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    豬藍(lán)耳病及其綜合防控措施

    2021-11-22 08:05:26
    豬業(yè)科學(xué) 2021年8期
    關(guān)鍵詞:考星耳病毒株

    譚 濤

    (禮藍(lán)(上海)動(dòng)物保健有限公司,上海 200003)

    1 臨床癥狀

    母豬群感染豬藍(lán)耳病后會(huì)出現(xiàn)流產(chǎn)、產(chǎn)弱仔、木乃伊胎、流產(chǎn)率可達(dá)10%~50%(圖1);母豬還可以出現(xiàn)早產(chǎn)、分娩延遲、發(fā)情不正常、易返情等情況。公豬感染后精液品質(zhì)下降、性欲減弱;流產(chǎn)胎兒臍帶可能出現(xiàn)壞死性脈管炎;公、母豬都會(huì)出現(xiàn)厭食的現(xiàn)象。仔豬和生長(zhǎng)育肥豬主要以呼吸道癥狀為主,表現(xiàn)體溫升高、呼吸困難等肺炎癥狀;有的母豬、保育豬會(huì)出現(xiàn)軀體末端皮膚發(fā)紺或者耳部皮膚發(fā)紫即“藍(lán)耳”現(xiàn)象(圖2,圖3),有時(shí)候豬只會(huì)出現(xiàn)眼結(jié)膜炎等臨床癥狀(圖4,圖5)。部分豬后驅(qū)無(wú)力、不能站立或共濟(jì)失調(diào);仔豬、保育豬呼吸困難,發(fā)熱或腹瀉(圖6,圖7),急性暴發(fā)時(shí)發(fā)病率很高,豬藍(lán)耳病陰性場(chǎng)暴發(fā)該病時(shí),發(fā)病率可接近100%,死亡率50%以上;育肥豬急性感染時(shí)發(fā)病率可達(dá)60%,死亡率約10~30%。

    圖1 豬藍(lán)耳病感染妊娠后期的母豬導(dǎo)致流產(chǎn)

    圖2 豬藍(lán)耳病急性感染造成的母豬死亡

    圖3 病豬耳部發(fā)紫即所謂的“藍(lán)耳”現(xiàn)象

    圖4 豬藍(lán)耳病感染后,有時(shí)可以造成豬眼結(jié)膜發(fā)紅

    圖5 病豬有時(shí)會(huì)出現(xiàn)眼結(jié)膜炎

    圖6 產(chǎn)房仔豬感染豬藍(lán)耳病后會(huì)造成發(fā)燒、呼吸困難和高死亡率

    2 病理變化

    豬藍(lán)耳病感染后不同日齡的豬只表現(xiàn)出相似的病理變化,但感染毒株的毒力不同,其造成的病變程度和病變范圍也有所區(qū)別[4-5]。病理變化主要集中在呼吸系統(tǒng)和淋巴系統(tǒng)上。

    哺乳仔豬:肺臟紅褐色斑駁狀,水腫,指壓不塌陷,表現(xiàn)間質(zhì)性肺炎;全身各處淋巴結(jié)發(fā)生水腫、周圍黃染或褐色腫大;可見腹腔、胸腔和心包腔內(nèi)清亮積液。

    保育豬:肺臟發(fā)生間質(zhì)性肺炎,觸摸有彈性但不易塌陷,北美型豬藍(lán)耳病病毒在攻毒試驗(yàn)中會(huì)造成感染豬只肺部深紅色實(shí)變(圖8);全身淋巴結(jié)水腫,嚴(yán)重的呈紅褐色。

    圖8 北美型豬藍(lán)耳病病毒株感染豬只10 d后的肺部病變,肺臟表面出現(xiàn)深紅色實(shí)變

    生長(zhǎng)育肥豬:肺臟多呈現(xiàn)暗紅或紅褐色。心臟出現(xiàn)輕度至中度的多灶性淋巴組織脈管炎和血管周心肌炎[5-8]。偶爾可見輕度的心肌纖維壞死[8]。有時(shí)在小腦、大腦和/或腦干中出現(xiàn)輕度的淋巴組織腦白質(zhì)炎或腦炎[5,8-10]。

