)胞核均勻藍(lán)染、染色質(zhì)分布均勻、核仁明顯、細(xì)胞質(zhì)均勻致密；2，4-D+LBP 組錐體細(xì)胞形態(tài)明顯優(yōu)于2，4-D 組，偶有染色質(zhì)邊集、胞核固縮呈三角形，見(jiàn)圖4。

圖4 各組大鼠海馬組織病理形態(tài)變化（HE×400）

2.6 各組大鼠血清中SOD、GSH-Px 和MDA 的含量比較

與 Control 組比較，2，4-D 組和 2，4-D+LBP組大鼠血清中SOD 和GSH-Px 含量降低，MDA含量升高（P 均<0.01）；與 2，4-D 組比較，LBP 組和2，4-D+LBP 組大鼠血清中 SOD 和 GSH-Px 含量升高，MDA 含量降低（P 均<0.01），見(jiàn)圖 5。

圖5 各組大鼠血清中 SOD、GSH-Px 活力和 MDA 含量比較（n=6，）

2.7 TUNEL 染色觀察各組大鼠海馬神經(jīng)元凋亡情況

TUNEL 染色發(fā)現(xiàn)，凋亡細(xì)胞呈現(xiàn)綠色或淡綠色熒光。與Control 組比較，2，4-D 組大鼠海馬神經(jīng)元陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多，細(xì)胞凋亡率升高（P 均<0.01）；與 2，4-D 組比較，LBP 組和 2，4-D+LBP組大鼠海馬神經(jīng)元陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少，細(xì)胞凋亡率降低（P 均<0.05），見(jiàn)圖 6。

圖6 TUNEL 染色法觀察各組大鼠海馬神經(jīng)元凋亡（n=6，）

2.8 Bcl-2 和Bax 凋亡蛋白的表達(dá)

免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)各組大鼠海馬CA3區(qū)Bax 和Bcl-2 表達(dá)。神經(jīng)元染色以胞漿有棕黃色物質(zhì)沉積為主，也有胞膜或核膜染色。與Control 組比較，2，4-D 組大鼠海馬 Bcl-2 表達(dá)降低，Bax 表達(dá)升高，Bcl-2/Bax 比值降低（P 均<0.05）。與 2，4- D 組比較，2，4-D+LBP 組大鼠海馬 CA3區(qū) Bcl-2 表達(dá)升高，Bax 表達(dá)降低，Bcl-2/Bax 比值升高（P 均<0.05），見(jiàn)圖 7。

圖7 各組大鼠海馬組織Bcl-2 和Bax 凋亡蛋白表達(dá)水平比較（n=6，）

3 討論

2，4-D 屬于激素型除草劑，是一種高效內(nèi)吸性除草劑[6]，具有較強(qiáng)的神經(jīng)毒性。Uyanikgil 等[7]發(fā)現(xiàn) 15 mg·L-1劑量 2，4-D 可使虹魚(yú)出現(xiàn)活動(dòng)減少、群居、呼吸不暢、突然旋轉(zhuǎn)和跳起、失去平衡等。Dehnert 等[8]研究結(jié)果顯示，2，4-D 可改變幼魚(yú)視覺(jué)基礎(chǔ)神經(jīng)回路的發(fā)育和功能。腦和脊髓的病理組織切片顯示神經(jīng)元丟失增加、細(xì)胞內(nèi)水腫、空泡，脊髓中神經(jīng)角質(zhì)增多及細(xì)胞固縮。有毒的外源化學(xué)物質(zhì)可能通過(guò)胎盤(pán)和乳汁影響胎兒的發(fā)育，而發(fā)育中的腦由于其血腦屏障尚未發(fā)育成熟更容易受到侵害，因此本研究以初斷乳大鼠建立 2，4-D 染毒模型，觀察 2，4-D 對(duì)初斷乳大鼠的神經(jīng)毒性作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，2，4-D 染毒組大鼠腦重和腦臟器系數(shù)降低，海馬CA3 區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)量明顯減少，錐體細(xì)胞間隙增寬，部分胞核固縮呈三角形或不規(guī)則形，胞漿空泡狀。行為學(xué)以動(dòng)物的自發(fā)行為為基礎(chǔ)，能夠反映動(dòng)物整體的生活行為改變。通過(guò)對(duì)新異環(huán)境的適應(yīng)和反應(yīng)，動(dòng)物的行為與中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生密切關(guān)系。本研究通過(guò)曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)、高架十字迷宮和懸尾試驗(yàn)觀察了2，4-D 染毒后大鼠神經(jīng)行為的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，2，4-D 組大鼠中央格停留時(shí)間與對(duì)照組相比延長(zhǎng)，提示2，4-D 染毒后大鼠對(duì)周?chē)h(huán)境的好奇心明顯減弱，探究行為減弱，大鼠緊張程度增加，表明2，4-D 可以對(duì)大鼠神經(jīng)行為產(chǎn)生影響，這可能與2，4-D 的神經(jīng)毒性密切相關(guān)。

