寒喘祖帕顆粒治療哮喘的潛在物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究*

范晨陽，馬 璇，季志紅，李柯翱，李治建

（1.新奇康藥業(yè)股份有限公司，新疆 烏魯木齊 830011；2.新疆醫(yī)科大學(xué)，新疆 烏魯木齊 830011；3.新疆維吾爾自治區(qū)維吾爾醫(yī)藥研究所，新疆 烏魯木齊 830011）

哮喘（Asthma）又名支氣管哮喘，是由多種細(xì)胞及細(xì)胞組分參與的慢性氣道炎癥，其特征是支氣管對多種刺激的反應(yīng)性增加，導(dǎo)致空氣通道變窄，從而導(dǎo)致呼吸困難、咳嗽和喘息?！吨谐伤幣R床用藥指南·呼吸系統(tǒng)疾病分冊》指出哮喘發(fā)作期冷哮證可選用的中成藥有3個，即寒喘祖帕顆粒、小青龍膠囊和桂龍咳喘寧膠囊。哮喘發(fā)作期冷哮證證見喉中哮鳴如水雞聲，呼吸急促，喘憋氣逆，胸膈滿悶如塞，咳不甚，痰少咯吐不爽，色白而多泡沫，口不渴或渴喜熱飲，天冷或受寒易發(fā)，面色晦滯，或有惡寒，發(fā)熱，身痛。舌質(zhì)淡，苔白滑，脈浮緊或弦緊。寒喘祖帕顆粒出自1336年艾克木·穆哈穆德·努爾編著的《賈米依拉基》，1998年被載入《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)（維吾爾藥分冊）》，是國家基本藥物、國家醫(yī)保品種。處方中含有小茴香、芹菜子、神香草等維藥。其功能為鎮(zhèn)咳、化痰、溫肺止喘，用于急性感冒、寒性乃孜來所致的咳嗽及異常黏液質(zhì)性哮喘。乃孜來系指產(chǎn)生于腦部，具有流動性、致病性的積液。乃孜分為寒性和熱性兩種，流入呼吸道可引起肺部炎性疾??；流入消化道可引起胃腸道糜爛等。乃孜來泛指病毒、細(xì)菌等致病因素。異常黏液質(zhì)系人體功能不正常時出現(xiàn)的異常體液，黏液質(zhì)體液偏盛的人為濕寒性氣質(zhì)，此類人的面色、眼睛及舌面較白，機(jī)體松弛而肥胖，嗜睡，流涎水，脈大而緩，尿多，尿色清[1]。

藥理試驗(yàn)結(jié)果顯示，寒喘祖帕顆粒具有止咳、祛痰、平喘、抗炎、肺保護(hù)的作用[2-4]。余通等[5]對寒喘祖帕顆粒治療呼吸系統(tǒng)疾病有效性進(jìn)行Meta分析，納入了897例患者，結(jié)果顯示其能明顯降低氣喘、咳嗽、肺音時間，改善TNF-α水平，明顯改善患者肺部功能。其聯(lián)合布地奈德福莫特羅、沙丁胺醇可用于治療支氣管哮喘，聯(lián)合沙美特羅替卡松粉吸入劑可以減少和預(yù)防慢性阻塞性肺疾病急性加重，提高患者生活質(zhì)量[6-9]。其輔助治療小兒咳嗽變異性哮喘療效顯著[10-13]。綜上所述，寒喘祖帕顆粒治療支氣管哮喘具有顯著的療效，然而其具體的體內(nèi)代謝機(jī)制尚不明確，本研究擬通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析探討寒喘祖帕顆粒中治療哮喘的物質(zhì)基礎(chǔ)與效應(yīng)機(jī)制。