    種豬:流產(chǎn)母豬會(huì)引起輕度到中度的子宮內(nèi)膜炎和子宮肌炎;公豬精液品質(zhì)下降,如精子畸形率上升、精子活力下降、精液稀薄等。

    微觀病理變化主要為間質(zhì)性肺炎,肺組織血管阻塞、淤血、水腫,單核細(xì)胞浸潤(rùn)導(dǎo)致肺泡明顯隔膜增厚,血管周圍會(huì)出現(xiàn)單核細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象(圖9)[11]。

    圖9 豬藍(lán)耳病病毒感染仔豬肺部微觀病變

    3 病原學(xué)與免疫學(xué)

    豬藍(lán)耳病病毒屬于套式病毒目,動(dòng)脈炎病毒科,動(dòng)脈炎病毒屬。病毒粒子呈球形,有囊膜,直徑在40~60 nm之間,表面有約5 nm大小的突起。核衣殼呈二十面體對(duì)稱,直徑為25~30 nm(圖10)。分為2種基因型,即Ⅰ型(歐洲型)和Ⅱ型(北美型),兩型間的序列同源性不到60%。2個(gè)基因型的代表毒株分別為L(zhǎng)V株和VR-2332株[12]。

    圖10 豬藍(lán)耳病病毒粒子模型

    豬藍(lán)耳病病毒的基因組是一條長(zhǎng)約15 kb的單股正鏈RNA,基因組約四分之三編碼非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP),四分之一編碼結(jié)構(gòu)蛋白(圖11)。作為RNA病毒,豬藍(lán)耳病病毒基因變異快速。該病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白基因變異相對(duì)較大,NSP的功能主要是蛋白酶、復(fù)制酶和聚合酶活性,不產(chǎn)生中和抗體。豬藍(lán)耳病病毒的結(jié)構(gòu)蛋白基因變異相對(duì)較小,該病毒共編碼7個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白,功能各不相同(表1)。GP5和非糖基化的M蛋白是病毒表面主要囊膜蛋白,GP5是病毒粒子中功能最豐富的糖蛋白,參與病毒感染與免疫,最新研究表明囊膜蛋白GP2-GP5刺激產(chǎn)生中和抗體。PRRSV的核衣殼蛋白(N蛋白)是病毒最主要的結(jié)構(gòu)蛋白之一,具有很多抗原表位,產(chǎn)生抗體最早,病毒感染7~10 d就能檢測(cè)到高滴度的N蛋白抗體水平,所以常作為診斷和血清學(xué)調(diào)查的理想對(duì)象[13]。

    表1 藍(lán)耳病病毒基因編碼蛋白及功能

    圖11 藍(lán)耳病病毒基因組結(jié)構(gòu)模式圖

    2006年以來(lái)中國(guó)不斷分離到北美株高致病性豬藍(lán)耳病病毒(HP-PRRSV),又被稱作變異株,判定HP-PRRSV毒株的依據(jù)是:相比經(jīng)典北美株病毒,變異株非結(jié)構(gòu)蛋白(NSP)中的NSP2基因編碼的482及533-561位氨基酸共缺失30個(gè)氨基酸,即90個(gè)核苷酸[1]。中國(guó)變異株豬藍(lán)耳病病毒代表株有JXA1、HuN4-F112、以及TJM-F92(圖12)等。2014年開始,國(guó)內(nèi)出現(xiàn)了類NADC30毒株,該毒株和美國(guó)的NADC30毒株高度同源[3,14-15]。近幾年不斷有報(bào)道疫苗株與野毒重組的發(fā)生,毒株的多樣性也增加了豬藍(lán)耳病防控的難度。

    圖12 藍(lán)耳病病毒基因組:江西毒株JXA1和天津毒株TJM-F92的基因差異

    豬藍(lán)耳病病毒不耐高溫,56 ℃下45 min即失活。低溫保存時(shí),豬藍(lán)耳病病毒具有較好的穩(wěn)定性[12]。同時(shí),PRRSV在微酸性條件下更易復(fù)制,在pH低于5和高于7的條件下,感染力下降90%以上。

