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    豬圓環(huán)病毒3型感染情況的初步調(diào)查

    2021-11-22 08:05:32蔣小玲賀曉霜段燕方周雙海
    豬業(yè)科學(xué) 2021年8期
    關(guān)鍵詞:圓環(huán)感染率斷奶

    肖 興 ,蔣小玲 ,芮 雪 ,賀曉霜 ,段燕方 ,周雙海 *

    (1.衡陽市畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心,湖南 衡陽 421001;2.北京農(nóng)學(xué)院動物科技學(xué)院,北京 102206)

    豬圓環(huán)病毒(porcine circovirus,PCV)是目前已知的最小的動物病毒,其屬于DNA病毒。在20世紀(jì),豬圓環(huán)病毒1型(PCV1)和豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)相繼被發(fā)現(xiàn),其中前者對豬沒有致病性,后者則能引起包括母豬繁殖障礙在內(nèi)的多種疾病,并被認(rèn)為和豬皮炎與腎病綜合征(porcine dermatitis and nephropathy syndrome,PDNS)有關(guān),給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了較大經(jīng)濟(jì)損失[1]。2016年,一篇文獻(xiàn)報道在PDNS病豬與流產(chǎn)母豬體內(nèi)檢出一種新型豬圓環(huán)病毒,并被命名為PCV3[2];同年,另一篇文獻(xiàn)報道在心肌炎與多系統(tǒng)炎癥病豬體內(nèi)也檢出大量的PCV3[3];最近,一篇文獻(xiàn)報道用PCV3單獨感染試驗成功復(fù)制出PDNS病例[4]。這些資料表明PCV3也對豬具有致病性。一些文獻(xiàn)報道,PCV3已在中國一些豬場存在[5-6]。PCV3作為正在傳播的一種新的豬病病原,了解當(dāng)前其流行情況是有必要的。

    1 材料與方法

    1.1 臨床血清樣品

    湖南地區(qū)160頭斷奶仔豬和京津冀地區(qū)363頭斷奶仔豬的血清都采集于2020年。

    1.2 主要實驗材料

    病毒DNA提取試劑盒和PCR試劑Taq Master Mix都是湖南艾科瑞生物工程有限公司產(chǎn)品;檢測PCV3核酸的上游引物P1(序列為5-TGCCAGGGCTTGT TATTCTGA-3)和下游引物P2(序列為5-GGACACT CGTAGCAC CACAAAA-3)[6]由生工生物工程(上海)有限公司合成。

    1.3 實驗方法

    按照試劑盒說明書提取血清中的病毒DNA,用常規(guī)PCR方法檢 測PCV3核 酸。PCR體 系 為:10 μL Taq Master Mix、5 μL病毒DNA、10 pmol上 游 引 物P1、10 pmol下游引物P2,體系總體積為20 μL。PCR程序為:95 ℃ 5 min;95 ℃ 30 s,55 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s,循環(huán)40次;72 ℃ 10 min。取10 μL PCR產(chǎn)物在1.8%瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳30 min后,在凝膠成像儀上觀察是否有381 bp大小的特異性目的條帶。

    1.4 統(tǒng)計分析

    用卡方檢驗對不同豬場的個體陽性率數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    對國內(nèi)部分地區(qū)16個豬場的523頭斷奶仔豬的病毒核酸檢測結(jié)果(表1)顯示,豬場陽性率為68.75%,總的個體陽性率為31.74%,不同豬場的個體陽性率介于0%~80.00%之間,整體存在極顯著(χ2=147.4,P<0.01)差異。

    表1 病毒核酸檢測的整體結(jié)果

    鑒于所有檢測豬場的個體陽性率的整體存在極顯著差異,于是進(jìn)行再分割分析。結(jié)果(表2)顯示,可以按照個體陽性率的高低分割成4個組,即個體陽性率為0%的組(占31.25%)、個體陽性率大于0%但不大于20%的組(占18.75%)、個體陽性率大于20%但不大于70%的 組(占31.25%)、個 體 陽性率大于70%的組(占18.75%),這4個組之間差異達(dá)到極顯著(χ2=145.9,P<0.01)水平。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),有半數(shù)豬場的個體陽性率超過20%,其中超過70%的占18.75%(3/16);低于20%的也占半數(shù),其中個體陽性率為0%的占31.25%(5/16)。

    表2 病毒核酸檢測的分組結(jié)果

    3 討論

    目前,PCR方法是檢測PCV3感染的最常用方法。對采集于湖南省和京津冀地區(qū)共16個豬場的523頭斷奶仔豬血清的PCR檢測結(jié)果顯示,豬場陽性率為68.75%,超過三分之二,說明多數(shù)檢測豬場存在PCV3感染;總的個體陽性率為31.74%,接近三分之一,說明有不少檢測個體感染了PCV3;同時,不同豬場之間的個體陽性率的差異非常顯著,有的高達(dá)80%,有的低到為0。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),PCV3感染率超過20%以上的豬場達(dá)到50%,超過70%的豬場接近20%,而低于20%的豬場也達(dá)到50%,還有超過30%的豬場為0%。張帆帆等[7]對2016-2017年江西省256份樣品進(jìn)行PCR檢測后發(fā)現(xiàn)PCV3感染率為1.17%,季程遠(yuǎn)等[8]對2017年廣西地區(qū)63份豬淋巴結(jié)樣品進(jìn)行PCR檢測后發(fā)現(xiàn)PCV3感染率為19.0%,溫海京等[9]對2018—2019年京津冀地區(qū)120份仔豬樣品進(jìn)行PCR檢測后發(fā)現(xiàn)PCV3感染率為40.8%,這些文獻(xiàn)報道了近年來我國一些地區(qū)的PCV3感染率,不同地區(qū)表現(xiàn)為高低不一。本次對2020年湖南省和京津冀地區(qū)的初步調(diào)查也顯示出類似的結(jié)果,并且進(jìn)一步分析了不同豬場的感染率數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)PCV3感染率在接近20%的豬場高達(dá)70%以上、在大約半數(shù)的豬場低于20%、在超過30%的豬場仍然為0%。由于PCV3被認(rèn)為與母豬繁殖障礙、PDNS和心肌炎等疾病有關(guān)[2-3],并且已有試驗證實PCV3感染能夠引起PDNS[4],充分表明PCV3對豬具有明顯致病性。因此,存在母豬繁殖障礙和PDNS等疾病的豬場,有必要關(guān)注和防范臨床上的PCV3感染。

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