1 方 法

1.1 寒喘祖帕顆粒9個藥物的成分收集與篩選 中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP，http://tcmspw.com/tcmsp.php）是一個獨(dú)特的中草藥系統(tǒng)藥理學(xué)平臺，可以捕捉藥物、中藥成分、成分靶點(diǎn)和疾病之間的關(guān)系。該數(shù)據(jù)庫包括502個中藥，13 729個化學(xué)成分和3 339個靶點(diǎn)，以及口服生物利用度（oral bioavailability，OB）、類藥性（drug-likeness，DL）、腸上皮通透性、血腦屏障、水溶性等化合物的藥代動力學(xué)特性。本研究以O(shè)B≥30%為條件[14]，篩選可被口服吸收的候選生物活性成分。其中，神香草、蕓香草、鐵線蕨、蕁麻子、芹菜子、葫蘆巴為維吾爾醫(yī)藥常用藥物，未收錄在TCMSP數(shù)據(jù)庫中，故采用在中國知網(wǎng)上查詢已發(fā)表的文獻(xiàn)進(jìn)行化學(xué)成分的搜集，然后利用TCMSP數(shù)據(jù)庫以O(shè)B≥30%為條件進(jìn)行候選生物活性成分的篩選。

1.2 寒喘祖帕顆粒候選生物活性成分的靶點(diǎn)預(yù)測UniProt（https://www.uniprot.org/）是一個高質(zhì)量且可免費(fèi)訪問的蛋白質(zhì)序列和功能信息的數(shù)據(jù)庫，UniProt每4周更新一次。本研究利用TCMSP數(shù)據(jù)庫中的靶點(diǎn)預(yù)測功能搜集寒喘祖帕顆粒中化學(xué)成分的靶點(diǎn)蛋白[15]，借助Uniprot數(shù)據(jù)庫，通過導(dǎo)入蛋白名稱并限定物種為人，檢索得到所有蛋白靶點(diǎn)對應(yīng)的基因名。

1.3 哮喘相關(guān)靶點(diǎn)的收集DisGeNET是一個人類疾病相關(guān)的公開基因和變體數(shù)據(jù)庫。人類表型本體論（Human Phenothpe Ontology，HPO）數(shù)據(jù)庫提供了人類疾病中遇到的表型異常的標(biāo)準(zhǔn)詞匯表，HPO目前包含13 000多個術(shù)語和156 000多個遺傳性疾病注釋。DrugBank數(shù)據(jù)庫是一個獨(dú)特的生物信息學(xué)和化學(xué)信息學(xué)資源，DrugBank于2020年4月22日更新的數(shù)據(jù)包含13 575個藥物，2 632種經(jīng)批準(zhǔn)的小分子藥物，1 377種經(jīng)批準(zhǔn)的生物制劑，131種營養(yǎng)保健品和6 375多種實(shí)驗(yàn)階段藥物，以及5 238個非冗余蛋白。GEO（https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/）數(shù)據(jù)庫是一個支持MIAME兼容數(shù)據(jù)提交的功能基因組學(xué)數(shù)據(jù)庫，用戶可以查詢和下載論文中實(shí)驗(yàn)過程涉及的基因表達(dá)譜。

通過以上4個平臺進(jìn)行哮喘相關(guān)靶點(diǎn)的搜集，以“asthma”為關(guān)鍵詞分別在DisGeNET平臺、HPO數(shù)據(jù)庫、DrugBank數(shù)據(jù)庫和GEO數(shù)據(jù)庫搜索哮喘相關(guān)靶點(diǎn)，對結(jié)果進(jìn)行整理，刪除重復(fù)項(xiàng)與無效項(xiàng)。

1.4 構(gòu)建寒喘祖帕顆粒藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)與PPI網(wǎng)絡(luò) 將“1.3”項(xiàng)下獲得的哮喘相關(guān)基因與“1.2”項(xiàng)下獲得的藥物成分靶點(diǎn)取交集，得到寒喘祖帕顆粒治療哮喘的潛在靶點(diǎn)。利用Cytoscape 3.7.2軟件進(jìn)行藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建與可視化，利用Cytoscape 3.7.2軟件中的插件Bisogenet對潛在靶點(diǎn)進(jìn)行蛋白互作網(wǎng)絡(luò)（protein-protein interaction network，PPI）的構(gòu)建。

1.5 GO富集分析與KEGG通路富集分析 為進(jìn)一步闡明潛在靶點(diǎn)的生物學(xué)活性，利用Rx64 3.6.2軟件對“1.4”項(xiàng)下獲得的潛在靶點(diǎn)進(jìn)行基因本體論富集分析（Gene Ontology，GO）和京都基因與基因組百科全書信號通路富集分析（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG），設(shè)定閾值P≤0.05，篩選具有顯著性差異的生物過程和靶點(diǎn)，P值越小，富集顯著程度越高。