    豬藍(lán)耳病病毒首先感染豬肺部,然后進(jìn)入淋巴系統(tǒng),進(jìn)一步分布到全身各組織和器官,并產(chǎn)生相應(yīng)的病理變化。無(wú)論豬藍(lán)耳病病毒通過(guò)哪種途徑侵入,有效感染主要發(fā)生在肺部的肺泡巨噬細(xì)胞中。感染豬藍(lán)耳病病毒的豬病毒血癥持續(xù)時(shí)間長(zhǎng),還可能長(zhǎng)期的排毒(圖13)。實(shí)驗(yàn)感染條件下在30 d內(nèi)可以檢測(cè)到病毒血癥,攻毒后14~120 d檢測(cè)到中和抗體,14~120 d可以檢測(cè)到IFN-γ介導(dǎo)的細(xì)胞免疫反應(yīng)[18]。病毒主要在扁桃體、肺和淋巴組織中持續(xù)性復(fù)制。出生后感染的豬體內(nèi),豬藍(lán)耳病病毒能持續(xù)性存在長(zhǎng)達(dá)150 d;而先天感染的豬體內(nèi)甚至能存在長(zhǎng)達(dá)210 d之久[12]。

    圖13 豬藍(lán)耳病的特征之一是其能夠長(zhǎng)時(shí)間在感染豬群內(nèi)長(zhǎng)期存在,形成持續(xù)性感染,有時(shí)會(huì)間歇性排毒[16- 17]

    當(dāng)豬只體內(nèi)的豬藍(lán)耳病抗體處于低水平時(shí),病毒與抗體在巨噬細(xì)胞上結(jié)合后會(huì)使病毒更容易進(jìn)入巨噬細(xì)胞,促進(jìn)豬藍(lán)耳病病毒在巨噬細(xì)胞中的復(fù)制,這種作用被稱為抗體依賴性復(fù)制增強(qiáng)效應(yīng)(ADE)[19]。因此低濃度的抗體會(huì)增加病毒粒子與巨噬細(xì)胞結(jié)合機(jī)會(huì),可能會(huì)加重疾病的發(fā)生。

    豬藍(lán)耳病的另外一個(gè)重要的危害是豬藍(lán)耳病感染的豬群會(huì)出現(xiàn)免疫抑制的現(xiàn)象。豬藍(lán)耳病病毒可以調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞(DCs)的細(xì)胞因子產(chǎn)量,調(diào)控抗原遞呈相關(guān)分子的表達(dá),從而抑制天然免疫和特異性免疫反應(yīng),引起免疫抑制[20-22]。免疫抑制的產(chǎn)生還與豬藍(lán)耳病病毒的感染有關(guān)。豬藍(lán)耳病病毒感染豬群后,主要在肺泡巨嗜細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞內(nèi)復(fù)制,在復(fù)制的過(guò)程中,病毒會(huì)誘導(dǎo)感染細(xì)胞和周邊未感染細(xì)胞的死亡和凋亡,導(dǎo)致肺泡巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞數(shù)量的大量減少,而肺泡巨噬細(xì)胞等具有吞噬、殺死外來(lái)病原,將病原進(jìn)行抗原處理、遞呈給免疫系統(tǒng)的功能,一旦這類細(xì)胞在豬藍(lán)耳病病毒的感染過(guò)程

    中死亡,那么必然導(dǎo)致機(jī)體的整體免疫能力大大下降,從而出現(xiàn)免疫抑制[23]。在感染期間,由于免疫抑制的存在,動(dòng)物對(duì)其他病原的免疫反應(yīng)能力下降,抗體產(chǎn)生遲緩、低下,對(duì)細(xì)菌的入侵清除能力下降,繼發(fā)細(xì)菌感染的機(jī)會(huì)大大增強(qiáng)。因此,由于免疫抑制的存在,豬藍(lán)耳病感染的豬場(chǎng),豬瘟、豬偽狂犬病等常見疾病的抗體水平不高,整齊度低,且常伴隨非常嚴(yán)重的副豬嗜血桿菌、胸膜肺炎放線桿菌、鏈球菌、巴氏桿菌的感染。

