牛結(jié)核病的病原、臨床癥狀、診斷方法及綜合防治措施

張召議，包雨鑫，王慧玲

（1.通遼市高林屯種畜繁育中心內(nèi)蒙古通遼 028000；2.通遼市農(nóng)牧科學(xué)研究所內(nèi)蒙古通遼 028000；3.通遼市科爾沁區(qū)第七中學(xué)內(nèi)蒙古通遼 028000）

牛結(jié)核病是由牛分枝桿菌引起的人畜共患傳染病，被世界衛(wèi)生組織列為必須報告的疾病之一，是我國的二類動物疫病。據(jù)不完全統(tǒng)計，全世界范圍內(nèi)每年有5,000 萬頭以上的牛被結(jié)核分枝桿菌感染，患病牛造成的經(jīng)濟(jì)損失約在30 億美元以上?；疾∨５娜庵破坊蛉橹破返染胁≡⑸?，人們通過食入被污染的食物或吸入含有病原微生物的氣溶膠而患病[1]，雖然由于卡介苗的推廣，人感染結(jié)核病的發(fā)病率較過去有一定程度的下降，但由于器官移植等疾病導(dǎo)致的免疫抑制以及國際范圍內(nèi)的溝通交流逐漸頻繁導(dǎo)致該病的發(fā)病率又有了增加的趨勢。此外，在一些地區(qū)存在一定的野生動物感染結(jié)核病的情況，當(dāng)牛群與之接觸時有較大的患病風(fēng)險。近幾年，我國的物質(zhì)生活水平飛速提升，國民對于食品衛(wèi)生安全的要求也逐步提高，結(jié)核病等人畜共患傳染病也受到了廣泛的關(guān)注。

1 病原

牛分枝桿菌是分枝桿菌屬的成員，可分為牛分枝桿菌、禽分枝桿菌以及結(jié)核分枝桿菌，結(jié)核分枝桿菌能夠引起人的結(jié)核病，有時也能感染牛，牛分支桿菌則是牛結(jié)核病的主要病原，此外還能感染豬、鹿、大象等50 余種溫血脊椎動物和20 多種禽類，有時也能危害人類身體健康安全[2]，在所有人感染結(jié)核病的病例中約有5%～10%是由于牛分支桿菌感染引起的。牛分枝桿菌是革蘭氏陽性菌，外形呈棍狀，沒有芽孢和莢膜，不能運(yùn)動，染色鏡檢時經(jīng)常用葵-尼氏抗酸染色法，其他染色方法較難著色。體外培養(yǎng)該菌時溫度應(yīng)為37.5℃，pH 值在5.9～6.9 時生長良好，但生長速度較為緩慢。牛分枝桿菌有較為豐富的類脂和蠟脂物質(zhì)，故對外界環(huán)境有比較強(qiáng)的抵抗能力，干燥環(huán)境下能夠存活10 個月，在病變組織或塵埃中也能存活2～7 個月，在水中能存活半年，糞便、土壤中存活6～7 個月。但當(dāng)溫度過高時，該菌較易失活，在60℃下0.5h 就能夠殺滅該菌，陽光直射下幾小時就會死亡，所以經(jīng)過巴氏消毒的乳制品中即使存在牛分枝桿菌也不能危害人類健康。在日常生產(chǎn)過程中可以使用消毒劑進(jìn)行殺菌，例如甲酚皂、酒精、漂白粉溶液或甲醛等。

牛結(jié)核病侵害的牛不僅限于奶牛和黃牛，水牛也能發(fā)病，該病的傳染源是患病動物及患者，他們的排泄物、乳汁、唾液、鼻液、生殖道分泌物等均有大量的病原微生物，健康的易感動物或人在接觸到被污染的環(huán)境后經(jīng)由呼吸道或消化道被感染，其中飛沫傳播或媒介傳播是結(jié)核病的最常見發(fā)病方式。此外，交配活動也能夠傳播牛結(jié)核桿菌，犢牛吮吸含有病原的牛乳后也會發(fā)病。該病常呈散發(fā)或地方性流行，特別是在飼養(yǎng)管理不當(dāng)、通風(fēng)不良、飼養(yǎng)密度過大、日糧營養(yǎng)水平過低以及牛只缺乏運(yùn)動或使役過重時更易發(fā)病。