2 結(jié) 果

2.1 寒喘祖帕顆粒9個藥物的活性成分與靶點(diǎn) 按照“1.1”項(xiàng)下方法共檢索得到9個藥物的564個化學(xué)成分，以O(shè)B≥30%為條件進(jìn)行候選生物活性成分的篩選，獲得候選活性成分390個，將篩選出的活性成分輸入到TCMSP數(shù)據(jù)庫，查詢其作用靶點(diǎn)，將查詢到的作用靶點(diǎn)輸入到UniProt平臺，獲得作用靶點(diǎn)的基因名。去除9個藥物共有成分和靶點(diǎn)，共獲得9個藥物，300個活性成分，374個靶點(diǎn)。（見表1）

表1 寒喘祖帕顆粒活性成分靶點(diǎn)匯總

2.2 哮喘相關(guān)基因 根據(jù)“1.3”項(xiàng)下方法，在4個數(shù)據(jù)庫收集哮喘相關(guān)靶點(diǎn)，其中DisGeNET平臺1 312個、HPO數(shù)據(jù)庫113個、DrugBank數(shù)據(jù)庫293個和GEO數(shù)據(jù)庫499個，去除重復(fù)，共獲得哮喘相關(guān)基因1 930個。

2.3 寒喘祖帕顆粒治療哮喘的潛在基因 將哮喘相關(guān)基因與寒喘祖帕顆?；钚猿煞职悬c(diǎn)基因取交集，得到寒喘祖帕顆粒治療哮喘的潛在基因結(jié)果。（見圖1）87、43、36、34、27、25、22、22、20、20；網(wǎng)絡(luò)中度值排名前10位的基因分別是PTGS2、PTGS1、ESR1、HSP90AA1、CHRM1、CALM1、AR、NOS2、PPARG、ADRB2度值分別為171、102、84、78、78、75、72、70、69、68，度值相對較高，為網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)。（見圖2）

圖1 寒喘祖帕顆粒與哮喘基因交集韋恩圖

圖2 寒喘祖帕顆粒治療哮喘的藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖

2.5 蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)分析 將“2.4”項(xiàng)下獲得的166個交集靶點(diǎn)基因?qū)氲紺ytoscape 3.7.2軟件中的插件BisoGenet中，對關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建，蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)來自于蛋白相互作用數(shù)據(jù)庫（Database of Interacting Protein，DIP）、生物通用交互數(shù)據(jù)集庫（Biological General Repository for Interactionh Datasets，BioGRID）、人類蛋白質(zhì)參考數(shù)據(jù)庫（HumanProteinReferenceDatabase，HPRD）、完整的分子相互作用數(shù)據(jù)庫（IntAct Molecular Interaction Database，IntAct）、分子相互作用數(shù)據(jù)庫（Molecular INTeraction database，MINT）、生物分子相互作用網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫（biomolecular interaction network database，BIND）。結(jié)果顯示靶點(diǎn)間存在直接或間接作用。（見圖3）

圖3 寒喘祖帕顆粒與哮喘交集靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)圖

2.4 寒喘祖帕顆粒治療哮喘的藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖 根據(jù)“1.4”項(xiàng)下方法，將寒喘祖帕顆粒中與治療哮喘相關(guān)的基因和成分導(dǎo)入到Cytoscape 3.7.2軟件中，構(gòu)建藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖，網(wǎng)絡(luò)包含429個節(jié)點(diǎn)和2 241條邊。根據(jù)網(wǎng)絡(luò)的拓?fù)鋵W(xué)性質(zhì)度值排序確定關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，網(wǎng)絡(luò)中成分度值中位數(shù)為7，基因度值中位數(shù)為2，度值大于等于2倍中位數(shù)的成分有44個，基因有59個。網(wǎng)絡(luò)中度值排名前10位的成分分別是MOL000098-槲皮素、MOL000422-山柰酚、MOL008680、MOL000006-木犀草素、MOL000254、MOL003896-7-甲氧基-2-甲 基 異 黃 酮、MOL002467、MOL000358-β-谷 甾 醇、MOL004328-柚皮素、MOL002565-美迪紫檀素，度值分別為