    4 豬藍(lán)耳病的傳播

    豬藍(lán)耳病的主要傳播途徑為水平傳播、垂直傳播。除了豬只之間的直接傳播之外,還有物品或蚊蟲引起的間接傳播,包括:設(shè)備、工作服、靴子、墊料、水、飼料、活載體(蒼蠅、蚊子等帶毒者)、懸浮微粒等;攜帶豬藍(lán)耳病病毒的空氣塵埃造成的傳播距離可達(dá)9.1 km[24]。

    豬藍(lán)耳病病毒在豬場(chǎng)豬群中的流行傳播與豬場(chǎng)的飼養(yǎng)模式有關(guān),尤其是單點(diǎn)式飼養(yǎng)模式,該病毒可以通過(guò)公豬的精液傳給母豬,也能通過(guò)母豬的胎盤屏障傳給胎兒;在哺乳、 保育、生長(zhǎng)及育肥屠宰豬群各階段豬藍(lán)耳病病毒都可以通過(guò)轉(zhuǎn)群、注射針頭、排泄物及蒼蠅、蚊子等昆蟲媒介而流行傳播;種豬群引入后備種豬也是豬藍(lán)耳病流行傳播的常見途徑;許多豬場(chǎng)管理不善,不能嚴(yán)格執(zhí)行全進(jìn)全出,導(dǎo)致豬藍(lán)耳病病毒感染的生長(zhǎng)育肥豬群成為內(nèi)部循環(huán)感染的重要傳染源,通過(guò)水平傳播或間接傳播等方式,發(fā)生逆向或正向感染,導(dǎo)致仔豬群、母豬群和/或大的生長(zhǎng)育肥豬群感染甚至發(fā)?。▓D14)。

    圖14 豬藍(lán)耳病病毒在豬場(chǎng)的傳播和循環(huán)

    5 診斷與檢測(cè)

    科學(xué)的診斷需要結(jié)合臨床癥狀、流行病學(xué)、剖檢變化以及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)(血清抗體檢測(cè)以及病原檢測(cè)等)。但是,目前國(guó)內(nèi)的組織病理學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)室診斷使用的不多。

    血液樣品和組織樣品采集:前者主要用于豬藍(lán)耳病血清學(xué)抗體檢測(cè),而后者主要用于豬藍(lán)耳病病原檢測(cè);豬藍(lán)耳病病原檢測(cè)普遍采用RT-PCR,該方法靈敏度高,可對(duì)組織、唾液及疾病急性發(fā)作期血清進(jìn)行檢測(cè)。

    RT-PCR檢測(cè)可區(qū)分經(jīng)典豬藍(lán)耳病病毒和突變株豬藍(lán)耳病病毒,但不能區(qū)分疫苗毒株與野毒毒株,如果要區(qū)分的話需要進(jìn)行基因測(cè)序。ELISA檢測(cè)也不能區(qū)分野毒感染還是疫苗免疫產(chǎn)生的抗體,因此,實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果要與豬群的免疫情況以及臨床發(fā)病情況結(jié)合起來(lái),進(jìn)行綜合診斷。

    目前口腔唾液檢測(cè)已經(jīng)得到了相當(dāng)廣泛的使用。具體的方法為:將棉繩懸掛于發(fā)病豬群或可疑豬群欄舍之上(長(zhǎng)度以豬群可以咀嚼到為佳),任豬只含咬,待豬群咀嚼20 min后,將棉繩上的唾液擠入一個(gè)封口袋,再將收集的唾液轉(zhuǎn)入15 mL離心管保存送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)之前,將唾液樣本 10 000 r/min離心15 min,之后0.22 μm濾膜過(guò)濾,再作進(jìn)一步的抗原或者抗體檢測(cè)。

    血清學(xué)ELISA檢測(cè)PRRS-S/P值評(píng)判參考標(biāo)準(zhǔn)(IDEXX?試劑盒)見表2。需要引起注意的是,在豬場(chǎng)實(shí)際進(jìn)行豬藍(lán)耳病抗體的監(jiān)測(cè)時(shí),以上的判定方法不一定與豬場(chǎng)實(shí)際感染狀況符合,所以S/P值判定豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病感染狀態(tài)的方法僅僅作為參考,而不能作為確切的診斷方法。

    表2 血清學(xué)ELISA檢測(cè)豬藍(lán)耳病抗體S/P值的參考標(biāo)準(zhǔn)(IDEXX?試劑盒)