2 臨床癥狀

牛結(jié)核病的潛伏期多為10～45d，也有少數(shù)病例潛伏期可達(dá)數(shù)年，根據(jù)患病部位的不同可以將牛結(jié)核病分為肺結(jié)核、乳房結(jié)核、腸結(jié)核、淋巴結(jié)核、腦結(jié)核、生殖器結(jié)核以及胸膜結(jié)核等。

2.1 肺結(jié)核

患病牛長時間干咳，患病初期容易疲勞，出現(xiàn)短而干的咳嗽，尤其是當(dāng)其運(yùn)動或吸入冷空氣時咳嗽加劇。隨著病程延長，咳嗽逐漸加重，次數(shù)增多，逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)闈窨龋人詴r表現(xiàn)痛苦，呼吸頻率加快，容易發(fā)生氣短。鼻腔內(nèi)有黏性、膿性分泌物，呈灰黃色，有腐臭氣味。聽診胸部有啰音和摩擦音?；疾∨Ｏ?、貧血，各個淋巴結(jié)腫大，在患病后期出現(xiàn)體溫升高，呼吸困難，最終因心力衰竭而發(fā)生死亡。

2.2 乳房結(jié)核

患病牛表現(xiàn)為乳房淋巴結(jié)腫大，淋巴結(jié)上出現(xiàn)局限性、彌散性結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)無熱痛，奶?；疾『竺谌榱匡@著降低，乳汁逐步變稀薄，患病乳區(qū)萎縮，各乳區(qū)變得不對稱，乳頭變形，位置異常，嚴(yán)重時不泌乳。

2.3 腸結(jié)核

患病牛常表現(xiàn)為前胃弛緩，食欲減退，消瘦，乏力，頑固性腹瀉，排出稀粥樣糞便，糞便內(nèi)有膿性汁液或黏液，腹膜粗糙，腸系膜淋巴結(jié)腫脹。

2.4 其他類型

淋巴結(jié)核、生殖器結(jié)核、胸膜結(jié)核以及腦結(jié)核等在臨床上病例較少。

3 診斷方法

該病的診斷可以根據(jù)臨床癥狀進(jìn)行大致推斷，但由于牛結(jié)核病的臨床表現(xiàn)與發(fā)病部分息息相關(guān)，且癥狀與其他疾病有一定的相似之處，應(yīng)注意鑒別診斷。如需確診應(yīng)當(dāng)進(jìn)行實驗室診斷，常用的實驗室診斷方法可以分為細(xì)菌學(xué)診斷法、免疫學(xué)診斷法以及分子生物學(xué)診斷法。

3.1 細(xì)菌學(xué)診斷法

將患病動物的病變部位、排泄物、分泌物等作為病料，進(jìn)行涂片鏡檢，涂片檢出的陽性率相對降低，且不易區(qū)分活菌和死菌，應(yīng)當(dāng)進(jìn)一步進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和動物接種試驗，但由于牛分枝桿菌在體外培養(yǎng)過程中對于培養(yǎng)條件和營養(yǎng)水平要求較高，且生長緩慢，所以該方法不作為診斷牛結(jié)核病的推薦方法。

3.2 免疫學(xué)診斷法

目前可用于診斷牛結(jié)核病的免疫學(xué)方法有結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)、酶聯(lián)免疫吸附試驗、免疫膠體金診斷、γ -干擾素診斷以及淋巴細(xì)胞增生試驗等，在臨床實踐中經(jīng)常應(yīng)用的方法為酶聯(lián)免疫吸附試驗和免疫膠體金診斷，ELISA 法有較高的敏感性和特異性，而膠體金法則具有簡便快速、試驗結(jié)果容易保存、不需要較為精密的儀器設(shè)備的特點(diǎn)，兩者相結(jié)合可以作為牛結(jié)核病的診斷依據(jù)。