2.6 GO富集分析與KEGG通路富集分析 運(yùn)用Bioconductor生物信息軟件包，借助R語言對“2.4”項(xiàng)下獲得的166個交集靶點(diǎn)基因進(jìn)行GO功能富集分析，855個GO項(xiàng)被顯著富集（P＜0.001），其中783個項(xiàng)在生物過程（BP）中顯著富集，16個項(xiàng)在細(xì)胞組成（CC）中顯著富集，56個項(xiàng)在分子功能（MF）中顯著富集，占比分別為92%、2%、6%。前20項(xiàng)顯著富集的生物過程、細(xì)胞組成和分子功能結(jié)果見圖4。GO富集分析主要集中在生物過程（BP）中，主要涉及對脂多糖的反應(yīng)（response to lipopolysaccharide）、對細(xì)菌來源分子的反應(yīng)（response to molecule of bacterial origin）、細(xì)胞對藥物的反應(yīng)（cellular response to drug）、對外源刺激的反應(yīng)（response to xenobiotic stimulus）；細(xì)胞組成（CC）主要涉及脂膜筏（membrane raft）、脂膜微結(jié)構(gòu)域（membrane microdomain）和脂膜區(qū)（membrane region）；分子功能（MF）主要涉及G蛋白偶聯(lián)胺受體活性（G protein-coupled amine receptor activity）、核受體活性（nuclear receptor activity）、轉(zhuǎn)錄因子活性，直接配體調(diào)節(jié)的序列特異性DNA結(jié)合（transcription factor activity，direct ligand regulated sequence-specific DNA binding）。

圖4 寒喘祖帕顆粒治療哮喘作用靶點(diǎn)的GO富集分析的前20個項(xiàng)

運(yùn)用Rx64 3.6.2對“2.4”項(xiàng)下獲得的166個交集靶點(diǎn)基因進(jìn)行KEGG通路富集分析，得到110條信號通路（P＜0.001），涉及百日咳（Pertussis）、IL-17信號通路（IL-17 signaling pathw）和腫瘤壞死因子信號途徑（TNF signaling pathway）等。（見圖5）

圖5 寒喘祖帕顆粒治療哮喘作用靶點(diǎn)的KEGG富集分析的前20個通路

2.7 基因通路網(wǎng)絡(luò)分析 基因通路網(wǎng)絡(luò)是基于顯著富集的KEGG通路和調(diào)控這些通路的基因構(gòu)建的。將“2.4”項(xiàng)下獲得的166個交集靶點(diǎn)基因與“2.6”項(xiàng)下獲得的KEGG通路導(dǎo)入Cytoscape 3.7.2中，得到寒喘祖帕顆粒治療哮喘的基因通路網(wǎng)絡(luò)（見圖6）。用BC（Betweenness Centrality）對110條通路和涉及的139個基因進(jìn)行了拓?fù)浞治?。紅色表示網(wǎng)絡(luò)中的通路，綠色表示參與通路的基因。節(jié)點(diǎn)大小與BC成正比。網(wǎng)絡(luò)圖顯示MAPK1的BC最大，是調(diào)控信號通路的核心基因，其他幾個基因也有較大的BC，如MAPK3、RAF1、RELA、MAPK9、MAPK8、JUN、MAPK14、EGFR和IL-6。它們可能是寒喘祖帕顆粒治療哮喘的主要基因。