    6 防控

    豬藍(lán)耳病的控制方法需要做好三方面的工作:良好的飼養(yǎng)管理和生物安全;選擇安全性好的疫苗并制定科學(xué)的免疫程序;合理的藥物保健程序。

    6.1 建立良好的飼養(yǎng)管理與生物安全

    1)嚴(yán)格控制豬群的流動(dòng),避免不同批次和不同豬群的接觸,盡量做到全進(jìn)全出;

    2)引種:盡量避免一次性引入大量后備母豬;盡量避免一次性從多個(gè)來(lái)源同時(shí)引進(jìn)后備母豬(或后備公豬),引種后需要進(jìn)行隔離、馴化;

    3)保持豬舍良好的溫度、濕度與合理的飼養(yǎng)密度;防止飼料的霉變或者營(yíng)養(yǎng)不足;

    4)對(duì)豬藍(lán)耳病的陽(yáng)性豬場(chǎng)進(jìn)行封群,使其自然的轉(zhuǎn)陰,但此方法不適合單點(diǎn)飼養(yǎng)模式;

    5)對(duì)豬藍(lán)耳病發(fā)病嚴(yán)重的豬場(chǎng)進(jìn)行清群并重新建群;

    6)條件允許時(shí)盡量采用分胎次飼養(yǎng)、多點(diǎn)式飼養(yǎng);

    7)有條件的情況下,可以考慮安裝空氣過(guò)濾設(shè)備,尤其是公豬站。

    6.2 疫苗免疫

    豬藍(lán)耳病疫苗使用的原則是安全和有效:疫苗注射后注意不能造成豬群的不良反應(yīng)比如流產(chǎn)等;免疫疫苗以后也能抵抗豬藍(lán)耳病的感染,起到預(yù)防豬藍(lán)耳病的作用。需要引起注意的是,豬藍(lán)耳病疫苗接種后產(chǎn)生的免疫是部分保護(hù)(partial protection)而非完全保護(hù)(complete protection);豬藍(lán)耳病疫苗接種后不能阻止野毒的感染,但可以降低感染野毒后造成的臨床癥狀和損失。有專家指出,疫苗的不規(guī)范使用和免疫程序不科學(xué)也是豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病難以控制的原因之一。

    國(guó)內(nèi)豬藍(lán)耳病疫苗生產(chǎn)廠家有30多家。疫苗包括滅活疫苗和弱毒疫苗。弱毒疫苗包括以CH-1R、R98、VR2332為代表的經(jīng)典毒株疫苗,以 及 以JXA1-R、HuN4-F112、TJM-F92、GDr180株為代表的高致病性毒株疫苗。關(guān)于豬藍(lán)耳病病毒不同毒株之間的交叉保護(hù)效果以及滅活疫苗的保護(hù)效果,專家們還存在爭(zhēng)議。

    一個(gè)豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病疫苗的免疫,最好先做全群抗體檢測(cè)分析(按規(guī)范的采血方案),將豬場(chǎng)豬群豬藍(lán)耳病的感染狀況進(jìn)行分類,分陰性場(chǎng),穩(wěn)定不活躍場(chǎng)、穩(wěn)定控制場(chǎng)、穩(wěn)定活躍場(chǎng)及不穩(wěn)定場(chǎng)(表3),再進(jìn)一步?jīng)Q定是否進(jìn)行豬藍(lán)耳病疫苗免疫。同時(shí),豬場(chǎng)要了解仔豬豬藍(lán)耳病病毒抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)的時(shí)間,從而確定仔豬最佳免疫時(shí)機(jī)。

    表3 根據(jù)豬場(chǎng)豬群豬藍(lán)耳病病毒的排毒和感染狀況,將豬場(chǎng)的藍(lán)耳病狀況劃分為4個(gè)等級(jí)