目前，關(guān)于2，4-D 的神經(jīng)毒性作用機(jī)制尚未明確，可能與細(xì)胞凋亡、氧化應(yīng)激、抑制神經(jīng)軸生長(zhǎng)等有關(guān)，其中氧化應(yīng)激學(xué)說(shuō)在神經(jīng)毒性機(jī)制的研究中占有重要地位。2，4-D 表現(xiàn)出很強(qiáng)的神經(jīng)毒性，原因可能為氧化應(yīng)激發(fā)生伴隨了過(guò)多氧自由基的產(chǎn)生[9]。而機(jī)體清除氧自由基能力越強(qiáng)，SOD 與GSH-Px 活性越高。MDA 含量反映了細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度，MDA 含量越高細(xì)胞受自由基攻擊越嚴(yán)重，越容易產(chǎn)生細(xì)胞毒性。研究[10]顯示，孕期和哺乳期暴露2，4-D 引起仔鼠神經(jīng)行為發(fā)育的改變，其機(jī)制可能通過(guò)干擾抗氧化平衡系統(tǒng)而導(dǎo)致發(fā)育期腦組織的損傷所致。長(zhǎng)時(shí)間暴露于2，4-D 則可能會(huì)使生物體受到壓力，從而抑制其生長(zhǎng)發(fā)育并增加其腦部畸形的發(fā)生率[11]。本研究與上述研究結(jié)果一致，顯示2，4-D 染毒大鼠血清中SOD、GSH-Px 活性降低，MDA含量升高，提示2，4-D 引起大鼠體內(nèi)抗氧化酶活性下降，氧化應(yīng)激水平升高。

Mahmoudinia 等[12]研究發(fā)現(xiàn)，2，4-D 可以誘導(dǎo)人牙髓干細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激和凋亡。本課題組前期實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，2，4-D 可以引起PC12 細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激，引起PC12 細(xì)胞內(nèi)MDA 含量升高SOD 和 GSH-Px 活力降低[13]。后期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn) 2，4-D 引起了PC12 細(xì)胞線(xiàn)粒體膜電位下降，發(fā)生細(xì)胞凋亡。線(xiàn)粒體凋亡是細(xì)胞凋亡的主要途徑，對(duì)于維持細(xì)胞增殖與凋亡的平衡具有重要影響，凋亡過(guò)度或過(guò)低都會(huì)誘發(fā)相應(yīng)的疾病。Bcl-2 家族蛋白是調(diào)節(jié)線(xiàn)粒體凋亡因子釋放的主要蛋白，根據(jù)其功能可分為促凋亡蛋白和抑凋亡蛋白。正常情況下Bcl-2 等抗凋亡蛋白一般作為細(xì)胞器膜的整合膜蛋白被隔離起來(lái)，而B(niǎo)ax 等促凋亡蛋白則以非活性狀態(tài)分布于胞質(zhì)和細(xì)胞骨架上[14]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，2，4-D 染毒組大鼠海馬神經(jīng)元陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增多，細(xì)胞凋亡率升高，大鼠海馬組織Bcl-2 表達(dá)降低，Bax 表達(dá)升高，Bcl-2/Bax 比值降低，表明2，4-D 可以引起海馬神經(jīng)元凋亡。

LBP 可以保護(hù)肝功能[15]、提高免疫力[16]、抑制腫瘤細(xì)胞[17]，并能抗衰老和抗氧化[18]。Lam 等[19]研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LBP 具有促進(jìn)神經(jīng)元發(fā)生，調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激和炎癥激活的凋亡信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，具有神經(jīng)保護(hù)作用。LBP 可有效改善嚴(yán)重應(yīng)激所致的創(chuàng)傷性認(rèn)知功能障礙[20]。本研究結(jié)果顯示，LBP 干預(yù)后，大鼠海馬組織錐體細(xì)胞數(shù)量增多，形態(tài)規(guī)則，血清 MDA 含量降低，SOD、GSH-Px 活力升高、細(xì)胞凋亡率下降，抗凋亡蛋白Bcl-2 表達(dá)升高，促凋亡蛋白Bax 表達(dá)升高，Bcl-2/Bax 比值降低，說(shuō)明LBP 對(duì)2，4-D 染毒大鼠的神經(jīng)元具有保護(hù)作用。

綜上所述，2，4-D 可以引起實(shí)驗(yàn)大鼠血清抗氧化酶活性降低，造成海馬神經(jīng)元損傷和細(xì)胞凋亡，影響大鼠的神經(jīng)行為，表現(xiàn)出抑郁和焦慮狀態(tài)。LBP 具有抗氧化和抑制海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的作用，可為2，4-D 引起的神經(jīng)損傷提供治療和預(yù)防。