圖6 寒喘祖帕顆粒治療哮喘的基因通路網(wǎng)絡(luò)圖

參 與 哮 喘 的KEGG通 路 包 括hsa04660、hsa04514、hsa04612、hsa04060、hsa04630、hsa04662和hsa04664[16]，分析寒喘祖帕顆粒治療哮喘的基因通路網(wǎng)絡(luò)圖發(fā)現(xiàn)，其包含hsa04660、hsa04630和hsa04664。其中hsa04660為T細(xì)胞受體信號通路（T cell receptor signaling pathway），T淋巴細(xì)胞的激活是免疫系統(tǒng)有效反應(yīng)的關(guān)鍵事件，外源抗原與T細(xì)胞受體（TCR）結(jié)合，導(dǎo)致一系列信號級聯(lián)，如蛋白酪氨酸激酶、磷酸酶、GTP結(jié)合蛋白和銜接蛋白等的功能激活，從而導(dǎo)致T細(xì)胞增殖分化為效應(yīng)細(xì)胞[17]。hsa04630為JAK-STAT信號通路（JAK-STAT signaling pathway），JAK-STAT通路是多種細(xì)胞因子和生長因子的主要信號機(jī)制，其作用是促進(jìn)發(fā)育和體內(nèi)平衡。細(xì)胞因子與其同源受體結(jié)合后，酪氨酸激酶JAK家族成員激活STATs，激活后的STATs被轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核，調(diào)節(jié)靶基因的表達(dá)。除了STATs的激活外，JAKs還介導(dǎo)MAP激酶、PI3激酶等細(xì)胞因子的募集。這些因子通過Ras-Raf-MAP激酶和PI3激酶通路處理下游信號，從而激活額外的轉(zhuǎn)錄因子[18]。hsa04664為Fc-epsilon-RI信號通路（Fc epsilon RI signaling pathway），F(xiàn)c-epsilon-RI通路介導(dǎo)的肥大細(xì)胞信號通路是由抗原（Ag）與IgE結(jié)合在Fc-epsilon-RIα鏈胞外區(qū)的相互作用啟動的。激活通路受多種信號分子相互作用的正負(fù)調(diào)控。因此被激活的肥大細(xì)胞釋放含有生物胺（特別是組胺）和蛋白多糖（特別是肝素）的介質(zhì)。磷脂酶A2的激活導(dǎo)致膜脂的釋放，隨后產(chǎn)生脂質(zhì)介質(zhì)，如白三烯（LTC4、LTD4和LTE4）和前列腺素（PDG2）。同時分泌細(xì)胞因子，如腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-4和白細(xì)胞介素-5。這些介質(zhì)和細(xì)胞因子促進(jìn)炎癥反應(yīng)[19]。

3 討 論

哮喘的發(fā)病機(jī)制一般認(rèn)為是吸入性變應(yīng)原與氣道內(nèi)的抗原遞呈細(xì)胞（antigen presenting cells，APC）相遇，在抗原識別和APC激活后，原始T細(xì)胞分化為TH2細(xì)胞?；罨腡H2細(xì)胞刺激B細(xì)胞形成免疫球蛋白E（Immunoglobulin E，IgE）。IgE分子與肥大細(xì)胞上的IgE受體結(jié)合，變應(yīng)原交聯(lián)肥大細(xì)胞結(jié)合的IgE導(dǎo)致生物活性介質(zhì)（組胺、白三烯）的釋放，從而導(dǎo)致過敏的直接癥狀。肥大細(xì)胞同時釋放趨化因子，趨化因子導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞的募集，白細(xì)胞介素-5（IL-5）促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞的增殖和分化。嗜酸性粒細(xì)胞的活化導(dǎo)致生物活性介質(zhì)和氧自由基的釋放，導(dǎo)致組織損傷，促進(jìn)慢性炎癥的發(fā)展。本研究分析出的3條通路參與哮喘的作用機(jī)制，其中hsa04660（T細(xì)胞受體信號）通路可能主要介導(dǎo)外源變應(yīng)原的刺激導(dǎo)致T細(xì)胞增殖分化為Th2細(xì)胞，并刺激B細(xì)胞生成IgE。hsa04630（JAKSTAT信號）通路可能主要介導(dǎo)細(xì)胞因子的產(chǎn)生與靶基因表達(dá)。hsa04664（Fc-epsilon-RI信號）通路主要介導(dǎo)肥大細(xì)胞的激活與釋放炎性因子，炎性因子作用于支氣管從而導(dǎo)致支氣管痙攣、腫脹和氣道阻塞。參與這3條通路的基因主要有IL-4、RAF1、RELA、FOS、JUN、MAPK1、MAPK8、MAPK9、MAPK14、MAPK3和MAPK5。