    6.3 做好藥物保健,控制繼發(fā)感染

    豬藍(lán)耳病感染以后豬只免疫系統(tǒng)受損,機(jī)體免疫力下降,很容易發(fā)生各種細(xì)菌性的繼發(fā)感染,導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率更高??刂坪眉?xì)菌的繼發(fā)感染可以控制由于繼發(fā)細(xì)菌性感染而造成的死亡,減少經(jīng)濟(jì)損失。有些藥物如替米考星可以在巨噬細(xì)胞內(nèi)富集,殺菌的效果更明顯[25]。同時(shí)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的改善還能有助于巨噬細(xì)胞抵抗病毒性感染[26]。這種抗病毒的作用是間接的,與豬藍(lán)耳病對(duì)巨噬細(xì)胞的吸附和侵入后的脫衣殼作用密切相關(guān)。

    豬藍(lán)耳病病毒感染豬體后首先在局部組織的巨噬細(xì)胞內(nèi)復(fù)制,然后迅速向淋巴組織、肺擴(kuò)散,最終到達(dá)肺泡巨噬細(xì)胞表面,通過(guò)與肺泡巨噬細(xì)胞膜表面上的受體結(jié)合,誘導(dǎo)細(xì)胞吞噬病毒而進(jìn)入細(xì)胞。豬藍(lán)耳病病毒進(jìn)入巨噬細(xì)胞后,將同細(xì)胞內(nèi)的溶酶體融合,溶酶體內(nèi)含有豐富的各種蛋白酶,這些酶必須在酸性的環(huán)境下才能發(fā)生酶促水解反應(yīng),豬藍(lán)耳病病毒在溶酶體內(nèi)通過(guò)這些酶的作用脫去病毒表面的核衣殼[27-29]。Nauwynck等研究發(fā)現(xiàn),豬藍(lán)耳病的吸附并進(jìn)入巨噬細(xì)胞的過(guò)程需要偏酸性的環(huán)境,并且進(jìn)入細(xì)胞后的病毒復(fù)制進(jìn)程仍然依賴于低pH的環(huán)境,如果沒(méi)有足夠的H+進(jìn)入,溶酶體內(nèi)的pH就會(huì)升高,豬藍(lán)耳病病毒的脫殼將減緩甚至失敗[27,30]。

    7 替米考星在控制豬藍(lán)耳病感染中的應(yīng)用

    替米考星是一類大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,該抗生素被口服后可迅速被吸收,具有良好的組織穿透力,能快速聚集于肺臟,并主要聚集在肺臟,而在血液中的濃度極低。研究資料表明,替米考星連續(xù)400 mg/kg 飼喂10 d,在肺部組織的含量是在血液中的11倍(2.59/0.23)。替米考星進(jìn)入肺部組織后,會(huì)集中于巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,尤其肺泡巨噬細(xì)胞,而且從亞細(xì)胞器的分布來(lái)看,替米考星主要分布于肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)的溶酶體內(nèi),其細(xì)胞內(nèi)外的濃度差可以高達(dá)75倍(圖15),而豬藍(lán)耳病感染動(dòng)物機(jī)體后,病毒的復(fù)制過(guò)程中最重要的脫殼過(guò)程就在此處完成,替米考星的這種嗜巨噬細(xì)胞溶酶體的特性,是它間接抑制豬藍(lán)耳病復(fù)制的基礎(chǔ)[25]。替米考星有2個(gè)堿性基團(tuán),其pKa值分別為7.4和8.5,這種堿性基團(tuán)以在巨噬細(xì)胞內(nèi)(尤其是溶酶體內(nèi))的高含量,可以改變巨噬細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境,降低豬藍(lán)耳病病毒的復(fù)制速度[31]。

