載脂蛋白E基因多態(tài)性對冠心病患者血脂水平的影響研究

楊 立，陳 葳

(1.西安交通大學(xué)，陜西 西安 710049;2.西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 西安 710061)

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病簡稱冠心病，是指冠狀動(dòng)脈粥樣硬化使血管腔狹窄或阻塞，或(和)因冠狀動(dòng)脈功能性改變(痙攣)導(dǎo)致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟病[1]。冠心病的致病因素也包括遺傳基因和環(huán)境因素[2]。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，冠心病相關(guān)遺傳因素的研究越來越深入，其中載脂蛋白E(ApoE)基因多態(tài)性對脂質(zhì)代謝有很大的影響[3]。ApoE是一種糖蛋白，包括299個(gè)氨基酸。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，ApoE很有可能是亞洲人發(fā)生冠心病的易患基因[4]。ApoE基因位于第19號染色體長臂13區(qū)2帶(19q13.2)上，含有4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子。ApoE基因有3個(gè)等位基因，即E2、E3和E4，共構(gòu)成6種不同的基因型：3種純合型(E2/E2、E3/E3、E4/E4)和3種雜合型(E3/E4、E2/E3、E2/E4)[5-6]。ApoE基因型由基因上2個(gè)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)決定，即112位氨基酸的堿基(c.388T>C)和158位氨基酸的堿基(c.526T>C)，其依據(jù)112和158位氨基酸的不同組合，形成不同的基因型。本研究探討了ApoE基因多態(tài)性對冠心病患者血脂水平的影響。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1—6月西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院收治的1 144例冠心病患者，其中男752例(65.7%)，女392例(34.3%)，年齡25～93歲。

1.2方法

1.2.1ApoE基因檢測 利用珠海賽樂奇公司生產(chǎn)的核酸提取或純化試劑對非肝素抗凝管采集的至少400 uL全血進(jìn)行樣本處理，然后利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增儀進(jìn)行目的片段的PCR擴(kuò)增，最后利用基因芯片攝像儀對結(jié)果進(jìn)行判讀。

1.2.2血脂水平檢測 晨起空腹采血3 mL，3 000 r/min離心10 min后取上清，利用全自動(dòng)生化分析儀對總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、ApoE及脂蛋白a[Lp(a)] 進(jìn)行檢測。

2 結(jié) 果

2.1ApoE基因型及等位基因分布情況 在ApoE基因型中，E3/E3型占比最多，E4/E4型占比最少；在ApoE表現(xiàn)型中，E3型占比最多，E2型占比最少。見表1。

表1 ApoE基因型及等位基因分布情況(n=1 144)

2.2不同ApoE基因型冠心病患者血脂水平比較 不同ApoE基因型冠心病患者TC、TG、ApoE、LDL水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而Lp(a)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.056)。其中，E2/E2型冠心病患者ApoE、TG水平高于其他基因型冠心病患者，而E4/E4基因型冠心病患者TC、LDL、Lp(a)水平高于其他基因型冠心病患者。見表2。

表2 不同ApoE基因型冠心病患者血脂水平比較

2.3不同ApoE表現(xiàn)型冠心病患者血脂水平比較 不同ApoE表現(xiàn)型冠心病患者TC、TG、ApoE、LDL水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而Lp(a)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.167)。其中，E2型冠心病患者ApoE、TG水平高于其他表現(xiàn)型冠心病患者，而E4型冠心病患者TC、LDL、Lp(a)水平高于其他表現(xiàn)型冠心病患者。見表3。

表3 不同ApoE表現(xiàn)型冠心病患者血脂水平比較

3 討 論

ApoE作為人體非常重要的載脂蛋白之一，其主要在肝臟和腦組織中合成，在其他組織如單核細(xì)胞(含巨噬細(xì)胞)中也有合成能力。ApoE是LDL受體的配體，也是肝細(xì)胞乳糜微粒(CM)殘粒受體的配體，可介導(dǎo)清除血漿中的CM和低密度脂蛋白，在TG和TC的代謝中發(fā)揮關(guān)鍵作用[7]。ApoE基因型和表現(xiàn)型可影響冠心病患者血脂水平，因此ApoE基因在冠心病易感性中占據(jù)重要地位。ApoE基因型和表現(xiàn)型檢測對于冠心病的早期預(yù)防、診斷及預(yù)后均有重要的指導(dǎo)意義，同時(shí)治療冠心病的他汀類藥物也因不同基因型患者而存在個(gè)體差異性。有研究發(fā)現(xiàn)，瑞舒伐他汀的療效與ApoE基因多態(tài)性有關(guān)，其對E2型冠心病患者的療效最好，其次為E3型，E4型最差[8-9]。因此，ApoE基因型和表現(xiàn)型檢測在不同基因型冠心病患者的臨床用藥上起到了非常重要的作用。本研究結(jié)果顯示，在ApoE基因型中，E3/E3型占比最多，E4/E4型占比最少；在ApoE表現(xiàn)型中，E3型占比最多，E2型占比最少，與文獻(xiàn)[10-11]結(jié)論基本一致。

本研究結(jié)果顯示，E2/E2、E2型冠心病患者TG水平明顯高于其他基因型和表現(xiàn)型冠心病患者。這是由于ApoE異構(gòu)體與LDL受體結(jié)合能力不同。ApoE2與LDL受體結(jié)合能力最低，導(dǎo)致TG水平升高；而ApoE4與LDL受體的結(jié)合能力較強(qiáng)，導(dǎo)致TC和LDL水平升高，而對TG水平影響不大[12]。本研究結(jié)果顯示，E2型冠心病患者TC和LDL水平最低，而E4型冠心病患者TC和LDL水平最高。提示E2型對冠心病的發(fā)生和發(fā)展中具有一定保護(hù)作用，而E4型則可能會(huì)加劇冠心病的發(fā)生、發(fā)展[13-14]。本研究結(jié)果顯示，不同ApoE基因型和表現(xiàn)型冠心病患者Lp(a)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但E4型冠心病患者Lp(a)水平高于其他表現(xiàn)型冠心病患者。高水平Lp(a)是公認(rèn)的致動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，其可競爭性與纖溶酶原受體結(jié)合,而抑制纖溶酶原轉(zhuǎn)化為纖溶酶,導(dǎo)致機(jī)體纖溶能力下降,加重動(dòng)脈粥樣硬化,進(jìn)而引起血栓形成，其對冠心病的轉(zhuǎn)歸有預(yù)后價(jià)值[15]。

綜上所述，ApoE基因多態(tài)性與冠心病患者血脂水平具有一定相關(guān)性，對冠心病的發(fā)生、發(fā)展及患者預(yù)后有重要影響，其中，E2型為保護(hù)型，對冠心病的發(fā)生、發(fā)展有正面保護(hù)作用；E3型為野生型；E4為高危型，對冠心病的發(fā)生、發(fā)展有負(fù)面影響。在臨床應(yīng)用中，ApoE基因檢測可在基因?qū)用嫔现笇?dǎo)冠心病的早期鑒別和診斷，有助于冠心病的早發(fā)現(xiàn)、早治療。ApoE基因檢測聯(lián)合血脂水平監(jiān)測，對冠心病發(fā)展和預(yù)后具有一定指導(dǎo)意義。本研究不足之處是沒有關(guān)注不同ApoE基因型冠心病患者用藥差異。