白細(xì)胞介素-4（IL-4）是趨化因子家族的一種細(xì)胞因子，其是Ⅱ型輔助T細(xì)胞（Th2細(xì)胞）分泌的細(xì)胞因子，生物作用包括刺激活化B細(xì)胞和T細(xì)胞增殖、CD4+T細(xì)胞分化成Th2細(xì)胞。它也在調(diào)節(jié)體液免疫和適應(yīng)性免疫中起關(guān)鍵作用。IL-4誘導(dǎo)B細(xì)胞抗體類別轉(zhuǎn)換向IgE，上調(diào)第二型主要組織兼容性復(fù)合體的產(chǎn)生[20]。RAF原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶（RAF1）Ras-GTPase起分子開關(guān)的作用，在活性GTP-和非活性GDP-結(jié)合態(tài)之間交替。Ras蛋白通常位于質(zhì)膜附近，被細(xì)胞外刺激激活后，與下游效應(yīng)器相互作用，調(diào)節(jié)多種生物過程的信號通路，特別是細(xì)胞生長、存活和分化。經(jīng)典的Ras信號途徑始于表皮生長因子受體酪氨酸激酶激活Ras。激活的Ras啟動一條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，最后激活MAP激酶ERK1，ERK1轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核誘導(dǎo)基因表達(dá)[21]。

藥物-成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)顯示槲皮素、山柰酚、木犀草素、柚皮素、β-谷甾醇等成分可能是寒喘祖帕顆粒治療哮喘的潛在物質(zhì)基礎(chǔ)。研究發(fā)現(xiàn)，槲皮素具有抗病毒、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等藥理作用[22]，可能參與基于IL-6、IL-1β調(diào)控的NF-κB信號通路（hsa04064）對支氣管炎起到治療作用[23]。山柰酚具有抗氧化、抗炎、抗癌、抗糖尿病、抗骨關(guān)節(jié)炎和免疫調(diào)節(jié)等多種藥理活性[24]。木犀草素和柚皮素具有抗病毒、抗炎等作用[25-26]。

維吾爾醫(yī)認(rèn)為處方中的小茴香、芹菜子為主藥，具有溫肺化痰、清除寒性乃孜來的作用；神香草可清除異常黏液質(zhì)，促進(jìn)機(jī)體自然隨和，止咳化痰，平喘利肺；玫瑰花、蕓香草散寒滲濕，止咳平喘，順氣通便平喘；蕁麻子、鐵線蕨、葫蘆巴消散寒氣，活血解痙，松化黏性體液，治療氣喘咳嗽頑痰，而甘草浸膏能減輕對咽部黏膜的刺激，并有緩解胃腸平滑肌痙攣與去氧皮質(zhì)酮樣作用，并使諸藥協(xié)調(diào)有序，既能使邪氣外達(dá)，又能斷其痰瘀之源，阻斷病情進(jìn)展而奏效，使風(fēng)寒可散，痰濕可化，瘀滯得行之效，清除氣道局部的異常黏液質(zhì)與黑膽質(zhì)，消除“亞路克”，故感冒、咳嗽、哮喘之疾可平。中醫(yī)認(rèn)為處方中小茴香散寒止痛，理氣和胃；胡蘆巴溫腎助陽，祛寒止痛；玫瑰花行氣解郁，和血之痛；芹菜子消除寒濕痹阻，調(diào)和百藥；神香草止咳化痰，平喘利肺。鐵線蕨止咳化痰，蕁麻子消散寒氣，蕓香草散寒滲濕，止咳平喘，行氣寬中。全方共奏溫中驅(qū)寒、疏散風(fēng)寒、宣肺止咳之功。芹菜子揮發(fā)油可有效逆轉(zhuǎn)肝纖維化[27]，治療局部缺血的腦血管疾病，還能改善微循環(huán)，抑制細(xì)胞凋亡和降低氧化性應(yīng)激[28-29]。小茴香揮發(fā)油具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗病毒、抗菌、抗肝纖維化作用，可抑制TGF-β/smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路從而減輕肝硬化[30-31]。神香草揮發(fā)油部分具有止咳平喘、解痙等抗哮喘樣藥理活性。其總黃酮可通過抗炎、止咳、平喘作用來降低大鼠血清IgE，改善大鼠肺組織病理改變，減輕氣道炎癥[32]。其水提物表現(xiàn)出較明顯的鎮(zhèn)咳、祛痰和平喘的藥理學(xué)活性[33]。

本研究將進(jìn)一步對寒喘祖帕顆粒組方藥進(jìn)行拆解，探究寒喘祖帕顆粒治療哮喘的主要組方成分，為臨床研究提供基礎(chǔ)。