    圖15 替米考星在細(xì)胞內(nèi)外的濃度

    2001年,美國(guó)明尼蘇達(dá)州立大學(xué)的Thomas Molitor報(bào)道,如果將豬藍(lán)耳病病毒直接暴露于替米考星溶液中,讓替米考星先作用于豬藍(lán)耳病病毒,再將處理完畢的豬藍(lán)耳病病毒感染肺泡巨噬細(xì)胞,此時(shí)的替米考星并不能殺死或者抑制豬藍(lán)耳病病毒的復(fù)制,對(duì)豬藍(lán)耳病病毒的活性也沒(méi)有任何影響;但是如果反過(guò)來(lái),先將肺泡巨噬細(xì)胞用替米考星處理后,再感染豬藍(lán)耳病病毒,發(fā)現(xiàn)豬藍(lán)耳病病毒在肺泡巨噬細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制量大大降低,明顯存在抑制作用,但存在劑量依賴性[26]。在替米考星的濃度達(dá)到0.1~1 μg/mL時(shí),豬藍(lán)耳病病毒的復(fù)制量比沒(méi)有使用替米考星處理的對(duì)照組下降約30%~40%、如果替米考星的量達(dá)到10 μg/mL時(shí),豬藍(lán)耳病病毒復(fù)制幾乎停止。美國(guó)伊利諾斯州立大學(xué)Yijun Du等人研究也發(fā)現(xiàn),替米考星無(wú)論對(duì)歐洲型還是北美型豬藍(lán)耳病病毒,在豬肺泡巨噬細(xì)胞中均有抑制豬藍(lán)耳病病毒復(fù)制的作用[32]。泰國(guó)學(xué)者Korakrit Poonsuk和越南Chung Hoang也發(fā)現(xiàn),替米考星對(duì)流行于亞太地區(qū)的高致病性豬藍(lán)耳病病毒,也同樣存在抑制其復(fù)制作用[33]。

    David Benf ield對(duì)豬藍(lán)耳病陰性保育豬進(jìn)行提前1周飼喂替米考星,連續(xù)飼喂28 d,在第7天時(shí)進(jìn)行強(qiáng)毒攻毒試驗(yàn),結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用替米考星組在日增重、采食量方面均比未使用替米考星組高,而料重比比未使用替米考星組低;通過(guò)分析血清和肺組織中的病毒發(fā)現(xiàn),使用替米考星后血清中的豬藍(lán)耳病病毒的陽(yáng)性率從75.9%下降到58.6%,肺組織中豬藍(lán)耳病病毒陽(yáng)性率則從48.3%下降到34.5%。

    替米考星對(duì)豬藍(lán)耳病陽(yáng)性豬群的效果除了控制繼發(fā)感染與減緩病毒的復(fù)制之外,還與它降低炎癥反應(yīng)的效果有關(guān)。細(xì)胞因子可以造成炎癥反應(yīng),而替米考星可以調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的表達(dá),從而抑制和減輕炎癥反應(yīng)。同時(shí),替米考星可以增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的效率,使之更有效地對(duì)凋亡細(xì)胞進(jìn)行吞噬,這樣就減少細(xì)胞凋亡和破裂導(dǎo)致的炎性因子釋放,進(jìn)一步降低炎癥反應(yīng)[34-37]。替米考星還具有免疫調(diào)節(jié)和抗炎作用,能夠抑制“細(xì)胞因子風(fēng)暴”,并能通過(guò)免疫調(diào)節(jié)作用減輕感染后的臨床癥狀。此外,替米考星本身作為一種抗生素,可以有效控制豬藍(lán)耳病發(fā)生后的細(xì)菌性的繼發(fā)感染,這種混合感染往往造成嚴(yán)重的肺炎。在實(shí)際臨床應(yīng)用時(shí),使用替米考星配合其他藥物,可以顯著降低豬藍(lán)耳病陽(yáng)性場(chǎng)保育豬的死淘率。

    2006年的第19屆世界豬病大會(huì)上,Misener報(bào)道了一個(gè)加拿大豬場(chǎng)的案例。一家1 690頭母豬的豬場(chǎng),含有分娩場(chǎng)和保育場(chǎng),雖然該場(chǎng)進(jìn)行過(guò)豬藍(lán)耳病疫苗的常規(guī)免疫,但仍然發(fā)生了豬藍(lán)耳病。該豬場(chǎng)后來(lái)采取了含有豬藍(lán)耳病野毒的血清對(duì)豬群進(jìn)行接種,并且對(duì)比了試驗(yàn)組(血清接種結(jié)合添加替米考星)與對(duì)照組(只有血清接種)的結(jié)果(表4),結(jié)果顯示,未加替米考星的對(duì)照組的死亡率為15.8%,而添加了替米考星的試驗(yàn)組死亡率僅為1.1%;對(duì)照組流產(chǎn)率為42.3%,而添加了替米考星的試驗(yàn)組流產(chǎn)率僅為5.2%(圖16)。