3.3 分子生物學(xué)診斷法

隨著分子生物學(xué)研究的不斷深入，牛結(jié)核病的分子生物學(xué)診斷技術(shù)也逐步應(yīng)用于臨床實踐，PCR 技術(shù)能夠很好的對生物樣本進(jìn)行快速檢測，同時還能夠分辨出結(jié)核分枝桿菌和非典型結(jié)核分枝桿菌等[3]。核酸探針技術(shù)、噬菌體測定技術(shù)、菌體成分檢測技術(shù)等方法也在不斷的改良、發(fā)展，相信在之后的結(jié)核病診斷中分子生物學(xué)一定能夠依靠其特點(diǎn)發(fā)揮更重要的作用。

4 綜合防治措施

牛結(jié)核病的危害性比較強(qiáng)，一旦發(fā)生疫情會造成較為嚴(yán)重的損失，且牛結(jié)核病發(fā)病后應(yīng)當(dāng)對患病動物進(jìn)行撲殺，故該病應(yīng)當(dāng)著重進(jìn)行預(yù)防。

4.1 定期檢疫

首先應(yīng)當(dāng)通過法定檢測方法對牛群進(jìn)行定期檢疫，當(dāng)發(fā)現(xiàn)結(jié)核陽性牛或陽性牛群時應(yīng)當(dāng)立刻報告上級主管部門并采取相應(yīng)措施。檢疫過程中應(yīng)當(dāng)盡量選擇免疫學(xué)診斷法進(jìn)行檢疫，抗體檢測法通常不用于牛群檢疫，這是由于結(jié)核桿菌生長速度較為緩慢，在感染過程中不同的階段分泌的蛋白質(zhì)有一定差異，此時依賴單一蛋白質(zhì)抗體檢測方法很有可能出現(xiàn)假陰性。健康牛群應(yīng)當(dāng)每年進(jìn)行兩次檢疫，當(dāng)發(fā)現(xiàn)陽性牛時要進(jìn)行淘汰，對動物尸體及其分泌物、排泄物或污染的用具等進(jìn)行深埋或焚燒。在發(fā)現(xiàn)陽性牛后一個月對牛群進(jìn)行第二次檢疫，此后每個月要進(jìn)行一次檢疫，半年內(nèi)有連續(xù)三次檢疫沒有陽性牛時可以認(rèn)為該牛場為健康牛場。

4.2 凈化污染牛群

多次檢疫不斷出現(xiàn)陽性動物的牛群稱為污染牛群，對于這類牛群每年應(yīng)當(dāng)進(jìn)行4 次以上的檢疫，對于檢疫結(jié)果陽性的牛和可疑牛應(yīng)當(dāng)立刻進(jìn)行分群隔離，將陽性牛和可疑牛剔除后再對牛群每隔1 個月進(jìn)行一次檢疫，不斷的將可疑牛和陽性牛剔除，直至連續(xù)三次沒有陽性牛出現(xiàn)。同時應(yīng)當(dāng)注重犢牛的健康，母牛產(chǎn)犢前應(yīng)進(jìn)行檢疫，每次哺乳前應(yīng)對乳區(qū)進(jìn)行清潔，犢牛在6 月齡內(nèi)應(yīng)進(jìn)行三次檢疫，均為陰性時方可認(rèn)為是健康牛只。注重消毒工作，對于牛舌、運(yùn)動場以及生產(chǎn)用具每周應(yīng)進(jìn)行消毒，消毒藥品應(yīng)定期進(jìn)行輪換，防止出現(xiàn)耐藥菌株。