○高 宇 錢(qián)友俊 孔令富 嚴(yán) 暉
滇池金線鲃?dòng)址Q(chēng)金線魚(yú),隸屬鯉形目、鯉科、鲃亞科、金線鲃屬,主要分布于云南昆明的滇池流域,為云南特有魚(yú)種,被列入《國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)(II級(jí))水生野生動(dòng)物》,《云南省珍稀水生動(dòng)物保護(hù)名錄》,1998年被收錄到《中國(guó)瀕危動(dòng)物紅皮書(shū)·魚(yú)類(lèi)》,2011年被評(píng)為云南六大名魚(yú)之一。
本文通過(guò)研究聚維酮碘、苯扎溴銨、硫酸銅和高錳酸鉀4種常見(jiàn)藥物對(duì)滇池金線鲃稚魚(yú)的急性毒性,探究滇池金線鲃稚魚(yú)對(duì)不同藥物的敏感性,為滇池金線鲃養(yǎng)殖過(guò)程中的科學(xué)用藥提供理論依據(jù)。
滇池金線鲃稚魚(yú)為云南某養(yǎng)殖場(chǎng)人工繁殖的魚(yú)苗,體長(zhǎng)8.0±1.5mm,身體健康,游泳活潑,無(wú)傷無(wú)畸形。
聚維酮碘(水產(chǎn)用,碘含量為10%)購(gòu)買(mǎi)自山西康派偉業(yè)生物科技有限公司;苯扎溴銨(水產(chǎn)用,含量為45%)購(gòu)買(mǎi)自常州市金太陽(yáng)動(dòng)物保健品有限公司;硫酸銅(化學(xué)純,含量不少于99%)購(gòu)買(mǎi)自北京化工廠;高錳酸鉀晶體(化學(xué)純,含量不少于99%)購(gòu)買(mǎi)自重慶川東化工(集團(tuán))有限公司。
試驗(yàn)用水為自來(lái)水,經(jīng)曝氣3天后使用,水溫18±1.5℃,pH8.0±0.5,溶解氧7.5±0.5mg/L。暴露試驗(yàn)開(kāi)始前,先在每個(gè)3L體積的長(zhǎng)方體聚乙烯盒子中加入1L曝氣水,放入滇池金線鲃稚魚(yú)10尾,馴養(yǎng)時(shí)間為72h,馴養(yǎng)期間不充氧,不喂食。
采用靜水暴露試驗(yàn)法進(jìn)行試驗(yàn),預(yù)試驗(yàn)將藥物濃度限定在一個(gè)較大的范圍內(nèi),每個(gè)濃度設(shè)置2個(gè)平行,每個(gè)平行隨機(jī)放入10尾稚魚(yú)。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,分別設(shè)置聚維酮碘暴露濃度為0、3.0、5.0、7.0、9.0和11.0mg/L;苯扎溴銨暴露濃度為 0、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25和1.50mg/L;硫酸銅暴露濃度為0、1.0、3.0、6.0、9.0和12.0mg/L;高錳酸鉀暴露濃度為0、0.5、1.0、1.5、2.0和2.5mg/L,每隔24h更換一次藥液以減少因藥液濃度變化而引起的誤差,試驗(yàn)期間不充氧,不喂食。試驗(yàn)開(kāi)始后的8小時(shí)內(nèi)連續(xù)觀察各試驗(yàn)組稚魚(yú)的活動(dòng)狀況、中毒情況和死亡情況等,記錄各藥物濃度組24、48、72和96小時(shí)的死亡情況,將死亡稚魚(yú)及時(shí)撈出。判定死亡的標(biāo)準(zhǔn)為稚魚(yú)身體僵直或卷曲躺在水體底部或漂浮于水面、用吸管連續(xù)觸碰數(shù)次皆無(wú)反應(yīng),
采用寇氏法(Karber method)來(lái)進(jìn)行半數(shù)致死濃度(LC50)的計(jì)算,其中
LC50=lg-1[Xm–d(ΣP-0.5)]
Sx50=d[(ΣP–ΣP2)/(n–1)]1/2
LC50的95%可信限=lg-1(lgLC50±1.96×Sx50)
式中:d為相鄰兩組劑量對(duì)數(shù)之差;Xm為最大劑量對(duì)數(shù);P為死亡率(用小數(shù)表示);Sx50為標(biāo)準(zhǔn)誤;n為實(shí)驗(yàn)魚(yú)數(shù)量。
安 全 濃 度(SC):SC=LC50(96h)×0.1
根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》(GB/T31270—2014)中規(guī)定的有毒物質(zhì)對(duì)魚(yú)類(lèi)毒性等級(jí)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn),按96小時(shí)半致死質(zhì)量濃度劃分為4個(gè)等級(jí)(表1),用此標(biāo)準(zhǔn)評(píng)判試驗(yàn)藥物對(duì)昆明裂腹魚(yú)稚魚(yú)的毒性等級(jí)。
表1 魚(yú)類(lèi)毒性等級(jí)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
本研究中,聚維酮碘、苯扎溴銨、硫酸銅和高錳酸鉀對(duì)滇池金線鲃稚魚(yú)的96小時(shí)半致死濃度 分 別 為 4.84、0.57、2.41和0.82mg/L;安全濃度分別為0.48、0.06、0.24和0.08mg/L。通常用半致死濃度和安全濃度來(lái)衡量藥物的毒性強(qiáng)弱,以96小時(shí)半致死濃度作為急性毒性的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。4種藥物對(duì)滇池金線鲃稚魚(yú)的毒性大小依次為苯扎溴銨>高錳酸鉀>硫酸銅>聚維酮碘。根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn):苯扎溴銨和高錳酸鉀對(duì)滇池金線鲃稚魚(yú)的毒性為高毒,聚維酮碘和硫酸銅對(duì)滇池金線鲃的毒性為中毒。
表2 聚維酮碘對(duì)滇池金線鲃稚魚(yú)的毒性試驗(yàn)結(jié)果
表3 苯扎溴銨對(duì)滇池金線鲃稚魚(yú)的毒性試驗(yàn)結(jié)果
表4 硫酸銅對(duì)滇池金線鲃稚魚(yú)的毒性試驗(yàn)結(jié)果
表5 高錳酸鉀對(duì)滇池金線鲃稚魚(yú)的毒性試驗(yàn)結(jié)果
滇池金線鲃稚魚(yú)對(duì)聚維酮碘敏感性不高,可在安全濃度范圍內(nèi)正常使用。根據(jù)安全濃度,聚維酮碘全池潑灑濃度為0.5-0.6mg/L,或5-6mg/L浸泡10分鐘。硫酸銅全池潑灑濃度為0.2-0.3mg/L,或3-5mg/L浸泡10分鐘,用藥的時(shí)間盡量選擇在晴天中午,且全池均勻的進(jìn)行潑灑,增氧設(shè)備需準(zhǔn)備妥當(dāng)。苯扎溴銨全池潑灑濃度為0.1-0.2mg/L,或1-2mg/L浸泡10分鐘;高錳酸鉀全池潑灑濃度為0.1-0.2mg/L,或1-2mg/L浸泡10分鐘;滇池金線鲃稚魚(yú)對(duì)苯扎溴銨和高錳酸鉀比較敏感,需謹(jǐn)慎用藥。
(通聯(lián):650201,云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院 手機(jī):13517296309)