    圖16 添加替米考星的對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果(1)

    表4 加拿大某豬場(chǎng)暴發(fā)豬藍(lán)耳病后,在使用活病毒血清接種的方法時(shí),進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)

    Karen Lehe報(bào)道,一家位于美國(guó)印第安納州的1 700頭母豬的豬場(chǎng),在懷孕舍突然發(fā)生個(gè)別母豬的流產(chǎn)后,母豬懷孕率大幅度下降,之后保育舍出現(xiàn)明顯的豬藍(lán)耳病臨床癥狀。母豬流產(chǎn)后,檢測(cè)到其豬藍(lán)耳病抗體S/P值顯著上升,除豬藍(lán)耳病外,該場(chǎng)同時(shí)存在多殺性巴氏桿菌、鏈球菌7型、波氏桿菌、胸膜肺炎放線桿菌的混合感染。在A農(nóng)場(chǎng),第1、2批豬只沒(méi)有添加替米考星,設(shè)定為未處理組,共770頭;第3~5批進(jìn)入保育舍即添加了替米考星,共1 110頭。在每噸飼料中添加替米考星1.5 kg,飼喂10~14 d;同時(shí)在撒在地板上的飼料中加替米考星1 kg/t,飼喂3周。結(jié)果A場(chǎng)的保育死亡率從未處理組(第1、2批)的27%下降到了處理組(第3、4、5批)的6%(圖17)。

    圖17 添加替米考星的對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果(2)

    在C農(nóng)場(chǎng),前4批未進(jìn)行替米考星的添加,共1 678頭保育豬,死亡率為18%,后3批(共1 688頭保育豬)設(shè)為處理組,在飼料中添加替米考星(泰勇)1.5 kg/t飼料,連續(xù)飼喂3周,結(jié)果死亡率顯著下降,僅為4%(圖18),同時(shí)保育豬采食量也由之前的從0.722磅(327.7 g)/d升高到0.928磅( 421.2 g)/d。

    圖18 添加替米考星的對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果(3)

    8 總結(jié)

    豬藍(lán)耳病是除了非洲豬瘟以外影響我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)最重要疾病,豬藍(lán)耳病病毒作為一種RNA病毒,變異迅速、毒株多并且新的毒株不斷出現(xiàn),不同毒株之間可以發(fā)生重組。該病的傳播途徑多種多樣,除了直接接觸傳播以外,還可以通過(guò)各種物資、昆蟲、人員甚至空氣進(jìn)行傳播。豬只在感染后,抗豬藍(lán)耳病病毒的中和抗體出現(xiàn)時(shí)間很晚,無(wú)法很好地抵擋豬藍(lán)耳病病毒的感染。豬藍(lán)耳病病毒存在持續(xù)性感染,一旦感染很難清除,而且會(huì)長(zhǎng)時(shí)間的排毒并引起免疫抑制,導(dǎo)致細(xì)菌性繼發(fā)感染的高發(fā),這更加劇了

    疾病的復(fù)雜程度與防控難度。豬藍(lán)耳病的診斷需要結(jié)合臨床癥狀、剖檢變化和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),最好能同時(shí)進(jìn)行組織病理學(xué)的診斷。豬藍(lán)耳病疫苗免疫起到部分保護(hù),但是無(wú)法做到完全保護(hù),不同毒株的交叉保護(hù)力效果存在爭(zhēng)議,有些疫苗的安全性還未完全達(dá)標(biāo),甚至可能出現(xiàn)毒力返強(qiáng)問(wèn)題[38]。豬藍(lán)耳病的防控需要良好的生物安全、精細(xì)化的管理、科學(xué)的疫苗免疫以及合理的藥物保健程序。替米考星作為新一代的動(dòng)物專用抗生素,無(wú)論是從理論上還是實(shí)踐中,對(duì)于豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病及其繼發(fā)感染具有較好的效果,它可以減緩豬藍(lán)耳病病毒的復(fù)制速度、控制繼發(fā)細(xì)菌性感染、降低炎癥反應(yīng),可以作為豬藍(lán)耳病陽(yáng)性豬場(chǎng)的控制措施之一,幫助豬場(chǎng)減少損失,維持生產(chǎn)穩(wěn)定。

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